丁香和瑞香狼毒提取物对苦瓜枯萎病菌抑菌机理初探

近年来,苦瓜因其独特的药理作用种植面积越来越大,但由于连作使得苦瓜枯萎病发病情况日趋严重,极大影响着苦瓜的产量及品质。试验以丁香(Syzygium aromaticum)、瑞香狼毒(Stellera chamaejasme)、羌活(Notopteryg iumincisum)、芫花(Daphne genkwa)、结香(Edgeworthia chrysantha)和八角(Illicium verum)等6种植物提取物为供试材料,测定其对苦瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.momordicae)的菌丝生长速率、孢子萌发以及酶活性的影响,旨在筛选对苦瓜枯萎病菌高效抑制的植物源农药,为进一步开发植物源农药提供理论依据。结果表明,丁香和瑞香狼毒提取物在质量浓度为4.0 mg/mL时,抑菌率均达到了100%,在质量浓度为2.0 mg/mL时,抑菌率分别达到了100%、87.02%,丁香和瑞香狼毒提取物EC50值为0.2565、0.3548 mg/mL;且在质量浓度为4.0 mg/mL时,二者对苦瓜分生孢子萌发抑制率均达到了80%以上。丁香和瑞香狼毒提取物处理苦瓜枯萎病菌后,丙二醛含量、丙酮酸含量较对照组均有明显提高,几丁质酶活性较对照组明显降低,处理组菌丝中的可溶性蛋白明显低于对照组。综上,丁香和瑞香狼毒提取物对苦瓜枯萎病菌有良好的抑制效果,二者均可破坏病原菌的膜脂结构以及细胞壁结构,从而影响病原菌的正常生长。

狼毒根提取物的生物活性测定

狼毒是我国北方普遍生长的一种有毒植物,其根是一种传统中药材。20世纪90年代中期以来,作为一种植源性农药资源,狼毒的开发研究受到重视。本研究表明不同狼毒根提取物都能表现出一定的生物活性,利用狼毒根水浸液与乙醇提取物对舞毒蛾幼虫的拒食作用最高达99%,7d的校正死亡率最高达100%,室内毒力测定中防后5d的校正死亡率最高达100%;不同有机溶剂对狼毒根乙醇提取物萃取分离得到的有效成分对油松毛虫的拒食作用最高达92 39%,7d的校正死亡率最高达100%。不同有机溶剂的萃取物对杨树溃疡病原菌表现出抑制生长的作用,而对仙客来尖镰孢基本没有效果。

瑞香狼毒根中活性物质的分离鉴定及作用机理

以瑞香狼毒根为研究材料,模式植物拟南芥为受体,采用实验室活体生物实验方法研究了瑞香狼毒根提取物及不同极性溶剂萃取物对7 d龄拟南芥幼苗的生长抑制作用;采用活性跟踪的化合物分离方法,分析了其中的活性化合物成分,并通过拟南芥DR5-GUS转基因株系,研究了单体化合物对拟南芥生长发育及根系生长素分布的影响.结果显示,瑞香狼毒根乙醇提取物对拟南芥有很强的生长抑制作用,其乙酸乙酯和氯仿萃取物的抑制活性最为显著,从氯仿萃取物中分离得到两种香豆素类化合物伞形花内酯(1)和西瑞香素(2),其中化合物1能够显著抑制拟南芥幼苗生长及根系发育,且明显降低了根部内源生长素的分布水平;化合物2也有较为明显的抑制活性.研究表明,氯仿和乙酸乙酯萃取物是瑞香狼毒植物毒活性的主要有效部位;伞形花内酯(1)和西瑞香素(2)是瑞香狼毒植物毒活性的有效成分,化合物1对拟南芥生长发育的抑制作用与生长素途径密切相关.

瑞香狼毒成分抗惊厥作用的初步研究

目的:应用不同溶剂对天然植物瑞香狼毒进行提取,并对不同提取物进行抗惊厥活性的初步实验,探索其治疗癫痫的有效化学成分。方法:采用溶剂萃取法和抗癫痫活性实验,确定何种溶剂提取物抗癫痫活性比较强,并对活性较强提取物的化学成分加以分离,进行结构鉴定。结果:抗惊厥活性物质分别存在于乙醇、乙醚、丙酮和水层提取物中,其中丙酮提取物可使其抗惊厥的潜伏期由对照组的(8.6±1.9)min延长至(21.4±6.7)min;对丙酮提取物进行进一步研究,证明抗惊厥活性的有效成分为伞形花内酯,其作用可使抗惊厥的潜伏期由对照组的(8.6±1.9)min延长至(18.1±4.3)min。结论:初步实验证明瑞香狼毒具有抗惊厥作用,伞形花内酯是有效成分之一。

瑞香狼毒根提取物及不同溶剂萃取物对马铃薯腐烂茎线虫触杀活性研究

采用实验室活体生物试验方法,测定和比较了瑞香狼毒乙醇提取物及不同极性溶剂萃取物对马铃薯腐烂茎线虫的触杀活性。结果表明,瑞香狼毒根乙醇提取物及其石油醚、氯仿、乙酸乙酯及水相萃取物对马铃薯腐烂茎线虫有不同程度的触杀活性,其中乙酸乙酯萃取物对马铃薯腐烂茎线虫的触杀活性最强,显著高于其他萃取物。随着处理浓度的增大和处理时间的增长,该萃取物对线虫的触杀活性明显增强,表现出良好的量效关系。

瑞香狼毒超临界萃取物的化学成分及其杀螨活性

我国农业害螨的抗药性越发严重,在防治过程中害螨的天敌也受到杀伤,造成害螨的再猖獗,严重影响农作物及经济林的产量和品质（Kalaisekar et al.,2003;Shi et al.,2004）。瑞香狼毒（Stellera

瑞香狼毒花多糖提取工艺优化及其抑菌活性研究

文章采用水提醇沉法,进行了单因素实验和正交实验,研究了瑞香狼毒花多糖的最优提取条件,并考察分析了瑞香狼毒花多糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑制作用。结果表明:瑞香狼毒花多糖提取的最佳条件为料液比1:30(g/m L)、水浴温度85℃、浸提时间9h、微波功率240W;抑菌试验发现,瑞香狼毒花多糖对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用,其对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑制浓度为12.5mg/m L,对大肠杆菌的最小抑制浓度为6.25mg/m L。

瑞香狼毒提取物抗实验性癫痫筛选研究

目的 对瑞香狼毒六种提取物 (依次为瑞香狼毒水、生离物、丙酮、石油醚、乙醚、乙醇提取物 )进行药效学及毒性比较研究 ,筛选出一种高效低毒的抗癫痫化合物 ,便于临床前机制探讨。方法 采用动物三种惊厥模型 ,测定瑞香狼毒六种提取物抗实验性癫痫半数有效量 (ED50 )。计算其半数致死量 (L D50 )。结果 瑞香狼毒提取物 ～ ,即丙酮、石油醚、乙醚、乙醇四种提取物对小鼠最大电休克发作实验 (MES)、戊四唑惊厥实验(MET)和电刺激大鼠皮层惊厥阈值 (TL S)模型均具有较强的对抗作用。而其中丙酮提取物毒性较低 ,治疗指数高达 14 .9。结论 瑞香狼毒丙酮提取物是一种抗惊厥作用较强而毒性小的有希望的抗癫痫化合物。

瑞香狼毒根的超临界萃取物抑菌活性和成分分析

瑞香狼毒（Stellera chamaejasme）为瑞香科（Thymelaeaceae）植物,广泛分布于我国西北、华北等地（刘欣等,2004）。据《神农百草经》记载,瑞香狼毒与大戟科（Euphorbiaceae）植物狼毒大戟（Euphorbia fischeriana）、月腺大戟（E.ebracteolata）同作狼毒入药,其性味苦平,全草有毒,有逐水祛痰、破积杀虫之功效（张慧文等,2006）。 瑞香狼毒也是一种极具开发潜力的植物源农药。

瑞香狼毒超临界CO_2萃取物的杀螨毒力及机理初探

为了测定瑞香狼毒超临界CO2萃取物对朱砂叶螨的触杀毒力,并了解其作用机理,笔者采用玻片浸渍法测定瑞香狼毒超临界CO2萃取物(SCE)对朱砂叶螨的触杀毒力,观察其对朱砂叶螨的致毒症状;结果表明:SCE对朱砂叶螨24h的触杀LC50值为2.411mg/mL;中毒试螨表现出类似神经毒剂的致毒症状,如兴奋、痉挛等。随后测定了SCE对朱砂叶螨神经系统靶标酶(乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶)活性的影响。结果表明,SCE能够显著抑制试螨乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性;据此推测,SCE对朱砂叶螨可能具有神经毒性。

超临界CO_2流体萃取瑞香狼毒根部油脂工艺条件的优化

为了采用超临界CO2萃取技术提取瑞香狼毒根部油脂,并确立其工艺条件,通过单因素试验及正交试验,对CO2流量、萃取时间、萃取压力、萃取温度、分离温度、分离压力等条件进行了优化。结果表明在试验范围内,各影响因素对瑞香狼毒根部油脂得率作用的大小依次为:萃取压力>分离压力>萃取温度>分离温度。超临界CO2流体萃取技术提取瑞香狼毒根部油脂的最佳工艺参数为:CO2流量21L/h,萃取时间为100min,萃取压力30MPa,萃取温度46℃,分离温度45℃、分离压力5.5Mpa。在此最佳工艺条件下,瑞香狼毒根部油脂萃取率达到3.57%。

瑞香狼毒提取物对病原菌及桃酶的生物活性研究

用乙酸乙酯及其他溶剂,利用平行提取法提取瑞香狼毒活性物质,采用生长速率法对8种植物病原菌进行了抑菌活性测定;并且以大久保桃为试验对象,对不同浓度瑞香狼毒乙酸乙酯提取液控制桃褐腐病效果进行了研究;同时检测了桃3种抗病性酶活性。结果表明:瑞香狼毒乙酸乙酯提取物对8种供试植物病原菌中的7种有明显的抑制作用,其中完全抑制了桃褐腐病原菌、苹果腐烂病原菌、小麦赤霉病原菌、黄瓜枯萎病原菌生长;瑞香狼毒乙酸乙酯、水、甲醇、乙醇、石油醚提取物对桃褐腐病原菌均有抑制作用(抑菌率均高于60%),其中瑞香狼毒乙酸乙酯提取物完全抑制病原菌菌丝的生长;经3种浓度的乙酸乙酯提取物处理桃的病斑都小于对照,而质量浓度为20 mg/mL提取物控制桃腐烂效果最好。乙酸乙酯提取物显著地提高了桃PAL,POD活性,但诱导PPO活性不明显。

瑞香狼毒的CO_2超临界提取工艺及其杀螨活性的研究

利用二氧化碳(CO2)超临界萃取技术提取瑞香狼毒中触杀朱砂叶螨的有效成分并进行工艺优化,研究提取物的杀螨活性。通过对影响提取率的3个因素(压力、温度、时间)进行正交试验设计,优化提取工艺。将优化工艺所得的提取物与传统提取技术(溶剂提取法)所提取的物质进行杀螨活性比较。优选出CO2超临界萃取的最佳工艺是:压强30 MPa,温度40℃,时间1.5 h,使用此工艺不但可以将萃取率由原来的2.06%提高为2.68%,而且杀螨活性也显著提高,LC50由原来的3.818 3 g/L降低为2.436 6 g/L。所以,CO2超临界萃取瑞香狼毒有效成分是一种比较优越的方法。

不同干燥方式对瑞香狼毒总黄酮提取及抑菌活性的影响

以瑞香狼毒为原料,通过烘干、红外干燥及微波干燥3种方式将瑞香狼毒干燥至恒重,考察不同的干燥方式对瑞香狼毒总黄酮含量及抑菌活性的影响,结果表明,通过红外干燥处理提取的黄酮类化合物含量最高,烘干处理次之,而通过微波干燥方式前处理提取的黄酮类化合物含量最低。红外干燥处理后提取的黄酮类化合物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制效果强于其他2种方式,可能与红外干燥处理后得到的黄酮类化合物含量较高有关。

瑞香狼毒叶提取物对皮肤石膏样毛癣菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用

目的研究瑞香狼毒叶提取物对常见皮肤表面菌的抑菌活性。方法采用药敏纸片法和二倍稀释法测定瑞香狼毒叶提取物对石膏样毛癣菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用。结果瑞香狼毒叶95%乙醇提取物浓度为100 mg·mL-1时对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径达12.8 mm,对石膏样毛癣菌抑菌圈直径达12.0 mm,二氯甲烷萃取物对金黄色葡萄球菌最低抑制浓度(MIC)为0.25 mg·mL-1,对石膏样毛癣菌MIC为0.50 mg·mL-1。结论瑞香狼毒叶提取物对石膏样毛癣菌和金黄色葡萄球菌均有抑制活性,其中对金黄色葡萄球菌抑制活性较强。

狼毒根提取物的杀虫活性测定

利用瑞香狼毒根乙醇提取物(SCEE)对榆白长翅卷蛾5龄幼虫和麦二叉蚜进行触杀作用测定。结果表明,SCEE对榆白长翅卷蛾5龄幼虫有很强的触杀活性,当浓度为20mg/ml、10mg/ml、6.67mg/ml、5mg/ml、4mg/ml时,其校正死亡率分别为100%、100%、98.2%,95.4%、83.18%。SCEE对麦二叉蚜的触杀活性较差,最高浓度20mg/ml时,其校正死亡率仅为22.54%。

瑞香狼毒根乙醇提取物及4种溶剂萃取物对两种叶螨及豌豆蚜的触杀活性比较

本文分别采用玻片浸渍法和带虫浸叶法测定比较了瑞香狼毒根乙醇提取物及4种不同溶剂萃取物对截形叶螨、二斑叶螨及豌豆蚜的触杀活性。结果表明,瑞香狼毒根的乙醇提取物对截形叶螨、二斑叶螨、豌豆蚜处理12h的校正死亡率分别为60.28%、59.24%、54.32%,24h的校正死亡率分别为66.75%、61.45%、65.53%;石油醚萃取物对3种供试生物处理12h和24h校正死亡率分别为89.39%、93.70%、91.49%和93.33%、84.19%、100%;氯仿萃取物处理12h和24h后校正死亡率分别为32.11%、35.66%、27.35%和34.47%、35.95%、38.60%,瑞香狼毒4种溶剂萃取物触杀活性顺序为:石油醚>氯仿>水>乙酸乙酯,随着浓度增大,萃取物对3种供试生物的触杀活性明显增强,表现出良好的量效关系。石油醚萃取物对截形叶螨12h和24h的LC50分别为2.040 2mg/mL和0.8mg/mL;对二斑叶螨12h和24h的LC50分别为0.280 3mg/mL和0.037mg/mL;对豌豆蚜12h和24h的LC50分别为0.911 4mg/mL和0.360 5mg/mL,24h毒力均高于12h毒力。

3种植物提取物对6种枯萎病菌的生物活性研究

枯萎病是农业生产中最具有威胁性的土传病害之一,严重影响多种作物的产量及品质。本研究旨在寻找和开发绿色环保且可高效抑制枯萎病菌的植物资源,同时为植物源杀菌剂的开发提供一定的理论依据。以丁香(Syzygium aromaticum)、甘草(Glycyrrhiza uralensis)和瑞香狼毒(Stellera chamaejasme)的提取物为材料,通过菌丝生长速率法测定3种植物提取物对6种植物枯萎病原菌的抑菌活性。研究表明当质量浓度为2 mg/mL时,丁香、甘草、瑞香狼毒3种提取物对6种植物枯萎病菌均有较强的抑制作用,3种植物提取物处理96 h后的抑菌率均在44.5%以上。其中,丁香对6种植物枯萎病菌的抑菌效果最好,EC50值在0.1473~0.3785 mg/mL之间;瑞香狼毒和甘草提取物的抑菌效果次之,EC50值分别在0.1866~2.6262 mg/mL和0.6281~3.1703 mg/mL之间。试验结果表明丁香、甘草、瑞香狼毒提取物对6种枯萎病均有良好的抑制效果,均可作为防治植物枯萎病的新型植物源农药进一步研究。

藏药瑞香狼毒多糖提取工艺的优化及其抑菌和抗氧化活性研究

【目的】优化乙醇/(NH_4)_2SO_4双水相体系提取藏药瑞香狼毒多糖的工艺参数,并分析瑞香狼毒多糖的抑菌及抗氧化活性,为瑞香狼毒功能产品的研发及多元化应用提供理论依据。【方法】以不同的料(g)液(mL)比(1∶30,1∶40,1∶50)、提取温度(45,55,65℃)和提取时间(20,30,40min)作为考察因素,以多糖的提取率作为评价指标,采用响应曲面优化分析确定瑞香狼毒多糖最佳提取工艺参数。利用硫酸亚铁-水杨酸氧化法和邻苯三酚自氧化法分别评估瑞香狼毒多糖(质量浓度分别为0.6,1.2,1.8,2.4,3.0,3.6mg/mL)对羟基自由基(·OH)和过氧负离子自由基(·O_2^(-2))的体外清除能力。采用滤纸片扩散法研究瑞香狼毒多糖(质量浓度为0.3和3.0mg/mL)的抑菌活性。【结果】料(g)液(mL)比1∶40、提取温度55℃、提取时间30min为最优的工艺参数,在该条件下瑞香狼毒多糖的提取率最高,达15.34%。3.0mg/mL瑞香狼毒多糖对·OH的清除率最大,为29.4%;2.4mg/mL瑞香狼毒多糖对·O_2^(-2)的清除率最大,为24.7%。抑菌试验结果表明,3.0mg/mL瑞香狼毒多糖对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌高度敏感,对枯草芽孢杆菌中度敏感。【结论】确定了瑞香狼毒多糖乙醇/(NH4)2SO4双水相体系提取的最佳工艺参数,建立了因素与提取率之间的二次函数模型;瑞香狼毒多糖具有一定的体外抑菌、抗氧化活性。

瑞香狼毒根部提取物对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡作用的影响

目的:探讨瑞香狼毒根部提取物(SCE)对人肺腺癌A549细胞作用和潜在机制。方法:细胞划痕和MTT用以评价和筛选SCE对A549细胞抑制的最佳浓度;激光共聚焦和荧光显微镜分别观察不同浓度SCE作用于A549后线粒体膜电位和染色质变化;Western blot检测p53、MDM2蛋白表达。结果:SCE药物组A549细胞较空白对照组在24、48 h迁移率均显著降低(P<0.01);在1~20μg/mL范围内,随着药物浓度的增加,A549细胞抑制率增强;与空白对照组比较,SCE低、中、高剂量组绿色荧光细胞占比逐渐增加;随着SCE浓度升高,A549细胞荧光增强至白色,染色质凋亡呈碎块状;与空白对照组比较,SCE低、中、高浓度组p53蛋白表达显著上升(P<0.05);与空白对照组和SCE低浓度组比较,SCE中、高浓度组MDM2蛋白表达显著下降(P<0.01)。结论:SCE能够显著抑制肺腺癌A549细胞增殖,其作用机制可能与作用于线粒体膜电位和p53/MDM2负反馈通路有关。