来源于深海链霉菌Streptomyces sp.OUCMDZ-4112的吡咯生物碱

目的分离鉴定深海来源放线菌Streptomyces sp.OUCMDZ-4112的活性天然产物。方法采用硅胶色谱,凝胶色谱及高效液相色谱(HPLC)等常规分离纯化手段对菌株的天然产物进行分离、纯化;运用核磁共振、CD、紫外、红外和旋光等方法鉴定所得化合物的结构;采用MTT法和CCK-8法评价化合物的细胞毒活性、对硝基苯基-α-吡喃葡萄糖苷(PNPG)法评价化合物的α-糖苷酶抑制活性。结果从深海沉积物来源的链霉菌OUCMDZ-4112的发酵产物中分离鉴定了2个新的吡咯生物碱:S(+)-2-甲氧基-4-氧亚基-4-(2-吡咯基)丁酰胺(1)和R(-)-2-甲氧基-4-氧亚基-4-(2-吡咯基)丁酰胺(2)、以及2个已知的灵菌红素(PGs):streptoriubin B(3)和undecylprodigiosin(4)。化合物3和4对K562肿瘤细胞株具有强细胞毒活性,IC50分别为0.60μmol/L和0.01μmol/L(阿霉素的IC50为0.43μmol/L);同时外消旋1/2和化合物3、4具有α-糖苷酶抑制活性,IC50值分别为2.61、0.082和0.92mmol/L(阿卡波糖的IC50为1.12mmol/L)。结论本文首次报道了PGs类化合物3和4的α-糖苷酶抑制活性;作为中间产物,新化合物1和2的分离鉴定,证明了文献中PGs的生合成途径。

海洋来源链霉菌OUCMDZ-3434中wblA基因的功能

【背景】Streptomyces sp. OUCMDZ-3434分离自山东青岛栈桥浒苔样品,其次级代谢产物Wailupemycin类化合物具有良好的α-糖苷酶抑制活性,但产量很低,影响了其进一步研发。【目的】建立海洋来源链霉菌Streptomyces sp. OUCMDZ-3434菌株的遗传转化系统,通过阻断全局性调控基因wblA探究Wailupemycin类化合物产量变化。【方法】以p SET152为载体,采用大肠杆菌-链霉菌属间接合转移策略建立了Streptomycessp.OUCMDZ-3434的遗传转化方法。采用PCR-Targeting策略构建了wblA基因阻断突变株,通过HPLC分析野生型和突变株发酵产物的差异并对表型差异进行显微形态观察。【结果】建立了Streptomyces sp. OUCMDZ-3434遗传转化系统,构建了wblA基因阻断突变株,与野生株相比,突变株发酵产物中Wailupemycin G产量提高了3倍,同时丧失了产生孢子的能力。【结论】在Streptomycessp.OUCMDZ-3434中wblA对Wailupemycin类化合物生物合成起到了负调控作用,同时参与调控孢子形成,本研究为采用遗传改造策略提高Wailupemycin G产量提供了参考。