奶牛日粮添加豆油抑制乳腺硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)基因mRNA表达水平

硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)是奶牛乳腺合成共轭亚油酸(CLA)的关键酶。奶牛日粮饲喂35 d豆油后,与不添加豆油的对照组相比,抑制了奶牛乳腺组织SCD基因mRNA的表达,研究结果表明,日粮亚油酸对乳腺SCD酶基因表达具有抑制作用。

鲤耐低温候选基因CcSCD全长cDNA的克隆及功能预测

硬酯酰辅酶A脱氢酶(Stearoyl-CoA Desaturase,SCD)是参与脂肪酸脱氢反应的限速酶和关键酶,此酶编码基因SCD对增加膜磷脂的不饱和脂肪酸成分,提高细胞膜在低温下的流动性发挥重要作用,可能是抗寒过程中的关键基因成员。本研究采用cDNA末端快速扩增技术(Rapid Amplifications of cDNAEnds,RACE)克隆了鲤(Cyprinus carpio)脑组织CcSCD基因的全长cDNA序列,采用实时荧光定量PCR技术检测该基因在低温(6℃)和常温(23℃)条件下的转录表达差异,对其蛋白编码序列的结构和功能进行了预测分析。结果显示,CcSCD基因cDNA全长2618bp,包含一个由324个氨基酸残基组成的长度为975bp的阅读框(ORF);蛋白分子进化树显示鲤的SCD和草鱼(Ctenopharyngodon idella)的SCD蛋白同源性最高,相似性达88%;实时荧光定量结果表明,低温刺激下(6℃),CcSCD基因表达水平是常温条件下(23℃)的13.9倍,差异非常显著(P<0.01)。本研究旨在为今后构建表达载体,通过遗传操作等研究手段鉴定其抗寒功能奠定基础。

疏肝健脾方药对NAFLD大鼠肝细胞SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白表达的影响,探讨其防治NAFLD的可能机制。方法:雄性SD大鼠75只随机分为正常对照组、模型组、疏肝组(柴胡疏肝散9.6 g/kg)、健脾组(参苓白术散30 g/kg)、合方组(柴胡疏肝散和参苓白术散合方39.6 g/kg),每组15只。采用高脂饲料喂养复制大鼠NAFLD模型。8 w后每组随机选取9只检测肝功及肝组织TC、TG,观察肝组织病理形态改变;同时每组取6只采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶法提取肝细胞,Q-PCR及Western Blot法检测肝细胞SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白表达。结果:与模型组比较,各药物干预组肝细胞SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白表达水平均有不同程度的下调(P<0.05或P<0.01),同时肝脂及病理学改变也较模型组有不同程度改善,以疏肝组作用最为显著(P<0.05)。各药物干预组组间比较,疏肝组大鼠肝细胞SREBP-1c、SCD-1 mRNA表达水平显著低于健脾组(P<0.05),而蛋白表达比较无统计学意义。结论:疏肝健脾方药可能通过抑制肝细胞SREBP-1c/SCD-1信号通路的激活,进而下调肝脏TC、TG合成,发挥防治NAFLD的作用。SREBP-1c、SCD-1 mRNA及蛋白可能是疏肝健脾方药抗NAFLD的有效作用靶点。

结直肠癌组织中SCD-1的表达及临床意义

目的探讨结直肠癌组织中酰基辅酶A去饱和酶1(SCD-1)的表达及其临床意义。方法收集2014年12月至2017年12月手术切除的77对结直肠癌组织和癌旁组织,采用免疫组化SP法检测上述组织中SCD-1的表达情况,分析其表达差异及与临床病理特征的关系。结果 SCD-1主要表达于细胞浆和胞膜。在结直肠癌组织中SCD-1的阳性表达率为66.2%(51/77),高于癌旁正常组织的13.0%(10/77),差异有统计学意义(P<0.05)。SCD-1表达与性别、年龄、分化程度和部位均无关(P>0.05),而与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05)。其中肿瘤较大(≥5 cm)、浸润较深(T_3+T_4)、淋巴结转移和分期较晚(Ⅲ+Ⅳ)的组织中SCD-1阳性表达率分别为80.6%(29/36)、72.9%(43/59)、78.6%(33/42)和78.0%(32/41),均高于肿瘤较小(<5 cm)、浸润较浅(T_1+T_2)、无淋巴结转移和分期较早(Ⅰ+Ⅱ)组织的53.7%(22/41)、44.4%(8/18)、51.4%(18/35)和52.8%(19/36),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SCD-1蛋白高表达可能参与结直肠癌的发生、发展,SCD-1表达可能是肿瘤进展的潜在标志物。

SCD和PPAR_γ基因在延边黄牛血液中的表达及其与IMF及TG含量的关系

为了研究脂肪代谢相关基因表达在不同肉质性状延边黄牛血液中的差异,试验选择20头延边黄牛按照高档牛肉生产模式统一饲养管理,根据它们的大理石花纹等级高低分为H组和L组。应用RT-PCR方法测定延边黄牛血液中硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)和过氧化氢酶体激活增殖受体γ(PPARγ)基因的表达丰度,另外分析了背最长肌肌内脂肪(IMF)和三酰甘油(TG)含量。结果表明:H组IMF和TG含量极显著和显著高于L组(P<0.01和P<0.05),H组个体血液中SCD和PPARγ表达丰度呈现出高于L组的趋势。IMF和TG含量随着大理石花纹等级的增加呈现上升趋势,SCD和PPARγ基因均可在血液中表达,并且延边黄牛血液中SCD和PPARγ基因表达水平随背最长肌IMF和TG含量的升高呈现增加的趋势。

牛SCD基因研究进展

硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)是催化主要包括棕榈酰CoA(C16:0)、硬脂酰CoA(C18:0)在内的饱和脂肪酸(SFA)产生单不饱和脂肪酸(MUFA)合成的关键酶,对牛奶、脂肪组织中脂肪酸的组成以及肌肉间脂肪沉积有着重要影响。文章概述了近年来牛SCD基因相关的研究进展。

不同品种猪SCD基因在肝脏、背脂、背最长肌中表达差异研究

本试验旨在揭示脂肪型藏猪和滇南小耳猪与瘦肉型大约克猪SCD基因的表达差异,试验分别选取6月龄藏猪、滇南小耳猪和大约克猪各6头,采用荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法检测了SCD基因在背脂、背最长肌和肝脏中相对表达量。结果表明:SCD基因在背脂、背最长肌和肝脏组织中均有表达,其中背脂中最高,肝脏次之,背最长肌最低。在背脂中,藏猪和滇南小耳猪表达量极显著高于大约克猪(P<0.01);在背最长肌和肝脏中,藏猪表达量极显著高于滇南小耳猪和大约克猪(P<0.01),表达水平基本趋于一致。结果表明,SCD基因在脂肪型和瘦肉型猪种表达量存在明显差异,本试验为进一步开展SCD基因对猪脂肪沉积和肉质性能的调控机制提供了重要依据。

INHBA-AS1通过c-Myc/SCD通路调控宫颈癌HeLa细胞的鸟氨酸代谢和EMT进程

目的:探讨抑制素β亚基A反义RNA1(INHBA-AS1)对宫颈癌HeLa细胞EMT和鸟氨酸代谢途径的影响及其机制。方法:体外常规培养HeLa细胞,实验分为10组:对照组、阴性对照(NC)组、sh-INHBA-AS1组、PluriSIn 1[硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearyl CoA desaturase,SCD)抑制剂]组、NC+PluriSIn 1组、sh-INHBA-AS1+PluriSIn 1组、10058-F4(c-Myc抑制剂)组、NC+10058-F4组、sh-INHBA-AS1+10058-F4组、sh-INHBA-AS1+OE-c-Myc组。平板克隆实验检测各组细胞的增殖能力,FCM检测各组细胞的凋亡情况,Transwell小室实验检测各组细胞的侵袭、迁移能力,qPCR法检测各组细胞中INHBA-AS1、c-Myc、SCD和EMT相关基因(N-cadherin、TGF-β、ZEB1)mRNA的表达,WB法检测各组细胞中c-Myc、SCD、EMT相关(N-cadherin、TGF-β、ZEB1)、S-腺苷-甲硫氨酸脱羧酶(SAMDC)和亚精胺/精胺N1-乙酰转移酶(SSAT)蛋白的表达,ELISA检测各组细胞上清液中鸟氨酸脱羧酶(ODC)的含量。结果:敲减INHBA-AS1表达使HeLa细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低(均P<0.05)而细胞凋亡率显著升高(P<0.05),q PCR、WB法检测结果显示,敲减INHBA-AS1均可显著抑制HeLa细胞中c-Myc、SCD、N-cadherin、TGF-β、ZEB1和SAMDC的表达(均P<0.05),而促进SSAT的表达(P<0.05),并降低HeLa细胞上清液中ODC的含量(P<0.05)。与c-Myc抑制剂和SCD抑制剂单独处理相比,其联合敲减INHBA-AS1后上述作用更加显著(均P<0.05);与sh-INHBA-AS1组相比,进一步过表达c-Myc后HeLa细胞的增殖能力显著升高(P<0.05)、SCD和N-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)、细胞上清液中ODC含量显著升高(P<0.05)。结论:INHBA-AS1可通过c-Myc调控SCD的表达,从而影响HeLa细胞鸟氨酸代谢和EMT进程,进而促进HeLa细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

葛根芩连汤对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织Scd1基因甲基化与表达的影响及甲基化与生理生化指标相关性分析

该研究旨在探讨葛根芩连汤(Gegen Qinlian Decoction,GQD)对高脂饲料诱导的胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)大鼠脂肪组织硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl CoA desaturase,SCD)基因的甲基化和mRNA水平的作用及甲基化与生理生化指标的相关性。实验分为7组:空白组(C),胰岛素抵抗模型组(IR),GQD低、中、高剂量组(GQDL、GQDM、GQDH;1.65、4.95、14.85 g·kg^(-1)),罗格列酮组(rosiglitazone,RGN;5 mg·kg^(-1)),辛伐他汀组(simvastatin,SVT;10 mg·kg^(-1))。取大鼠附睾脂肪组织,用亚硫酸氢盐测序PCR法(bisulfite sequencing PCR,BSP)检测Scd1基因2个片段的所有胞嘧啶甲基化水平:片段1[Scd1-1,位于CG海岸(shores)]和片段2[Scd1-2,位于CG岛,包含转录起始位点(transcription start site,TSS)]。用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q-PCR)法测定Scd1 mRNA水平;并采用Spearman相关系数分析所扩增片段C甲基化与基因表达量及大鼠生理生化指标之间的相关性。结果表明,GQDM能显著逆转高脂饲料引起的Scd1-2片段TSS上游CG7甲基化的增加;GQDL能显著逆转高脂饲料引起的Scd1-2片段TSS下游总CG甲基化的降低。各GQD组未显著改善高脂饲料引起的Scd1 mRNA水平降低。位于CG海岸区域的Scd1-1的总CG、CG5、CT11甲基化与血清甘油三酯(triglyceride,TG)水平均呈显著负相关,与Scd1 mRNA水平呈正相关;位于Scd1-2 TSS上游片段多个C位点的甲基化与生理生化指标呈正相关;Scd1-2 TSS下游片段多个CG位点甲基化与生理生化功能指标呈负相关,下游片段多个CH位点甲基化与生理生化功能指标呈正相关。该研究表明,GQD可能通过调节Scd1基因CG岛区TSS上游CG7以及TSS下游总CG位点发挥一定的药效作用;Scd1基因的CG海岸区域总CG、CG5、CT11位点甲基化可能是调节Scd1 mRNA水平进而影响血清TG水平的重要靶点。

秀丽线虫硬脂酰辅酶A去饱和酶的研究进展

硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl-co A desaturase,SCD),也称为Δ9去饱和酶,是脂肪合成的关键酶。SCD在饱和脂肪酸(saturated fatty acids,SFAs)棕榈酸(palmitic acid,C16:0)和硬脂酸(stearic acid,C18:0)的第九和第十位碳原子间引入一个双键,分别将它们催化为单不饱和脂肪酸(monounsaturated fatty acids,MUFAs)棕榈油酸(palmitoleic acid,C16:1n-7)和油酸(oleic acid,C18:1n-9)。大量的研究表明,饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸的正常比例对维持生物膜的流动性、信号传递、能量平衡等非常重要。SCD的表达和活性受到环境、激素、饮食及多种转录因子的影响和调控,与肥胖、糖尿病、心脑血管疾病、癌症及其它代谢性疾病相关。近几年来,秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)成为研究脂代谢调控广受欢迎的模式动物。秀丽线虫具有三个编码SCD的基因:fat-5、fat-6和fat-7,与其它物种的scd基因具有高度同源性和保守的生物学功能,影响秀丽线虫的生长、发育、抗逆境和能量平衡等。文章主要综述了近几年来秀丽线虫SCD的相关研究进展,并对SCD未来研究的方向进行展望。