无花果叶发酵条件优化及其对活性成分含量的影响

研究利用菌酶协同技术发酵无花果叶,以期提高无花果叶中活性成分的析出率。以无花果叶为唯一碳源配制培养基,从新鲜、冻存及晒干的无花果叶中均筛选出嗜麦芽寡养单胞菌,该菌发酵无花果叶产香豆素的含量高于未发酵组,故选定其作为发酵菌种。发酵2 d后,通过比色法检测发酵液中香豆素和萜类化合物的含量,通过单因素试验和正交试验优化培养条件。结果显示,优化后最优发酵方式为菌酶协同发酵,最佳前体物为8 mg/L的苯丙氨酸,额外碳源为2 g/L的麦芽糖,最佳氮源为3 g/L的硫酸铵+蛋白胨混合物,纤维素酶和果胶酶的最佳比例为1:2。优化培养后无花果叶发酵液中香豆素、萜类化合物、黄酮类化合物以及多糖含量分别提高了92.66%、59.40%、44.68%和42.84%。优化后多酚类化合物含量是优化前的4.24倍。研究表明,无花果叶发酵可以提高其活性成分的含量,研究可为无花果叶作为一种新型饲料添加剂的开发利用提供依据。

嗜麦芽窄食单胞菌产生的几丁质酶的特性

从土壤中筛选出一株产几丁质酶的革兰氏阴性细菌，通过16S rDNA法对酶活力最高的菌株C进行鉴定，确定为嗜麦芽窄食单胞菌（S．maltophilia）菌株．通过单因素优化法和均匀设计法确定S．maltophilia产几丁质酶的最佳条件：在pH值为7．0的基础培养基中添加质量分数为1．0％的酵母膏、质量分数为0．5％的胶体几丁质，于180r·min^-1，30℃的摇床中培养60h．对硫酸铵沉淀获得的粗酶进行酶学性质研究，结果表明，该几丁质酶的最适反应温度为50℃，最适反应pH值为7．2，在55℃以上的温度条件下容易失活．通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，确定S．maltophilia几丁质酶的相对分子质量为6．8×10^3；以筛选的S．maltophilia菌株的总DNA为模板，利用聚合酶链式反应（PCR）扩增出几丁质酶DNA测序；应用生物信息学手段推导S．maltophilia几丁质酶为分泌型蛋白酶，预测其等电点pI值为5．42，相对分子质量为6．8×10^3（与实验纯化的酶蛋白电泳结果一致）．预测该酶氨基酸序列具有信号肽区（氨基酸残基1～41）、Ⅲ型几丁质结合区（残基47-92）、多囊肾病域（107～194）、类纤维连接蛋白Ⅲ型区（Fn3，201～278）和18家族糖基水解域等5个结构功能区，5个区域被富含Ala，Gly，Pro，Ser和Thr的短序列连接起来；在第400～500个氨基酸残基间有一个螺旋结构．

嗜麦芽窄食单胞菌耐药机制的研究进展

嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia,SMA)广泛存在于土壤、水、植物、动物和食物等自然界中,在医院环境中也普遍存在,近年来临床分离率不断增加,是引起医院内感染的主要机会性致病菌之一。它对多种抗生素耐药,主要机制与抗生素灭活酶、存在多药外排泵、smqnr基因以及整合子、生物膜形成等相关,导致其感染的治疗十分困难,本文就嗜麦芽窄食单胞菌耐药机制的研究进展作一综述。

1129株嗜麦芽窄食单胞菌的临床分布和耐药性分析

目的了解首都医科大学附属北京世纪坛医院嗜麦芽窄食单胞菌的分布及耐药性,为临床经验性抗感染治疗提供参考。方法对2011年1月至2018年12月分离的嗜麦芽窄食单胞菌细菌分布及药敏进行回顾性分析,使用WHONET 5.6进行统计学分析。结果共分离到嗜麦芽窄食单胞菌1129株。嗜麦芽窄食单胞菌主要分离自60岁以上老年患者,占87.86%。标本来源前2位依次是痰液、咽拭子,分别占82.81%、3.72%。菌株主要分布于重症医学科(ICU)和呼吸内科,检出率分别为37.82%及17.62%。8年间该菌对替卡西林/克拉维酸、左氧氟沙星、复方新诺明和米诺环素较敏感,耐药率低于20.00%;对头孢他啶耐药率较高,为75.20%。结论嗜麦芽窄食单胞菌引起的感染以呼吸道为主,主要集中在ICU,且多见于60岁及以上老年患者。药敏试验结果显示,对替卡西林/克拉维酸、左氧氟沙星、复方新诺明和米诺环素有较高的敏感性,对头孢他啶耐药率较高。临床应该根据药敏结果选择用药。

2007-2008年嗜麦芽寡养单胞菌的科室分布及耐药性分析

目的了解嗜麦芽寡养单胞菌的科室分布,探讨嗜麦芽寡养单胞菌的耐药特点。方法2007年1月-2008年9月临床送检的标本分离194株嗜麦芽寡养单胞菌,对其进行20种抗菌药物敏感试验。结果嗜麦芽寡养单胞菌对亚胺培南、四环素、头孢噻肟、氨曲南耐药率>90.00%;对庆大霉素、美罗培南、妥布霉素的耐药率>80.00%;对头孢哌酮/舒巴坦耐药率为10.31%;米诺环素的耐药率为1.55%。结论该菌耐药状况十分严重,应尽早根据药敏情况选用抗菌药物,可以选择头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素。

2007-2010年ICU嗜麦芽寡养单胞菌的临床分布及耐药分析

目的分析2007-2010年ICU嗜麦芽寡养单胞菌的临床分布及耐药变迁分析,为合理使用抗菌药物提供依据。方法采用回顾性调查分析2007-2010年ICU嗜麦芽寡养单胞菌533株,药敏试验采用K-B纸片扩散法。结果 4年来嗜麦芽寡养单胞菌标本检出率和15种抗菌药物耐药率总体呈上升趋势,检出率由2007年3.69%上升至2010年4.14%,痰液标本来源最高,>70.00%;对哌拉西林/他唑巴坦的敏感性最好,耐药率<15.00%,对头孢哌酮/舒巴坦及左氧氟沙星有较好的敏感性,对头孢吡肟耐药率上升明显,由2008年11.20%上升至2010年46.10%。结论嗜麦芽寡养单胞菌是ICU医院感染常见条件致病菌之一,检出率和耐药率呈逐年上升趋势,因此合理、规范使用抗菌药物和加强各种防护措施,是有效防止该菌的耐药率增高和多药耐药菌产生的关键。