液相脉冲放电辅助提取千金藤素的工艺研究

利用液相脉冲放电技术提取金线吊乌龟中千金藤素并优化了工艺流程,以千金藤素的产量为响应指标,通过响应面法优化了放电电压、提取时间和液固比3种因素。结果表明,放电电压为5.5 kV、提取时间为4.2 min、液固比为52 mL/g时千金藤素的最大产量为(13.07±0.52)mg/g,与传统热浸提取产量[(6.3±0.103)mg/g]相比大幅提高;同时液相脉冲放电法的能量消耗为225 kJ/kg,低于传统热浸提取所耗能量(2041.2 kJ/kg)。

中药植物金线吊乌龟对植物病原真菌的抗菌活性

采用菌丝生长速率法测定了中药植物金线吊乌龟块根甲醇提取物对5种植物病原真菌的抗菌活性,结果表明:金线吊乌龟块根提取物对梨锈病菌、稻瘟病菌、水稻纹枯病菌和玉米炭疽病菌有很高的抑制活性,质量浓度为10g/L时,抑菌率分别为97.74%、100.00%、94.51%和84.40%;有效中浓度(EC50)分别为0.5879、0.3122、0.2807g/L和0.8353g/L。对柿角斑病菌的活性较低,在10g/L质量浓度下,抑菌率只有67.59%,EC50为1.3491g/L。金线吊乌龟块根提取物对甘蔗凤梨病菌孢子、柑橘疮痂病菌孢子和梨锈病菌孢子的萌发具有明显的抑制活性,质量浓度为10g/L时,抑制率分别为91.80%、97.00%和100.00%;对西瓜枯萎病菌孢子萌发的抑制效果比较差,抑制率仅为20.63%。按生物碱分离程序对金线吊乌龟块根提取物进行初步分离,结合活性跟踪,发现氯仿层生物碱是金线吊乌龟的主要抗菌活性成分。

头花千金藤的急性毒性试验

头花千金藤急性毒性试验结果表明:其块根鲜品与干品水煎液的LD_(50)分别为41.4g/kg和22.9g/kg。

MSPD-HPLC法测定金线吊乌龟中千金藤素

目的建立基质固相分散-高效液相色谱法（MSPD-HPLC）测定千金藤属植物金线吊乌龟块根中千金藤素的量。方法样品的前处理采用MSPD法,以碱性氧化铝为吸附剂,甲醇为洗脱溶剂。HPLC分析采用Phenomenex Gemini C18色谱柱（250 mm×4.60 mm,5μm）,流动相为乙腈-缓冲液（0.5%三乙胺水溶液用磷酸调节p H至10.7）,体积流量1.0 m L/min,检测波长282 nm,柱温40℃。结果千金藤素在14.88-238μg/m L范围内呈良好线性关系（r=0.999 4）,平均回收率为98.2%,RSD 3.0%（n=6）。结论所建MSPD-HPLC法简便、快速,可用于金线吊乌龟中千金藤素的定量分析。

金线吊乌龟化学成分的研究

目的研究金线吊乌龟Stephania cepharantha Hayata的化学成分。方法金线吊乌龟95%乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH-20、大孔树脂、RP-C18柱和制备液相进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到15个化合物,分别鉴定为异粉防己碱(1)、小檗胺(2)、千金藤素(3)、轮环藤宁(4)、左旋四氢巴马汀(5)、光千金藤啶碱(6)、异紫堇定(7)、腺嘌呤(8)、腺嘌呤核苷(9)、sinococuline (10)、cephamorphinanine(11)、衡州乌药碱(12)、coclaurine-12-O-β-D-glucopyranoside(13)、轮环藤酚碱(14)、木兰花碱(15)。结论化合物8~9、13为首次从该植物中分离得到,其中化合物13为新天然产物。

白药子总生物碱对X射线辐射小鼠白细胞减少症的保护作用及机制研究

目的探讨白药子总生物碱对X射线辐射损伤致小鼠白细胞减少的保护作用及其机制。方法采用辐射法(一次性全身照射,照射剂量2.5 Gy)制备白细胞减少症小鼠模型,90只昆明种小鼠随机分为对照组,模型组,白药子生物碱低、中、高剂量(1.25、2.50、5.00 mg·kg^(-1))组以及重组人粒细胞刺激因子(G-CSF)阳性对照组,共6组,每组15只。除对照组外,各组小鼠均进行1次性全身照射,白药子总生物碱各组分别于照射前3 d及照射后连续ig给药3、15 d,G-CSF组于照射前3 d sc给药,照射后ig给药15 d。实验结束后取小鼠股骨计算有核细胞数及DNA水平。处死小鼠后称取小鼠肝脏、脾脏和胸腺质量,计算脏器指数。采用血液学分析仪分别于照射前及照射后3、7、15 d对外周血细胞中的白细胞(WBC)进行计数。收集小鼠血清,采用酶联免疫吸附法检测粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-3(IL-3)、白细胞介素-4(IL-4)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和可溶性细胞间黏附分子(SICAM-1)。通过苏木精和伊红染色检测小鼠肝脏、脾脏的病理变化。电镜观察脾脏、肝脏的超微结构。取肝脏组织,检测抗氧化相关指标。结果白药子总生物碱可以明显抑制X射线照射后14 d内外周血白细胞的减少,同时提高X射线辐射后的骨髓DNA水平及小鼠造血生长因子GM-CSF水平,提高X射线辐射后免疫炎症因子IL-3、SICAM-1水平,减轻肝脏和脾脏组织损伤,维持小鼠肝脏、脾脏正常功能,并显著降低肝脏中的丙二醛(MDA)和黄嘌呤氧化酶(XOD)水平。结论白药子总生物碱增强免疫和造血功能,揭示其作为放射防护剂和辐射缓解剂的治疗潜力。

金线吊乌龟茎叶中生物碱的研究

目的:研究金线吊乌龟茎叶中的生物碱类成分。方法:金线吊乌龟干燥茎叶粉末用95%乙醇溶液渗滤提取,减压回收乙醇,依次用石油醚和氯仿萃取,所得氯仿层浸膏利用微孔吸附树脂、正相、反相硅胶、葡聚糖凝胶、聚酰胺等柱色谱方法分离和纯化,通过理化性质及光谱方法鉴定化合物的结构。结果:从金线吊乌龟茎叶中分离得到11个生物碱类成分,分别鉴定为观音莲明(1),四氢巴马亭(2),巴马亭(3),isocorydione(4),紫堇单酚碱(5),紫堇根碱(6),sinoracutine(7),青风藤碱(8),顶花防己胺(9),异紫堇定(10)和紫堇定(11)。结论:化合物2～7为首次从金线吊乌龟中分离得到,且化合物7为首次从千金藤属植物中分离得到,化合物4为首次从防己科植物中分离得到。

不同来源千金藤中千金藤素的HPLC法测定

目的建立不同来源的千金藤植物中千金藤素的HPLC测定方法。方法采用Angela C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：乙腈–水（52∶48,含0.5%三乙胺、0.01%磷酸）;检测波长：282 nm;柱温：30℃;体积流量：1.0 m L/min;进样体积：20μL。结果千金藤素质量浓度在9~216μg/m L时与峰面积值呈良好的线性关系（r=0.999 7）,平均回收率为96.0%,RSD值为2.0%（n=6）。产自湖南的千金藤（No.13）、产自广西的白药子（No.17）中千金藤素的量较高,分别为0.013 9%、0.122 1%;同一植株的不同用药部位（No.12~15）中千金藤素的量也不尽相同,湖南产千金藤中千金藤素主要分布在茎中,其质量分数为0.013 9%。结论该方法操作简便、准确、重复性好,可用于千金藤植物千金藤、地不容和白药子中千金藤素的测定。