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玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因克隆、表达及功能鉴定
被引量:
6
1
作者
黄英
林芳
+5 位作者
雷攀先
梁甲元
李雪
杜丽琴
黄日波
韦宇拓
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期11-16,共6页
目的:克隆玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因(Srt)使其在大肠杆菌XL10-Gold中高效表达,并对重组酶的酶学特性进行研究。方法:利用PCR技术从玫瑰链霉菌中克隆到一段长1 704bp的海藻糖合成酶基因(Srt),构建重组表达质粒pSE380-Srt-treS,将其转...
目的:克隆玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因(Srt)使其在大肠杆菌XL10-Gold中高效表达,并对重组酶的酶学特性进行研究。方法:利用PCR技术从玫瑰链霉菌中克隆到一段长1 704bp的海藻糖合成酶基因(Srt),构建重组表达质粒pSE380-Srt-treS,将其转化大肠杆菌XL10-Gold中诱导表达,对重组纯酶进行SDS-PAGE分析及酶学特性测定。结果:SDS-PAGE显示在65kDa处有明显单一蛋白条带。该酶可催化麦芽糖和海藻糖之间的可逆反应,海藻糖得率达82%,且含有很低的副产物葡萄糖(5%左右)。最适反应温度和pH分别为30℃、7.5,Cu2+、Zn2+和Tris能明显抑制酶活力。该酶还可催化蔗糖生成一种无龋齿,适合糖尿病患者食用的糖类-海藻酮糖。结论:成功克隆表达了一个海藻糖合成酶基因,该酶转化率高,副产物较少,为工业酶法生产海藻糖奠定基础。
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关键词
玫瑰链霉菌
海藻糖合成酶
克隆表达
酶学性质
原文传递
题名
玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因克隆、表达及功能鉴定
被引量:
6
1
作者
黄英
林芳
雷攀先
梁甲元
李雪
杜丽琴
黄日波
韦宇拓
机构
广西大学生命科学与技术学院
亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室
广西科学院
出处
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期11-16,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目("海藻糖合成酶底物特异性的关键氨基酸的研究"
31160311)资助
+2 种基金
广西科学与研究开发计划科技攻关与新产品试制项目("生物法转化木薯淀粉生产低聚麦芽糖的关键技术研究"
11107008-3)
广西研究生教育创新计划项目(YCBZ2012008)资助
文摘
目的:克隆玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因(Srt)使其在大肠杆菌XL10-Gold中高效表达,并对重组酶的酶学特性进行研究。方法:利用PCR技术从玫瑰链霉菌中克隆到一段长1 704bp的海藻糖合成酶基因(Srt),构建重组表达质粒pSE380-Srt-treS,将其转化大肠杆菌XL10-Gold中诱导表达,对重组纯酶进行SDS-PAGE分析及酶学特性测定。结果:SDS-PAGE显示在65kDa处有明显单一蛋白条带。该酶可催化麦芽糖和海藻糖之间的可逆反应,海藻糖得率达82%,且含有很低的副产物葡萄糖(5%左右)。最适反应温度和pH分别为30℃、7.5,Cu2+、Zn2+和Tris能明显抑制酶活力。该酶还可催化蔗糖生成一种无龋齿,适合糖尿病患者食用的糖类-海藻酮糖。结论:成功克隆表达了一个海藻糖合成酶基因,该酶转化率高,副产物较少,为工业酶法生产海藻糖奠定基础。
关键词
玫瑰链霉菌
海藻糖合成酶
克隆表达
酶学性质
Keywords
streptosporangium roseum
trehalose synthase
cloning and expression
characteristics
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
Q786 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
玫瑰链霉菌海藻糖合成酶基因克隆、表达及功能鉴定
黄英
林芳
雷攀先
梁甲元
李雪
杜丽琴
黄日波
韦宇拓
《生物技术》
CAS
CSCD
北大核心
2013
6
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