林肯链霉菌谷氨酰胺合成酶的酶学性质

在分离纯化的基础上,报道了pH、温度和金属离子对林肯链霉菌(Streptomyceslincolnensis)Z-512谷氨酸胺合成酶(GS)活力的影响及GS底物专一性的研究结果.在动力学性质的研究中,发现林肯链霉菌GS在生物合成反应系统中,对底物NH_4CI的饱和曲线不遵守米氏方程.Hill作图呈两相曲线.在NH_4CI浓度低的情况下,Hill系数大于1,具有正协同效应;当NH_4CI浓度增加到一定程度时,Hill系数小于1,具有负协同效应.这说明NH_4CI不仅作为林肯链霉菌GS的底物,而且作为一种效应物调节GS的活性.林肯链霉菌GS对底物Glu及ATP的饱和曲线遵守米氏方程.在不同的激活离子存在下,GS对Glu、ATP的Km值也不同.

林肯链霉菌谷氨酰胺合成酶活力调节的研究

对不同氮源生长条件下林肯链霉菌无细胞粗提液中谷氨酰胺合成酶 (GS)的研究结果表明 ,高浓度NH+4阻遏了GS的生物合成。从不同氮源生长条件下林肯链霉菌中分离纯化了GS ,其性质没有差别。以受腺苷化调节的产气克雷伯氏菌GS作对照 ,林肯链霉菌GS没有明显的氨休克作用 ,经蛇毒磷酸二酯酶处理后 ,其活力没有变化。这些结果都说明林肯链霉菌GS不存在腺苷化共价修饰这一调节方式。反馈抑制作用是林肯链霉菌GS的一种重要的调节方式 ,这种抑制作用是以累积的方式进行的 ,这表明各种抑制剂对GS作用位点不同 ,各种抑制剂对GS的抑制作用是相互独立的。由此推测 ,林肯链霉菌GS是一种变构酶。

林肯链霉菌林肯变种谷氨酰胺合成酶的研究(英文)

林肯链霉菌林肯变种是林可霉素的产生菌，研究中发现其菌丝体中谷氨酰胺合成酶（ Ｇ Ｓ）的比活力与林可霉素的生物合成存在正相关性．在此基础上，报道了 Ｇ Ｓ的分离纯化、分子特征、酶学性质和活力调节特性．采用硫酸铵分级沉淀、 Ｄ Ｅ５２ 离子交换层析、 Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ６ Ｂ凝胶过滤等方法，从林肯链霉菌林肯变种中分离纯化了 Ｇ Ｓ，用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ）鉴定为单一组分．以梯度 Ｐ Ａ Ｇ Ｅ 和凝胶过滤法测得 Ｇ Ｓ的相对分子质量为 ６６０ ０００， Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ测得其亚基相对分子质量为５５ ０００，表明该酶由 １２ 个相同的亚基构成． Ｍｇ２＋ 或 Ｍｎ２＋ 作为辅助因子对 Ｇ Ｓ的催化活性是必需的．反馈抑制是 Ｇ Ｓ的一种重要调节方式，这种抑制作用是以累积的方式进行的，这表明各种代谢物对 Ｇ Ｓ的作用位点不同，它们对 Ｇ Ｓ的抑制作用是相互独立的．以受腺苷化去腺苷化调节的产气克雷伯氏菌 Ｇ Ｓ作对照，研究发现林肯链霉菌林肯变种 Ｇ Ｓ没有明显的氨休克作用，且经蛇毒磷酸二酯酶处理后，其活力没有变化．这些结果都说明林肯链霉菌林肯变种 Ｇ Ｓ不存在腺苷化共价修饰这一调节方式．另外，对不同氮源生长条件下林肯链霉菌林肯变种无细?