基于高通量培养分析稻虾共作模式土壤的细菌群落

高通量测序技术的发展发现并鉴定了土壤微生物的未培养物种,然而,仅依赖非培养的高通量测序无法获得发挥关键功能的微生物培养物,限制了对其功能的验证及其应用,这对关键功能微生物的机理性研究和应用具有一定的局限性.本研究以稻虾共作和水稻单作两种稻作模式的土壤样品为研究对象,分别对比了传统平板涂布、96孔培养板划线分离以及将非培养和培养法相结合的———“96孔高通量培养法”3种方法的土壤细菌分类差异、菌群多样性、组成特异性以及细菌功能特征.结果表明,相对于传统涂布培养法,96孔高通量培养法所获取的细菌数量高约5倍,能鉴定到属的培养物高约4倍,预测功能鉴定提高约2倍.由此可见,“96孔高通量培养法”大大提高了对土壤细菌培养物的获取和鉴定率.本研究弥补了传统培养法的获得率低的不足,拓宽了高通量培养技术的应用领域,同时,也为进一步揭示稻虾共作模式参与土壤生态变化过程的微生物机制提供研究基础.

枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢测量方法研究

枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢是生物防护和灭菌效果评价的重要指示微生物,其量值准确可以保证评价的有效性和可比性。对枯草芽孢杆菌涂布平板法进行了方法验证和协同实验验证以及不确定度分析。结果显示,当平板上的菌落数在30~300 CFU之间时,该方法重复性和再现性均较好,室内重复性相对标准偏差为10.0%,室间相对标准偏差为14.1%。经统计分析,胰蛋白胨大豆琼脂培养基平板涂布法相对扩展不确定度为12.0%(k=2),适用于枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢定量测量,对于人员防护装备防护性能评价、消毒剂检测及灭菌质量控制具有重要意义。

3M纸片检测大肠菌群法与国标快速检测法的比较研究

[目的]比较用3M纸片法与用快速检测国标法(MEFH)对不同样品大肠菌群的检测结果。[方法]以花生、小米、玉米、大米和花生油为检测样品,以Aliz-gal和MUGal肉汤为培养基,设大肠菌群污染的自然状态未知浓度和模拟培养已知浓度的两种处理,进行3M纸片法与MEFH法对大肠菌群的检测结果对比试验。[结果]3M法与MEFH中MPN法检测自然状态的5种样品的大肠菌群结果比较符合率为90%,3M纸片法和MEFH中的平板法检测结果无明显差异。3M纸片法未出现假阳性现象,证明了3M纸片法有很强的选择性。[结论]3M纸片法操作简便,适合企业现场食品卫生检测。

溶洞顶板极限承载力研究

针对国标《工程岩体分级标准》[1]中Ⅲ、Ⅳ类岩体条件,采用显式有限差分法,对岩溶地区扩大基础下椭球状溶洞顶板稳定性进行了分析。通过对溶洞顶板的应力和位移变化规律及塑性区演化规律研究,得出在两种岩体条件下不同溶洞跨度和顶板厚度时溶洞顶板的极限承载力,绘出了溶洞跨度、顶板厚度对极限承载力的联合影响曲面。溶洞顶板的极限承载力随溶洞跨度的增大而减小,随溶洞顶板厚度的增大而增大。在其他条件相同时,Ⅳ类岩体的溶洞顶板极限承载力仅为Ⅲ类岩体的1/3左右。

3种荧光标记根瘤菌数量测定方法比较

试验以绿色荧光蛋白标记的中华苜蓿根瘤菌菌株Sm1021为试验材料,将平板涂布法、膜过滤法、流式细胞术3种微生物计数方法测得结果进行对比,以平板涂布法为基准,观察膜过滤法与流式细胞术的准确性。结果表明:利用膜过滤法测定根瘤菌数量可获得与平板涂布法相近的结果,但在操作层面上具有一定制约,且测定成本较高,只有在某些特定情况下具有应用优势;流式细胞术测定的结果与平板涂布法所得结果间存在显著的差异,但由于菌类的数量基数较大,可进行粗略的统计估算。此外,当菌液中菌量较大时,流式细胞术的准确性增加(P=0.495)。

危岩拦石墙计算方法研究

拦石墙是危岩主要的被动防治技术之一。通常布设在陡崖或陡坡脚前适当部位。而布设在陡崖或陡坡脚前的距离及自身高度、宽度等结构尺寸均应通过计算确定,但计算理论迄今尚未完善。作者将危岩落石作用于拦石墙的传力机理概化为落石→堤→桩及板→地基的传力过程。落石作用于挡土墙后在挡土墙内的扩散范围为一锥体,建立了落石对拦石墙的冲击力及其在土堤内部扩散的计算方法,量化了落石在墙体内的冲击深度及扩散角,即锥体的高度及顶角张开度。将拦石墙土堤等效为连续土板,则可将拦石墙概化为连续桩板结构并将冲击力均布作用于扩散锥。据此便可运用结构力学方法进行拦石墙内力计算。运用论文建立的拦石墙计算方法在三峡水库区万州太白岩实施了3km长的示范工程。多次随机落石事件显示了该结构的可靠性及有效性。

芦荟苷对足部主要致病菌抑菌活性的研究

以库拉索芦荟提取物90％的芦荟苷为测试样品,以4种足部主要致病菌为供试菌,用试管稀释法、结合平板涂布法,研究芦荟苷的抑菌活性.结果表明:芦荟苷对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、红色毛癣菌均有较好的抑制作用,对大肠杆菌的抑制活性最大,且对革兰氏阴性菌的抑制活性强于革兰氏阳性菌.4种菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为1、2、1、1mg/mL.芦荟苷对足部主要致病菌具有较好的抑菌活性和抑菌效果,可用于鞋用里布的抗菌功能改性.

日本冲绳海槽和欧亚板块附加体二维构造应力场的有限元模拟及其构造意义初探

应用有限元方法模拟了日本冲绳海槽和欧亚大陆板块附加体二维构造应力场,并根据库仑-摩尔准则讨论了有限元模型中断裂构造发育与变形,定量化地研究了大陆岩石圈的扩张作用以及菲律宾海板块的俯冲作用对大陆板块边缘构造应力场及其变形作用的影响。数学模拟的结果表明,大陆地壳底部的扩张作用使得冲绳海槽内发育正断层,从而导致冲绳海槽这一弧后盆地的形成。菲律宾海板块的俯冲作用引起欧亚板块附加体中形成逆掩断层。有限单元模拟实验结果与研究区地震震源机制的研究结果是一致的。

一种快速准确测定A群脑膜炎奈瑟菌活菌率的方法

目的研究"美蓝-(碱性)藏红O"双染色法用于快速准确测定A群脑膜炎奈瑟菌(group A Neisseria meningitidis,以下简称A群脑膜炎球菌)活菌率的可行性。方法制备A群脑膜炎球菌悬液,取菌悬液双染色法染色,用光学显微镜观察,计算活菌率。将菌悬液进行10倍系列稀释,各菌液分别用平板涂布法接种至10%羊血普通琼脂平皿,于CO2环境下、35~37℃培养12~20 h,计算菌悬液活菌率。比较两种方法测定8批A群脑膜炎球菌所测得的活菌率,并进行相关性和线性回归分析。结果 "美蓝-(碱性)藏红O"双染色法与平板涂布法所测得的活菌率结果差异无统计学意义(P>0.05);两种方法所测得的活菌率具有显著的直线回归关系(P<0.01,n=8),相关系数r=0.984,其回归方程为y=0.919x+1.661(R2=0.967)。结论 "美蓝-(碱性)藏红O"双染色法检测时间短、判定结果直观、操作简单、计数结果准确,可用于A群脑膜炎球菌活菌率的快速测定。

雪茄烟中霉菌计数方法的适用性评价

为明确霉菌计数方法对雪茄烟的适用性,采用孟加拉红琼脂培养基、改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基和SYMPHONY Agar快速显色培养基对13种雪茄烟进行霉菌计数,评价3种培养基在不同接种方式条件下雪茄烟中霉菌计数结果的一致性,并对各霉菌计数方法进行比较。结果表明:(1)同种接种方式条件下,3种培养基的霉菌计数结果的一致性较好;(2)相同培养基条件下,平板涂布法操作更简便,菌落分布均匀,典型菌落更易判读;(3)3种霉菌计数培养基相比,SYMPHONY Agar快速显色培养基培养周期短,霉菌典型菌落大小均匀,更容易计数。因此,SYMPHONY Agar快速显色培养基和平板涂布法接种方式更适合于雪茄烟中的霉菌计数。

固体培养基螺旋接种和涂布接种方法比较研究

目的评价固体培养基螺旋接种代替涂布接种方法的可能性。方法以国内外6个厂家的7种固体培养基(麦康凯琼脂、亚硫酸铋琼脂、HE琼脂、沙门菌显色培养基、平板计数琼脂、营养琼脂、胰蛋白胨大豆琼脂),分别用螺旋平板法与传统的涂布平板法对7株不同菌株(鼠伤寒沙门菌、伤寒沙门菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、福氏志贺菌)进行比对测定。结果对用2种接种方法在各培养基上生长的菌落数进行方差统计,金黄色葡萄球菌菌株在平板计数琼脂和营养琼脂上差异有统计学意义(P<0.05),其余各菌株基本上在7种培养基上差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对大部分菌株的接种,螺旋平板法可代替传统的涂布平板的接种方法。