微小RNA-141-3p在脑出血患者血清中的表达及其作用机制

目的分析微小RNA-141-3p(miR-141-3p)在脑出血(ICH)患者中的表达水平,并探讨miR-141-3p对大鼠脑出血损伤的作用及其机制。方法以40例脑出血患者和40例体检健康对照者为研究对象,采用Real-time PCR方法检测血清中miR-141-3p的含量。采用生物信息学预测miR-141-3p的靶标基因,双荧光素酶报告分析验证miR-141-3p对核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)的调控作用。在大鼠脑出血模型侧脑室注射miR-141-3p激动剂(agonist)或者激动剂对照(agonist NC),治疗7 d后进行神经功能评分。麻醉处死大鼠后取出脑组织,HE染色观察脑组织病理改变。干湿重法测定脑组织含水量,并采用Real-time PCR测定miR-141-3p和NLRP3的表达,通过Western blotting方法测定白细胞介素(IL)-1β、IL-6和IL-18的表达。结果与健康对照组(0.520±0.028)相比,脑出血患者血清中miR-141-3p的表达水平(0.068±0.038)显著下调(t=15.93,P<0.001),且与血肿周围水肿严重程度成负相关(r=-0.8948,-0.9434~-0.8087,P<0.001)。miR-141-3p靶向调控NLRP3基因表达。miR-141-3p的表达水平在miR-141-3p agonist组中明显高于agonist NC组(P<0.001),炎症小体NLRP3和炎症因子IL-1β、IL-6和IL-18表达水平明显低于agonist NC组(P<0.001)。与agonist NC组相比,agonist组miR-141-3p在ICH术后7 d脑水肿减轻,神经功能评分明显降低(P<0.001)。HE染色结果表明,ICH大鼠注射miR-141-3p激动剂后血肿周围水肿明显缩小。结论miR-141-3p通过靶向NLRP3降低炎症反应,减轻对脑出血后血肿周围脑组织的损伤。

凋亡因子FADD蛋白与Caspase-7蛋白在胃腺癌中的表达及意义

目的:探讨胃腺癌中Fas相关死亡结构域蛋白(FADD)与半胱氨酸蛋白酶-7蛋白(Caspase-7)的表达及意义。方法:采用免疫组化S P法检测60例胃腺癌组织及50例正常胃黏膜组织F A D D蛋白与C a s p a s e-7蛋白的表达情况,分析二者与胃腺癌临床病理特征的关系,以及胃腺癌组织中二者表达的相关性。结果:FADD蛋白和Caspase-7蛋白阳性产物均为棕黄色颗粒状,主要位于细胞质。胃腺癌组织FADD蛋白和Caspase-7蛋白的阳性表达率均明显低于正常胃黏膜组织(38.3%vs 60.0%,46.7%vs 68.0%,P<0.05)。FADD蛋白、Caspase-7蛋白表达与胃腺癌患者性别、年龄无关(P>0.05),与胃腺癌分化程度、T N M分期、淋巴结转移、浸润深度有关。Spearman相关分析结果显示,胃腺癌FADD蛋白和Caspase-7蛋白表达呈正相关关系(r=0.362,P<0.05)。结论:FADD蛋白与Caspase-7蛋白低表达可能在胃腺癌的发生发展过程中具有协同作用。

染色域Y样蛋白介导的组蛋白巴豆酰化与抑郁小鼠模型中NGF和炎症因子水平及神经功能紊乱的关系

目的:探究染色域Y样蛋白介导的组蛋白巴豆酰化与抑郁小鼠模型中神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)和炎症因子水平及神经功能紊乱的关系。方法:32只成年雄性C57BL/6小鼠分为4组:对照组、模型组、CDYL过表达组、CDYL敲低组,各8只。通过慢性束缚应激诱导抑郁模型,通过旷场试验记录中心时间和中心距离,通过强迫游泳测试记录不动时间。通过RT-qPCR和蛋白质免疫印迹检测CDYL m RNA和蛋白质表达水平。通过ChIP-seq检测组蛋白赖氨酸巴豆酰化。通过ELISA检测TNF-α,IL-1β和IL-6表达水平。通过RT-qPCR检测检测海马组织5-HT和IDO m RNA表达水平。通过蛋免疫组织化学染色检测检测海马组织NGF、BDNF和突触素(Synaptophysin,SYP)表达水平。通过BrdU免疫荧光染色检测神经系统的发育以及识别大脑中的神经发生。结果:模型组中心时间和中心距离较对照组降低,不动时间较对照组升高(P<0.05)。CDYL过表达组中心时间和中心距离较模型组降低,不动时间较模型组升高(P<0.05)。CDYL敲低组中心时间和中心距离较模型组升高,不动时间较模型组降低(P<0.05)。模型组CDYL m RNA和蛋白质表达水平较对照组升高(P<0.05)。CDYL过表达组CDYL m RNA和蛋白质表达水平较模型组升高(P<0.05)。CDYL敲低组TCDYL m RNA和蛋白质表达水平较模型组降低(P<0.05)。模型组组蛋白巴豆酰化水平较对照组降低(P<0.05)。CDYL过表达组组蛋白巴豆酰化水平较模型组降低(P<0.05)。CDYL敲低组组蛋白巴豆酰化较模型组升高(P<0.05)。模型组TNF-α,IL-1β和IL-6表达水平较对照组升高(P<0.05)。CDYL过表达组TNF-α,IL-1β和IL-6表达水平较模型组升高(P<0.05)。CDYL敲低组TNF-α,IL-1β和IL-6表达水平较模型组降低(P<0.05)。模型组5-HT m RNA表达水平较对照组降低,IDO m RNA表达水平较对照组升高(P<0.05)。CDYL过表达组5-HT m RNA表达水平较模型组降低,IDO m RNA表达水平较模型组升高(P<0.05)。CDYL敲低组5-HT m RNA表达水平较模型组升高,IDO m RNA表达水平较模型组降低(P<0.05)。模型组NGF,BDNF和SYP表达水平较对照组降低(P<0.05)。CDYL过表达组NGF、BDNF和SYP表达水平较模型组降低。CDYL敲低组NGF,BDNF和SYP表达水平较模型组升高(P<0.05)。结论:慢性束缚应激诱导抑郁模型组蛋白巴豆酰化降低、炎症因子水平升高、NGF、BDNF和SYP水平降低以及神经功能紊乱,CDYL过表达组较慢性束缚应模型激进一步加剧炎症反应和神经功能紊乱,而CDYL敲低对慢性束缚应激引起的新生细胞和未成熟神经元损伤具有保护作用。