【目的】为了调查甘肃省天水市张家川县的猪链球菌型Ⅱ及毒力基因流行情况,为本市及全省的猪链球菌疫情预警和防控措施制定提供参考。【方法】于2020年1月至2020年12月年从甘肃省天水市张家川县10个规模化猪场定期采集267份猪血清样本,...【目的】为了调查甘肃省天水市张家川县的猪链球菌型Ⅱ及毒力基因流行情况,为本市及全省的猪链球菌疫情预警和防控措施制定提供参考。【方法】于2020年1月至2020年12月年从甘肃省天水市张家川县10个规模化猪场定期采集267份猪血清样本,利用从临床样本中分离得-到的18株猪链球菌Ⅱ型病原菌,通过ELISA抗体检测试剂盒特异性检测猪链球菌和猪链球菌Ⅱ型血清抗体水平,并通过PCR测定溶菌酶释放蛋白(muramidasereleased protein,MRP)、胞外因子(extracellular protein fateror,EPF)和溶血素(suilysin,SLY)基因的表达水平。【结果】267份样品中猪链球菌阳性率为26.2%(70/267),猪场阳性率为60%(6/10)。18株猪链球菌Ⅱ型检测到7种毒力基因型。其中,epf^(+)mrp^(+)sly^(+)是此地区优势毒力基因型,其次是epf^(+)mrp^(-)sly^(+)基因型、epf^(+)mrp^(-)sly^(-)基因型和epf^(-)mrp^(+)sly^(-)基因型。【结论】2020年猪链球菌病在甘肃省天水市张家川县流行情况较为严重。展开更多
【目的】猪链球菌2型(Streptococcus suis type2,SS2)为一种重要的人兽共患病病原,次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)为SS2新近鉴定的一个蛋白,本文旨在体外构建基因缺失株明确IMPDH与SS2致病力的相关性。【方法】选用自杀性质粒,通过体外构...【目的】猪链球菌2型(Streptococcus suis type2,SS2)为一种重要的人兽共患病病原,次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)为SS2新近鉴定的一个蛋白,本文旨在体外构建基因缺失株明确IMPDH与SS2致病力的相关性。【方法】选用自杀性质粒,通过体外构建具有同源臂的重组自杀性质粒,电转化进入SS2,经同源重组,获得impdh基因缺失株。通过接种不同敏感动物,明确缺失株致病力的变化。【结果】经过PCR鉴定,impdh基因被氯霉素(cat)选择标记基因表达盒所代替,Western blot鉴定结果显示,IMPDH单抗没有检测到相应的IMPDH蛋白。SS2-H(△IMPDH)对6种糖的发酵能力降低、生长速度减慢、产酸减少一个pH滴度和对本动物和试验动物的致病力减低。SS2-H(△IMPDH))对于Balb/c小鼠LD50是8.3×108CFU,而SS2-H的LD50是3.36×108CFU;对新西兰家兔只引发体温升高(高于正常体温至少1℃),不致死;对于断奶仔猪,只表现临床症状,但不引起死亡。【结论】本研究成功获得IMPDH缺失株,即SS2-H(△IMPDH),并且明确IMPDH的缺失导致了SS2对仔猪、家兔和Balb/c小鼠的致病力降低。展开更多
文摘【目的】为了调查甘肃省天水市张家川县的猪链球菌型Ⅱ及毒力基因流行情况,为本市及全省的猪链球菌疫情预警和防控措施制定提供参考。【方法】于2020年1月至2020年12月年从甘肃省天水市张家川县10个规模化猪场定期采集267份猪血清样本,利用从临床样本中分离得-到的18株猪链球菌Ⅱ型病原菌,通过ELISA抗体检测试剂盒特异性检测猪链球菌和猪链球菌Ⅱ型血清抗体水平,并通过PCR测定溶菌酶释放蛋白(muramidasereleased protein,MRP)、胞外因子(extracellular protein fateror,EPF)和溶血素(suilysin,SLY)基因的表达水平。【结果】267份样品中猪链球菌阳性率为26.2%(70/267),猪场阳性率为60%(6/10)。18株猪链球菌Ⅱ型检测到7种毒力基因型。其中,epf^(+)mrp^(+)sly^(+)是此地区优势毒力基因型,其次是epf^(+)mrp^(-)sly^(+)基因型、epf^(+)mrp^(-)sly^(-)基因型和epf^(-)mrp^(+)sly^(-)基因型。【结论】2020年猪链球菌病在甘肃省天水市张家川县流行情况较为严重。
文摘【目的】猪链球菌2型(Streptococcus suis type2,SS2)为一种重要的人兽共患病病原,次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)为SS2新近鉴定的一个蛋白,本文旨在体外构建基因缺失株明确IMPDH与SS2致病力的相关性。【方法】选用自杀性质粒,通过体外构建具有同源臂的重组自杀性质粒,电转化进入SS2,经同源重组,获得impdh基因缺失株。通过接种不同敏感动物,明确缺失株致病力的变化。【结果】经过PCR鉴定,impdh基因被氯霉素(cat)选择标记基因表达盒所代替,Western blot鉴定结果显示,IMPDH单抗没有检测到相应的IMPDH蛋白。SS2-H(△IMPDH)对6种糖的发酵能力降低、生长速度减慢、产酸减少一个pH滴度和对本动物和试验动物的致病力减低。SS2-H(△IMPDH))对于Balb/c小鼠LD50是8.3×108CFU,而SS2-H的LD50是3.36×108CFU;对新西兰家兔只引发体温升高(高于正常体温至少1℃),不致死;对于断奶仔猪,只表现临床症状,但不引起死亡。【结论】本研究成功获得IMPDH缺失株,即SS2-H(△IMPDH),并且明确IMPDH的缺失导致了SS2对仔猪、家兔和Balb/c小鼠的致病力降低。
