头花蓼对幽门螺杆菌相关性胃炎大鼠胃组织SIRT1、p53和p21的影响

目的:观察头花蓼对幽门螺杆菌相关性胃炎(HAG)的治疗效果及对HAG胃组织中SIRT1/p53/p21信号通路的影响。方法:30只SD大鼠均分为正常对照组、模型组和药物组,正常对照组给予无菌脑心浸液肉汤灌胃,模型组和药物组大鼠给予H.pylori灌胃(1×1011CFU/L SS2000菌液1.5 m L/只)建立HAG模型,药物组HAG模型大鼠给予1.58 mg/(kg·d)头花蓼灌胃治疗,正常对照组大鼠和模型组大鼠给予等量无菌生理盐水灌胃,连续给药14 d;治疗结束4周时检测大鼠胃组织H.pylori定植量、观察各组大鼠胃黏膜组织学改变,采用Real time PCR和Western blot技术检测大鼠胃组织SIRT1、p53及p21 mRNA及蛋白表达水平。结果:正常对照组大鼠胃组织H.pylori定植量为0,模型组和药物组大鼠胃黏膜均有H.pylori定植,与模型组比较,药物组H.pylori定植量显著降低(P<0.05);正常对照组大鼠胃组织无病理形态学改变,模型组大鼠H.pylori感染后的胃黏膜腺体排列不规则,胃黏膜固有层中有较多淋巴细胞浸润,细胞浸润多呈弥漫性;药物组大鼠胃组织病理形态学改变少于模型组;与正常对照组比较,模型组病理评分显著升高,而药物组病理评分显著低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);H.pylori感染后,与正常对照组相比,模型组大鼠胃组织SIRT1、p53基p21 mRNA表达量增加(P<0.05);头花蓼治疗后,与模型组相比,药物组大鼠胃组织SIRT1、p53及p21 mRNA水平都明显升高(P<0.05);与正常对照组相比,模型组大鼠胃组织SIRT1、p53及p21蛋白表达均有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05);而头花蓼治疗后,与模型组相比,SIRT1、p53和p21蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:头花蓼治疗可能是通过上调SIRT1、p53和p21基因表达来发挥作用。

竹荪多糖对砷中毒大鼠肝功能及肝纤维化的影响

目的:探讨竹荪多糖对砷中毒大鼠肝损伤的影响。方法:将24只清洁级健康SD大鼠均分为对照组、模型组、竹荪干预组3组,每组雌雄各半;对照组以常规饲料饲养,竹荪干预组和模型组喂饲砷含量50 mg/kg的饲料,竹荪干预组每日以10 g/L的竹荪多糖20 m L/kg灌胃,各组大鼠喂养3个月时取血检测血清谷草转氨酶(AST)及谷丙转氨酶(ALT)活力、总蛋白(TP)及白蛋白(ALB)水平、白蛋白与球蛋白比值(A/G)、粘连蛋白(LN)、透明质酸酶(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)以及Ⅳ型胶原(PCIV)的水平;取大鼠同一肝小叶行HE及Masson染色,观察肝组织病理学改变,并计算肝纤维化增生面积。结果:与对照组相比,竹荪干预组和模型组大鼠血清内AST的活力均升高,ALB水平降低,LN、HA、PCIV水平增高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,竹荪干预组大鼠血清内AST和ALT的活力均降低,TP、A/G、ALB水平升高,LN、PCIV水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);HE和Masson染色结果显示,竹荪干预组和模型组均出现不同程度的肝损伤;通过图像分析系统测量,对照组、竹荪干预组、模型组大鼠肝脏增生纤维面积呈增加趋势,竹荪干预组和模型组与对照组相比胶原纤维沉积面积差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:竹荪多糖对砷中毒大鼠肝脏有一定的保护作用。

吗啡后处理对大鼠缺血再灌注心肌线粒体膜通透转运孔的影响

目的 观察吗啡后处理对雄性大鼠缺血再灌注心肌细胞线粒体膜通透转运孔（MPTP）的影响。方法 S‐D雄性大鼠48只，体质量170～260 g ，随机分为4组（ n ＝12）：①假手术组（C组），②缺血再灌注组（I／R组），③吗啡后处理组（MP组），④吗啡＋苍术苷组（MAP组）。采用结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注90 min的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型。再灌注结束后，HE染色观察心肌细胞结构，检测心肌梗死区／缺血区（IS／AAR）梗死百分比、心肌组织丙二醛（MDA）含量。结果 与I／R组比较，MP组血流动力学显著改善，心肌梗死百分比 IS／AAR％和 MDA 含量显著降低，而 MAP组与 MP组比较，心肌梗死面积（IS／AAR）和MDA含量显著增高。结论 吗啡后处理可显著减轻心肌缺血再灌注损伤；线粒体膜通透性转运孔M PT P可能是吗啡后处理心肌保护的作用通路。

吗啡处理对大鼠延髓头端腹内侧区的L-型电压门控钙通道蛋白与电流的影响

【目的】探讨在吗啡引起的痛觉超敏状态下,SD大鼠延髓头端腹内侧区电压门控钙通道（voltage-gated calcium channels, VGCCs）蛋白的表达变化和功能变化。【方法】采用western blot方法检测α1C和α1H亚基蛋白在大鼠延髓头端腹内侧区（the rostral ventromedial medulla,RVM）的表达,采用脑片全细胞膜片钳技术记录大鼠RVM神经元的VGCCs电流。【结果】在吗啡诱导的痛觉超敏状态下,SD大鼠RVM的α1C亚单位蛋白表达显著增加,同时神经元的VGCCs总电流和L-型VGCCs电流也显著增加。【结论】延髓RVM的L-型电压门控钙通道的可塑性变化,可能是导致吗啡痛觉超敏的重要原因。

丹红注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤后GFAP表达的影响

目的探讨脑缺血再灌注损伤（I／R）大鼠丹红注射液干预后胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）的表达变化。方法96只SD大鼠随机分为：正常对照8只（N组），不做任何处理；假手术组8只（S组），仅分离出血管，不做其他处理；缺血再灌注损伤组40只（I／R组），丹红注射液干预组40只（DI／R组），两组均采用大脑中动脉闭塞方法制作大鼠脑缺血再灌注模型。模型成功后，DI／R组从实验前一天开始腹腔注射丹红注射液（8 mL／kg ，Qd）；I／R组在相同时间点注射生理盐水。并于再灌注后6h、24h、48h、72h、7d的各时间点分批处死动物，免疫组织化学方法检测各组大鼠脑内GFAP的表达情况；各组大鼠在处死前行神经功能缺损评分。结果 N组和S组神经细胞中GFAP阳性细胞较少；I／R组缺血再灌注6 h GFAP的表达开始增加，72 h GFAP表达增加达到高峰，缺血再灌注7 d表达减少，DI／R组GFAP表达趋势同缺血再灌注组，但各时间点阳性细胞数明显低于I／R组（ P ＜0．05）；除6 h外的其余各时间点，DI／R组大鼠神经功能缺损均小于I／R组（ P ＜0．05），且DI／R组缺血再灌注时间越长，神经功能缺损程度越轻（ P＜0．05）。结论大鼠脑缺血再灌注损伤后，GFAP的表达上调，但丹红注射液下调GFAP的表达，抑制星形胶质细胞过度增生，减轻脑缺血后损伤。

胰激肽原酶通过调节自噬减轻免疫制剂诱导肾损伤的机制

目的按探讨他克莫司(TAC)诱导大鼠使用胰激肽原酶(PK)之后的肾脏损伤治疗效果,分析胰激肽原酶的药用机理。方法选取48只雄性Sprague-Dawledy大鼠作为样本,随机将大鼠分为VH组、VH+PK组、TAC组、TAC+PK组,每组各12只。VH组大鼠进行皮下橄榄油1mL·(kg·d)^(-1)、腹腔生理盐水2mL·(kg·d)^(-1)注射;VH+PK组大鼠进行皮下橄榄油1 mL·(kg·d)^(-1)和腹腔PK为7.2U·(kg·d)^(-1)"注射;TAC组进行皮下TAC1.5mg·(kg·d)^(-1)和腹腔生理盐水2mL·(kg·d)^(-1)注射;TAC+PK组进行皮下TAC1.5mg·(kg·d)^(-1)和腹腔PK7.2U·(kg·d)^(-1)注射,每组大鼠的给药周期为4周,在给药结束后采集大鼠尿液样本,检测尿蛋白水平(UPRO);在大鼠颈部右侧静脉部位采集血液样本,检测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、TAC水平;使用电子显微镜观察肾组织的超微结构改变,运用蛋白免疫印迹法对组织细胞内的自噬相关因子轻链蛋白3B(LC3B)、P62、Beclin的变化进行分析。结果与VH组比较,TAC组大鼠的饮水量增加,尿量提高,而体重明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。TAC+PK组大鼠的体重大于TAC组(P<0.05)。TAC组大鼠的Scr、BUN、UPRO大于VH组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。TAC+PK治疗组的Scr、BUN和UPRO均较TAC组明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。VH+PK组大鼠在电子显微镜下的各项变化和VH组无差异,而TAC组不仅出现了肾小管基膜增厚,还伴有肾小管萎缩,肾小管间质炎性细胞增多以及肾间质胶原纤维明显增生,同时出现了上皮细胞空泡变形,大量自噬体形成。相较于VH组,TAC组大鼠组织细胞中的LC3B-Ⅱ表达下降,而P62和Beclin表达显著增强(均P<0.05);TAC+PK组大鼠的LC3B-Ⅱ表达大于TAC组,而P62、Beclin表达低于TAC组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论自噬可参与免疫抑制剂诱导肾损伤的发生发展,TAC诱导肾脏损伤大鼠在采用PK给药治疗后的肾脏损伤程度有所下降,其原因可能源于PK对肾脏细胞自噬功能的调节作用。