Induced Mutation for Developing Mutant Rice Lines Tolerant to the Parasitic Weed Striga asiatica (L.) Kuntze

This work aims to screen mutant rice lines tolerant to Striga asiatica.Two rainfed sensitive rice varieties B22 and F154 were used.Plants survival rates of the two parents were significantly lower respectively(9.74a and 11.83a)than those of mutant lines(55.36c to 74.36b);Striga plants emergence/pot were significantly higher for the parents(13.96c and14.89c)compared to the mutants(0.12a to 1.5b);the infection rate of parents(7.37b;7.86b)was higher compared to the mutants(2.27a to 2.74a);fertility rate/plant of parents was lower(20.98%b;22.29%b)but much higher than mutants(72.19%b to 78.35%b);the average panicle number/plant of parents was significantly lower(0.5a;1a)than those of mutants(1.5b to 2.4bc)and the 100 g grain weight of parents are lower(2.35a;2.56a)than those of mutants(3.19b to 3.23b).The culture of those mutant lines may increase rice production and contribute to enhancing food security in Madagascar.

A new triterpene and a saponin from Centella asiatica

A new triterpene and a saponin, named 2α,3β23-trihydroxyurs-20-en-28-oic acid （1） and 2α,3β,23-trihydroxyurs-20-en-28-oic acid O-α-L-rhanmopyranosyl-（1→4）-O-β-D-glucopyranosyl-（1→6）-O-β-D-glucopyranosyl ester （2）, have been isolated from the aerial part of CenteUa asiatica. Their structures were elucidated by spectral methods, including 2D-NMR spectra.

独脚金总黄酮的提取工艺优化及体外抗氧化活性分析

目的:优化独脚金总黄酮的提取工艺并对其抗氧化活性进行分析。方法:在单因素试验基础上,以料液比、提取温度、乙醇体积分数、提取时间和提取次数为影响因素,选择独脚金总黄酮的提取率作为评价指标,再采用正交设计试验和数据分析得出最优提取工艺。此外,以维生素C为对照,研究其清除DPPH、羟自由基和铁离子的还原力。结果:正交试验结果表明,独脚金中总黄酮最佳提取工艺为A1B3C3D3,即乙醇浓度55%、料液比1:50 g/mL、提取温度70℃;在最佳条件下测得独脚金总黄酮总提取率平均值为6.325%。独脚金总黄酮具有一定的抗氧化能力,对DPPH自由基和羟自由基最大清除率为89.53%和58.52%,最大还原力为0.021。结论:正交试验工艺简单可行,可用于独脚金中总黄酮的提取,为其资源开发利用提供实验依据。

独脚金黄酮类化学成分研究

目的:对玄参科植物独脚金进行化学成分的分离与鉴定。方法:采用色谱分离技术进行分离纯化,通过波谱分析鉴定其结构。结果:从独脚金中分离得到6个化合物,分别为:芹菜素-7-半乳糖醛酸苷(Ⅰ)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(Ⅱ)、槲皮苷(Ⅲ)、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(Ⅳ)、芹菜素(Ⅴ)、金圣草素(Ⅵ)。结论:化合物Ⅰ～Ⅳ为首次在该植物中分离得到。

聚酰胺对独脚金总黄酮的纯化工艺研究

目的研究聚酰胺分离纯化独脚金总黄酮的工艺条件。方法以紫外可见分光光度法测定独脚金样品溶液中总黄酮的含量为指标,考察多个工艺参数。结果聚酰胺对独脚金的总黄酮有良好的吸附作用,其吸附分离工艺条件的药液浓度为1.12～2.24mg/mL,以2BV/h吸附速率进行吸附,95%乙醇250mL洗脱效果最佳。结论该方法简单易行,分离效果良好,适于独脚金中总黄酮的分离纯化。

独脚金转录组特征分析

【目的】获取独脚金[Striga asiatica(L.)O. Kuntze.]的转录组信息特征。【方法】提取独脚金叶片和茎的总RNA、建库、测序、组装,以注释和比对等生物信息分析技术得到独脚金转录组的遗传信息。【结果】共获得38 096 466个高质量Reads,通过de novo组装获得41 918条Unigenes,N50长度为1 754 bp,平均长度1 029 bp。共有27 375条Unigenes(占65.31%)在CDD、PFAM、KEGG、KOG、GO、NR、NT等数据库中得到注释。其中NR数据库注释到27 187条Unigenes,在KEGG中注释到5 331条Unigenes,涉及284条代谢通路。在独脚金中共鉴定到30条Unigenes涉及黄酮类生物合成,同时还鉴定到778个转录因子(TFs)。采用微卫星识别软件(MISA)对组装的1 000 bp以上的Unigenes分析发现,13 107条Unigenes包含17 036个简单重复序列(SSR)位点。【结论】利用转录组数据分析为独脚金的重要功能基因鉴定和次生代谢通路的挖掘奠定了研究基础。

独脚金的高效液相色谱指纹图谱研究

目的:建立独脚金药材的指纹图谱分析方法。方法:采用反相高效液相色谱法,Dikma(Diamonsil^(TM) C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-2%甲酸水溶液系统,梯度洗脱,检测波长340nm。结果:建立了独脚金药材的HPLC指纹图谱,确立了独脚金药材指纹图谱中的8个共有峰,计算出10批独脚金药材指纹图谱的相似度。结论:所建立的HPLC指纹图谱有很好的精密度、重复性和稳定性,能够用于独脚金药材的质量控制。

独脚金药材的质量标准

目的:初步建立独脚金药材的质量标准。方法:采用薄层色谱对独脚金进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定独脚金中芹菜素的含量。结果:薄层色谱分离效果好、斑点清晰;芹菜素对照品的进样量在1.25～12.5μg(r=0.999 7)范围内峰面积积分值呈良好线性关系;平均加样回收率为98.71%,RSD=1.56%(n=6)。结论:所建立的质量标准有利于对独脚金药材的质量控制。

独脚金配方颗粒、水煎剂、饮片特征图谱的比较研究

目的比较独脚金配方颗粒、水煎剂、饮片的HPLC特征图谱,为其质量控制提供可靠的方法。方法采用高效液相色谱法测定,Inertsil ODS-SP色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^(-1);柱温:35℃;检测波长:340 nm。结果初步建立了独脚金配方颗粒、水煎剂、饮片的HPLC特征图谱。并采用国家药典委员会《中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件》(2008版)进行数据处理。确定了独脚金配方颗粒7个特征峰,鉴别了2个黄酮类特征峰(木犀草素、芹菜素),且均可在其水煎剂、饮片中得到追溯。结论采用HPLC法所建立的独脚金配方颗粒特征图谱,具有配方颗粒、水煎剂、饮片成分的可追溯性,为全面控制独脚金配方颗粒的质量提供方法。

独脚金的化学成分研究

为研究玄参科植物独脚金(Striga asiatica(L.)O.K.)全草的化学成分,采用硅胶柱色谱、凝胶色谱等方法进行化学成分的分离纯化,通过理化性质和波谱数据(如核磁共振、红外光谱、质谱等)进行结构鉴定。结果表明:分离鉴定了到19个化合物,分别为(-)-threo-guaiacyl-glycerol-8-O-4'-(coniferyl alcohol) ether(1),3β-hydroxyolean-12-en-11-one acetate(2),2α, 3α, 19α, 23-四羟基-乌索烷-12-烯-28-O-β-D-葡萄糖苷(3),olean-12-ene-3β,7β,15α,28-tetraol(4),黄芩素6,4'-二甲醚(5),金圣草黄素(6),金圣草黄素-7-O-葡萄糖苷(7),rhamnopyranosyl vanilloyl(8),5, 3', 4'-三羟基-3,7-二甲氧基黄酮(9),5,7,3',4',5'-五甲氧基黄酮(10),木犀草素-7, 3', 4'-三甲醚(11),芹菜素(12),芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(13),芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(14),3-O-(6'-O-palmitoy-β-D-glucosyl)-spinasta-7,22-diene(15),木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(16),槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(17),withagulatin A(18),(6S,9R)-roseoside(19),其中化合物1,2,3,4和19是首次从该属植物中分离得到。

星点设计-效应面法优化独脚金总黄酮提取工艺

目的:优化独脚金总黄酮的提取工艺。方法:以醇浓度、提取时间、提取温度为自变量,独脚金黄酮提取率为因变量,用星点设计-效应面法选取最佳工艺。结果:优化出最佳提取工艺为:醇浓度70%、提取温度80℃、提取时间1.5 h。提取预测值与验证值偏差为-0.07%。二项式拟合复相关系数平方R2=0.9871。结论:采用本工艺提取独脚金总黄酮具有方法简便,精密度高,可预测性较好的优点。

濒危药用植物独脚金群落结构特征及物种多样性

目的:掌握半寄生植物独脚金的群落结构特征,为独脚金野生资源保护以及合理有序利用夯实基础。方法:分别在广东惠州、福建龙岩、江西赣州等独脚金分布区域设置样地,采用样地调查法对不同分布点进行调查,分析其群落的种群组成、结构特征和物种多样性。结果:不同样地共涉及31科56属61种植物。独脚金群落类型可分为6个类别,其中马唐在各群落中的重要值总和最大,达106.3%,为典型的优势物种。各群落物种丰富度(S)、Simpson指数(D)和Shannon-Wiener指数(H′)变化趋势基本相似,但多样性系统中的物种均匀度Pielou指数(E)则有所不同。结论:独脚金喜温暖湿润气候,喜光照,喜分布在开阔平整的荒草地,其伴生植物主要为草本类植物,群落中寄主生长旺盛则有利于独脚金的生长发育。建议加大独脚金野生资源保护力度,深入研究人工栽培独脚金的关键技术,从根本上改善独脚金资源短缺的现状。

独脚金药材HPLC-DAD特征图谱研究

目的:建立独脚金药材的HPLC-DAD特征图谱。方法:采用HPLC法测定,使用Acchrom XAqua C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1 m L·min^(-1),检测波长为340 nm,柱温为30℃。对10个批次独脚金药材检测,采用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2008版)进行数据处理分析。并用HPLC-ESI-MS技术对部分共有峰进行了初步归属。结果:建立了以8个共有峰为指标成分的独脚金药材HPLC特征图谱,并通过MS技术初步鉴定出7个共有峰的可能化学成分,分别为木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(2号峰)、芹菜素-7-半乳糖醛酸苷或芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷(3号峰)、金圣草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(4号峰)、木犀草素(5号峰)、刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(6号峰)、芹菜素(7号峰)、金圣草素(8号峰)。以木犀草素色谱峰为参照,其他7个色谱峰的相对保留时间分别为(0.441±0.004)、(0.513±0.004)、(0.665±0.010)、(0.727±0.005)、(1.048±0.005)、(1.258±0.008)、(1.333±0.009)。结论:该方法经过方法学验证,可用于独脚金药材的质量控制。

五子衍宗方制剂-药材谱峰匹配指纹图谱研究

目的建立五子衍宗方(WYP)制剂的HPLC指纹图谱,对其中的特征峰进行指认,并对WYP制剂-药材进行谱峰匹配研究。方法采用HPLC-DAD检测法,色谱柱为Waters Symmetry?C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.4%磷酸水溶液-乙腈,体积流量1 m L/min,线性梯度洗脱,柱温35℃,检测波长为254 nm,对12个批次的WYP样品进行HPLC指纹图谱相似性评价,并将WYP对照图谱与单味药材进行谱峰匹配。结果在12批WYP样品色谱图中共有24个共有峰,指认的特征峰有8个,分别为没食子酸(1号峰)、京尼平苷酸(4号峰)、绿原酸(8号峰)、金丝桃苷(19号峰)、异槲皮苷(20号峰)、毛蕊花糖苷(21号峰)、山柰酚-3-O-芸香糖苷(22号峰)和异毛蕊花糖苷(23号峰),单味药材色谱峰与WYP谱峰共有峰匹配数分别为枸杞子8个(2、3、6、7、8、11、12、18号峰)、菟丝子10个(6、7、8、9、10、15、16、19、20、24号峰)、覆盆子7个(1、3、7、13、14、17、22号峰)、车前子3个(4、21、23号峰)、五味子1个(3号峰)。各批WYP样品之间的相似度均大于0.959,各批WYP样品与对照指纹图谱之间的相似度均大于0.979。结论建立的WYP指纹图谱相似度较高,同时结合制剂用药材与WYP制剂指纹图谱谱峰匹配相结合的方法为WYP的定性、定量鉴别提供了科学、简便可行的评定方法。

基于质量综合评价的积雪草干燥方法筛选研究

目的探讨不同干燥方式对药材质量的影响,筛选积雪草适宜干燥方法。方法分别采用热风干燥、晒干、晒半干后热风干燥、阴干、微波以及真空干燥对积雪草全草鲜品进行干燥加工,并测定干燥时间和折干率;参考药典方法对积雪草药材性状特征、鉴别、检查、浸出物含量进行分析;采用HPLC法测定样品中积雪草苷、羟基积雪草苷、积雪草酸、羟基积雪草酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷、山柰酚和槲皮素的含量;并采用加权评分法进行多指标综合评价排序。结果不同干燥方法耗时差异大,其中晒干、阴干和50℃真空干燥超过100 h,微波干燥低至1.5 h;折干率均值为24.83%;不同干燥方法对药材性状影响主要反映在色泽和气味,其中50~70℃热风干燥色泽较佳,为浅绿色,80、85℃热风干燥和微波干燥气味也发生了显著变化;水分和灰分含量虽有一定差异,但均符合药典标准;干燥方法对浸出物也有一定影响,晒干方式的浸出物含量达到最大,为45.70%,阴干方式的浸出物含量最小,为29.67%;HPLC法测定的7个有效成分含量总和最高的是较为温和的干燥方式阴干,为83.032 mg/g,最低的为75℃热风干燥,为40.982 mg/g;羟基积雪草苷和积雪草苷总和含量最高的为80℃热风干燥,最低的为75℃热风干燥;加权评分排在前3位的分别为70℃热风干燥、晒半干后50℃热风干燥、50℃热风干燥,85℃热风干燥排在末位。结论积雪草产地的适宜干燥方法为70℃热风干燥。