中药影响变形链球菌对唾液获得性膜粘附的研究

目的 研究不同传统中药提取物对变形链球菌在唾液获得性膜粘附的影响 ,进一步探讨中药防龋的可能机制。方法 采用唾液包被羟磷灰石 (S- HA )形成实验性获得性膜的体外模式 ,以变形链球菌作为试验菌株 ,用不同的药物提取物分别处理 S- HA和菌细胞 ,观察细菌对 S- HA的粘附情况。结果 两组试验中大部分试验药物均能抑制菌细胞对 S- HA的粘附 ,且随药物浓度的升高而逐渐增强。这些药物中 ,以五倍子的抑制作用表现更为显著 ,其在 1、2、4 mg/ ml时的抑制率可达 10 0 %。

不同浓度的葡萄糖对变形链球菌初始粘附能力的影响

目的研究不同浓度的葡萄糖对变形链球菌初始粘附能力的影响,同时观察高龋组、无龋组变形链球菌初始粘附能力的差别。方法选取高龋组、无龋组变形链球菌(血清c型)临床分离株各10株及1株参考株UA159,用唾液包被的羟基磷灰石(SHA)模拟口腔中牙面情况。各菌株分别在含3H的0.2%、1.0%、5.0%葡萄糖的液体培养基中培养,配成菌悬液。菌液与SHA作用90min,清洗、吸干,液体闪烁计数测量各样本中粘附于SHA的细菌的量。各变形链球菌菌株在不同浓度葡萄糖条件下对SHA的粘附能力以粘附量CPM值表示。结果变形链球菌高龋组分离株初始粘附能力明显高于无龋组分离株(P<0.05);同时变形链球菌在不同浓度的葡萄糖营养条件下其初始粘附能力也有统计学上的差别(P<0.05),5.0%葡萄糖组粘附力最强,0.2%葡萄糖组粘附力最低,1.0%葡萄糖组粘附力界于两者之间。结论①变形链球菌的初始粘附能力可能与龋病的发生有关;②葡萄糖可能与变形链球菌的初始粘附相关,在一定范围内,葡萄糖可能会促进变形链球菌的初始粘附。

白屈菜红碱对变形链球菌表面疏水性及黏附作用的影响

目的:测定白屈菜红碱对变形链球菌表面疏水性及黏附作用的影响,研究其对变形链球菌黏附的作用机制。方法:将白屈菜红碱对倍稀释为不同浓度的溶液,浓度范围为24.4～781.3μg/ml。采用微生物黏着碳氢化合物法(MATH)测定白屈菜红碱对变形链球菌的细胞表面疏水性,并测定不同浓度的白屈菜红碱溶液对变形链球菌在玻璃表面黏附作用的影响。使用SPSS13.0统计软件包对结果进行处理,各浓度组总体均数之间比较采用单因素方差分析。结果:变形链球菌表面疏水性随白屈菜红碱溶液浓度的升高而逐渐下降,各浓度实验组与对照组均数之间均具有高度显著性差异(P<0.01),24.4～195.3μg/ml4个浓度组之间均无显著性差异(P>0.05);变形链球菌对玻璃表面的黏附抑制率随白屈菜红碱浓度的升高逐渐增高,195.3μg/ml和390.6μg/ml2个浓度组与对照组和其余浓度组之间均有高度显著性差异(P<0.01)。结论:白屈菜红碱对变形链球菌细胞表面疏水性和黏附具有抑制作用,提示其具有良好的防龋应用前景。

氟保护漆对主要致龋链球菌黏附抑制作用的实验研究

目的:评估氟保护漆对变形链球菌和远缘链球菌体外黏附的影响,为氟保护漆的临床推广应用提供一定的理论依据。方法:在含5g/L、1g/L氟保护漆、5mg/L氟化钠、去离子水的心脑浸液培养基中分别连续培养变形链球菌和远缘链球菌,8d后测定各组中黏附于毛细管表面的变形链球菌量和远缘链球菌的重量,并进行统计学分析。结果:5g/L氟保护漆和1g/L氟保护漆组变形链球菌的平均黏附重量分别为8.61mg、9.46mg,差别无统计学意义(P>0.05);而远缘链球菌的平均黏附重量分别为8.82mg、9.83mg,差别有统计学意义(P<0.05);两种浓度的氟保护漆对两种致龋菌的单独黏附抑制作用均优于对照组,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:5g/L氟保护漆和1g/L氟保护漆对变形链球菌和远缘链球菌均有较好的黏附抑制作用,5g/L氟保护漆的黏附抑制作用更显著,具有深入研究价值。

蜂胶对变形链球菌的抑菌及粘附抑制实验

目的 测定蜂胶对变形链球菌的抑菌及粘附抑制作用效果 ,以探讨蜂胶防龋的机制。方法 ①用不同浓度的蜂胶溶液 ,采用杯碟法检测蜂胶溶液抑菌活性 ,并测出其最小抑菌浓度 ;②用 0 .0 4 %、0 .0 1 %蜂胶溶液采用毛细管法检测蜂胶对变形链球菌粘附抑制效果 ,设置空白对照及 2 %氟化钠阳性对照。结果 ①蜂胶溶液对变形链球菌有较强的抑菌作用 ,最小抑菌浓度为 0 .0 2 5 % ;② 0 .0 4 %、0 .0 1 %两个浓度的蜂胶溶液对变形链球菌的粘附抑制作用明显高于对照组。结论 蜂胶对变形链球菌有明显的抑菌及抑制变形链球菌粘附作用 。

5种天然药物对变形链球菌在唾液获得性膜粘附的影响

目的 研究大黄、槟榔、白芷、川芎和儿茶 5种天然药物对变形链球菌在唾液获得性膜粘附的影响。方法 采用唾液包被的羟磷灰石 (S- HA)形成实验性膜的体外模式 ,用天然药物处理 S- HA和变形链球菌 ,观察变形链球菌在 S- HA粘附的情况。结果 大黄、槟榔和川芎可明显抑制变形链球菌对 S- HA的粘附 ,且槟榔的抑制作用最为显著 ,而白芷对变形链球菌的粘附无明显影响 ,儿茶仅在处理变形链球菌时对其粘附有抑制作用。结论 大黄、槟榔、川芎和儿茶对变形链球菌在唾液获得性膜的粘附有一定的抑制作用 。

免疫牛乳清对变形链球菌粘附的影响

目的 :研究免疫乳清对变形链球菌蔗糖依赖性粘附的影响。方法 :用来源于葡糖基转移酶过表达株B 2 9 33免疫孕牛获得的免疫牛奶和从未免疫孕牛获得的对照牛奶 ,分别观察两种乳清在 5种不同剂量条件下的细菌粘附率 ,并用扫描电镜观察粘附的形态学变化。结果 :对照乳清在 5种剂量条件下 ,变形链球菌的粘附率基本无变化。免疫乳清随着剂量的增加 ,细菌的粘附率呈下降趋势 ,从 10 0 μl时的 84 37% ,下降至 90 0 μl时的 5 8 5 9%。扫描电镜下见免疫乳清组细菌的细胞清晰 ,基质少。对照乳清组细菌的细胞则被大量的胶冻状基质包裹。结论 :免疫乳清可以抑制变形链球菌的蔗糖依赖性粘附。

壳寡聚糖对变形链球菌黏附的影响

目的:研究壳寡聚糖对变形链球菌蔗糖依赖性黏附的影响。方法:使用不同浓度的壳寡聚糖与变形链球菌S.mutansATCC25175共同培养,计算壳寡聚糖对变形链球菌的黏附抑制率的影响,同时扫描电镜下观察变形链球菌在玻片的形态学特征。结果:变形链球菌对玻片的黏附率随培养基中壳寡聚糖浓度的升高而下降。扫描电镜图片显示壳寡聚糖组细菌间基质少,菌细胞清晰。而空白组细菌则包裹有较多的胶冻状基质。结论:壳寡聚糖可以有效抑制变形链球菌的蔗糖依赖性黏附。

柠檬精油、柠檬烯、茶多酚对变形链球菌表面疏水性及黏附的影响

目的:研究天然植物成分柠檬精油(LEO)、柠檬烯(LIM)及茶多酚(TP)对变形链球菌(S.mutans)细菌表面疏水性及黏附能力的影响。方法:取最小抑菌浓度(MIC)以下浓度作为实验浓度;采用微生物黏着碳氢化合物法(MATH),测定S.mutans表面疏水性;采用96孔板结晶紫染色法,评价S.mutans的黏附。结果:LEO、LIM、TP在低于最小抑菌浓度(MIC)时,对S.mutans表面疏水性及粘附具有抑制作用;在一定范围内其抑制作用随浓度增大而逐渐增加(P<0.05);1/2 MIC和1/20MIC时LEO抑制表面疏水性的作用强于LIM和TP(P<0.05)。结论:LEO具有防龋应用前景。

变形链球菌表面蛋白V区、P区及C末端遗传多态性与龋病发生关系的研究

目的 了解变形链球菌表面蛋白 V区、P区及 C末端遗传多态性与其粘附性能的关系。方法 实验菌株选自本实验室前期工作所获得的粘附力较强和较弱的血清 c型变形链球菌临床分离株 ,提取全菌 DNA ,经PCR分别扩增表面蛋白 V区、P区编码基因 spa P- pv(2 0 6 0～ 315 7bp)、C末端编码基因 spa P- c(4 0 0 3～ 4 85 1bp)后 ,用限制性内切酶 Alu 进行限制性片段长度多态性分析。结果 两组不同粘附力的变形链球菌 (血清 c型 )临床分离株全菌 DNA扩增产物 spa P- pv经 Alu 酶切后 ,出现了两种基因型 a、b。两种基因型在不同粘附力菌株的分布不同 (P<0 .0 5 ) ,a型在低粘附力菌株中的比例高于高粘附力菌株 ,而 b型在高粘附力菌株中的比例高于低粘附力菌株。 spa P- c经 Alu 酶切后 ,共呈现两种基因型 c、d。 d型在高、低粘附力的菌株中各占 1例 ,其分布无统计学差异。结论 spa P-

甘草水煎剂对变异链球菌黏附影响的体外实验

目的初步探讨甘草水煎剂对体外培养的变异链球菌黏附能力的影响及其机制。方法将甘草用水煎煮制备成水煎剂,按所含甘草的不同质量浓度25、50、100 g.L-1分为A、B、C三组,不含甘草水煎剂的设为对照组。实验在玻璃试管中进行,分别收集每管中紧密黏附、非黏附和松散黏附的细菌,计算每组细菌的黏附率;用蒽酮法测定各组细菌合成水不溶性胞外多糖的含量。结果 A组、B组、C组和对照组的细菌黏附率分别为70.2%、40.1%14.2%、87.1%,各组细菌合成的水不溶性胞外多糖的质量浓度分别为0.28、0.25、0.13、0.30 g.L-1。结论甘草水煎剂能够明显抑制变异链球菌对光滑表面的黏附,该抑制作用存在剂量-效应关系,可能与其抑制细菌水不溶性胞外多糖的合成有关。

高龋及无龋儿童变形链球菌分离株的蔗糖粘附能力比较

目的:探讨高龋和无龋儿童变形链球菌(变链菌)临床分离株的蔗糖依赖性粘附能力。方法:选取本实验室从10例高龋儿童和10例无龋儿童(3￣5岁)牙菌斑内分离、鉴定所得的60株变链菌临床分离株进行研究。采用紫外分光光度计,检测来自高龋儿童(dmfs≥6)的39株和无龋儿童(dmfs=0)的21株变链菌在含糖培养基中对玻壁的粘附情况。采用SPSS12.0软件包进行单因素方差分析,比较高龋儿童和无龋儿童之间牙菌斑内变链菌分离株的玻壁粘附能力。结果:在含1%蔗糖的培养基中,高龋组变链菌分离株对玻壁的粘附比平均值为(55.49+26.16)%,无龋组变形链球菌分离株对玻壁的粘附比平均值为(27.01+18.39)%,2组间差异具有显著性,P<0.01。结论:在含蔗糖环境中,分离自高龋儿童牙菌斑的变链菌株对玻壁的粘附能力高于来自无龋儿童的变链菌分离株,提示变链菌临床分离株的粘附能力与其致龋力相关。

葡萄糖浓度对变形链球菌spaP基因表达的影响

目的观察不同浓度葡萄糖对变形链球菌初始粘附相关基因spaP表达的影响。方法变形链球菌分别在0.2、1.0、5.0%葡萄糖条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌初始粘附相关基因spaP的表达情况。结果在0.2%～5.0%葡萄糖浓度范围内,粘附较强的变形链球菌菌株spaP基因的表达随糖浓度的增加而明显增强,粘附较弱的菌株也呈现这样的趋势,但差异不具有统计学意义。粘附较强的变形链球菌菌株其spaP基因的表达总体上高于粘附较弱的菌株。结论在一定浓度范围内(0.2%～5.0%),葡萄糖浓度升高利于变形链球菌spaP基因表达可能是其促进变形链球菌初始粘附的机制之一;变形链球菌对牙面的粘附力可能与其spaP表达量有关。

变形链球菌粘附调节基因研究进展

变形链球菌是主要致龋菌之一。粘附是变链菌形成生物膜的初期阶段,也是必经阶段,是公认的细菌四大致龋条件(细菌的粘附、生物膜形成能力、菌细胞代谢碳水化合物能力及细菌对不断波动环境的适应能力)之一。分析与粘附相关的变链菌基因,将有助于我们从分子水平上探索变链菌在生物膜环境中的致龋机理,为从基因水平探索和丰富龋病病因学及龋病防治提供理论依据。

酸性环境对变形链球菌spaP基因表达的影响

目的:观察酸性环境对变形链球菌初始黏附相关基因spaP表达的影响。方法:变形链球菌分别在初始pH为5.5和7.0的条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌初始黏附相关基因spaP的表达。结果:pH5.5的酸性环境中变形链球菌spaP基因表达显著下调(P<O.05);黏附较强的变形链球菌菌株无论在中性还是酸性的环境中,其spaP基因的表达总体上高于黏附较弱的菌株。结论:酸性环境抑制变形链球菌spaP基因表达可能是酸性环境中变形链球菌初始黏附下降的机制之一;变形链球菌对牙面的黏附力可能与其spaP表达的量有关。

变异链球菌耐氟菌株的致龋能力

长期应用氟化物会导致变异链球菌耐氟菌株的产生,此变异是否导致其致龋能力发生变化,并且对于氟化物防龋是否出现新的影响,国内外学者进行了大量的研究。本文就变异链球菌耐氟菌株的产酸能力、脱矿能力、耐酸能力、黏附能力和糖酵解能力等研究进展作一综述。

稻芽粗提物抑制变异链球菌的体外实验研究

目的:观察稻芽粗提物对变异链球菌的抑制作用。方法:采用醇提法制取稻芽的药物粗提物,并测量其在不同药物浓度下对变异链球菌生长、黏附、产酸等作用的抑制效果。结果:稻芽粗提物抑制变异链球菌(变链菌)体外生长的最低抑菌浓度(MIC)值为6.25 mg/mL,当稻芽粗提物浓度≥0.78 mg/mL时有较明显的抑制变链菌黏附的作用,当稻芽粗提物浓度≥0.39 mg/mL即有较明显的抑制变链菌产酸的作用。结论:稻芽粗提物对变异链球菌有一定的抑制作用。

赤藓糖醇和木糖醇对变异链球菌黏附的影响

目的对比赤藓糖醇和木糖醇对变异链球菌黏附的影响。方法变异链球菌分别在阴性对照组以及含质量分数2%、4%、6%、8%赤藓糖醇和木糖醇的TPY液体培养基试管内厌氧培养24 h,用磷酸缓冲盐溶液(PBS)冲洗含变异链球菌生物膜的试管3次,加入PBS超声震荡。分别收集各组原液并将其稀释至10%,各取50μL分别接种于TPY固体培养基中,厌氧培养48 h,行平皿菌落计数并绘制变异链球菌集落生成单位(CFU)计数曲线图。结果赤藓糖醇组和木糖醇组的变异链球菌CFU计数低于阴性对照组,且差异有统计学意义;随着赤藓糖醇和木糖醇质量分数的增加,变异链球菌的CFU计数逐渐降低,且差异有统计学意义。在同一质量分数下,木糖醇组变异链球菌的CFU计数少于赤藓糖醇组。在质量分数为2%和4%时,组间差异无统计学意义;在质量分数为6%和8%时,组间差异有统计学意义。结论赤藓糖醇和木糖醇对变异链球菌的黏附有抑制作用,随其质量分数的增加,抑制效果增强。在质量分数为2%和4%时,赤藓糖醇和木糖醇对变异链球菌黏附的抑制作用没有明显的差异,在质量分数为6%和8%时,木糖醇对变异链球菌黏附抑制效果优于赤藓糖醇。

变形链球菌粘附与义齿基托材表面粗糙度的关系

为了探讨变形链球菌 (简称变链菌 )粘附与义齿基托材表面粗糙度的关系 ,体外研究变链菌在不同粗糙度基托材试片上的粘附 ,并通过荧光显微镜计数观察 ,用方差分析法进行统计学分析。结果发现表面粗糙度高的义齿基托材表面变链菌粘附量高于粗糙度低的 (P <0 .0 5 )。提示应重视提高义齿表面光洁度 ,以减少菌斑附着。

变形链球菌葡糖基转移酶过表达株粘附模式的扫描电镜观察

通过对变形链球菌野生株ＭＴ８１４８及其ＧＴＦＩ过度表达株作蔗糖依赖性粘附实验，发现随着起始接种菌量的增加，所构建的变链ＧＴＦＩ过度表达株蔗糖依赖性粘附能力明显下降，而ＭＴ８１４８无显著变化。扫描电镜揭示，这是由于ＧＴＦＩ过表达株的粘附模式发生了改变，即由错落有序的立体网状结构转变成片层状结构所致。作者推测这可能与葡聚糖合成的增加有关。