HPLC法同时测定15个产地浮萍中4种黄酮类成分

目的建立HPLC法同时测定15个产地浮萍Spirodela polyrriza(L.)Schleid.中4种黄酮类成分(荭草苷、牡荆苷、木犀草素、芹菜素)的含有量。方法分析采用Waters XBridge C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相甲醇-0.5%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长350 nm。结果荭草苷在0.228 0~5.700 0μg(R^2=0.999 7)、牡荆苷在0.086 4~5.400 0μg(R^2=0.999 8)、木犀草素在0.132 0~5.500 0μg(R^2=0.999 8)、芹菜素在0.026 4~6.600 0μg(R^2=0.999 9)范围内具有良好的线性关系,平均加样回收率为100.31%~104.58%,其含有量依次为荭草苷>牡荆苷>木犀草素>芹菜素。结论不同产地浮萍中荭草苷和牡荆苷的含有量有明显差异,而木犀草素和芹菜素比较稳定。

基于UPLC指纹图谱评价不同产地浮萍的质量

目的建立浮萍药材的UPLC指纹图谱,综合比较不同产区浮萍的质量。方法采用UPLC建立浮萍药材的指纹图谱;应用PCA分析法和聚类分析对UPLC指纹图谱进行分析。结果浮萍药材UPLC指纹图谱共7个共有峰,其中4个为牡荆素、荭草苷、木犀草苷、木犀草素;产自江苏、山东、湖北和福建4个产地的浮萍药材相似度为0.987~1.000;主成分分析结果表明,荭草苷、牡荆素、木犀草苷、木犀草素等7个特征峰对评价浮萍质量具有重要作用;通过聚类分析18批药材被分成2类,产自山东的3批归为一类,其他15批归为一类。结论 UPLC指纹图谱结合PCA和聚类分析,可以客观地评价不同产地浮萍药材的质量。

复方驱蚊精油化学成分分析及其驱避活性评价

[目的]分析由薄荷、浮萍、石菖蒲、迷迭香4种中药植物配伍而成的复方驱蚊精油的化学成分,并进行驱避活性评价。[方法]通过气质联用色谱技术(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)分析复方驱蚊精油的化学成分,按照《空间驱避产品药效试验及评价(Y型管法)》,评价精油对白纹伊蚊成虫的驱避活性。[结果]鉴定出主要挥发性成分58种,占精油总成分的98.28%,萜类18种(44.99%)、烯烃类9种(20.27%)、酯类5种(14.07%)、芳香烃类8种(12.00%)、烷烃类7种(3.48%)、醇类9种(2.78%)、酮类2种(0.69%)。复方驱蚊精油对白纹伊蚊的驱避率(percent repellency,PR)平均达90%。[结论]复方驱蚊精油的化学成分较多,对白纹伊蚊起到驱避作用的可能有薄荷醇、薄荷酮、α-蒎烯等多种化学成分,平均驱避效果达到A级水平。

不同品系及苯丙氨酸饲喂对紫萍中类黄酮累积的影响

目的探讨不同品系紫萍主要类黄酮含量以及苯丙氨酸饲喂对不同品系紫萍生长及总黄酮含量的影响。方法对天津、武汉、贵阳采集的浮萍样本进行形态学及DNA条形码鉴定,利用超高效液相色谱(UPLC)测定6个品系紫萍的木犀草苷、荭草苷和牡荆素含量。用0、0.005、0.05、0.5、1 mmol·L^(-1)浓度的苯丙氨酸饲喂不同品系紫萍10 d,收样测定其鲜重、干重及总黄酮含量。结果采集的浮萍样本经鉴定为紫萍属。6个品系紫萍中p143的总黄酮和3种主要类黄酮的含量最高。0.005 mmol·L^(-1)苯丙氨酸饲喂明显促进WHD和5543的鲜重累积。0.05 mmol·L^(-1)苯丙氨酸饲喂分别使5543、W0716、9509的总黄酮含量上调了16.5%、33.1%和42.6%。结论6个品系紫萍中p143的黄酮含量最高,低浓度苯丙氨酸饲喂可以促进部分品系紫萍的生长及总黄酮含量累积。

Cr^(6+)和乙草胺对少根紫萍的毒性效应

采用水培实验方法,研究了重金属Cr6+和除草剂乙草胺对少根紫萍(SpirodelaoligorrhizaL.)生长的单一毒性和联合毒性效应。结果表明,Cr6+和乙草胺对少根紫萍96h生长抑制的IC50分别为15.4和6.95mg·L-1,在质量浓度1∶1的情况下,Cr6+与乙草胺共存对少根紫萍96h的IC50为3.14mg·L-1,二者为协同作用。随着Cr6+和乙草胺处理浓度的增加,少根紫萍叶绿素a浓度下降,复合污染对叶绿素a的影响明显大于单一污染,也表现为协同作用。另外,还对少根紫萍生长抑制实验进行了探讨,建议使用植物个体数和重复间的偏差作为衡量实验质量的指标。

浮萍的化学成分研究

从中药浮萍的正品紫萍的乙醇提取物中分离出４个黄酮化合物，经理化常数和光谱鉴定其结构，分别为芹菜素（ａｐｉｇｅｎｉｎ）、木犀草素（ｌｕｔｅｏｌｉｎ）、芹菜素－７－Ｏ－葡萄糖苷（ａｐｅｇｅｎｉｎ－７－Ｏ－ｇｌｕｃｏ－ｓｉｄｅ）和水犀草素－７－Ｏ－葡萄苷（ｌｅｕｔｅｏｌｉｎ－７－Ｏ－ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ），它们是紫萍中的主要化学成分。

浮萍放养体系中氮的平衡与浮萍体内氮的亚细胞分布研究

采用15N示踪技术研究了浮萍放养体系中氮的平衡与浮萍体内氮的亚细胞分布.结果表明,两个不同氮浓度处理浮萍的含氮量分别为3592.0和3366.0 mg/kg FW、标记氮的吸收量分别为每瓶0.2919和0.3031 mg,差异不大,可能与处理浓度较高,已能满足浮萍对氮的需求有关.两个处理未能回收的15N量也比较接近,分别为每瓶0.8921和0.8206 mg,由于溶液pH控制在5.5左右,氨挥发作用十分有限,可以认为是由硝化-反硝化作用所致.研究还发现,浮萍吸收的外源15N标记铵态氮主要分布在可溶性组分中,即细胞质液和液泡溶液中,以可溶性蛋白质(包括酶)、多肽和游离氨基酸等形态存在,这有利于浮萍的资源化利用.

浮萍生长及其除磷效率的影响因素的研究

磷是藻类增殖的限制因子，是引起水体富营养化的关键营养物质。有效除磷，能在很大程度上减轻水体的富营养化。利用浮萍科植物吸收转化污水中的营养物质引起了越来越多研究者的关注，但对浮萍科植物除磷效果的影响因素的研究相对较少。以少根紫萍（Spirodela oligorrhiza）为供试材料，以完全培养液为处理对象，研究了培养液pH、少根紫萍初始放养密度对其生长及除磷效率的影响。结果表明：少根紫萍能够耐受的最低pH在4左右，在pH=5～9能正常生长，在pH=6～8具有较高的TP去除率，最高去除率可达84．1％；少根紫萍的相对增长率随其初始放养密度的增加而降低，但其鲜重增长量、平均增长速率、TP去除率及平均TP去除速率均随着初始放养密度的增加而增加。

镉和乙草胺对少根紫萍的毒性效应

联合毒性实验在水环境污染评价中非常重要。本文以少根紫萍(SpirodelaOligorrhiza)为研究对象,研究了重金属Cd和除草剂乙草胺对少根紫萍生长的单一毒性和联合毒性效应。实验结果表明:Cd、乙草胺及对少根紫萍的96h-IC50分别为4.77mg/L和6.95mg/L,在浓度1∶1的情况下,Cd与乙草胺共存对少根紫萍的96h-IC50为1.41mg/L,采用Marking相加指数法求得相加指数AI为1.00,大于零,为协同作用。同时,随着Cd、乙草胺处理浓度的增加,少根紫萍叶绿素a的浓度下降,其中Cd对叶绿素a的影响大于乙草胺,复合污染对叶绿素a的影响明显大于单一污染,也表现为协同作用。另外,本文还对少根紫萍生长抑制试验进行了探讨,建议使用植物体数和重复间的偏差作为衡量试验质量的指标。

Cd^(2+)、乙草胺单一及其复合污染对少根紫萍生理生化特性的影响

为进一步了解重金属和农药复合污染对水生植物产生毒害作用的机制,以少根紫萍叶片叶绿素质量比、过氧化物酶活性(POD)、超氧化物歧化酶活性(SOD)、丙二醛(MDA)含量为指标,通过水培试验研究了少根紫萍在镉、乙草胺污染胁迫4 d后的生理生化响应,并探讨了镉、乙草胺单一与复合污染对少根紫萍叶片的毒性效应及其致毒机制。结果表明,单一镉污染时,随镉质量浓度的增加,叶绿素质量比显著降低。叶绿素质量比对镉污染响应敏感,有潜力作为水体镉毒性效应的监测指标。随着镉质量浓度的增加,少根紫萍叶片SOD、POD酶活性表现为先增加后降低的趋势;MDA含量随镉质量浓度的增加而显著增加。乙草胺单一处理对少根紫萍各项指标的影响与镉相似,但均小于镉对少根紫萍的影响。镉-乙草胺复合污染时,叶绿素质量比变化趋势与单一处理相同,并低于相应的单一镉、乙草胺处理;但同一镉质量浓度下不同乙草胺质量浓度处理组间叶绿素质量比差异不显著,Cd2+对叶绿素的破坏占主导。镉-乙草胺复合污染处理时,SOD、POD活性仍表现为先增加后下降趋势,但与镉单一处理时比较有降低现象;MDA含量仍随质量浓度的增加而增加,且高于单一处理。镉-乙草胺复合污染的毒性效应高于单一污染的毒性效应,表现为协同作用。

除草剂对水生植物的生理生态效应

首先研究了常用除草剂对水生植物的生理生态效应。结果表明在 12种除草剂中 ,乙草胺、丁草胺、艾割对紫萍 (Spirodelapolyrhiza (L .) Schleid)、金鱼藻 (Ceratophyllum demersum )生长影响显著。其后进行的丁草胺对金鱼藻生物量及生理生化影响研究表明 :金鱼藻生物量 (干重 )随丁草胺浓度的升高显著下降 ,处理后 16 d,两者呈显著的负相关。丁草胺处理后金鱼藻光合放氧速率明显下降 ,至 16 d,2、4、6、8m g/L处理分别比对照减少 36 .0 2 %、4 1.6 4 %、4 2 .74 %和 4 8.4 3% ;呼吸耗氧速率亦显著下降 ,4、6、8m g/L处理分别比对照下降 2 5 .87%、6 6 .6 4 %、6 7.94 %。呼吸耗氧速率的改变与丁草胺浓度呈极显著的负相关 ;丁草胺处理后金鱼藻叶绿素含量显著下降。谷胱甘肽 - S-转移酶 (GSTs)的变化也与丁草胺处理浓度有关 ,低浓度 (1m g/L )呈现先高后低 ,至 16 d显著低于对照 ,高浓度 (8mg/L )为先低后逐渐恢复。除草剂对水生植物的影响有可能影响整个水生生态系的功能。

浮萍药用研究概况

在广泛文献检索基础上,介绍了浮萍的基源、成分、主要功效,为深入研究开发提供基础资料。

水体中氮含量对紫背浮萍生长的影响

考察水体不同氮含量条件下,紫萍的生长特性及其体内蛋白质和碳水化合物累积情况,分析水中氮元素与紫萍体内碳氮磷元素累积的相关性,并进行了紫萍酒精发酵的初步试验。氮浓度采用了1、3、5、7、10 mg/L,氮源分硝基氮和氨基氮两种。试验初步获得了水中氮磷与紫萍体内蛋白质和碳水化合物累积的关系,确定了获取高蛋白质含量和高碳含量紫萍的相关培养条件;酒精发酵效率达94.92%,为紫萍治理废水并应用于能源和饲料行业开拓思路。

响应面优化紫萍黄酮提取工艺及其抗氧化活性

采用响应面法优化微波提取紫萍黄酮的条件。在单因素实验的基础上,选取乙醇体积分数、微波功率、液料比为影响因子,应用Box-Behnken中心组合法进行三因素三水平的试验设计,以紫萍黄酮得率为响应值,进行响应面分析(RSM),结果表明:微波提取紫萍黄酮的最佳提取条件为乙醇体积分数62%、液料比17∶1(mL/g)、微波功率500 W、微波时间9 min;在优化工艺下,紫萍黄酮的得率达到4.14%。对微波提取的紫萍黄酮进行抗氧化性研究发现紫萍黄酮对DPPH.清除作用较好,其抗氧化活性要优于相同浓度的抗坏血酸(VC)和2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)。

紫萍提取物对过氧化氢诱导内皮细胞氧化损伤的保护作用研究

目的研究紫萍提取物是否具有保护内皮细胞免受过氧化氢损伤的作用。方法采用MTT比色法筛选紫萍提取物作用于内皮细胞的安全剂量,建立H2O2对内皮细胞的氧化损伤模型,并研究紫萍提取物的保护作用。最后采用检测试剂盒方法分析紫萍提取物作用后内皮细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性变化。结果紫萍提取物的浓度<100μg/ml,作用时间为24 h时,无明显细胞毒性。以1 mmol/L的H2O2作用于ECV-304细胞1 h造氧化损伤模型,10,25,50μg/ml的紫萍提取物具有预防氧化损伤作用,可使细胞的存活率由21.98%分别上升至37.49%,51.71%和64.74%,其机理可能是紫萍提取物能够剂量依赖性的增强SOD,CAT和GSH-Px等酶的活性。但是紫萍提取物无治疗氧化损伤的作用。结论紫萍提取物可以有效保护内皮细胞免受氧化损伤。

浮萍中黄酮类化学成分的分离与鉴定

目的研究浮萍Spirodela polyrrhiza(L.)Schleid.的化学成分。方法采用正相和反相硅胶柱色谱以及半制备型HPLC进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果分离得到了5个黄酮苷类化合物,分别鉴定为芹菜素8-C-(2″-O-阿魏酰基)-β-D-葡萄糖苷(apigenin-8-C-(2″-O-feruoyl-)-β-D-glucoside,1),荭草素(rietin,2),牡荆素(vitexin,3),木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin7-O-β-D-glucoside,4),芹菜素7-O-β-D-葡萄糖苷(apigenin7-O-β-D-glucoside,5)。结论化合物1为一个新化合物,化合物2和3为首次自该植物中分离得到。

Cu胁迫对紫背萍的生长及活性氧清除系统的影响

通过水培实验研究了重金属铜(Cu)胁迫下的紫背萍的生理响应。结果表明:Cu对紫背萍的生长有低浓度(≤1.8mg.L-1)促进、高浓度(>1.8mg.L-1)抑制作用。紫背萍的植物体数(Y1)、叶绿素含量(Y2)均与Cu浓度(X)呈显著负相关,回归方程为:Y1=-0.53X+34.47、Y2=-0.035X+0.90;Cu对紫背萍的植物体净增殖量、叶绿素含量的4天半数抑制浓度(4d-IC50)分别为5.48mg.L-1和12.12mg.L-1。紫背萍体内的SOD活性(Y3)和CAT活性(Y4)与Cu浓度(X)之间均呈曲线相关,回归方程分别为:Y3=-5.367X2+140.56X-59.25、Y4=-7.146X2+123.65X+1101.03。POD活性在Cu浓度不超过10mg.L-1时,较之对照相差不大,但在18mg.L-1时则大幅度下降。

PB试验结合BBD响应面法优化浮萍多糖的提取工艺研究

目的:优化浮萍多糖的提取工艺。方法:在单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman试验法,对影响浮萍多糖提取率的5个因素进行筛选。根据PB试验结果,选取醇沉至终的乙醇体积分数、料液比、浸提温度为考察因素,运用Box-Behnken响应面法对浮萍多糖的提取工艺进行优化。结果:3个因素对浮萍多糖提取率影响的大小依次是:浸提温度>乙醇体积分数>料液比。最优工艺为:醇沉至终的乙醇体积分数为81%、料液比为1∶42、浸提温度为100℃、浸提时间为60 min、浸提4次。结论:运用Plackett-Burman法和Box-Behnken响应面法优选的浮萍多糖提取工艺稳定可行,可用于浮萍多糖的提取。

铈对紫萍抗铜能力的影响

铈能减缓铜胁迫导致的紫萍 (SpirodelapolyrhizaL .)叶片膜透性的增加、可溶性蛋白含量和叶绿素a/b值的下降以及超氧阴离子 (O2 —·)、丙二醛 (MDA)的积累。与同浓度的单一铜处理相比 ,加入 2 0mg/L的铈后 ,超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化氢酶 (CAT)、过氧化物酶 (POD)的活性和类胡萝卜素(Car)、抗坏血酸 (AsA)含量不同程度的增强或增多 ,暗示铈可能通过提高紫萍活性氧清除能力以增强对铜的抗性和耐性。

大孔吸附树脂分离紫萍中总黄酮的工艺研究

目的探讨大孔吸附树脂法纯化紫萍总黄酮的工艺。方法将AB-8，HPD-450和HPD-6003种大孔吸附树脂对紫萍总黄酮的吸附效果进行了比较，并对AB-8的吸附特性进行了研究。结果AB-8，HPD-450和HPD～600对紫萍总黄酮的吸附量分别为：80．04，82．26和75．96mg／g，解吸率分别为90．47％，80．88％和75．84％。AB-8纯化紫萍总黄酮的工艺条件为：上柱样品pH值为5～6，以1BV／h的速度流过树脂，待吸附平衡后，用4BV的蒸馏水以2BV／h的速度淋洗树脂，然后用70％的乙醇溶液以1BV／h的流速进行洗脱，收集第2～3BV时的洗脱液，其干燥品中的黄酮纯度可达80％左右。结论AB-8型大孔吸附树脂最适合于紫萍总黄酮的分离纯化。