颌面部鳞癌细胞生物学特性及p21蛋白表达的定量分析

本文应用双抗体标记和流式细胞分析技术，对５５例颌面部鳞状上皮源性良恶性肿瘤及正常组织进行ＤＮＡ指数、增殖指数、Ｓ期细胞比例及ｐ２１蛋白的表达进行了定量分析。结果：正常皮肤和乳头状瘤均为二倍体，鳞癌异倍体率为６０％，并随病理分级增高而增高；增殖指数和Ｓ期细胞所占的百分比在这三种组织中均有显著性差异；正常组织ｐ２１蛋白的表达为阴性；乳头状瘤ｐ２１蛋白阳性表达率为３０％；鳞癌ｐ２１阳性表达率为７０％；鳞癌ｐ２１蛋白的阳性表达率和表达强度均显著高于其它两种组织。结论认为ｐ２１蛋白在良性肿瘤中也有部分阳性表达。但表达率显著低于恶性肿瘤。

MDM2、P53和P27蛋白在食管鳞癌及其癌旁组织中的表达及其意义

背景与目的:探讨癌基因蛋白MDM2、抑癌基因蛋白P53以及细胞周期蛋白P27在食管鳞癌及其癌旁组织中的表达及其意义。材料与方法:采用免疫组织化学EnVision二步法(定性)检测85例食管癌存档蜡块及其癌旁黏膜中MDM2、P53和P27蛋白的表达;采用流式细胞仪(定量)检测上述3种蛋白在48例食管癌新鲜组织标本及其癌旁黏膜以及12例切缘相对正常黏膜中的表达。结果:从单纯性增生-轻度非典型增生-中度非典型增生-重度非典型增生-原位癌-浸润癌进展过程的变化,发现:定性和定量检测结果均显示P53蛋白在正常食管黏膜上皮中无表达,在食管癌变早期即出现P53蛋白的积聚;而MDM2、P27蛋白在正常黏膜上皮均有不同程度的表达,在癌变的晚期MDM2蛋白表达明显增加。结论:P53和P27蛋白表达的变化可能发生在食管癌形成早期,MDM2蛋白表达的变化可能发生在食管癌变的晚期。定性和定量2种方法联合检测能更客观和准确的探讨癌基因产物的表达及其临床意义。

PTEN在口腔鳞状细胞癌中的定量分析及平阳霉素化疗对其表达的影响

目的 探讨抑癌基因PTEN在口腔鳞状细胞癌组织中的定量表达，平阳霉素化疗对该基因表达的作用。方法收集1999～2002年口腔鳞状细胞癌石蜡包埋组织88例，分化疗组44例，未化疗组44例。化疗组为术前3天用平阳霉素48毫克。选择28例正常口腔粘膜组织作为对照组。应用流式细胞术定量分析技术研究PTEN在口腔鳞状细胞癌中的定量表达。结果PTEN在正常粘膜组FI值为1．0±0．03，平阳霉素化疗组FI值为0．8±0．06，未化疗组FI值为0．68±0．03。各组之间FI值均有显著性差异。结论PTEN在口腔鳞状细胞癌组织中呈低表达，平阳霉素化疗使其含量上升。

口腔白斑及鳞癌病理组织中ras癌基因P^(21)蛋白表达

口腔白斑及鳞癌为口腔临床中常见的癌前病损和恶性病变。本研究应用免疫组化技术（ＡＢＣ法）检测口腔鳞状细胞癌及白斑组织中ｒａｓ癌基因产物Ｐ２１蛋白的表达。检测结果表明：在４０例口腔鳞癌中Ｐ２１蛋白阳性表达率为９２．５０％；２１例口腔白斑病变中其阳性率为１９．０５％。Ｐ２１阳性表达位于分化差的癌细胞膜及胞浆内，且阳性表达与临床病理分级呈正相关，提示Ｐ２１蛋白检测可以作为癌及癌前病损预后观察的客观指标。

熊果酸对舌鳞癌Tca8113细胞增殖及凋亡的作用研究

目的探讨熊果酸对舌鳞癌Tca8113细胞增殖、凋亡的作用及可能机制,为临床治疗提供理论依据。方法经不同浓度熊果酸(10、20、40μmol/L)处理体外培养的舌鳞癌Tca8113细胞24 h后,采用MTT法检测细胞增殖活性,荧光染色法观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位的变化,Real-time PCR法检测Bcl-2和Bax m RNA的表达,酶联免疫吸附试验测定caspase-3蛋白酶活性。结果与对照组比较,不同浓度的熊果酸均可明显抑制Tca8113细胞增殖,诱导细胞DNA损伤,促进细胞凋亡,降低Bcl-2/Bax的表达比例,增高细胞线粒体膜电位(△Ψm),增强caspase-3蛋白酶活性,且具有一定的剂量依赖性。结论熊果酸可以抑制Tca8113细胞增殖并促进细胞凋亡,其机制可能与调控细胞线粒体凋亡途径有关。

c-Cbl在喉癌中的表达及临床意义

目的探讨c-Cbl在喉癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组化(SP)法检测40例喉癌组织、15例癌旁组织和8例喉正常黏膜组织中c-Cbl蛋白的表达情况。应用流式细胞术定量检测40例喉癌组织、13例癌旁组织和5例喉正常黏膜组织中c-Cbl的含量。结果免疫组化示喉癌组织、癌旁组织及喉正常黏膜组织中c-Cbl的表达强度呈下降趋势,3组相比有显著性差异。应用流式细胞术检测c-Cbl蛋白在喉癌组织、癌旁组织及喉正常黏膜组织中的表达量分别为1.8424±0.1814、1.6350±0.3889、1.1026±0.0181,3组相比有显著性差异。在喉癌组织中c-Cbl蛋白表达与其病理分级有关。结论 c-Cbl蛋白与喉癌的发生发展有关。

喉鳞癌组织中SOX9表达与S期组分的研究

目的:研究SOX9在喉鳞癌组织中的表达以及S期组分(S phase fraction,SPF)的变化,探讨与肿瘤发生发展的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测60例喉鳞癌(喉癌组)与32例正常喉黏膜组织(对照组)中SOX9蛋白表达变化,应用图像分析技术检测SOX9阳性表达产物的面密度及积分光密度值变化,同时采用流式细胞术检测喉癌组与对照组组织中SPF变化。结果:喉癌组面密度及积分光密度值较对照组升高,两组比较差异有显著性(P<0.01)。喉鳞癌组织中SOX9蛋白表达升高,喉鳞癌组织中SOX9蛋白表达与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。喉癌组SPF高于对照组,二者差异有统计学意义(P<0.01)。结论 :SOX9蛋白异常表达及SPF变化可能在喉鳞癌发生发展中发挥重要作用。

膀胱癌癌基因蛋白P^(21)和抑癌基因蛋白P^(53)的表达及其意义

采用流式细胞术和细胞免疫荧光染色技术,对42例膀胱移行细胞癌癌基因蛋白P^(21)和抑癌基因蛋白P^(53)表达进行了定量分析。结果显示,P^(21)及P^(53)蛋白表达阳性率分别是69.0％和57.1％,联合表达阳性者45.12％。P^(21)和P^(53)蛋白表达与肿瘤分级、分期、DNA倍体类型及预后密切相关。提示测定P^(21)和P^(53)在膀胱肿瘤的表达,对预后能作出客观判断。

下咽癌rasP^(21)蛋白的表达及临床意义

本文采用流式细胞术和单克隆技术对下咽鳞状细胞癌（下咽癌）细胞ｒａｓＰ２１蛋白表达进行定量检测。结果显示：下咽癌细胞的ｒａｓＰ２１蛋白表达量明显高于正常下咽粘膜细胞，下咽癌ｒａｓＰ２１蛋白阳性率为７５．９３％，ｒａｓＰ２１蛋白表达与下咽癌的临床分期无关，可能与下咽部细胞癌变的起动有关，对下咽癌的早期诊断有一定意义，ｒａｓＰ２１蛋白表达与下咽癌预后无明显相关性。

microRNA-21对人舌鳞癌细胞的增殖和凋亡的影响

目的:探讨micro RNA-21(mi R-21)对人舌鳞癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:选取8例舌鳞癌组织和4例癌旁组织为研究材料,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)法对舌鳞癌及癌旁组织中的mi R-21相对表达量进行检测,利用人工合成的mi R-21mimic对人舌鳞癌Tca8113细胞进行瞬时转染,采用q RT-PCR法对Tca8113细胞中mi R-21相对表达量进行检测,采用四唑盐比色法(MTT)法对Tca8113细胞增殖情况进行检测,采用流式细胞术对Tca8113细胞周期与凋亡情况进行检测。结果:舌鳞癌组织中mi R-21的相对表达量(3.502±0.674),高于癌旁组织(0.998±0.192),差异有统计学意义(P<0.05)。mi R-21mimic导致了Tca8113细胞中的mi R-21相对表达量上调(6.864±1.324),明显高于对照scramble组[(0.997±0.187),P<0.05],对Tca8113细胞的增殖发挥了促进作用(P<0.05)。经mi R-21mimic转染之后,Tca8113细胞进入S期的细胞出现了明显的增加[(27.4±5.1)%vs(48.6±8.7)%,P<0.05],处于G1期的细胞出现了显著的减少[(56.3±9.6)%vs(36.2±7.2)%,P<0.05],细胞凋亡数量出现了显著减少[(9.4±2.3)%vs(18.6±3.9)%,P<0.05]。结论:mi R-21在舌鳞癌组织中高表达,过表达mi R-21有效促进了Tca8113细胞的增殖,抑制细胞的凋亡,mi R-21在舌鳞癌诊断和治疗可能具有一定的新型靶点价值。