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甾醇酰基转移酶基因高表达对酵母菌麦角甾醇合成的影响
被引量:
8
1
作者
何秀萍
郭雪娜
+1 位作者
张博润
谭华荣
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期67-71,共5页
通过PCR扩增克隆到含酵母菌甾醇酰基转移酶基因ARE2编码序列和上游调控序列的DNA片段ARE2 1及仅含编码序列的DNA片段ARE2 2。分别以ARE2启动子 ,乙醇脱氢酶基因ADH1启动子和铜抗性基因CUP1启动子及ADH1终止子为调控元件构建了酵母菌...
通过PCR扩增克隆到含酵母菌甾醇酰基转移酶基因ARE2编码序列和上游调控序列的DNA片段ARE2 1及仅含编码序列的DNA片段ARE2 2。分别以ARE2启动子 ,乙醇脱氢酶基因ADH1启动子和铜抗性基因CUP1启动子及ADH1终止子为调控元件构建了酵母菌表达质粒pHX2 ,pHXA2和pHXC2。表达质粒分别转化酿酒酵母单倍体菌株YS5 8和以前通过细胞杂交构建的麦角甾醇高产菌株YEH5 6。通过营养缺陷互补和铜抗性筛选到转化子 ,质粒上的ARE2基因在YS5 8和YEH5 6中都实现了活性表达 ,使细胞内甾醇酯化水平升高 ,并导致细胞麦角甾醇含量的提高。对转化菌株的培养条件进行了初步研究 ,在优化条件下 ,重组转化菌株YEH5 6 (pHX2 )、YEH5 6 (pHXA2 )和YEH5 6 (pHXC2 )的麦角甾醇含量分别是受体菌YEH5 6的 1 3、1 3和 1 4倍。
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关键词
甾醇酰基转移酶
基因表达
麦角甾醇
酵母工程菌
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职称材料
题名
甾醇酰基转移酶基因高表达对酵母菌麦角甾醇合成的影响
被引量:
8
1
作者
何秀萍
郭雪娜
张博润
谭华荣
机构
中国科学院微生物研究所
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第1期67-71,共5页
文摘
通过PCR扩增克隆到含酵母菌甾醇酰基转移酶基因ARE2编码序列和上游调控序列的DNA片段ARE2 1及仅含编码序列的DNA片段ARE2 2。分别以ARE2启动子 ,乙醇脱氢酶基因ADH1启动子和铜抗性基因CUP1启动子及ADH1终止子为调控元件构建了酵母菌表达质粒pHX2 ,pHXA2和pHXC2。表达质粒分别转化酿酒酵母单倍体菌株YS5 8和以前通过细胞杂交构建的麦角甾醇高产菌株YEH5 6。通过营养缺陷互补和铜抗性筛选到转化子 ,质粒上的ARE2基因在YS5 8和YEH5 6中都实现了活性表达 ,使细胞内甾醇酯化水平升高 ,并导致细胞麦角甾醇含量的提高。对转化菌株的培养条件进行了初步研究 ,在优化条件下 ,重组转化菌株YEH5 6 (pHX2 )、YEH5 6 (pHXA2 )和YEH5 6 (pHXC2 )的麦角甾醇含量分别是受体菌YEH5 6的 1 3、1 3和 1 4倍。
关键词
甾醇酰基转移酶
基因表达
麦角甾醇
酵母工程菌
Keywords
sterol acyltransferase
,
gene expression
,
ergosterol
,
yeast engineered strain
分类号
Q933 [生物学—微生物学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甾醇酰基转移酶基因高表达对酵母菌麦角甾醇合成的影响
何秀萍
郭雪娜
张博润
谭华荣
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
8
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