Sr18菌代谢产物对松材线虫蛋白质和酶活力的影响

基于Sr18菌(Syncephalastrum racemosum)代谢产物在8 h内具有显著的杀线虫活性,测定了其在8h内对松树线虫体内总蛋白质含量、SOD、CAT、TCh E和ATP酶活性的影响。结果表明,4 h时处理组总蛋白质的含量陡增至0.544 2 mg/m L,显著高于对照组0.429 1 mg/m L,Sr18菌代谢产物干扰了线虫体内蛋白质的代谢;在8 h内,处理组的SOD、CAT、TCh E和ATP酶这4种酶活性均低于对照组,Sr18菌代谢产物对线虫体内这4种酶都有不同程度的影响。这一结果为利用Sr18菌代谢产物研究和开发微生物源杀线剂奠定了理论基础。

Sr18菌代谢产物对线虫应激能力的影响

基于Sr18菌代谢产物在24 h内具有显著的杀线虫活性,为进一步探究其杀线虫机理和作用规律,测定其在16 h内对线虫应激能力的影响。结果表明,在4 h时处理组对外界条件刺激的敏感性明显提高,运动频率均高于对照组,表明4 h为Sr18菌代谢产物对线虫产生作用的转折点;8 h后处理组活跃程度明显减弱,对刺激的反应较对照组缓慢,随着刺激时间增加,处理组的活跃性有所增加但不显著,表明Sr18菌代谢产物已产生明显的药效作用,致使线虫对刺激反应迟钝。Sr18菌代谢产物对线虫应激能力的影响呈现"平稳-上升-下降"的规律,进一步探究Sr18菌代谢产物的作用机理为实践中的合理用药提供理论依据。

Sr18菌杀线虫代谢产物30L罐发酵放大条件的优化

在原有摇瓶及5L罐发酵的基础上，对线虫生防菌株Sr18杀线虫代谢产物30L罐发酵放大的工艺条件进行了优化，确定了30L罐发酵的工艺参数为：一级种子静置培养24h，接种体积分数为4％，通气量1：0．35～1．0，溶氧量20％～30％，发酵周期48h左右．在优化的发酵工艺条件下，经30L罐发酵放大培养所得发酵滤液1／2浓度的杀线率可达95％．

杀线虫真菌Sr18发酵液对松材线虫超微结构的影响

Sr18真菌是一株自主分离获得的具有广谱杀线虫活性的生防菌。为探明该菌的杀线虫作用机理,以松材线虫为靶标,借助场发射高分辨扫描电镜及透射电镜,对1/2浓度的Sr18发酵液小分子活性组分处理后的线虫及未处理的正常线虫进行了超微观察。高分辨率扫描电镜观察结果表明,小分子物质对松材线虫头部、体壁和尾部均有损伤,并观察到内容物外溢的现象。透射电镜观察结果显示,线虫表皮和体腔分离,细胞核受损严重,形状不规则,粗面内质网核糖体聚集,线粒体空泡样变,肌纤维受损。这些现象从形态结构角度证实了该发酵液小分子活性成分对线虫的损伤是整体性的毒杀作用,排除了表面触杀的机制。这为进一步揭示Sr18的杀线虫机理以及线虫生防制剂的开发提供了重要理论依据。

菌株Sr18杀线虫代谢物的规模发酵及杀线效果研究

实验以菌株Sr18(Syncephalastrum racemosum)为发酵对象,以杀线虫活性为考察指标,在5 L、30 L发酵研究基础上,进行了200 L和5 t发酵罐水平上的规模发酵实验。结果显示,200 L罐发酵工艺参数为接种量4%,发酵温度26℃,罐压0.05~0.12 MPa,空气流量4~9 m^3/h,转速120~198 r/min,发酵周期48 h;5 t罐发酵参数为接种量4%,发酵温度26℃,罐压0.03 MPa,空气流量65~80 m^3/h,转速80~90 r/min,发酵周期40 h。在此发酵条件下,200 L和5 t罐的1倍稀释发酵液的杀线虫活性均可达到100%,表明实验所设定的发酵参数适用、可控。