普洱茶对SD大鼠血液生理生化指标影响的研究

普洱茶是云南独有的特产茶,特殊的原料、环境、工艺和贮藏条件赋予了普洱茶独特的品质。迄今,国内外对普洱茶复合成分的毒理学安全性评价研究报道甚少。研究以云南普洱生茶、熟茶为样本,进行90 d亚慢性毒性试验。试验得出2个茶样各剂量组的各项血常规指标与对照组相比无显著差异(P>0.05);除各剂量组的甘油三酯值与对照组相比显著降低(P<0.05)外,其他各组的各项生化指标均在正常值范围内。结果表明:适宜浓度的普洱茶对SD大鼠血液生理生化指标无不良影响,同时可降低血液中甘油三酯含量,饮用适宜浓度的普洱茶是安全的。

SD大鼠不同小肠段对血糖控制作用的基础研究

目的探讨正常SD大鼠不同小肠段对血糖控制改变的影响和可能机制。方法将20只SD大鼠按数字表随机分为A、B、C三组,其中A组6只,B组和C组各7只。测各大鼠体质量及尾部静脉血空腹血糖。手术探查小肠全长度,并将其分为三等分,用7b丝线结扎每段肠管的两端,保留正常的肠系膜血液循环。A组向近侧段小肠腔内注射葡萄糖,B组向中间段小肠腔内注射葡萄糖,C组向远侧段小肠腔内注射葡萄糖(注射量均为1 mg/kg,生理盐水稀释至1 ml)。分别测定注射葡萄糖后2 min、15 min、45 min、75 min、120 min尾部静脉血血糖。结果手术过程中有3只大鼠死亡,A组1只死于失血量过多,B组1只死于麻醉药物中毒(麻醉药物注入血管),C组1只大鼠死于空气栓塞,手术存活率为85%。三组SD大鼠空腹血糖相互比较差异均无统计学意义[(7.85±1.26)mmol/L vs(7.76±2.19)mmol/L vs(7.83±1.82)mmol/L,P>0.05]。术后2 min B组与A组血糖比较差异均无统计学意义[(9.90±1.51)mmol/L vs(10.56±1.47)mmol/L,P>0.05];而C组[(7.78±1.56)mmol/L]明显低于A组和B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后15 min、45 min、75 min、120 min血糖比较,B组均低于A组,C组均低于A组和B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论通过向不同段SD大鼠小肠注射葡萄糖的研究结果发现,近段小肠控制血糖效果最差,中间段小肠次之,远段小肠效果最好。从本实验的结果中可以看出,越是靠近末端的小肠,越是有控制血糖水平的能力。不同肠段对血糖控制的作用机制可能与胃肠道激素分泌有关,尚有待进一步的研究。

欧李发酵液对高脂血症SD大鼠血脂的调控及对肝脏的保护作用

研究欧李发酵液(Cerasus humilis fermentation juice,CF)对高脂血症SD大鼠血脂的调控作用及肝保护作用。健康雄性SD大鼠30只,适应性喂养7 d后,依据体重随机分为对照组、高脂模型组与CF组(发酵液浓度为40%,灌胃剂量为10 mL/kg bw),每组10只,经口灌胃,1次/d,连续10周。灌胃期间于第0、2、4、6、8、10周末眼眶静脉丛采血,全自动生化分析仪测定血清总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)浓度;肝脏冰冻切片油红O染色观察肝脂滴情况并计算脂滴面积比;HE染色观察肝细胞病变情况。结果表明:大鼠的血脂随着造模时间的延长呈波动趋势。第8周时,与模型组相比,CF组血清TG浓度显著降低57.20%(P<0.05)。实验结束时,与模型组相比,CF组大鼠血清TC浓度降低了10.02%(P>0.05),血清LDL-C浓度显著降低35.48%(P<0.05)且与对照组浓度相近;CF组肝脏器指数较模型组显著降低了20.92%(P<0.05);肝油红脂滴面积比显示,CF组较模型组显著下降27.50%(P<0.05);HE染色结果显示CF组肝细胞脂质空泡明显减少。结果表明,欧李发酵液具有调控高脂血症SD大鼠血脂紊乱的作用,并能明显改善肝脏因脂质沉积而导致的病变。

钼暴露对不同性别SD大鼠血气相关指标的影响

为了研究钼对SD大鼠血气相关指标的影响,试验选用健康状况良好的SD大鼠60只(雌雄各30只),雌雄鼠分别随机分为5组,即对照组、钼50组、钼100组、钼200组、钼400组,适应后进行试验,自由进食及饮水,分别在饮水中添加0、50、100、200、400 mg·L^(-1)钼酸钠(Na_(2)MoO_(4)·2H_(2)0),以此建立试验动物模型,试验周期为28d,试验结束后抽血测定各组SD大鼠血气相关指标。结果表明:与对照组相比,雄鼠钼50组、钼100组、钼200组pO_(2)和pO_(2)(T)极显著降低(P<0.01),钼400组pO_(2)和pO_(2)(T)显著降低(P<0.05);钼200组、钼400组Lac显著升高(P<0.05)。与对照组相比,雌鼠钼50组K^(+)极显著升高(P<0.01);钼100组K极显著升高(P<0.01),葡萄糖(Glu)极显著降低(P<0.01);钼200组K^(+)显著升高(P<0.05),Glu极显著降低(P<0.01);钼400组Glu极显著降低(P<0.01),而ctCO_(2)、pH、HCO^(3-)(act)、HCO^(3-)(std)、BE(ecf)、BE(B)、BB(B)、pH(T)升高(P>0.05)。说明钼剂量达50 mg·L^(-1)时,雄鼠出现缺氧并呈浓度依赖性;钼剂量达100 mg·L^(-1)时,雌鼠出现糖代谢障碍并呈浓度依赖性;钼剂量达200 mg·L^(-1)时,雄鼠Lac升高,出现脱水、缺氧或肝肾功能异常等;钼剂量达200 mg·L^(-1)时,雌鼠酸碱状态指标异常,机体存在明显的代谢性碱中毒。

不同品系、不同性别对大鼠CIA发病情况的比较研究

目的:对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)在不同性别、不同品系(SD大鼠、Wistar大鼠、Lewis大鼠)大鼠的发病情况进行比较研究,以期寻找出一种适合制作CIA模型的大鼠品系。方法:选用6周龄SPF级SD大鼠、Wistar大鼠各80只,Lewis大鼠40只,雌雄各半。采用尾根部皮下注射Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂混合物的方法诱导出关节炎模型。结果:(1)不同种属发病率不同;随着免疫时间的延长,发病率越高。两两比较显示,SD和Wistar大鼠与Lewis大鼠发病率有显著性差异,但SD与Wistar无显著性差异;(2)不同品系大鼠AI不同,有显著性差异;组间两两比较结果显示:Lewis比SD、Wistar大鼠AI低,有显著性差异,且SD比Wistar大鼠AI高,差异亦具有显著性。但性别对AI没有影响;(3)性别对病理积分影响无显著性,种属对病理积分影响有显著性差异。两两比较结果显示,Lewis比SD、Wistar大鼠关节病理积分低,有显著性差异,而SD与Wistar大鼠之间无显著性差异。结论:在制作痹证(RA)大鼠模型时建议首选SD大鼠,其次可以选择Wistar大鼠,雌雄均可。

流体剪应力对大鼠破骨细胞骨吸收活性的影响

探讨流体剪应力对大鼠破骨细胞骨吸收活性的影响。我们采用低温离心法获取6月龄健康雌性SD大鼠椎骨骨髓细胞,以1.6×106细胞密度种植于血盖片上,采用1,25-(OH)2维生素D3体外诱导获取破骨细胞。于破骨细胞诱导的第7d取出细胞爬片,置于流体剪应力装置中,分别加载5.97、11.36、16.08、20.54dyne/cm2大小的流体剪应力,持续30min,以未加载流体剪应力的破骨细胞为对照组。实验结束时,以2.5%戊二醛固定细胞爬片,置于0.25mol/L氢氧化铵液超声处理10min,清除细胞爬片上的破骨细胞,经1%硪酸固定,梯度酒精脱水,醋酸异戊酯置换酒精,CO2临界点干燥,喷金后扫描电镜观察骨吸收陷窝并计数,图像分析法测定骨吸收陷窝的面积;同时分别收集每次灌流液10ml,冻干,用1ml复溶后,紫外分光光度仪检测抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)活性的变化。结果显示:在本实验中所选用的流体剪应力可增强破骨细胞TRAP活性,而骨吸收陷窝的数量和面积也增加,尤其是剪应力在16.08dyne/cm2时,破骨细胞TRAP活性增强以及骨吸收陷窝的数量和面积增高最为明显。结果表明,一定范围内的流体剪应力可以增强破骨细胞的骨吸收活性。

大鼠脑源性骨质疏松动物模型

目的研究损毁下丘脑弓状核导致骨质疏松是否一种可操作性强，可重复性好和稳定性高的骨质疏松动物模型。方法新生SD大鼠（体重5．5～6．5g）（广东医学院实验动物中心提供，实验动物合格证书编号：粤检证字：2002A013号）166只（雌100只，雄66只）分成10个实验组，每个实验组再随机分为对照（NS）组和模型（MS6）组。10个实验组用同样造模方法，由经过训练的不同人员操作，在不同时间完成。模型组大鼠于出生后第1、3、5、7、9d皮下注射10％谷氨酸单钠（MSG）4g/kgB．W，对照组同法注射等体积生理盐水。并另设MSG毒性对照组，于70d龄同法注射MSG。各实验组按照设定的取材时间，将实验动物称重后，用3％戊巴比妥钠腹腔麻醉，用4％多聚甲醛经左心室行全身灌注，取脑作下丘脑弓状核（ARc）冠状面切片，HE染色。取右侧胫骨常规脱钙，石蜡包埋，矢状面连续切片，胶原特殊染色，显示骨小梁结构。用图像分析仪对ARC和骨组织进行组织形态计量学检测。结果模型组大鼠弓状核神经细胞数量减少66．3％（P〈0．01）；骨小梁面积百分数（Percent trabecular area，％Tb·Ar）减少72．7％（P〈0．01），骨小梁厚度（Trabecular thickness，Tb·Th）减少25．1％（P〈0．05），骨小梁数量（Trabecular number，Tb·N）减少62．6％（P〈0．01），骨小梁分离度（Trabecular separation，Tb·SP）增大259．7％（P〈0．001），表明骨量显著减少，骨结构明显退变，发生明显骨质疏松。对照组和MSG毒性对照组的弓状核和骨组织无明显改变。结论①MSG大鼠骨组织的改变不是MSG对骨组织的毒性作用所致；②MSG损毁弓状核神经细胞导致骨质疏松，此模型可操作性强、可重复性好和稳定性高；③此模型是由于损毁弓状核神经细胞，造成神经内分泌免疫功能减退和紊乱导致骨质疏松的大鼠骨质疏松动物模型。命名为大鼠脑源性骨质疏松动物模型。

大鼠脑源性骨质疏松的特性

目的研究大鼠脑源性骨质疏松的特性。方法用雌性SD大鼠建立脑源性骨质疏松动物模型,用体内双荧光标记法测其右胫骨上段骨组织形态计量学动态参数,用XLA27153型流式细胞仪测定CD3、CD4、CD8和NK细胞的百分率(%)。用3H-TdR掺入法测定大鼠体外T淋巴细胞转化功能。用放射免疫法测定血清中生长素(GH)、雌二醇(E2)和骨钙素(BGP)的含量。用酶法测定血脂,称体脂质量。结果与对照组比较,模型组大鼠:(1)代表骨形成的骨组织形态计量学动态参数值显著降低:荧光标记周长百分率(%L.PM),骨矿化沉积率(MAR),骨形成率(BFR/BS,BFR/BV)分别降低了33.6%(P<0.01),25.5%(P<0.01),48.0%(P<0.01)和46.3%(P<0.01);(2)生长素(GH)、雌二醇(E2)和骨钙素(BGP)的含量显著降低;(3)免疫功能下降:CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、NK细胞百分率明显降低和体外T淋巴细胞转化能力明显降低;(4)脂质代谢紊乱:TC,TG,LDL-C显著升高,HDL-C显著降低,体脂质量显著增加。结论大鼠脑源性骨质疏松是一种多因素的综合的神经、内分泌、免疫功能和脂质代谢功能减退和紊乱的低转换型骨质疏松。

谷氨酸单钠损毁弓状核对雌性大鼠骨组织形态计量学的实验研究

目的研究损毁下丘脑弓状核对大鼠骨组织形态计量学的影响。方法选用新生期SD雌性大鼠12只,随机分成2组:皮下注射10%谷氨酸单钠组(MSG实验组),同法注射等体积生理盐水组(NS对照组),各组大鼠皆存活至120d处死,取左侧胫骨上段制成不脱钙骨切片,行骨组织形态计量学研究。结果与NS对照组相比,MSG实验组的骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)降低23.21%(P<0.05),骨小梁宽度(Tb.Th)降低9.74%(P<0.05),骨小梁数量(Tb.N)减少14.65%(P<0.05),骨小梁分离度(Tb.Sp)升高24.04%(P<0.05)。骨小梁荧光周长百分数(%L.Pm)降低32.89%(P<0.05),骨矿化沉积率(MAR)增加11.83%(P<0.05),骨形成率(BFR/TV、BFR/BV、BFR/BS)分别降低34.96%、16.91%、24.60%(P<0.05)。骨小梁周长破骨细胞数量增加100%。结论 MSG损伤弓状核引起大鼠骨转换降低,骨形成减少,骨吸收增加,导致骨质疏松。

摩罗丹(浓缩丸)对慢性非萎缩性胃炎模型大鼠的影响

目的:研究摩罗丹(浓缩丸)治疗慢性非萎缩性胃炎(CNAG)大鼠的疗效及作用机制,为摩罗丹(浓缩丸)在CNAG方面的药效学提供依据。方法:采用灌胃60%乙醇溶液、20 mmol/L去氧胆酸钠溶液与饮用低浓度氨水溶液联合饥饱失常的方法制备CNAG大鼠模型。通过测定胃液pH值、胃蛋白酶、血清胃动素、胃泌素水平评价摩罗丹(浓缩丸)对CNAG模型大鼠胃功能的改善作用,通过胃组织病理学检查,评价摩罗丹(浓缩丸)对CNAG模型大鼠胃黏膜炎症的改善作用。结果:2倍临床等效剂量西药阳性药枸橼酸铋钾颗粒以及摩罗丹(浓缩丸)高、中、低剂量均可不同程度改善CNAG模型大鼠的胃黏膜组织病理学情况(P<0.01)。摩罗丹(浓缩丸)高剂量组、枸橼酸铋钾颗粒组与模型组胃液pH值差异有统计学意义(P<0.05)。摩罗丹中剂量组、低剂量组胃动素表达水平与模型组差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01)。结论:摩罗丹(浓缩丸)能够减轻CNAG大鼠的胃黏膜损伤,其机制可能与维持胃液pH值,调节胃动素有关,表明摩罗丹(浓缩丸)对CNAG有较好的治疗作用,并对胃黏膜有修复和保护作用。

磁场对大鼠血清营养相关生化指标的影响

报道了旋转恒定磁场对大鼠血液生化指标的影响.在强度为0 4T,旋转速率为8Hz的磁场条件下,鼠龄3周的大鼠,磁场每天处理2h,共持续10周,导致血清葡萄糖水平显著下降;鼠龄为10周的大鼠,每天磁场处理2h,共持续4周,则引起血清甘油三酯水平的显著降低,血清高密度脂蛋白水平则显著上升.

木瓜蛋白酶联合DNA酶法提取乳鼠原代皮层神经元及鉴定

目的采用木瓜蛋白酶联合DNA酶法提取24 h内新生SD大鼠皮层神经元,改进体外原代培养方法。方法取24 h内新生SD大鼠,剥离脑血管膜分离出大脑皮层,采用木瓜蛋白酶和DNA酶顺序消化、纯化后,以含10%胎牛血清的DMEM-F12培养基为神经元接种液,4 h后更换为预热的含有B27的Neurobasal-A神经元培养液,连续培养7 d。分别以1×10^(5)、5×10^(5)、1×10^(6)细胞/mL接种于L-多聚赖氨酸浸泡后的6孔板内,并在显微镜下观察细胞的生长状态。取培养7 d后的神经元,采用β-Tubulin免疫荧光法和神经元特异性核蛋白(Neun)抗体免疫组化法鉴定神经元,神经元微管相关蛋白2抗体(MAP2)免疫荧光法鉴定神经元纯度。结果神经元以密度为5×10^(5)细胞/mL接种最为合适,接种24 h后,皮层神经元部分贴壁;接种3 d后,贴壁细胞逐渐增多,神经元突触进一步生长并延长,交联成稀疏网络;接种7 d后,神经元仍大量生长,胞体丰满,并形成更为紧密的神经元网络系统。经β-Tubulin免疫荧光法和Neun抗体免疫组化法鉴定,提取培养细胞为神经元,并经神经元标志物MAP2免疫荧光法鉴定神经元纯度为(91.06±1.51)%。结论采用24 h内新生SD大鼠分离大脑皮层,经木瓜酶与DNA酶顺序消化,可提取到优质皮层神经元。

高剂量摄入鱼油导致大鼠脂肪肝的实验研究

目的分析低剂量、高剂量鱼油对大鼠血脂、肝脏脂肪沉积及胰岛素敏感性的影响。方法 24只雄性SD大鼠随机分为3组,对照组(NC)、低剂量鱼油组(LFO)、高剂量鱼油组(HFO)。喂养12周,记录采食量及体重,测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、游离脂肪酸(FFA),分析肝脏脂肪沉积及胰岛素敏感性。数据采用单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果 LFO、HFO组血清TG、TC均低于NC组,差异有统计学意义(P<0.05),3组间HDL-C、FFA差异无统计学意义(P>0.05);LFO及NC组肝脏结构正常,肝细胞索排列紧密,肝细胞内未见脂肪沉积,而HFO组肝细胞内有大量脂肪聚集,为严重脂肪肝;3组大鼠胰岛素敏感性差异无统计学意义(P=0.086)。结论低剂量、高剂量摄入鱼油均能降低大鼠血脂,但高剂量摄入导致大鼠脂肪肝。

草铵膦原药对大鼠致畸试验

[目的]检测95%草铵膦原药对妊娠大鼠是否有母体毒性,胚胎毒性以及致畸毒性。[方法]应用SpragueDawley(SD)大鼠为实验动物,设计30、70、150 mg/kg b.w.三个剂量组和1个阴性对照组进行了草铵膦原药的"致畸试验"。[结果]经口灌胃95%草铵膦原药70 mg/kg b.w.引起妊娠母鼠轻微母体毒性反应和胎鼠体质量增长缓慢,部分胎鼠出现第2胸骨缺失。95%草铵膦原药150 mg/kg b.w.引起妊娠母鼠严重的母体毒性反应、母体平均增重和胎鼠平均身长、尾长和体质量增长缓慢,部分胎鼠出现角尾和弯尾或第2胸骨缺失或肋骨缺失或短。[结论]经口灌胃95%草铵膦原药70 mg/kgb.w.可引起轻微母体毒性反应、胎鼠毒性和骨骼发育迟缓,对胎鼠无致畸作用。95%草铵膦原药150 mg/kg b.w.可引起明显母体毒性反应、母体毒性、胎鼠毒性、胎鼠骨骼发育迟缓及个别胎鼠骨骼发育畸形。

长期致癌试验动物饲养管理技术关注要点

致癌性研究是药物非临床安全性评价的重要内容,啮齿类动物2年致癌性试验仍被视为致癌性检测的"金标准",动物饲养管理直接关系到试验成败。本文将结合工作经验、指导原则、文献报道和新药审评材料,从动物质量控制、动物房及笼具、饲养方式等方面提出长期致癌试验饲养管理方面的关注点和建议,为新药长期致癌试验在国内的开展提供有益的参考。

桔梗对哮喘大鼠支气管重构的影响

目的在建立支气管重构哮喘大鼠模型的基础上,通过灌胃给药,初步探讨桔梗对哮喘大鼠支气管重构的影响。方法将40只SD大鼠随机分为对照组、生理盐水组、低浓度桔梗组和高浓度桔梗组,持续给药8周。测定用药前后大鼠的引喘时间,以及大鼠血清中核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)的浓度。结果结果显示,与生理盐水组比较,高浓度桔梗组大鼠引喘时间显著延长(P<0.01),NF-κB、MMP-9和TIMP-1的血清浓度显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论本研究表明,高浓度桔梗可通过抑制肺部炎症反应和MMP-9的高表达,从而减轻哮喘大鼠支气管重构。

蠕虫来源的LNFPⅢ对周围性神经病理性疼痛的病理发生和脊髓胶质细胞活化的影响

目的 探讨蠕虫来源的免疫调控性糖分子乳-N-岩藻五糖Ⅲ（lacto-N-fucopentaoseⅢ,LNFPⅢ）对成年大鼠胫神经永久性横断伤（即改良型备用性神经损伤,modified spared nerve injury,mSNI）后神经病理性疼痛的病理发生的影响,以及它对此时脊髓胶质细胞活化的影响。方法 成年雄性SD大鼠随机分为4组,即假手术组（n=6）、mSNI手术组（n=6）、mSNI手术＋牛血清白蛋白（BSA）组（n=12）和mSNI手术＋LNFPⅢ组（n=12）。各组动物行右侧mSNI手术或者相应的假手术,根据实验分组腹腔注射BSA或LNFPⅢ与BSA的结合物。每组取6只大鼠进行足底试验、von Frey纤维试验、针刺试验和丙酮试验,测试手术前、后手术同侧和对侧大鼠后爪足底面腓肠神经和隐神经皮肤区域特异性的疼痛反应。制备mSNI手术＋BSA组和mSNI手术＋LNFPⅢ组手术后7d和14d（各组每个时间点3只动物）的第3~第4腰椎（L3~4）脊髓节段冰冻切片,进行小胶质/巨噬细胞标志物分化抗原簇分子11b（cluster of differentiation molecule 11b,CD11b）和星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的免疫荧光染色。结果 成年大鼠mSNI后,早期系统性给予LNFPⅢ可显著缓解手术后急性诱导期（4/5d）和慢性转化期（7/8d和14/15d）中手术侧后爪足底面腓肠神经和隐神经皮肤区域特异性的机械和温度刺激诱发的病理性疼痛。同时,早期系统性给予LNFPⅢ抑制mSNI大鼠手术侧脊髓背角中术后7d小胶质/巨噬细胞以及术后7d和14d星形胶质细胞的活化。结论 早期系统性给予LNFPⅢ能抑制成年大鼠mSNI后神经病理性疼痛的病理发生（包括急性诱发和慢性转化）以及该过程中脊髓胶质细胞的活化。