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esat6基因表达载体的构建及其在戈登链球菌中的表达
被引量:
4
1
作者
贾平
杜先智
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期350-354,共5页
为了构建结核分枝杆菌(MTb)esat6基因表达载体并在戈登链球菌GP251中进行分泌表达,以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板扩增esat6基因,将esat6基因TA克隆到pMD18-T,构建pMD18-esat6重组载体。酶切消化pMD18-esat6,将esat6基因亚克隆到质粒PS...
为了构建结核分枝杆菌(MTb)esat6基因表达载体并在戈登链球菌GP251中进行分泌表达,以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板扩增esat6基因,将esat6基因TA克隆到pMD18-T,构建pMD18-esat6重组载体。酶切消化pMD18-esat6,将esat6基因亚克隆到质粒PSMB104,生成PSMB104-esat6重组载体,用于转化感受态戈登链球菌表达菌株GP251。用Tricine-SDS-PAGE和Western印迹检测esat6蛋白的表达,并用ELISA技术检测该蛋白的分泌表达量。结果表明,酶切、PCR、测序及蛋白表达测定证实esat6基因表达载体构建成功,转化戈登链球菌表达菌株GP251后可分泌表达出相对分子质量约10kD的esat6蛋白,Western印迹证明蛋白有较好的免疫原性。esat6基因表达载体的成功构建并能在戈登链球菌GP251中进行分泌表达,为研究esat6的免疫原性奠定了一定的基础。
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关键词
戈登氏链球菌
黏膜疫苗
esat6
基因
原文传递
题名
esat6基因表达载体的构建及其在戈登链球菌中的表达
被引量:
4
1
作者
贾平
杜先智
机构
重庆医科大学附属第二医院
出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期350-354,共5页
基金
国家自然科学基金专项基金项目(No.30540051)
重庆市科委重大科技攻关项目(No.CSTC
2005AC5061)
文摘
为了构建结核分枝杆菌(MTb)esat6基因表达载体并在戈登链球菌GP251中进行分泌表达,以结核杆菌H37Rv基因组DNA为模板扩增esat6基因,将esat6基因TA克隆到pMD18-T,构建pMD18-esat6重组载体。酶切消化pMD18-esat6,将esat6基因亚克隆到质粒PSMB104,生成PSMB104-esat6重组载体,用于转化感受态戈登链球菌表达菌株GP251。用Tricine-SDS-PAGE和Western印迹检测esat6蛋白的表达,并用ELISA技术检测该蛋白的分泌表达量。结果表明,酶切、PCR、测序及蛋白表达测定证实esat6基因表达载体构建成功,转化戈登链球菌表达菌株GP251后可分泌表达出相对分子质量约10kD的esat6蛋白,Western印迹证明蛋白有较好的免疫原性。esat6基因表达载体的成功构建并能在戈登链球菌GP251中进行分泌表达,为研究esat6的免疫原性奠定了一定的基础。
关键词
戈登氏链球菌
黏膜疫苗
esat6
基因
Keywords
streptococcus gordonii
,
mucosa vaccine
,
esat6 gene
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
Q789 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
esat6基因表达载体的构建及其在戈登链球菌中的表达
贾平
杜先智
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
4
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