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Identification,structure and function of a novel tetraspaninhoniologue from Spirometra erinaceieuropaei 被引量:1
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作者 Fu Qiongyao Lu Yajun +6 位作者 Rao Langyu Chen Jinglong Wu Qiang Cai Qunfang Li Lihua Wu Lixian Lu Gang 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2011年第9期739-742,共4页
Objective:To identify a full length cDNA sequence of a novel tetraspanin(TSP) homologue from Spirometra erinaceieuropaei and to predict the structure and function of its encoding protein using bioinformatics methods.M... Objective:To identify a full length cDNA sequence of a novel tetraspanin(TSP) homologue from Spirometra erinaceieuropaei and to predict the structure and function of its encoding protein using bioinformatics methods.Methods:Using the NCBI,EMBI,Expasy and other online sites, the open reading frame(ORF),conserved domain,physical and chemical parameters,signal peptide,transmembrane domain,epitope,topological structures of the protein sequences were predicted.And Vector NTI software was used for multiple sequence alignment and phylogenetic tree construction.Results:’Hie target sequence was 1 132 hp length with a 681 hp biggest ORF encoding 226 amino acids protein with typical TSP conserved domain.It was confirmed as full length cDNA of TSP16 from Spirometra erinaceieuropaei and named as SeTSP16 (GenBank accession number:JF728872).The predicted molecular weight and isoelectric point of the deduced protein were 24 750.5 Da and 7.88 Da,respectively.Compared with TSP16s from Schistosoma japonicum and Schistosoma mansoni.it showed similarity of 59%and 59%, respectively.SeTSP16 contained four transmembrane domains(TM 1-4),intracellular N and C-termini,one short small extracellular loop and one large extracellular loop.Four major epitopes that were significant different from the corresponding epitope regions of TSP16 from Schistosoma mansoni and Schistosoma japonicum were predicted.Conclusions:The full length cDNA sequences of SeTSP16 arc identified.It encodes a transmembrane protein which might be an ideal diagnosis antigen and target molecule for antiparasitic drugs. 展开更多
关键词 spirometra erinaceieuropaei TETRASPANIN PREDICTION STRUCTURE FUNCTION
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湖南省猬迭宫绦虫的线粒体cox1和nad1基因的序列测定及种系发育分析 被引量:16
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作者 刘自逵 刘国华 +4 位作者 戴荣四 刘伟 李芬 胡涛 刘毅 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期463-468,共6页
本研究旨在阐明猬迭宫绦虫湖南分离株线粒体细胞色素c氧化酶第I亚基(cox1)基因部分序列(pcox1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位l基因(nad1)部分序列(pnad1)的遗传变异情况,并用pcox1和pnad1序列重构猬迭宫绦虫与其它绦虫的种... 本研究旨在阐明猬迭宫绦虫湖南分离株线粒体细胞色素c氧化酶第I亚基(cox1)基因部分序列(pcox1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位l基因(nad1)部分序列(pnad1)的遗传变异情况,并用pcox1和pnad1序列重构猬迭宫绦虫与其它绦虫的种群遗传关系。利用聚合酶链反应(PCR)扩增猬迭宫绦虫的pcox1和pnad1,应用ClustalX1.81程序对序列进行比对,再用Phylip3.67程序MP法和Mage4.0程序NJ法绘制种系发育树,并用Puzzle5.2程序构建最大似然树,同时利用DNAStar5.0中的Megalign程序进行同源性分析。结果显示所获得各样品株的pcox1和pnad1序列长度一致,分别为396和566bp,湖南分离株与已知猬迭宫绦虫位于同一分枝。由于猬迭宫绦虫pcox1和pnad1序列种内相对保守,种间差异较大,故均可作为种间遗传变异研究的标记,从而为猬迭宫绦虫的种群体遗传学研究和其相关疾病的诊断奠定基础。 展开更多
关键词 猬迭宫绦虫 线粒体DNA cox1基因 nad1基因 种系发育关系
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ELISA法检测猬迭宫绦虫抗体的研究 被引量:6
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作者 丁月新 郭丽莉 +2 位作者 刘殿武 张普洪 刘树贤 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期303-304,共2页
目的 探讨研制猬迭宫绦虫特异性诊断方法。 方法 将已克隆的编码猬迭宫绦虫幼虫半胱氨酸酶的基因重组到表达载体内 ,制备高纯度的基因工程抗原 ,以此基因工程抗原制成酶联免疫吸附试剂盒 ,检测 6例裂头蚴病患者血清。 结果与结论 ... 目的 探讨研制猬迭宫绦虫特异性诊断方法。 方法 将已克隆的编码猬迭宫绦虫幼虫半胱氨酸酶的基因重组到表达载体内 ,制备高纯度的基因工程抗原 ,以此基因工程抗原制成酶联免疫吸附试剂盒 ,检测 6例裂头蚴病患者血清。 结果与结论 基因工程抗原能与裂头蚴病患者血清发生很强的特异性反应 ,而不能与囊虫病患者血清发生反应。此方法的建立为裂头蚴病的特异性诊断奠定了基础。 展开更多
关键词 猬迭宫绦虫 ELISA 基因工程抗原 裂头蚴病 诊断
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欧猬迭宫绦虫全长cDNA文库构建及鉴定 被引量:3
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作者 吕刚 芦亚君 +3 位作者 范志刚 史大中 甘秀凤 钟赛凤 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期393-394,共2页
应用SMART方法成功构建欧猬迭宫绦虫成虫全长cDNA文库,文库的重组率为95.5%,库容量为1.06×106;平均插入片段长度约为1.4kb。选取48个随机阳性克隆测序,去除<450bp序列后获得36个有效表达序列标签(EST),平均长度为674bp,其中单... 应用SMART方法成功构建欧猬迭宫绦虫成虫全长cDNA文库,文库的重组率为95.5%,库容量为1.06×106;平均插入片段长度约为1.4kb。选取48个随机阳性克隆测序,去除<450bp序列后获得36个有效表达序列标签(EST),平均长度为674bp,其中单基因簇(unigene)比例为58.3%(21/36);26条具有同源性序列的EST中15条有或可能有5′末端,全长性比率为57.7%(15/26)。文库质量良好,可用于大规模EST测序。 展开更多
关键词 欧猬迭宫绦虫 成虫 全长CDNA文库
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猬迭宫绦虫幼虫一个含重复序列的cDNA的分子克隆 被引量:2
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作者 刘殿武 刘殿军 +1 位作者 冷双英 刘树贤 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期39-41,共3页
目的:研究猬迭宫绦虫幼虫-裂头蚴的某些蛋白抗原的基因结构。方法:用鼠抗猬迭宫绦虫裂头蚴多克隆抗体筛选裂头蚴cDNA文库,筛选出的阳性克隆经亚克隆,测序后,用微机分析其一级结构。并用Northern杂交实验检测与cDN... 目的:研究猬迭宫绦虫幼虫-裂头蚴的某些蛋白抗原的基因结构。方法:用鼠抗猬迭宫绦虫裂头蚴多克隆抗体筛选裂头蚴cDNA文库,筛选出的阳性克隆经亚克隆,测序后,用微机分析其一级结构。并用Northern杂交实验检测与cDNA杂交的mRNA长度。结果:从cDNA文库中筛选出一个长度为1084bp的克隆,此克隆的开放读码框为828bp,编码276个氨基酸。开放读码框内有一个由123个核苷酸组成的重复单位,此重复单位在开放读码框内重复5次。重复单位编码的41个氨基酸内疏水性氨基酸占53.7%。Northern杂交结果显示在1.1kb处有一个很强的杂交带,1.7kb处有一个弱的杂交带。1.1kb处的杂交带与cDNA克隆的长度几乎相等。结论:裂头蚴在宿主体内移行或停留时,这些含重复序列的抗原性多肽可能作为逃避抗原,使裂头蚴在体内逃避免疫系统的杀伤作用。 展开更多
关键词 猬迭宫绦虫 裂头蚴 CDNA 重复序列
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猬迭宫绦虫线粒体cox3基因的克隆及序列分析 被引量:4
6
作者 伍慧兰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第11期73-75,共3页
本研究旨在阐明猬迭宫绦虫湖南分离株线粒体细胞色素c氧化酶第Ⅲ亚基(cox3)基因部分序列(pcox3)的遗传变异情况。利用聚合酶链反应(PCR)扩增猬迭宫绦虫的pcox3,应用ClustalX 1.81程序对序列进行比对,同时利用DNAStar5.0中的Megalign程... 本研究旨在阐明猬迭宫绦虫湖南分离株线粒体细胞色素c氧化酶第Ⅲ亚基(cox3)基因部分序列(pcox3)的遗传变异情况。利用聚合酶链反应(PCR)扩增猬迭宫绦虫的pcox3,应用ClustalX 1.81程序对序列进行比对,同时利用DNAStar5.0中的Megalign程序进行同源性分析,再用Phylip 3.67程序MP法绘制系统发育树,并与GenBank中已知猬迭宫绦虫相应基因序列进行比对分析。结果显示,所获得的pcox3序列长度一致,均为264bp,湖南分离株与已知猬迭宫绦虫位于同一分支,来自湖南省的猬迭宫绦虫pcox3序列有微小差异。本研究结果为猬迭宫绦虫进一步的分类、鉴定和遗传变异研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猬迭宫绦虫 线粒体DNA cox3基因 序列分析
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欧猥迭宫绦虫膜联蛋白E1基因的生物信息学分析
7
作者 邬强 李东冬 +1 位作者 马盼盼 吕刚 《海南医学院学报》 CAS 2010年第9期1106-1110,共5页
目的:从欧猥迭宫绦虫成虫cDNA文库中识别出膜联蛋白E1(Annexin E1)基因,并对其进行生物信息学分析和功能预测。方法:从欧猥迭宫绦虫cDNA文库中获取Annexin E1基因的核酸序列,应用NCBI、ExPASy等多种生物信息学在线分析工具结合Vector NT... 目的:从欧猥迭宫绦虫成虫cDNA文库中识别出膜联蛋白E1(Annexin E1)基因,并对其进行生物信息学分析和功能预测。方法:从欧猥迭宫绦虫cDNA文库中获取Annexin E1基因的核酸序列,应用NCBI、ExPASy等多种生物信息学在线分析工具结合Vector NTI Advance10、Geneious Pro等软件包,对所获基因及其编码蛋白的基本理化特征、亚细胞定位、保守功能域、抗原表位、二级结构及拓扑结构等进行预测,建立蛋白质三级空间结构模型及构建其分子进化树。结果:Annexin E1编码354个氨基酸残基,理论分子量为40168.0Da,具有4个完整的保守功能域。位于细胞内,无信号肽及跨膜结构,存在6个潜在抗原表位。二级结构主要以α螺旋为主,结构和功能有关的位点高度保守,具有多个磷酸化位点。在进化的过程中与绦虫类亲缘较近,而与脊椎类亲缘较远。结论:Annexin E1编码蛋白及潜在的抗原表位与宿主同源性低,可能作为研发新型免疫诊断方法的理想分子靶标。 展开更多
关键词 欧猥迭宫绦虫 膜联蛋白 结构 功能 生物信息学
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猬迭宫绦虫裂头蚴线粒体nad1基因部分序列的多态性研究 被引量:5
8
作者 曾利娟 刘国华 +3 位作者 廖春玉 曾德良 杨奉凤 刘伟 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第3期92-94,共3页
从湖南省4个不同地区的黑斑蛙大腿肌肉中采集猬迭宫绦虫裂头蚴作为研究对象,用引物Nad1u及Nad1d扩增猬迭宫绦虫裂头蚴的nad1基因片段,应用ClustalX 1.81程序对序列进行比对,同时利用DNAStar 5.0中的MeGalign程序进行同源性分析。结果显... 从湖南省4个不同地区的黑斑蛙大腿肌肉中采集猬迭宫绦虫裂头蚴作为研究对象,用引物Nad1u及Nad1d扩增猬迭宫绦虫裂头蚴的nad1基因片段,应用ClustalX 1.81程序对序列进行比对,同时利用DNAStar 5.0中的MeGalign程序进行同源性分析。结果显示猬迭宫绦虫裂头蚴nad1序列均为570 bp。研究结果为猬迭宫绦虫裂头蚴进一步的分类、鉴定和遗传变异研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猬迭宫绦虫 裂头蚴 nad1基因 序列分析
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基于cox3基因分析蛇源裂头蚴种系发育关系 被引量:5
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作者 谢雯琴 唐伟 +2 位作者 胡丹 杨凌宸 刘伟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期622-624,共3页
为分析野生蛇源裂头蚴与其它绦虫的种群遗传关系,本研究采集湖南省8个地区野生蛇肌肉中的裂头蚴,采用PCR方法对其线粒体cox3基因序列进行扩增、测序及分析。结果显示,湖南省8个裂头蚴分离株cox3基因核苷酸部分序列长度均为342 bp,其cox... 为分析野生蛇源裂头蚴与其它绦虫的种群遗传关系,本研究采集湖南省8个地区野生蛇肌肉中的裂头蚴,采用PCR方法对其线粒体cox3基因序列进行扩增、测序及分析。结果显示,湖南省8个裂头蚴分离株cox3基因核苷酸部分序列长度均为342 bp,其cox3基因核苷酸同源性为98.2%~100.0%,种内遗传差异性为0~1.8%,与其它科绦虫cox3基因核苷酸同源性为63.4%~73.9%,种间遗传差异较大,为26.1%~36.6%。cox3基因的系统进化分析结果显示,湖南省8个裂头蚴分离株与已知猬迭宫绦虫位于同一分支,与其它绦虫所属分支相隔较远。上述结果表明,蛇源裂头蚴线粒体cox3基因序列种内差异远低于种间差异,可以作为研究蛇源裂头蚴种系遗传变异的分子标记。本研究为蛇源裂头蚴的分子流行病学及其群体遗传研究奠定了基础。 展开更多
关键词 裂头蚴 cox3基因 系统进化关系
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猬迭宫绦虫广东分离株线粒体pcox1基因的克隆及序列分析 被引量:2
10
作者 李淳 李明伟 +2 位作者 刘国华 朱兴全 林瑞庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期644-646,共3页
为阐明猬迭宫绦虫广东分离株的遗传变异情况,本研究利用PCR技术扩增了猬迭宫绦虫的部分细胞色素C氧化酶第Ⅰ亚基(pcox1)基因,经SSCP筛选出带型差异的代表样品进行测序,经系统发育树表明,广东分离株与已知猬迭宫绦虫位于同一分枝。同时... 为阐明猬迭宫绦虫广东分离株的遗传变异情况,本研究利用PCR技术扩增了猬迭宫绦虫的部分细胞色素C氧化酶第Ⅰ亚基(pcox1)基因,经SSCP筛选出带型差异的代表样品进行测序,经系统发育树表明,广东分离株与已知猬迭宫绦虫位于同一分枝。同时研究表明猬迭宫绦虫pcox1序列种内相对保守,又存在一定种间差异,可作为种间遗传变异研究的标记,研究结果为进一步研究猬迭宫绦虫的群体遗传结构奠定了基础。 展开更多
关键词 猬迭宫绦虫 线粒体DNA cox1基因 SSCP 种系发育关系
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不同宿主来源猬迭宫绦虫线粒体pcox1、pcox3和prrn S基因的系统发育分析
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作者 贺峻琳 龚腾芳 +4 位作者 谢馨锐 李文超 陈叔玉 李芬 刘伟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期445-448,460,共5页
为了分析不同宿主猬迭宫绦虫的遗传多样性和种系发育关系,本研究通过PCR方法扩增了湖南省7种不同宿主体内采集的7株猬迭宫绦虫(其中3株为裂头蚴)的线粒体pcox1、pcox3和prrn S基因并测序,采用DNAStar 5.0软件分析其与其他绦虫相应基因... 为了分析不同宿主猬迭宫绦虫的遗传多样性和种系发育关系,本研究通过PCR方法扩增了湖南省7种不同宿主体内采集的7株猬迭宫绦虫(其中3株为裂头蚴)的线粒体pcox1、pcox3和prrn S基因并测序,采用DNAStar 5.0软件分析其与其他绦虫相应基因序列的同源性;利用DnaSP V6.12软件计算并分析各基因序列的多样性;利用邻接法绘制pcox1、pcox3和prrn S基因的遗传进化树。PCR扩增及测序结果显示,7株虫株均扩增出了分别为396 bp(pcox1)、362 bp(pcox3)和280 bp(prrn S)的目的片段,且3种基因碱基差异率分别为0~2.27%、0~1.10%和0~1.79%。同源性分析结果显示,本研究的7株猬迭宫绦虫与已报道的其他猬迭宫绦虫线粒体pcox1、pcox3和prrn S基因序列的同源性分别为97.20%~100.00%、98.90%~100.00%和97.90%~100.00%;与其他绦虫线粒体pcox1、pcox3和prrn S基因序列同源性分别为66.70%~84.10%、51.70%~72.10%和63.80%~87.10%。基于基因序列单倍型数(H)、单倍型多样性(Hd)、核苷酸多样性(Pi)、平均核苷酸差异(K)数据的基因序列多样性分析结果显示,3个基因变异率为pcox1>prrn S>pcox3。系统进化树结果显示,7株虫株的pcox1、pcox3和prrn S基因均与已知猬迭宫绦虫相应基因聚类在同一分支,与其他绦虫所属分支相距较远,且基于pcox1、pcox3和prrn S基因均可以将猬迭宫绦虫聚为两个分支。上述结果表明,上述3种基因尤其是pcox3基因均可以作为研究不同宿主来源猬迭宫绦虫遗传变异的分子标记及用于其虫种的鉴定,且猬迭宫绦虫的遗传变异与宿主无关。该研究是国内首次通过线粒体基因探究不同宿主猬迭宫绦虫的遗传进化关系,为猬迭宫绦虫的分子鉴定、分类和群体遗传研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猬迭宫绦虫 不同宿主 线粒体DNA 序列分析 种系发育关系
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湖南省猬迭宫绦虫的线粒体nad5和rrnS基因的序列测定及种系发育分析 被引量:9
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作者 刘自逵 赵光辉 +3 位作者 刘国华 宋海燕 李芬 刘毅 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期258-261,共4页
本研究旨在阐明猬迭宫绦虫湖南分离株线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位5基因(nad5)部分序列(pnad5)和核糖体小亚基基因(rrnS)部分序列(prrnS)的遗传变异情况,并用pnad5和prrnS序列重构猬迭宫绦虫与其他绦虫的种群遗传关系... 本研究旨在阐明猬迭宫绦虫湖南分离株线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位5基因(nad5)部分序列(pnad5)和核糖体小亚基基因(rrnS)部分序列(prrnS)的遗传变异情况,并用pnad5和prrnS序列重构猬迭宫绦虫与其他绦虫的种群遗传关系。利用聚合酶链反应(PCR)扩增猬迭宫绦虫的pnad5和prrnS,应用ClustalX 1.81程序对序列进行比对,再用Phylip3.67程序MP法和Mega4.0程序NJ法绘制种系发育树,并用Puzzle5.2程序构建最大似然树。结果显示,所获得的pnad5和prrnS序列与预期(片段的)长度一致,分别为531bp和328bp。种系发育树表明,湖南分离株与已知猬迭宫绦虫位于同一分枝。结果表明,由于猬迭宫绦虫pnad5和prrnS序列种内相对保守,种间差异较大,均可作为种间遗传变异研究的标记。 展开更多
关键词 猬迭宫绦虫 线粒体DNA nad5基因 rrnS基因 种系发育关系
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湖南省猬迭宫绦虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析 被引量:4
13
作者 刘自逵 刘国华 +5 位作者 戴荣四 刘伟 李芬 徐平原 胡涛 刘毅 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期209-212,共4页
利用聚合酶链反应(PCR)扩增猬迭宫绦虫rDNA的ITS-1、5.8S及ITS-2片段,将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌落PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定并进行序列分析。结果显示,所获得的ITS及5.8S rDNA序列总长存... 利用聚合酶链反应(PCR)扩增猬迭宫绦虫rDNA的ITS-1、5.8S及ITS-2片段,将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌落PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定并进行序列分析。结果显示,所获得的ITS及5.8S rDNA序列总长存在一定差异,为1 369~1 393 bp,包含部分的18、28S及全部的ITS-1(662~687 bp)5、.8S(138 bp)及ITS-2(457~475 bp)序列。由于猬迭宫绦虫ITS序列种内相对保守,种间差异较大,故可作为种间遗传变异研究的标记。 展开更多
关键词 猬迭宫绦虫 内转录间隔区(ITS) 5.8S RDNA 序列分析
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欧猥迭宫绦虫乳酸脱氢酶新基因识别及其结构与功能预测 被引量:1
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作者 吕刚 芦亚君 +3 位作者 范志刚 史大中 甘秀凤 钟赛凤 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期982-984,共3页
目的用生物信息学方法识别欧猥迭宫绦虫(Spirometra erinaceieuropaei,S.e)乳酸脱氢酶(LDH)全长cD-NA序列,预测其编码蛋白的结构与功能。方法用NCBI、EMBI、Expasy等在线网站对序列结构域、功能域等进行分析以识别基因,预测其蛋白序列... 目的用生物信息学方法识别欧猥迭宫绦虫(Spirometra erinaceieuropaei,S.e)乳酸脱氢酶(LDH)全长cD-NA序列,预测其编码蛋白的结构与功能。方法用NCBI、EMBI、Expasy等在线网站对序列结构域、功能域等进行分析以识别基因,预测其蛋白序列理化参数、信号肽、抗原表位、拓扑结构等,三级结构同源建模应用Vector软件进行同源序列比对、构建进化树及三级结构模型分析。结果目标序列具有完整开放阅读框、L-LDH结构域及功能域、polyA,确定为LDH全长cDNA,命名为SeLDH(GU 121 968);该序列编码338氨基酸残基(aa),预测等电点为6.38,分子量为36 028.6Da;与华支睾吸虫、日本血吸虫及人LDH的相似性分别为60%、59%及55%;有5个可能跨膜区域;主要线性表位中的185~191 aa、223~235 aa及328~338 aa与人LDH相同区域差异明显;表位104~111 aa与人LDH相同区域有1 aa的差异,其上有NAD及底物结合位点,关键催化位点112 R紧邻该区域;三级结构模型显示其在蛋白表面形成环状结构,3个关键催化位点及NAD、丙酮酸结合位点在该环状结构上或周围形成催化中心。结论获得SeLDH全长cDNA序列;该蛋白可能是膜蛋白;是理想的免疫诊断、药物作用及疫苗靶分子。 展开更多
关键词 欧猥迭宫绦虫 乳酸脱氢酶 结构 功能 预测
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