Physical-biological Collaborative Prevention and Control of Facility Strawberry Continuous Cropping Diseases

The aim was to develop green strawberry varieties,control soil-borne diseases from facility strawberry continuous cropping,improve the safety and quality of strawberries and promote the healthy and stable development of the strawberry industry. Based on the production practices in recent years,we summarized the physical-biological collaborative prevention and control technology for the disease of facility strawberry continuous cropping facilities,established the technical goals,the main types of soil-borne diseases,and the physical-biological collaborative control prevention and control technologies,mainly including the specific methods and technical points of solar high temperature disinfection technology and biological bacterial fertilizer（ agent） treatment technology.

草莓叶枯病生防芽孢杆菌的分离鉴定及防效研究

为筛选防治草莓叶枯病的生防芽孢杆菌(Bacillus spp.),采集健康草莓根际土壤,采用稀释涂布平板法和平板对峙法,筛选对草莓叶枯病具有较高防效的芽孢杆菌,采用形态学、生理生化鉴定及分子生物学方法对其进行鉴定,并初步研究其发酵特性,同时采用室内离体叶片法对其防治效果进行验证,通过血平板法和盆栽试验法对菌株安全性进行检测。结果表明,筛选得到一株对草莓叶枯病菌(Neopestalotiopsis clavispora)具有较高抑制效果的芽孢杆菌B125,其平板抑菌率达到75.44%,经形态学、生理生化鉴定及分子生物学鉴定,其为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。利用液体发酵培养以及热风干燥法制备得到菌株B125菌粉,其菌粉对草莓叶枯病的室内离体叶片防效达到61.69%,安全性试验表明,该菌株不具备溶血性,对作物生长无害且可以显著促进作物生长。综上,贝莱斯芽孢杆菌B125能够显著抑制草莓叶枯病菌的生长,具有较高的工业生产开发价值。

土壤微生物制剂防治草莓连作病害的研究

木霉T42与枯草芽孢杆菌Bs-6对引起草莓连作病害的主要病原菌尖孢镰刀菌和立枯丝核菌有明显的拮抗作用。应用实验表明,由T42与Bs-6组成的复合生物制剂能显著促进连作草莓的营养生长和生殖生长,连作草莓的死苗率由52.9%降低到8.2%,产量增加111%,果实品质显著提高。

放线菌制剂对连作草莓根区微生物区系的影响及其防病促生作用

【目的】探索放线菌制剂对草莓根域微生态的影响及其防病促生效果。【方法】采用露地小区试验和平皿培养法，测定接种放线菌制剂对草莓生长及其根域微生态的影响。【结果】①草莓移栽时，接种放线菌制剂Act11和Act12可以显著增加草莓根表细菌数量及根区、根表、根内放线菌数量，接种处理的草莓根表细菌、放线菌数量分别较对照提高71．4％～100．0％，112．9％～234．9％，根内真菌、放线菌数量分别较对照提高236．4oA～254．5％，366．7％～916．7％；接种Act11和Act12可极显著提高草莓根表、根内A／B及根表B／F、A／F，Act12接种处理根区、根表及根内A／B分别为对照的1．63，1．67及8．8倍，根表、根内A／F分别为对照的3．2，3．3倍，与对照的差异达到了极显著水平（P〈0．01），Act11处理与之类似。②Act11和Act12能在草莓根区、根表土壤和根内定殖，其中根表的定殖密度最大，分别为1．30×10^7和5．76×10^7cfu／g，其定殖率分别为32．3％和92．4％。③Act11和Act12能显著促进草莓根系、匍匐茎及地上部分生长，新根生物量分别较对照增加了31．3％和112．5％，匍匐茎增加了109．4％和168．8％。④Act11和Act12对草莓连作病害有较为明显的防效，在露地试验中的相对防效分别为28．6％和84．7％。【结论】草莓移栽时接种Act11和Act12能显著改善草莓根域微生物生态，促进草莓生长，提高抗病性。

复合生物制剂防治西瓜连作病害的研究

T42木霉与枯草芽孢杆菌Bs-6对尖孢镰刀菌FUS3有明显的拮抗作用。田间试验表明,由T42木霉与枯草芽孢杆菌Bs-6组成的复合生物制剂能显著增加连作西瓜的茎长和茎粗,经济产量、生物产量分别增加50.9%、66.7%,对连作病害的防效可达75%。

枯草芽孢杆菌Bs-0728对苹果再植病害的生防效果

Bs-0728菌株是从土壤中分离筛选到的1株具有抗真菌活性的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。本文研究了Bs-0728对6个苹果再植病菌菌株菌丝生长和孢子萌发的抑制作用,采用胚根接种法和盆栽试验测试了Bs-0728对苹果再植病害的防治效果,对苹果和海棠生长的促进作用及在苹果根际定殖的能力。结果表明,3%Bs-0728发酵液对6个供试病原菌株菌丝生长的抑制率为22.58%~100%,对孢子萌发的抑制率为44.33%~60.80%。胚根接种法测试结果表明,Bs-0728处理使胚根生长较病菌接种对照分别提高了12.9%~112.0%。盆栽试验结果表明,Bs-0728发酵液灌根施用对海棠生长的促进作用最高可达为62.30%,显著优于浸种处理的22.95%。对利福平标记的Bs-0728菌株在苹果树根围土壤的定殖动态研究结果表明,Bs-0728能成功定殖于苹果根围土壤至少120d。本研究明确了Bs-0728菌株发酵液对苹果再植病菌的抑制作用及其对苹果树再植病害控制效果。

木霉菌制剂防治草莓苗期炭疽病效果研究

通过土豆培养基平板对峙试验,筛选出一株对草莓炭疽病病原有拮抗活性的木霉菌菌株Tr78。经液体发酵和剂型处理,制成含2×108个/g活孢子可湿性粉剂,对在露地和设施2种育苗方式下的草莓炭疽病进行田间药效测试,草莓测试品种为红颜。对病情指数和木霉菌孢子在草莓苗叶片和根表面定殖数的统计,是在对2种育苗方式草莓苗的第1次处理后的90 d(7月中旬)和110 d(8月上旬)进行的;死苗率的统计是在将2种育苗方式的草莓苗移栽到大棚后第30天进行的。结果表明:在2种育苗环境下,Tr78喷雾(T-1)和化学药剂喷雾(T-3)处理之间,草莓苗的病情指数和死苗率均无显著性差异,而它们的病情指数和死苗率分别显著性地(P≤0.05)低于清水喷雾(T-4)对照处理,但显著性地(P≤0.05)高于Tr78灌根+喷雾(T-2)处理。在防治效果方面,处理T-1和T-3之间也无显著性差异,但显著性地(P≤0.05)低于处理T-2,这与Tr78在草莓苗根表面(P≤0.01)的定殖数有显著的线性相关性,即Tr78在草莓苗根表面的定殖数越高,防治效果越好。总体来说,在大棚育苗环境下,经各项处理的草莓苗的病情指数和死苗率都明显低于它们各自在露地环境下的草莓苗。

微生物制剂对草莓重要真菌病害的作用研究

为筛选防治草莓几种重要真菌病害的高效微生物制剂,本研究测定了以植物免疫蛋白、淡紫拟青霉、枯草芽胞杆菌和粉红黏帚霉等为活性成分的3种微生物制剂对草莓炭疽病、灰霉病和白粉病的防治作用及对草莓生长的影响。结果表明,3种微生物制剂对草莓炭疽病的防效均在65%以上,对灰霉病的防效在30%~55%。对于草莓白粉病害,沃丰康?克线散防治效果较好,达到64.1%,而普绿通粉剂和沃丰康?复合微生物菌剂防效不明显(<40%)。此外,3种微生物菌剂均表现出明显的促生、增产作用,其中沃丰康?复合微生物菌剂效果最为显著,植株干重增加57.3%,草莓干重增加83.1%;施用沃丰康?克线散粉剂植株和果实增幅分别为47.5%和76.1%,普绿通粉剂分别增加17.9%和66.2%。本研究表明,生防制剂可以替代化学农药用于草莓病害防治和有机生产。

一株兼具降解纤维素和抗草莓重茬病害能力细菌的筛选和应用

从腐熟牛粪中筛选兼具降解纤维素功能和抗草莓重茬病害功能的细菌,为草莓夏季高温闷棚时提供菌种资源。结果:筛选出1株有纤维素降解功能的细菌JN2,水解圈直径达14 mm;JN2对草莓灰霉菌、镰刀菌和拟盘多毛孢菌表现出强烈拮抗作用;离体叶片实验中,JN2对草莓灰霉病的防效达97%,盆栽试验也验证了JN2对草莓灰霉病有较高的防效;经形态特征、生理生化特征和16SrDNA测序,JN2被鉴定为解淀粉芽孢杆菌。

复合微生物菌肥KMM减缓苹果再植病害机制

为揭示木美土里复合微生物菌肥(Kimidori microbial manure,KMM)促进再植苹果树的生长及减缓苹果再植病的作用机制,采用土壤常规农业化学分析法和Illumma MiSeq高通量测序技术比较分析KMM和常规有机肥(对照)处理后再植苹果树的生长指标、理化因子、根际土壤酶活性以及细菌群落结构和功能的变化。结果表明,施用KMM后,果树的株高增长率、干径增长率、叶绿素含量、分枝个数和分枝长度等生长指标均显著升高,有机质含量显著增加,中性磷酸酶、脲酶、蔗糖酶和过氧化氢酶活性均显著提高,同时增加了再植土壤细菌群落的丰富度和多样性。从采集土壤中分离得到51株细菌并进行盆栽试验,其中经KMM-15、KMM-37和KMM-50菌株处理后海棠苗叶绿素含量、株高、茎粗均显著提高,经鉴定这3株菌株为贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis。表明春秋2次施用KMM提高了土壤有机质含量和酶活性,并重塑了根际土壤中细菌群落结构,进而缓解苹果再植病害发生程度,促进果树生长。

荧光假单胞菌SS101对苹果再植病害的生防效果

为明确荧光假单胞菌SS101对苹果再植病害的生防效果,采用平板对峙法和孢子萌发法研究了SS101菌株对9株来自不同苹果产区病原菌的抑制作用以及对盆栽海棠实生苗、海棠大苗和苹果树生长的影响,并测定了连续处理4年苹果树的产量。结果显示,SS101菌株对9株病原菌的菌丝生长抑制率为39.39%~72.00%,对孢子萌发抑制率为19.86%~51.77%;经SS101菌株处理后,海棠实生苗叶绿素含量、株高和鲜重均显著高于再植土处理,分别提高13.38%、19.39%和48.26%;经SS101菌株处理后,海棠大苗定植9个月后,茎粗净增长量为2.97 mm,增长率为214.05%,而再植土处理仅为114.02%;连续处理4年的苹果树平均单株产量比再植土处理提高139.46%,且消除了再植病害症状。研究表明,SS101菌株对苹果再植病害病原菌具有显著抑制作用,在田间对再植病害具有良好的防控效果。

复合微生物菌剂对苹果再植病害的生防效果测定及拮抗菌株鉴定

为探究复合微生物菌剂对苹果再植病害的生防效果,以苹果砧木实生海棠幼苗为试材,通过盆栽试验测试了木美土里复合微生物菌剂对苹果再植病害的防治效果及对再植海棠的促生作用,然后对该菌剂的可分离微生物进行了分离纯化,并以尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum菌株HS2为靶标菌,测试分离获得的10株菌株的拮抗效果,并对拮抗效果显著的1株真菌菌株和2株细菌菌株进行种类鉴定。结果表明,木美土里复合微生物菌剂对苹果再植病害的防治效果达87.78%;经该菌剂处理后,再植海棠苗的株高、茎粗、鲜重、干重及叶面积分别是对照处理的1.51、2.00、5.74、5.21和2.83倍,表明该菌剂有显著的促生作用。木美土里复合微生物菌剂对菌株HS2的抑制率达到68.59%,并从中分离到7株真菌菌株,3株细菌菌株。其中,拮抗效果高于80.00%的真菌菌株有1株,细菌菌株有2株。经鉴定,真菌菌株MMTL-1为哈茨木霉Trichoderma harzianum;细菌菌株BM-01和BM-03均为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens。

复合微生物菌肥对苹果再植病害调控及对根围土壤真菌群落结构的影响

为研究复合微生物菌肥对再植苹果幼树的影响,从再植土壤酶活性、真菌群落结构和功能的方面分析,探究复合微生物菌肥的作用机理。本研究设置了KMM和对照CK两个处理,再植苹果树于春秋两次分别施用复合微生物菌肥(KMM)和有机肥(CK)。通过土壤常规农业化学分析法和Illumma MiSeq高通量测序技术,系统研究了两个处理再植苹果树的生长、根围土壤酶活性以及真菌群落结构和功能的变化。试验结果表明,施用复合微生物菌肥显著提高了再植苹果幼树株高、干径、叶绿素、分枝个数和分枝长度;提高再植土壤酶活性(中性磷酸酶、脲酶、蔗糖酶和过氧化氢酶);降低再植土壤真菌群落丰富度,改变真菌群落结构。相对丰度高于1%的优势真菌属中有21个菌属与再植果树的5项生长参数具有相关性,并且在不同分类水平上具有一定的差异,缝壳菌属(Lophiostoma)、织球壳菌属(Plectosphaerella)、赤壳菌属(Nectria)和维希尼克氏属(Vishniacozyma)显著增加,丝孢菌属(Anguillospora)和假丝酵母菌属(Pseudeurotium)显著降低。通过对测序片段功能水平的分析,在二级功能水平上显著降低了真菌群落氨基酸、核苷和核苷酸的生物合成、电子转移、发酵、呼吸、CTP生物合成嘧啶脱氧核糖核酸功能序列的丰度值,共6种功能类群均与土壤酶活性呈负相关。施用复合微生物菌肥,改变了真菌群落结构,减弱真菌群落相关代谢的功能,提高土壤酶活性,促进再植苹果幼树的生长。