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Screening and Identification of Antagonistic Strain HAS against Sporisorium scitaminea Sydow
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作者 Xiong Guoru Zhao Gengfeng +3 位作者 Wu Suran Feng Cuilian Cai Wenwei Zhang Shuzhen 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2014年第3期20-23,共4页
The present study was to screen and identify a biocontrol strain with antagonistic effect against Sporisorium scitaminea Sydow. 16 S rDNA gene fragments were amplified by universal primers P0 and P6. The results showe... The present study was to screen and identify a biocontrol strain with antagonistic effect against Sporisorium scitaminea Sydow. 16 S rDNA gene fragments were amplified by universal primers P0 and P6. The results showed that 16 S rDNA gene fragment with the size of 1 533 bp was obtained,and its sequence had the homology of 99% with the sequence of Bacillus subtilis. The morphological characteristics of the strain were as follows: the mycelium of strain HAS was short-rod shape,and could move; Gram staining was positive; 3% KOH solubility test was negative; flagellum was grown around the cells; spores were grown in the middle,elliptic,and cysts were slightly swelled. The strain was preliminarily identified as B. subtilis. Dual culture with pathogenic fungi showed that the strain had good inhibitory effect against various pathogenic fungi causing diseases on sugarcane and other crops. Therefore,strain HAS isolated in the study was identified to be B.subtilis,which had good control effect against S. scitaminea. 展开更多
关键词 Bacillus subtilis HAS sporisorium scitaminea sydow Biological control
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海南蔗区甘蔗黑穗病菌生理小种鉴定 被引量:10
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作者 熊国如 赵更峰 +6 位作者 伍苏然 沈林波 冯翠莲 王俊刚 蔡文伟 王文治 张树珍 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第7期1328-1334,共7页
采集海南蔗区8个县市24个乡镇的甘蔗黑穗病菌样品24份,通过甘蔗黑穗病菌鉴别寄主NCO376(免疫)、NCO310(抗小种2,感小种1)、F134(感小种2,抗小种1)、F173(高感)及主栽品种ROC22,确定海南蔗区甘蔗黑穗病菌的生理小种。接种甘蔗黑穗病菌后... 采集海南蔗区8个县市24个乡镇的甘蔗黑穗病菌样品24份,通过甘蔗黑穗病菌鉴别寄主NCO376(免疫)、NCO310(抗小种2,感小种1)、F134(感小种2,抗小种1)、F173(高感)及主栽品种ROC22,确定海南蔗区甘蔗黑穗病菌的生理小种。接种甘蔗黑穗病菌后1 a新植,2 a宿根的发病情况表明:海南蔗区甘蔗黑穗病菌生理小种为小种2,或优势小种为小种2。这对了解海南蔗区甘蔗黑穗病菌生理小种的分化及分布情况,以及对今后海南蔗区甘蔗黑穗病的防控及抗黑穗病甘蔗种质的选育提供依据。 展开更多
关键词 甘蔗黑穗病 黑穗病菌 生理小种 鉴别寄主
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带黑穗病菌蔗种的种植对蔗茎产量和蔗糖分的影响 被引量:8
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作者 王文治 杨本鹏 +5 位作者 熊国如 冯翠莲 蔡文伟 王俊刚 赵婷婷 张树珍 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第9期1683-1687,共5页
甘蔗黑穗病是甘蔗种植过程中危害较为严重的病害之一,影响甘蔗的蔗茎产量和蔗糖分质量。为对黑穗病爆发比较严重的蔗区提供一种合理的种植模式,分别在2012年农历立春前及立夏前种植带黑穗病菌的甘蔗种茎,以种植未感染黑穗病菌的健康甘... 甘蔗黑穗病是甘蔗种植过程中危害较为严重的病害之一,影响甘蔗的蔗茎产量和蔗糖分质量。为对黑穗病爆发比较严重的蔗区提供一种合理的种植模式,分别在2012年农历立春前及立夏前种植带黑穗病菌的甘蔗种茎,以种植未感染黑穗病菌的健康甘蔗种茎作为对照,观察这2期甘蔗生长过程的黑穗病发病情况,以及对甘蔗有效茎、株高、茎径和锤度的影响。结果表明:在不同的气候环境下,种植携带黑穗病菌的蔗种黑穗病发病差异显著;携带黑穗病菌的蔗种宜冬春早种,利用冬春季节阴冷潮湿的天气,延迟黑穗病菌的萌发,减少对有效茎的侵害,进而减少对产量的影响。 展开更多
关键词 甘蔗 黑穗病 甘蔗种植
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枯草芽孢杆菌HAS中TasA基因的克隆与分析 被引量:3
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作者 熊国如 赵更峰 +3 位作者 蔡文伟 伍苏然 杨本鹏 张树珍 《贵州农业科学》 CAS 2016年第12期53-57,共5页
为弄清枯草芽孢杆菌HAS对甘蔗黑穗病菌的抑制作用机理,选取可对多种植物病原真菌有抑制作用的抗菌蛋白TasA基因进行克隆与分析。结果表明:在HAS菌株中含有TasA基因,克隆编码抗菌蛋白TasA的基因全长,序列分析其有786个碱基组成,该序列与G... 为弄清枯草芽孢杆菌HAS对甘蔗黑穗病菌的抑制作用机理,选取可对多种植物病原真菌有抑制作用的抗菌蛋白TasA基因进行克隆与分析。结果表明:在HAS菌株中含有TasA基因,克隆编码抗菌蛋白TasA的基因全长,序列分析其有786个碱基组成,该序列与GenBank上登录的TasA(AJ871386.1)序列同源性达99%,推测蛋白分子量大小大约28KD,其中第104、164、169、250、399、623、627位等7个碱基发生碱基转换或颠换,而且这些变异分别发生在密码子的第2、2、3、1、3、2、3位碱基上,引起多肽链氨基酸的错义突变。经氨基酸序列比对,同Bacillus subtilis subsp.subtilis str.168编码的TasA蛋白(NP_390342.1)在第150位和第209位上的氨基酸发生变化,由苏氨酸、天冬酰胺分别代替丙氨酸和谷氨酸。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌HAS 黑穗病菌 抗菌蛋白 TasA基因
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甘蔗品种黑穗病抗性评价体系的建立(英文) 被引量:31
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作者 阙友雄 许莉萍 +3 位作者 林剑伟 陈天生 陈如凯 李依龙 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 2006年第1期18-23,共6页
为了建立甘蔗品种黑穗病抗性评价体系,选用9个引进品种,设计一个包括6个对照品种在内的田间试验。首次采用混合小种进行人工浸渍接种,通过整个新植蔗生长季病害进展曲线下的面积、茎感染率和株感染率3个病情指数,以及病害流行学参数潜... 为了建立甘蔗品种黑穗病抗性评价体系,选用9个引进品种,设计一个包括6个对照品种在内的田间试验。首次采用混合小种进行人工浸渍接种,通过整个新植蔗生长季病害进展曲线下的面积、茎感染率和株感染率3个病情指数,以及病害流行学参数潜伏侵染期和持续发病期的分析,对其抗病性进行评价。在分析以上参数相关程度的基础上,引进了系统聚类分析法进行进一步评价。结果显示:9个引进甘蔗品种中,ROC26属于感病品种,其余属于抗病或高抗品种;3个病情指数和持续发病期的两两相关均为显著正相关,潜伏侵染期与这些参数的相关为负相关,但未达到显著水平;在类间距离大于1.0的条件下,可将15个品种聚为6类,进一步明确了各品种抗黑穗病性的相似程度;抗性鉴定标准对照种NCo310、F134、NCo376和Ya71-374的应用,明确了接种源为小种1和小种2,通过一次接种试验,明确了供试品种对2个小种的抗性水平,标准对照种的抗性表现,还说明了本生长季发病条件基本是适宜的。本文建立的甘蔗品种抗黑穗病评价体系是切实可行的。 展开更多
关键词 甘蔗 品种 黑穗病 抗性评价 相关系数 聚类分析
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甘蔗黑穗病菌拮抗菌HAS的筛选和鉴定 被引量:12
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作者 熊国如 赵更峰 +2 位作者 伍苏然 冯翠莲 张树珍 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2013年第6期1149-1154,共6页
采用传统形态学鉴定及16S rRNA基因序列分析,筛选鉴定对甘蔗黑穗病菌具有拮抗作用的细菌的归属,并采用细菌的通用引物P0、P6扩增16S rRNA基因片段。结果表明:得到1 533 bp的DNA片段,其序列与枯草芽孢杆菌序列的同源性高达99%。其形态学... 采用传统形态学鉴定及16S rRNA基因序列分析,筛选鉴定对甘蔗黑穗病菌具有拮抗作用的细菌的归属,并采用细菌的通用引物P0、P6扩增16S rRNA基因片段。结果表明:得到1 533 bp的DNA片段,其序列与枯草芽孢杆菌序列的同源性高达99%。其形态学特征:菌体为短杆状,能运动;革兰氏阳性反应;3%KOH溶解性实验呈阴性反应;有鞭毛,鞭毛周生;芽孢中生,椭圆形,孢囊稍膨大,初步将该菌株归属为枯草芽孢杆菌。与病原真菌对峙培养的结果表明,该菌对引起甘蔗和其它作物病害的多个植物病原真菌均具有很好的抑制作用。据此,可将分离的菌株HAS确定为对甘蔗黑穗病菌有较好防治效果的枯草芽孢杆菌。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌HAS 甘蔗黑穗病菌 生物防治
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对甘蔗受黑穗病菌侵染后差异表达基因的分离与鉴定 被引量:7
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作者 阙友雄 许莉萍 陈如凯 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期452-458,共7页
采用12个3′锚锭引物和8个5′随机引物构建引物组合,运用DDRT-PCR差异显示方法,分析NCo376和F134两品种接种黑穗病菌前后的基因表达差异。经克隆、测序和半定量RT-PCR验证,获得7条真实差异表达片段,这些片段分别同GenBank中编码细胞色素... 采用12个3′锚锭引物和8个5′随机引物构建引物组合,运用DDRT-PCR差异显示方法,分析NCo376和F134两品种接种黑穗病菌前后的基因表达差异。经克隆、测序和半定量RT-PCR验证,获得7条真实差异表达片段,这些片段分别同GenBank中编码细胞色素C氧化酶基因、核糖体蛋白基因、NAD-依赖型苹果酸脱氢酶基因、氨基转移酶基因、乙烯响应相关结合蛋白基因、RNA聚合酶特异转录起始因子和反转录转座子的序列的同源性达28%~99%。半定量RT-PCR分析表明,细胞色素C氧化酶基因的表达受甘蔗黑穗病菌和水杨酸的调控,不依赖于过氧化氢的作用机制,在甘蔗根、茎、叶中表达的抗病基因组成型表达,但表达水平较低。推测甘蔗受黑穗病菌侵染后,可能通过细胞色素C氧化酶基因的诱导,促使植保素合成增多,以此抵抗或抑制病原菌的胁迫。该结果丰富了甘蔗与黑穗病菌互作的分子机制研究,为甘蔗抗黑穗病分子育种奠定了基础。 展开更多
关键词 甘蔗 甘蔗黑穗病 MRNA差异显示 差异表达基因 RT-PCR
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8种杀菌剂对甘蔗黑穗病菌的室内毒力测定 被引量:8
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作者 朱桂宁 林珊宇 +3 位作者 贤小勇 颜梅新 黄福新 秦碧霞 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期989-994,共6页
【目的】研究8种杀菌剂对甘蔗黑穗病菌的室内毒力,为甘蔗黑穗病药剂防治提供科学依据。【方法】采用冬孢子萌发抑制法、担孢子增殖抑制法及菌落生长速率法测定8种杀菌剂对甘蔗黑穗病菌的生物活性。【结果】嘧菌酯、苯醚甲环唑·嘧... 【目的】研究8种杀菌剂对甘蔗黑穗病菌的室内毒力,为甘蔗黑穗病药剂防治提供科学依据。【方法】采用冬孢子萌发抑制法、担孢子增殖抑制法及菌落生长速率法测定8种杀菌剂对甘蔗黑穗病菌的生物活性。【结果】嘧菌酯、苯醚甲环唑·嘧菌酯、噻呋酰胺、吡唑醚菌酯、吡唑醚菌酯·啶酰菌胺、啶酰菌胺、苯醚甲环唑对甘蔗黑穗病菌冬孢子萌发具有很好的生物活性,EC50分别为0.0117、0.0234、0.0636、0.1238、0.1441、13.7620和25.9300μg/mL,而丙环唑的活性较低,EC50为155.5000μg/mL。啶酰菌胺对甘蔗黑穗病菌担孢子增殖没有抑制作用,除嘧菌酯对"+"、"-"两种担孢子增殖的EC50分别为4.3250和5.3040μg/mL外,其余药剂的EC50均小于1.0000μg/mL。对甘蔗黑穗病菌菌丝生长抑制作用较好的药剂依次为丙环唑、苯醚甲环唑、噻呋酰胺、苯醚甲环唑·嘧菌酯、吡唑醚菌酯、吡唑醚菌酯·啶酰菌胺、啶酰菌胺,EC50分别为0.0145、0.0643、0.1291、0.1689、0.2535、0.6767和4.8610μg/mL,嘧菌酯对菌丝生长的抑制作用稍差,EC50为94.5000μg/mL。【结论】供试8种杀菌剂对甘蔗黑穗病菌不同生长时期均具有不同的生物活性,可进一步开展这些杀菌剂的田间药效防治试验。 展开更多
关键词 甘蔗黑穗病菌 杀菌剂
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甘蔗黑穗病及其抗病育种的现状与展望 被引量:52
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作者 许莉萍 陈如凯 《福建农业学报》 2000年第2期26-31,共6页
就甘蔗黑穗病 (Ustilago scitaminea Syd.)及其生理小种 ,甘蔗对黑穗病菌的抗性机制及其遗传 ,甘蔗抗黑穗病性鉴定技术 ,以及我国甘蔗抗黑穗病育种的现状进行评述 。
关键词 甘蔗黑穗病 抗病育种 现状
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甘蔗分离群体的黑穗病病情指数分析(英文) 被引量:5
10
作者 许莉萍 陈如凯 陈平华 《热带作物学报》 CSCD 2004年第3期33-36,共4页
在田间进行2组试验以分析甘蔗分离群体的甘蔗黑穗病病情指数。新植蔗和宿根蔗分别有72份和50份无性系参试。采用孢子悬浮液浸渍法对新植蔗进行接种,并收集新植蔗和宿根蔗自第1个黑穗病鞭子出现至发病停止期间的数据。对所收集到的新植蔗... 在田间进行2组试验以分析甘蔗分离群体的甘蔗黑穗病病情指数。新植蔗和宿根蔗分别有72份和50份无性系参试。采用孢子悬浮液浸渍法对新植蔗进行接种,并收集新植蔗和宿根蔗自第1个黑穗病鞭子出现至发病停止期间的数据。对所收集到的新植蔗3个病情指数茎感染率(SI)、丛感染率(PI)和病害进展曲线下的面积(AUDPC)的数据进行正态分布检验。结果表明:AUDPC与标准正态分布曲线最吻合,其3个特征值正态度、偏度和峰度分别为0.949,0.018和-0.721;PI的吻合程度次之;SI为第3。以上结果的置信度大于97.7%。不论新植蔗还是宿根蔗,3个病情指数两两间以及各病情指数与持续发病期(SDD)间均呈显著正相关,在AUDPC与SI间的相关系数最大,新、宿分别为0.929和0.888。除潜伏侵染期(LP)与PI间的相关外,LP与AUDPC、SI和SDD间的负相关均达到显著水平,LP与SDD间的负相关系数最大,为0.521。相关分析结果暗示,在进行甘蔗抗黑穗病性评价时,利用包括病情指数和病害流行学参数在内的多个参数综合评价抗病性是必要的。 展开更多
关键词 甘蔗 分离群体 黑穗病 病情指数
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甘蔗鞭黑粉菌ISSR-PCR反应体系的优化 被引量:2
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作者 沈万宽 习平根 姜子德 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期712-717,共6页
以甘蔗鞭黑粉菌交配型分离物为试验材料,采用CTAB法提取基因组DNA,并对影响甘蔗鞭黑粉菌ISSR-PCR反应体系中的一些重要参数进行摸索和优化试验,建立起适合甘蔗鞭黑粉菌基因组DNA的ISSR-PCR反应体系。优化的反应体系为:在25μL体系中,rTa... 以甘蔗鞭黑粉菌交配型分离物为试验材料,采用CTAB法提取基因组DNA,并对影响甘蔗鞭黑粉菌ISSR-PCR反应体系中的一些重要参数进行摸索和优化试验,建立起适合甘蔗鞭黑粉菌基因组DNA的ISSR-PCR反应体系。优化的反应体系为:在25μL体系中,rTaq DNA聚合酶1.5 U、Mg2+浓度为2.0 mmol/L、dNTP浓度为0.2 mmol/L、引物浓度为0.2μmol/L、DNA模板10~20 ng、10×PCR buffer 1μL、用重蒸水补足25μL。 展开更多
关键词 甘蔗鞭黑粉菌 ISSR 体系优化
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转基因甘蔗抗黑穗病鉴定研究 被引量:4
12
作者 李娇 王震 +5 位作者 杨本鹏 张树珍 蔡文伟 顾丽红 杨志才 王文治 《广西农业科学》 CSCD 2009年第9期1150-1155,共6页
用分离得到的甘蔗黑穗病病菌单孢子菌丝体对5个甘蔗转基因株系进行体外抑菌作用鉴定,结果显示,5个转基因株系对甘蔗黑穗病均有不同程度的抗性表现;通过人工接种方法对转基因植株(T1)进行了甘蔗黑穗病病菌的田间接种实验,利用病害流行指... 用分离得到的甘蔗黑穗病病菌单孢子菌丝体对5个甘蔗转基因株系进行体外抑菌作用鉴定,结果显示,5个转基因株系对甘蔗黑穗病均有不同程度的抗性表现;通过人工接种方法对转基因植株(T1)进行了甘蔗黑穗病病菌的田间接种实验,利用病害流行指标LP、SDD、IPmax、Ymax、AUDPC对其后代(T2)进行抗病性鉴定,结果表明,SCG1和SCG2两个株系表现为抗病(R),而SCG3、SCG4和SCG5三个株系表现为中抗(I);并结合RT-PCR技术鉴定目的基因在转基因甘蔗无性系后代(T2)中的表达,结果显示两个目的基因在转基因甘蔗无性系T2中均有表达,此结果与其抗病表现一致。 展开更多
关键词 甘蔗黑穗病 转基因甘蔗植株 抗性鉴定
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正负交配型担孢子接种法鉴定重要甘蔗品种(系)对黑穗病的抗性 被引量:7
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作者 陈健文 沈万宽 +4 位作者 杨湛端 陈仲华 刘睿 陈勇生 邓海华 《甘蔗糖业》 2013年第1期23-26,共4页
以正负交配型担孢子菌株组成的混合菌液作为接种体,对30个重要甘蔗品种(系)进行浸泡接种,鉴定其对黑穗病的抗性。结果表明,抗性水平为高抗(HR)的材料有CP84-1198、CP89-2143等9份;抗性水平为抗(R)的材料有粤糖99-66、粤糖06-581和Q190;... 以正负交配型担孢子菌株组成的混合菌液作为接种体,对30个重要甘蔗品种(系)进行浸泡接种,鉴定其对黑穗病的抗性。结果表明,抗性水平为高抗(HR)的材料有CP84-1198、CP89-2143等9份;抗性水平为抗(R)的材料有粤糖99-66、粤糖06-581和Q190;抗性水平为中抗(MR)的有HoCP93-746、ROC22和ROC24;CP63-588、ROC25和NCo310这3份材料表现为中感(MS);CP72-1210和F134等9份材料表现为感(S),而CP85-384、HoCP95-988和粤糖63-237则高感(HS)黑穗病。此外,还初步推断广东省湛江遂溪蔗区存在不同于台湾报导的小种1、2和3的甘蔗黑粉菌生理小种。 展开更多
关键词 甘蔗 黑穗病 正负交配型 抗性鉴定
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枯草芽孢杆菌HAS中几丁质酶基因的克隆分析 被引量:1
14
作者 熊国如 赵更峰 +3 位作者 张树珍 蔡文伟 伍苏然 杨本鹏 《贵州农业科学》 CAS 2017年第2期1-4,共4页
为揭示枯草芽孢杆菌菌株HAS对甘蔗黑穗病菌抑制作用的机理,选取对多种病原真菌有抑制作用的几丁质酶进行克隆与分析。结果表明:菌株HAS基因组中含有1个ORF全长834bp的几丁质酶编码序列,其具有编码278个氨基酸的几丁质酶蛋白,该序列同Gen... 为揭示枯草芽孢杆菌菌株HAS对甘蔗黑穗病菌抑制作用的机理,选取对多种病原真菌有抑制作用的几丁质酶进行克隆与分析。结果表明:菌株HAS基因组中含有1个ORF全长834bp的几丁质酶编码序列,其具有编码278个氨基酸的几丁质酶蛋白,该序列同GenBank上登录的几丁质酶蛋白(Bacillus subtilis subsp.subtilis str.168)(ref|NP_390566.1)的同源性最高,达98%。推测该几丁质酶在菌株HAS抑制甘蔗黑穗病菌过程中可能起关键作用。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌HAS 黑穗病菌 抗菌蛋白 几丁质酶基因
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Cloning and Analysis of Chitinase Gene in Bacillus subtilis HAS
15
作者 Xiong Guoru Zhao Gengfeng +3 位作者 Cai Wenwei Wang Jungang Yang Benpeng Zhang Shuzhen 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2019年第2期4-6,共3页
[Objective] The paper was to study the possible mechanism of chitinase gene. [Method] The chitinase gene with inhibitory effect against a variety of pathogenic fungi was cloned and analyzed in this study. [Result] The... [Objective] The paper was to study the possible mechanism of chitinase gene. [Method] The chitinase gene with inhibitory effect against a variety of pathogenic fungi was cloned and analyzed in this study. [Result] The genome of HAS strain contained an ORF of 834 bp. The homology of coding protein corresponding to ORF with chitosanase [Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168](ref|NP_390566.1) was the highest of 98%(272/277).[Conclusion]Through the analysis of amino acid sequence and secondary structure of the protease, tertiary structure prediction and analysis, HAS strain may play a pivotal role in controlling Sporisorium scitaminea Syd. 展开更多
关键词 BACILLUS SUBTILIS HAS sporisorium scitaminea syd. ANTIFUNGAL protein CHITINASE gene
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Cloning and Analysis of TasA Gene in Bacillus subtilis HAS
16
作者 Guoruo XIONG Gengfeng ZHAO +3 位作者 Wenwei CAI Suran WU Benpeng YANG Shuzhen ZHANG 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2017年第2期48-50,54,共4页
In order to clarify the mechanism for the inhibitory action of the Bacillus subtilis strain HAS on Sporisorium scitamineum ( Syd. ), which can cause sugarcane smut, the full-length TasA gene which encodes a protein ... In order to clarify the mechanism for the inhibitory action of the Bacillus subtilis strain HAS on Sporisorium scitamineum ( Syd. ), which can cause sugarcane smut, the full-length TasA gene which encodes a protein with broad-spectrum antimicrobial activity, was PCR-amplified from HAS, and cloned into pMD18-T vector. Sequence analysis indicated that the full-length TasA cloned from HAS consisted of 786 nucleotides, and shared 99% homology in nucleotide sequence with the TasA gene sequence published in Genbank (AJ871386.1). It was predicted that the molecular weight of TasA protein was about 28 kD. Base transitions or transversions ~curred at positions 104, 164, 169,250, 399,623 and 627, at the 2nd, 2nd, 3rd , 1st , 3rd, 2nd and 3rd bases of TasA codons. The mutations in the seven bases may cause the missense mutations of the polypeptide chain. Compared with the amino acid sequences of the TasA protein encoded by Bacillus aubtilis subsp, subtilis str. 168, mutations in two amino acids at positions 150 and 209 of the protein encoded by the cloned TasA gene were found, and as a result, an ala- nine was replaced with a threonine. 展开更多
关键词 Bacillus subtilis HAS mad a glutamic acid was replaced with an asparagine. sporisorium scitamineum syd. Antimicrobial protein TasA
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