深海链霉菌SCSIO 1071中聚酮合酶基因簇Cluster 46编码产物探究

目的 对南海深海来源链霉菌Streptomyces olivaceus SCSIO 1071中新颖I型聚酮合酶基因簇Cluster46及其编码产物进行探究。方法 通过生物信息学手段对基因簇Cluster 46的基因组成进行分析;采用PCRtargeting策略构建聚酮合酶基因orf27和LuxR家族转录调控基因orf46双交换阻断突变株;通过高效液相色谱法(HPLC)分析野生株和突变株发酵产物的差异,检测粗提物对3株多重耐药(multiple drug resistant,MDR)菌Staphylococcus aureus CCARM 3090、Enterococcus faecalis CCARM 5172、Enterococcus faecium CCARM 5203的抑菌活性。结果 得到了Δorf27和Δorf46双交换阻断突变株;HPLC分析结果表明,相比较野生株,Δorf27和Δorf46突变株中化合物峰1~10不再产生;突变株发酵液粗提物对3株MDR菌抑菌活性较野生株明显降低;液相色谱-质谱(LC-MS)数据和紫外(UV)数据表明化合物峰1~10可能为dixiamycins类化合物。结论 orf27和orf46的阻断间接影响了具有抗MDR菌活性的化合物峰1~10的产生,为挖掘S. olivaceus SCSIO 1071中新颖活性次级代谢产物奠定了基础。