超级微波消解-石墨炉原子吸收光谱法测定虾蛄中镉含量

为了比较超级微波和传统微波消解方法,建立一种能快速测定虾蛄镉的方法,分别采用超级微波和传统微波消解大虾标准物质,对比消解效果,优选消解方法,采用石墨炉原子吸收光谱法测定,优化基体改进剂、灰化温度等工作参数,确定最佳的分析方法,同时加标回收验证方法的准确性与可靠性。结果表明,两种消解方法下测得结果均在参考值范围内,在选定测定条件下,镉在0~2.0μg/L范围内,所得回归方程的线性关系良好(r≥0.999 4),检出限为0.04μg/L,定量限为0.12μg/L,加标回收率为88.5%~105%,精密度为2.9%~4.9%。超级微波消解优于传统微波消解,其耗酸量低、高效便捷、测得数据准确稳定,便于在基层推广,适用于批量虾蛄样品的镉污染监测工作。

虾蛄繁殖生物学与繁育技术研究

随着海洋资源的减少,原未被重视的虾蛄逐渐成为佳肴,为了可持续利用虾蛄资源,国内外学者进行了大量的研究工作。本文根据国内外学者及作者自己的研究成果,对虾蛄生殖系统的结构特点、生殖腺发育、胚后发育、繁殖习性、繁殖生态、人工繁殖及养殖等作一综述。

超高压对虾蛄脱壳及加工性能的影响

以压力、保压时间为影响因素,以得肉率、脱壳时间和持水性为指标,研究超高压处理虾蛄脱壳的最佳条件,评价不同脱壳条件下所得虾仁的加工性能（汁液流失率、质构和色泽变化）。结果显示：在所选的压力（100~500 MPa）和时间（1~20 min）范围内,当压力为350~400 MPa,保压时间为8 min时,与传统的手工直接去壳相比,脱壳时间缩短55%、得肉率提高26.28%。在该条件下处理后虾仁的持水性为31.82%、汁液流失率为-6.56%、整体色差变化值为12.46、硬度为214.396 g、弹性为0.891、咀嚼性为101.020、黏聚力为0.526。因此,超高压处理虾蛄,能够提高脱壳效率,改善虾肉的加工性能。

虾蛄消化系统的组织学和组织化学研究

虾蛄（ Ｓｑｕｉｌｌａ ｏｒａｔｏｒｉａ） 的消化系统由消化道和中肠腺组成，前者包括口、食道、贲门胃、幽门胃、中肠和中肠盲囊、后肠以及肛门。中肠腺甚为发达，为复管状腺，腺管上皮由分泌细胞、储存细胞、吸收细胞和胚细胞４ 种类型细胞组成。分泌细胞的顶端有一明显的分泌囊泡，呈现蛋白酶、非特异性酯酶和脂酶活性，可通过分泌囊泡外排或顶端细胞质崩解而向腺腔分泌水解酶类，后者进入消化道对食物进行细胞外消化。吸收细胞细胞质内含丰富的ＲＮＡ 和蛋白质，表明该细胞具有旺盛的蛋白质合成功能。储存细胞含有糖原和脂类，其基部质膜显示碱性磷酶酶活性，表明储存细胞可将细胞内的营养物质转运至腺管间的血窦。胚细胞体积较小，胞质嗜碱性，但细胞核大而圆。消化道粘膜上皮主要为柱状细胞，贲门胃和幽门胃上皮细胞表面有几丁质层覆盖。贲门胃肌层发达，主要起机械研磨食物的作用。幽门胃的几丁质层特化形成间壶腹脊和壶腹上脊，两者相互配合而起过滤作用。中肠粘膜上皮细胞表面无几丁质层，上皮细胞呈现蛋白酶、非特异性酯酶和脂酶活性，表明中肠也能分泌消化水解酶。中肠上皮细胞具有微绒毛，亦表明中肠可能参与食物的吸收。后肠肠腔虽宽大，但其上皮细胞仅呈现较弱的非特异性酯酶活性。

浙江沿海虾蛄生物学及其开发利用研究报告

本文根据浙江省教委、省基金、舟山市科委关于浙江沿海虾蛄生物学及其开发利用研究的要求，对四年多来的研究进行总结，主要包括资源与分布、生物学习性、暂养及运输技术、营养成份分析。

从虾蛄壳制备甲壳素和壳聚糖的研究

以虾壳和虾蛄壳为原料分别采用EDTA法和盐酸法制备了甲壳素和壳聚糖。采用红外光谱和化学分析方法分析了甲壳素和壳聚糖试样的结构和主要性能指标,其结果为:虾蛄壳是一种优良的制备甲壳素、壳聚糖的原料,尤其是可制得相对分子质量较高的甲壳素和壳聚糖。

MTT法测定口虾蛄提取物的体外抗肿瘤活性

目的分离筛选口虾蛄中抗鼻咽癌CNE-2Z细胞活性部位。方法采用系统溶剂法对口虾蛄95%乙醇提取物进行分离,运用MTT比色法对分离得到的部位进行体外抗肿瘤活性的测定。结果乙酸乙酯提取物对鼻咽癌CNE-2Z细胞表现出较强的抑制作用,在测定浓度范围内呈现出良好剂量依赖性抑制作用,而正丁醇和石油醚提取部位在同一测定浓度范围内抑制作用不如乙酸乙酯提取物,其中石油醚提取物抑制作用最弱。结论乙酸乙酯提取部位是口虾蛄抗肿瘤主要的活性部位。

南海北部陆架区虾蛄类的种类组成和数量分布

根据2006～2007年南海北部陆架区4个季节的调查资料,分析该海区虾蛄类的种类组成和数量分布。结果表明,虾蛄类有15种,隶属于4科7属。虾蛄类可以分为3种生态类群:热带生态类群、热带亚热带生态类群和广温性生态类群,并以热带亚热带类群为主。依据Pinkas等(1971)提出的相对重要性指数IRI判定,优势种为口虾蛄Oratosquilla oratoria、黑斑口虾蛄Oratosquilla kempi、猛虾姑Harpiosquilla harpax、长叉口虾蛄Oratosquilla nepa、棘突猛虾姑Harpiosquilla raphidea,它们属于虾蛄科和猛虾蛄科,其渔获率(1.86kg/h)占虾蛄类渔获率(1.90kg/h)的98.17%。经济虾蛄类为口虾蛄、黑斑口虾蛄、猛虾姑、长叉口虾蛄和装饰口虾蛄Oratosquilla ornata,它们属于虾蛄科和猛虾蛄科,其渔获率(1.84kg/h)占虾蛄类渔获率(1.90kg/h)的96.85%。虾蛄类平均生物量为42.18kg/km2,经济虾蛄类平均生物量为40.85kg/km2。虾蛄类的区域生物量分布:B断面最高(76.27kg/km2),A断面最低(25.13kg/km2);虾蛄类生物量的季节变化:秋季最高(49.24kg/km2),冬季最低(32.29kg/km2)。虾蛄类的生物量分布与水深成负相关,密集分布于10～40m深的水域,尤以10m水深附近最多,达173.40kg/km2,10m水深附近分布种类全属于经济种类。

虾蛄在低温贮藏过程中的细菌菌相分析

分离纯化不同贮藏温度下虾蛄腐败过程中的优势菌株,并利用ATB ExpressionTM仪进行鉴定,以探讨虾蛄贮藏温度、贮藏时间与腐败细菌菌相变化之间的关系,进一步揭示虾蛄的腐败机理。结果表明:虾蛄在三种贮藏温度下,随着贮藏时间的延长,细菌总数不断增加,增长速度依次为:冷藏>冰温>冷冻,贮藏期间均有7种典型菌株出现,有一株未鉴定出,其余6株分别是少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)、嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)、泛菌属(Pantoea)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)和腐败希瓦菌群(Shewanella putrefaciens)。其中贮藏前期以Sphingomonas paucimobilis和Pantoea为主,冷藏后期的优势腐败菌为Shewanella putrefaciens和Aeromonas hydrophila,冰温和冻藏条件下的优势腐败菌均为Stenotrophomonas maltophilia和Aeromonas hydrophila。

鸡肉与虾蛄中肌原纤维蛋白磷酸化特性的比较

以鸡肉和虾蛄中的肌原纤维蛋白为原料,分别用焦磷酸钠(SPP)和三聚磷酸钠(STP)将其进行磷酸化,并制备成凝胶,测定凝胶质构特性和保水性,对比研究了二者经不同处理后肌原纤维蛋白之间的特性差异。结果表明:随着蛋白质浓度增加,二者凝胶强度和凝胶保水性均增加,其中,经SPP处理后的鸡肉与虾蛄中肌原纤维蛋白的凝胶强度无显著性差异(P>0.05),未经磷酸化处理及经STP处理后二者之间凝胶强度差异均显著(P<0.05)。研究表明,磷酸化可改变蛋白凝胶特性和保水性,鸡肉与虾蛄中的肌原纤维蛋白凝胶特性是有差异的。

ESO联合DDP对肝癌HepG2细胞增殖的抑制效应及其机制

目的:探讨海洋生物口虾咕乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extract of Squilla Oratoria,ESO)联合顺铂(cisplatin,DDP)对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制效应及其机制。方法:MTT法测定不同浓度ESO和DDP单独或联合处理对HepG2细胞增殖的抑制作用,并计算联合效应指数(CI);流式细胞术检测ESO对细胞周期和细胞凋亡的影响,Western blotting检测HepG2细胞Survivin、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平。建立裸鼠皮下HepG2细胞移植瘤模型,并观察ESO和DDP单用或联用对移植瘤的抑制效应。结果:ESO能有效地抑制HepG2细胞的生长(呈浓度依赖性),促进细胞凋亡,将细胞周期阻滞在S期;与DDP联合用药时,对HepG2细胞增殖的抑制呈现出协同效应,凋亡率明显增加(P<0.05)。ESO可下调Survivin和Bcl-2蛋白表达、上调Bax蛋白表达,且呈浓度依赖性(P<0.05)。裸鼠成瘤抑制实验发现,随着ESO浓度的增大,肿瘤增长的速度减慢,以联合用药组抑制作用更为明显。结论:ESO可通过细胞周期阻滞及促细胞凋亡作用抑制HepG2细胞增殖;与顺铂联合用药,能对HepG2细胞增殖产生协同抑制效应。

超高压协同磷酸盐对虾蛄中肌原纤维蛋白凝胶特性的影响

为了提高虾蛄中肌原纤维蛋白凝胶的品质,优化加工工艺,把磷酸盐(STP)添加到虾蛄肌原纤维蛋白中,然后经超高压处理,加热形成凝胶,测定其凝胶强度。结果表明,STP对肌原纤维蛋白凝胶的凝胶强度影响极显著(p<0.01)。通过Box-Behnken实验所得的结果和二次多项回归方程确立了最优的工艺条件,即:压力为293 MPa,保压时间为17 min,STP添加量为6.0%,得到凝胶强度为(214.340±4.93)g。STP与保压时间的交互作用对蛋白凝胶强度影响显著(p<0.05),其他因素交互作用并不显著(p>0.05)。研究表明,超高压协同磷酸盐能够促进肌原纤维蛋白形成良好的凝胶,在虾蛄肉制品加工中具有广泛的应用前景。

虾蛄冷藏条件的研究

鲜虾蛄包装条件分别为:充氮包装、抽真空包装和普通包装。在-25℃下冷冻8h,然后分别在-5、-10、-15、-20、-25℃等温度条件下贮存,并在不同的贮存时间对虾蛄的感官指标评价、K值和TVB-N(挥发性盐基氮)值进行测定。结果表明虾蛄的K值与TVB-N值有较好的相关性。当虾蛄的K值在20%以下,TVB-N值在30mg/100g以下时,其感官指标在C级以上。在-20℃和-25℃条件下贮存的虾蛄不论是感官指标还是化学指标均无明显的区别。真空和充氮包装使K值与TVB-N值增加的速度放缓,可以延长保鲜时间。

活虾蛄离水干露试验

本文介绍了秋冬季舟山沿海成体虾蛄活体离水干露研究试验，主要结论是：在几种不同容器对比试验中，以能保持恒温、适当的湿度、又能透气的容器为最好，冬季以加盖的聚乙烯泡沫箱为宜；夏季温度高时适当地降温（９－１１℃）能延长干露时间；干露时不能长时间风吹雨淋日晒，干露运输中每隔２小时淋一次海水，大部分活虾蛄可干露１２－１４小时。

口虾蛄抗鼻咽癌细胞生长活性成分的初步分析

目的:提取并初步分析口虾蛄抗鼻咽癌细胞生长活性成分。方法:系统溶剂法分离口虾蛄乙醇提取物,MTT法测定其抗人鼻咽癌CNE-2Z细胞生长作用,并以薄层色谱法初步分析性质。结果:MTT结果显示,乙酸乙酯提取物(B)和正丁醇提取物(C)对人鼻咽癌CNE-2Z细胞生长均有较明显的抑制作用,而石油醚提取物(A)的作用不明显;薄层显色结果显示,A及B均可能含有蛋白质类、甾体和萜类等物质;C可能含有蛋白质类、生物碱类以及糖类等物质。结论:B有较强抗鼻咽癌细胞生长活性,可能因含有甾体、萜类等物质;C有较强抗鼻咽癌细胞生长活性,可能因其含有生物碱类物质。

口虾蛄提取物对人鼻咽癌CNE-2Z细胞的抑制作用

目的研究口虾蛄乙酸乙酯提取物对人鼻咽癌CNE-2Z细胞的抑制作用及可能机制。方法于细胞培养镜下观察细胞形态学改变和计数法测定生长曲线;采用3H-脱氧胸苷掺入法测定对DNA合成的影响,采用MTT比色法检测给药后鼻咽癌细胞的增殖抑制情况。结果口虾蛄乙酸乙酯提取物作用后,癌细胞生长延缓并萎缩,胞质粗糙,有大量颗粒状物堆积,而且药物浓度越大,形态学改变越明显;生长曲线测定、3H-脱氧胸苷掺入法及MTT比色法实验结果显示,口虾蛄乙酸乙酯提取物对CNE-2Z细胞的增殖和生长有显著抑制作用,并呈明显的时间-剂量依赖关系,当提取物浓度为400μg/mL以上时,其对CNE-2Z细胞的掺入抑制率和增殖抑制率均高于阳性对照药5-Fu组。结论口虾蛄乙酸乙酯提取物对鼻咽癌CNE-2Z细胞具有细胞毒作用,其机制可能通过干扰细胞代谢,改变细胞外衣的性质抑制CNE-2Z细胞增殖。

口虾蛄提取物对鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨口虾蛄乙酸乙酯提取物对鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖及凋亡相关蛋白表达的影响。方法用MTT比色法检测药物对细胞增殖的作用,流式细胞术和PI/Hoechst33258荧光双染法检测细胞凋亡,Western Blot法检测用药前后凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的改变。结果口虾蛄乙酸乙酯提取物对CNE-2Z细胞的增殖有显著抑制作用,且可诱导细胞凋亡;随着口虾蛄乙酸乙酯提取物浓度升高,Bax蛋白的表达逐渐增多,而Bcl-2蛋白表达改变不明显。结论口虾蛄乙酸乙酯提取物对CNE-2Z细胞有显著抗增殖及诱导凋亡作用,其诱导肿瘤细胞凋亡的可能机制与凋亡相关基因Bcl-2/Bax蛋白比值下降有关,但诱导凋亡不是主要机制。

口虾蛄提取物对人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP增殖、耐药的影响及机制

目的观察口虾蛄乙酸乙酯提取物(ESO)对人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP增殖、耐药的影响,并探讨其机制。方法选取人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP,用不同浓度(0、200、400、800μg/m L)的ESO干预细胞,24 h后,采用MTT法测算细胞增殖抑制率,流式细胞技术测算细胞周期百分率。采用流式细胞技术观察400μg/m L ESO干预0、30、60 min细胞内荧光染料罗丹明123(Rh123)蓄积和外排情况。采用Western blotting法检测不同浓度ESO干预24 h后细胞多药耐药蛋白1(MDR1),并检测400μg/m L ESO干预2、4、8 h后细胞ERK1/2、p-ERK1/2蛋白。结果 200、400、800μg/m L的ESO干预细胞增殖抑制率分别为19.940%±0.041%、37.360%±0.024%、42.510%±0.008%,两两相比P均<0.01。0、200、400、800μg/m L ESO干预细胞G2/M期分别为24.06%±2.22%、31.10%±0.79%、35.64%±1.15%、43.19%±0.43%,两两相比P均<0.01。Rh123在ESO干预细胞内积累增多、外排减少,且60 min时较30 min时明显(P均<0.01)。0、200、400、800μg/m L ESO干预细胞MDR1蛋白相对表达量分别为1.22±0.23、0.83±0.16、0.37±0.09、0.31±0.04,两两相比P均<0.01。ESO干预不同时间A549/DDP细胞ERK1/2蛋白表达无变化,p-ERK1/2蛋白表达上调(P均<0.01)。结论 ESO通过使A549/DDP细胞发生周期阻滞,从而抑制其增殖;通过调节MAPK-ERK1/2信号通路,使其多药耐药发生逆转。