干细胞白血病基因药物对糖尿病膀胱病豚鼠膀胱Cajal间质细胞表面c-kit蛋白表达的影响

目的研究干细胞白血病(SCL)基因药物对糖尿病膀胱病(DCP)豚鼠受损膀胱Cajal样间质细胞(ICCs)表面c-kit蛋白表达的影响。方法选取60只健康豚鼠单次腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)200 mg·kg-1构建豚鼠糖尿病膀胱病模型。按随机数字表法将27只糖尿病膀胱病豚鼠随机分为3组:实验组、阳性对照组和空白对照组,每组9只。实验组单次尿道灌注SCL基因重组慢病毒药物(滴度2×107 U)0.2 mL,阳性对照组单次尿道灌注空慢病毒液(不含SCL基因)0.2 mL,空白对照组单次尿道灌注磷酸盐缓冲液(PBS)0.2 mL。每组每次各选取3只豚鼠于灌注后第7,14,28天麻醉后取其膀胱,提取培养DCP豚鼠膀胱ICCs,于倒置显微镜下观察其细胞形态,将用绿色荧光抗体标记的ICCs置于激光共聚焦显微镜下检测ICCs细胞荧光强度,采用Western blotting检测ICCs表面c-kit蛋白的表达。结果SCL基因重组慢病毒在14 d时转染效果最佳,激光共聚焦显微镜下观察到实验组ICCs荧光强度和c-kit蛋白表达较其他两组明显增强(P<0.05),与空白对照组比较,阳性对照组ICCs荧光强度和c-kit蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢病毒为载体将SCL基因药物转染入DCP膀胱后能使高糖环境下ICCs膜表面c-kit蛋白表达增强,可能有利于DCP膀胱受损的ICCs功能的恢复。

X射线照射K562细胞后mdrl基因表达和白血病干细胞含量的变化

目的研究白血病K562细胞经X射线照射后耐药基因mdr1表达、白血病干细胞(LSC)含量和药物敏感性的变化,探讨白血病辐射耐受性与药物耐受性的相关性。方法以白血病K562细胞为模型,直线加速器X射线照射,采用实时荧光定量PCR技术检测mdr1 mRNA表达,流式细胞术检测LSC表面标志和P-糖蛋白(P-gp)表达,MTT法测定细胞的药物敏感性。结果白血病K562细胞系mdr1基因表达和LSC含量极低,经不同剂量的X射线照射后,K562细胞中LSC的含量显著增加,mdr1/P-gp表达增高,随时间延长而逐渐降低;对阿霉素的敏感性明显降低。结论X射线照射可提高白血病K562细胞群中LSC的比例和刺激mdr1/P-gp表达,继发性地降低其对常规化疗药物的敏感性。

白血病多药耐药与PTEN调控作用的研究进展

逆转白血病的多药耐药是白血病治疗难点,研究表明PTEN基因作为一种具有蛋白磷酸酶及脂质磷酸酶双特性活性的抑癌基因,在白血病干细胞(LSCs)中低表达、突变或缺失,通过多种信号通路介导白血病细胞多药耐药,并参与细胞生长、分化、增殖。PTEN基因作为一种抑癌基因,有望为清除LSCs及逆转白血病多药耐药提供新的靶点。本文将从PTEN基因通过抑制MAPK信号通路、FAK/P130cas信号通路及负调控PI3K/AKt/mToR信号通路等参与调控细胞生长、分化、增殖,以及在白血病多药耐药中的研究进展作一综述。