大球盖菇多肽的制备、抗氧化及抗肿瘤活性的研究

[目的]大球盖菇作为近年来在我国迅速崛起的食用菌,以其卓越的营养价值和多样的保健功效受到市场的青睐。然而,尽管其产量迅猛增长,深度加工技术的滞后和创新产品开发的不足已成为制约大球盖菇产业发展的关键因素。因此,本研究旨在优化大球盖菇多肽的制备工艺,并评价其体外抗氧化和抗肿瘤活性,为大球盖菇的深度加工和产品创新提供科学依据。[方法]以蛋白水解度为评价指标,在蛋白酶筛选的基础上,通过单因素和正交试验获得大球盖菇多肽的最佳制备工艺,并通过超滤分级纯化获得3个多肽组分(M1:>10 kDa、M2:3~10 kDa、M3:<3 kDa);通过DPPH·和ABTS^(+)·清除率的测定评价多肽体外抗氧化活性。通过常见肿瘤细胞增殖抑制率的测定评价多肽抗肿瘤活性。[结果]胰蛋白酶酶解制备大球盖菇多肽的最佳工艺为料液比1∶20 g/mL、酶添加量4000 U/g、酶解时间3 h,在该条件下大球盖菇蛋白的水解度为28.31%,比优化前提高了3倍。所制备的大球盖菇多肽对DPPH·和ABTS^(+)·的清除率最高可达69.2%和91.4%,高于以往相关报道。3个多肽组分对4种常见的肿瘤细胞(宫颈癌细胞HeLa、肺癌细胞NCI-H460、乳腺癌细胞BT549、肝癌细胞HepG2)的抑制效果不同,但均呈现浓度依赖性。M1和M3对肺癌细胞NCI-H460的抑制效果最好,而M2主要抑制宫颈癌细胞HeLa;其中,500μg/mL M3对肺癌细胞NCI-H460的抑制率达30.28%。[结论]胰蛋白酶酶解制备大球盖菇多肽的工艺优化后,所制备的多肽具有良好的抗氧化活性和抗肿瘤活性。

Key Techniques of Cultivation of Stropharia rugosoannulata

Stropharia rugosoannulata is a straw rotting edible fungus that has developed rapidly in recent years.In the process of cultivation,key technologies have a huge impact on its yield.The key techniques for the cultivation conditions and modes of S.rugosoannulata were summerized to promote the realization of stable and high yield of S.rugosoannulata.

大球盖菇遗传育种研究进展

大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)营养丰富,栽培简易,是联合国粮食和农业组织向发展中国家推荐栽培的食用菌品种。近年来,我国大球盖菇产业发展迅速,对优良品种的需求日益迫切,同时我国的大球盖菇育种研究也取得较多成果,但缺乏系统总结和报道。该文从大球盖菇遗传特性、种质资源分布、育种方法及成果、经官方审(认)定或申请专利保护的品种等方面首次综述了我国大球盖菇遗传育种的研究进展,并对大球盖菇育种的重点方向进行展望,以期为我国大球盖菇优良品种的培育和各地引种栽培大球盖菇时进行品种选择提供参考依据。

多孢自交选育大球盖菇新品种

以优质大球盖菇栽培品种明大128为亲本,通过多孢自交选育获得菌丝生长势强、产量高的新菌株S18,并进行新菌株鉴定和品种区域试验。结果表明S18达到新品种认定标准,通过浙江省农作物品种认定委员会认定,定名为球盖菇18。球盖菇18的菌丝生长最适温度为18~22℃,出菇最适温度为14~25℃;子实体单生或丛生,粗壮,致密,不易破碎;菌盖半球形,黄褐色至棕褐色,有鳞片,直径为4.81~5.19 cm;菌柄圆柱形,白色,直径为3.54~3.75 cm;平均生物学效率为77.4%。具有丰产性好,品质优,商品性好等优点,适于设施栽培和林下栽培。

不同树种林业废弃物对大球盖菇栽培的影响

以大球盖菇为研究对象,采用堆积发酵的方法,研究了不同林业废弃物木屑对大球盖菇培养料发酵过程和农艺学性状的影响,以期为利用林业废弃物作为大球盖菇栽培基质的工艺优化提供参考依据。结果表明:在相同的抚育、储存和粉碎条件下,不同树种林业废弃物理化性质存在巨大差异。以林业废弃物木屑为主料的培养料在发酵过程中木质素均降解最慢,纤维素和半纤维素降解速率在不同配方间存在差异。以杨树木屑和柳树木屑为主料的培养料栽培大球盖菇发菌速度较快,子实体商品性状更好,生物学效率分别达56.44%和50.39%,高于另外2种林业废弃物配方,因此在就近利用当地林业废弃物栽培大球盖菇时,可以优先选择杨树木屑和柳树木屑。

大球盖菇栽培技术研究

[目的]解决北方地区大球盖菇冷棚栽培生产过程中技术来源混乱、标准缺失等问题,完善适于本地区的标准化、优质化栽培技术模式。[方法]对比不同配方、播种方式、覆盖物处理方式以及菌床规格对大球盖菇发菌、原基形成、出菇时间以及产量的影响。[结果]20%玉米秸秆、20%玉米芯、30%菌糠、20%稻壳、10%柞木屑的栽培配方综合生产周期和产量表现最好;其他条件一致情况下,点播、条播和撒播3种不同播种方式对大球盖菇生育周期及产量没有统计学影响;覆土对大球盖菇产量提升存在显著的促进作用,发菌完成后覆土可以缩短发菌时间;0.6 m宽菌床对于大球盖菇菌丝生长和产量提升具有明显的促进作用。[结论]大球盖菇栽培过程中复合型培养配方、窄距菌床以及发菌结束后覆土等技术的应用,可有效缩短生产周期、提高产量。

大球盖菇液体菌种繁育工艺研究

【目的】优化大球盖菇液体菌种培养基,探究液体培养过程中的生长规律,确立液体菌种繁育栽培种工艺参数。【方法】以大球盖菇8号为试验菌株,以菌丝体生物量为评价指标,采用单因素和正交试验L9(34)优化液体菌种培养基。测定液体菌种菌丝体生物量,还原糖和氨基氮含量,羧甲基纤维素酶、淀粉酶、酸性蛋白酶、漆酶胞外酶酶活生理生化指标,确立优化配方的液体菌种最优培养时间。以平均满袋时间为指标,确立液体菌种扩繁栽培种接种量、培养基配方颗粒度和碳氮比。【结果】优化得到大球盖菇液体菌种最优配方为葡萄糖20 g·L^(-1)、小麦粉30 g·L^(-1)、酵母粉0.75 g·L^(-1)、磷酸二氢钾1.00 g·L^(-1)、硫酸镁0.50 g·L^(-1)、起始p H 5。培养第8天时,大球盖菇菌丝体生物量最大,为1.66 g·hm L^(-1);液体培养过程中还原糖含量由12.23 mg·m L^(-1)降至1.38 mg·m L^(-1),氨基氮含量由0.09mg·m L^(-1)降至0.06 mg·m L^(-1);羧甲基纤维素酶和淀粉酶酶活在第4天最高,酶活分别为6.49、5.16 U,酸性蛋白酶酶活在第2天最高,酶活为1.80 U,漆酶酶活在第6天最大,酶活为1.63 U。液体菌种扩繁栽培种生产工艺参数:接种量为15 m L,菌包培养基配方颗粒度的粗细木屑比为7∶3,碳氮比为50∶1。【结论】大球盖菇液体菌种活性与上述指标具有一定的相关性,结合发酵液生理生化指标,判定第7天的液体菌种活力最高。利用大球盖菇液体菌种扩繁栽培种,平均满袋时间为23.7 d,缩短生长周期2.7 d。本研究建立配套的制种工艺,为大球盖菇栽培种工厂化生产技术奠定基础。

一株黄色大球盖菌株的选育及菌丝生长特性

以在辽宁省锦州市义县大球盖菇种植基地发现红褐色大球盖菇的黄色变异子实体为试材,采用组织分离获得纯菌丝体后,进行初筛、复筛、中间试验和示范栽培的选育方法,以期获得新的大球盖菇种质资源,为大球盖菇的开发利用提供参考依据。结果表明:该试验选育出1株性状优良的黄色大球盖菇菌株“辽金球盖菇1号”,拮抗试验和ISSR分子标记验证表明“辽金球盖菇1号”与出发菌株具有明显的遗传差异,是区别于出发菌株的新菌株。该菌株菌盖金黄色,子实体单菇质量25~90 g;菌丝生长最适温度为25℃,最佳碳源为可溶性淀粉,最佳氮源为大豆蛋白胨,最佳无机盐为磷酸二氢钾。

不同氮含量对大球盖菇菌丝生长和碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响

通过研究液体培养时不同氮含量(0.4%、0.6%、0.8%、1.0%、1.2%、1.4%)对菌丝生长、碳氮代谢相关酶活性及基因表达的影响,筛选大球盖菇(Stropharia rugosoannulata)菌丝生长最适氮源。结果表明:豆粕粉是大球盖菇菌丝生长最适氮源。氮含量为0.6%时,菌丝生长速度最快。在实验范围内,对照(氮含量为0)的亚硝酸盐还原酶活性较高,1.2%氮含量的天冬酰胺合成酶活性较高,0.6%氮含量的谷氨酸合酶活性最高;0.6%氮含量的内切β-1,4-葡聚糖酶活性最高,β-1,3-葡聚糖酶活性较高;0.6%氮含量的谷氨酸合酶基因表达量最高,1.2%氮含量的谷氨酸脱氢酶基因表达量较高;对照的β-1,3-葡聚糖酶基因和半纤维素酶基因表达量均最高。研究结果可为大球盖菇液体菌种开发和应用提供参考。

热泵干制和射频干制对大球盖菇风味成分及品质的影响

为筛选适用于大球盖菇采后品质提升的干制技术,探究了热泵干制和射频干制技术对大球盖菇风味成分含量及品质的影响。不同干制技术对大球盖菇样品风味成分含量及品质影响较大。脂质、烷烃、杂环类物质是射频干制的大球盖菇样品中的主要挥发性化合物,醛酮醇类物质是热泵干制的大球盖菇样品中的主要挥发性化合物,挥发性成分主要富集在初级醇类、酮类、杂芳香族化合物的合成代谢通路上。甜味、鲜味氨基酸是两种干制样品中的主要氨基酸种类,其中,谷氨酸、丝氨酸、丙氨酸和缬氨酸等是主要氨基酸;热泵干制样品中滋味成分核苷酸、氨基酸、有机酸总量及等鲜浓度值均高于射频干制样品。热泵干制样品鲜甜味滋味成分的电子舌及挥发性硫化物和芳香族化合物的电子鼻响应信号更高。大球盖菇干品的风味成分、感官及质构分析结果显示,热泵干制技术更有利于大球盖菇干品形成愉悦风味和较好品质外观,该技术有望进一步推广应用于大球盖菇采后品质提升。

不同竹笋加工废弃物配方对大球盖菇菌丝生长及产量的影响

【目的】分析不同竹笋加工废弃物栽培配方对大球盖菇菌丝生长及产量的影响,为竹笋加工废弃物栽培大球盖菇提供参考依据。【方法】以全木屑配方为对照配制培养基,设置竹笋加工废弃物不同添加比率15%(T1)、30%(T2)、45%(T3)、60%(T4)、75%(T5)共5个配方处理,测定大球盖菇菌丝生长速率、采收时间和产量。【结果】大球盖菇菌丝在不同培养基上均能生长,T1、T2处理菌丝生长速率均快于对照,T2处理的菌丝生长速率最快,达到2.36 mm/d,显著快于对照,随着竹笋加工废弃物添加比率的提高,菌丝生长速率逐渐减慢。在不同培养基上均能出菇,T1、T2的采收时间比对照短,竹笋加工废弃物添加比率大于45%时,采收时间变长,产量降低。各处理之间的产量差异均显著,T1、T2产量显著高于对照,T2产量最高为6.47 kg/m^(2),比对照提高10.79%,竹笋加工废弃物添加到45%以上时,产量逐渐降低。【结论】竹笋加工废弃物添加比率30%(T2)的培养基大球盖菇产量最高,采收时间短,适合大球盖菇栽培与推广。

不同栽培基料配比对大球盖菇生长的影响

为研究利用农业废弃物栽培大球盖菇的可行性,以农作物秸秆、废菌包、牛粪等废弃物为主要原料,设置9种不同基料配方栽培大球盖菇,分析比较供试配方栽培的大球盖菇菌丝生长情况、产量及经济效益。结果表明,D_(3)、D_(4)、D_(8)处理的菌丝生长较好、出菇快、产量高、经济效益好。综合分析,在生产中推荐“玉米秸秆+谷壳+玉米芯+废弃菌包+牛粪”的基料配比组合,可以实现经济效益最大化。

大球盖菇酶解液中鲜味肽的分离鉴定及其协同增鲜效果分析

利用超滤、凝胶过滤色谱结合感官评价和电子舌分析技术,分离大球盖菇酶解液中鲜味肽组分,对鲜味最强组分F3中的鲜味肽进行反向高效液相色谱-串联质谱鉴定,并将鉴定得到的鲜味肽合成后进一步探讨其呈味特性。结果表明,大球盖菇酶解液F3组分中鉴定得到8条鲜味肽段,分别为ELWR、RLVDR、KPDNR、AHLRF、LDWDR、LAEWR、DDWWR和EGHKGW,它们均具有鲜味特征和鲜味增强作用,阈值分别为0.30~1.33mmol/L和0.53~2.43 mmol/L;除LDWDR外,7条多肽对味精溶液均有不同程度的鲜味提升,提升幅度0.18%~61.12%,ELWR、RLVDR、KPDNR、AHLRF和EGHKGW 5条多肽在低浓度时表现出良好的鲜味提升效果。RLVDR和KPDNR协同增鲜的鲜味峰值质量浓度为5mg/mL,LDWDR、LAEWR、DDWWR和EGHKGW在4mg/mL时达到鲜味峰值。鲜味肽的氨基酸组成和空间结构会影响其味觉属性。本研究结果为大球盖菇鲜味肽的开发利用提供了理论依据。

基于大球盖菇基因组的SSR分子标记开发及指纹数据库应用

以13个大球盖菇菌株及其已公布的基因组为试材,采用生物信息学和试验验证相结合的方法,研究了大球盖菇基因组上的SSR类型及分布,设计了100对SSR引物开展试验验证,以期为大球盖菇的种质资源鉴定、品种选育、分子标记辅助育种等研究提供参考依据。结果表明:总计检索到6种SSR类型的2 124条序列,其中主要以三核苷酸类型为主,共计704,占SSR总数的33.15%;五、六碱基重复类型较多,但总和只占全部SSR数量的14.59%。由验证试验获得16对引物,其中引物DQGSSR020、DQGSSR031、DQGSSR077的多态性较高、特异性好、无杂峰、荧光亮度高、区分度好。同时,基于16对SSR引物进行大球盖菇DNA指纹编码构建,获得了13个大球盖菇菌株的32位数分子指纹数据库编码。

大球盖菇研究进展

大球盖菇(Stropharia rugoso-annulata)作为一种药食两用的食用菌,近年来在我国栽培面积不断扩大。文章综述了大球盖菇丰富的营养成分和生物活性物质,如多糖、蛋白质、氨基酸等,并探讨了这些成分对人体健康的促进作用。此外,文章还详细阐述了大球盖菇的栽培技术、加工工艺以及在食品、医药以及环境生态等领域的应用潜力。

即食椒麻味大球盖菇加工配方优化

采用新鲜大球盖菇为原料,椒麻料、食盐、白砂糖、味精为配料,感官评分作为评价指标,在单因素试验的基础上,通过正交试验设计优化调味料配方。结果表明,即食椒麻味大球盖菇最佳调味料配方为椒麻料添加量10%,食盐添加量1.5%,白砂糖添加量1.0%,味精添加量0.8%。通过此配方制得的即食大球盖菇风味独特、营养丰富。

外源铅在基质-大球盖菇子实体系统的迁移规律研究

为了从子实体水平探究重金属铅在基质-食用菌系统的迁移规律,研究利用大球盖菇Strophar-ia rugoso-annulata开展外源铅添加试验,对其基质总铅含量(Pb_(total))和有效态铅含量(Pb_(avail)),以及子实体铅含量(Pb)进行检测分析。结果表明:(1)基质Pb_(avail)与Pb_(total)之间具有良好的线性关系,随着Pb_(total)增加,Pb_(avail)增加,Pb_(avail)在Pb_(total)的占比也增加;(2)大球盖菇子实体的铅含量随基质Pb_(total)和Pb_(avail)的增加,呈现先增大后减小的趋势;(3)铅从基质向大球盖菇子实体转移的迁移系数TF(TFtotal和TFavail)随基质Pb_(total)及Pb_(avail)的增加,先增大后减小。研究揭示了在不同铅浓度条件下,重金属铅从基质向大球盖菇子实体迁移的变化规律,也表明基质的总铅含量及有效态铅含量可作为管控食用菌产品质量安全的有效指标。

高产多糖大球盖菇的ARTP诱变筛选及其菌丝培养条件优化

为获得优良的大球盖菇菌株,采用ARTP诱变处理大球盖菇孢子,通过检测诱变后的菌株菌丝生长势、拮抗作用及多糖含量,筛选菌丝生长快、多糖含量高的突变菌株;并对突变菌株菌丝多糖结构特征、红外光谱及菌丝液体培养条件进行分析。结果表明,在42株诱变菌株中,筛选得到5株生长势较好、遗传稳定,且与出发菌株有拮抗作用的突变菌株,其中菌株D1和D4的菌丝具有较高的生物量和多糖含量。D1菌株菌丝中的多糖颗粒均一、规则,粒径约为0.05μm,具有一般多糖的红外光谱特征;该菌株适宜的液体培养条件为孢子接种量8%、转速115 r·min-1、温度24℃、培养时间4 d,在此条件下菌丝生物量为56.82 mg。

稻菇轮作对水稻产量和品质及土壤性质的影响

为了明确优质稻与大球盖菇轮作对水稻种植的影响,以T香优557和大球盖菇1号为供试品种,对比贵阳和安顺两地“冬闲+优质稻”和“大球盖菇+优质稻”轮作对水稻产量和品质及土壤性质的变化。结果表明,与“冬闲+优质稻”相比,贵阳和安顺不同生态区“大球盖菇+优质稻”轮作使水稻品种T香优557的有效穗数和千粒重显著增加,进一步增加水稻产量,其中安顺地区产量增加20.3%,达到显著水平(p<0.05);从稻米品质分析看,“大球盖菇+优质稻”轮作使水稻品种T香优557的垩白粒率分别显著降低了48.4%和27.4%,垩白度分别显著降低了52.8%和46.4%,蛋白质含量分别显著提高了43.2%和32.7%,整精米率分别增加了3.5%和12.4%;从土壤性质来看,“大球盖菇+优质稻”轮作使得有效磷的含量显著增加40.5%和22.4%。因此,“大球盖菇+优质稻”轮作模式不仅能提高水稻产量,还能改善稻米品质,对土壤也有一定的影响,安顺地区的效果更明显。

水稻-大球盖菇模式对土壤微生物量碳氮磷的影响

为探讨栽培大球盖菇及其菌种用量与基料配方对土壤养分和土壤微生物量碳、氮、磷的影响,开展了2年田间小区试验,设置了5个处理,即冬闲田对照处理CK,4个栽培大球盖菇处理:T1(3000kg·hm^(-2)菌种量+100%稻草基料)、T2(3000kg·hm^(-2)菌种量+75%稻草配25%玉米芯基料)、T3(4500kg·hm^(-2)菌种量+100%稻草基料)、T4(4500kg·hm^(-2)菌种量+75%稻草配25%玉米芯基料)。结果表明:连续2年栽培大球盖菇的耕层土壤养分和土壤微生物量碳、氮、磷(MBC、MBN、MBP)含量均逐年明显增加,且受菌种用量和基料配方的影响。在第2年,与CK处理相比,各试验处理的土壤有机质、碱解氮、有效磷、速效钾、全氮和全磷分别显著增加32.92%~42.44%、52.96%~77.35%、53.99%~75.09%、88.00%~184.62%、19.12%~38.24%、9.82%~29.46%(P<0.05),土壤微生物量碳、氮含量分别显著增加84.18%~129.28%、166.60%~260.01%(P<0.05)。2年间各试验处理较CK处理的MBC:MBN显著降低,MBC:MBP和MBN:MBP有所增加。冗余分析(RDA)显示,全氮在2021年(F=5.9,P=0.004)和2022年(F=7.4,P=0.002)分别解释了31.1%和36.3%的土壤微生物量变化,是土壤微生物量碳、氮、磷及其化学计量比的最主要影响因子;相关性分析表明,土壤微生物量碳、氮含量均与有机质、全氮、全磷、碱解氮、有效磷和速效钾含量呈显著正相关。栽培大球盖菇,不仅显著提高了土壤养分,还增加了土壤微生物量碳、氮、磷含量,其中以菌种量3000kg·hm^(-2)、基料75%稻草+25%玉米芯的栽培方式效果较好。研究结果可为后续推广“水稻一大球盖菇”轮作模式提供理论指导。