环磷酸腺苷反应元件结合蛋白靶基因Staufen在小鼠海马的原位杂交定位

目的:依据环磷酸腺苷反应元件结合蛋白靶基因STAUFEN蛋白序列寻找与人类亲缘关系较近的动物模型,并在动物模型的脑组织上进行Staufen1mRNA的定性和定位。方法:查找相关动物的STAUFEN蛋白序列,构建生物进化树,寻找合适的动物模型。采用反转录PCR扩增Staufen1片断,接入载体制作亚克隆,转化细菌后筛选、扩增、抽提,然后测序鉴定。体外转录Staufen1基因mRNA探针,将其和脑组织冰冻切片原位杂交、显色。结果:生物进化树提示,小鼠与人的Staufen1的蛋白序列相似性达99.7%;原位杂交结果显示,小鼠海马CA1、CA2、CA3和DG区存在Staufen1 mRNA的表达。结论:小鼠是研究Staufen1基因在海马转录的合适动物模型。

中老年CD-1小鼠海马Staufen蛋白含量改变及其与认知功能减退的相关性研究

探讨中老年CD-1小鼠海马Staufen(Stau)蛋白含量的改变及其与空间学习记忆功能减退之间的相关性。选取3月龄(青年)和15月龄(中老年)CD-1小鼠各10只(雌雄各半)。采用Morris水迷宫评估空间学习记忆能力,用免疫组织化学技术检测海马Stau蛋白的相对含量。结果发现,与3月龄小鼠相比,15月龄鼠在Morris水迷宫中学习期游泳路程显著延长(P<0.01),记忆期靶象限游泳路程百分比显著降低(P<0.05),且海马CA1区和CA3区Stau蛋白含量显著升高(P<0.05)。相关性分析显示,15月龄小鼠CA1区、CA3区Stau蛋白含量与学习期游泳路程呈正相关(P<0.05),CA3区Stau蛋白含量与记忆期靶象限路程百分比呈负相关(P<0.05)。以上结果提示中老年CD-1小鼠海马Stau蛋白含量呈亚区特异性增加,且可能与海马相关性空间学习记忆的损害有关。