马钱子减毒增效途径及机制研究进展

本文综述马钱子减毒增效的主要途径及其减毒增效的机制研究进展。马钱子减毒增效的主要途径包括炮制、配伍、新剂型与制剂新技术等;减毒增效的机制主要包括生物碱成分含量发生变化、生物碱药代动力学行为改变、影响CYP450酶的mRNA表达和酶活性、诱导血脑屏障上P-糖蛋白外向转运加速生物碱外排、缓释及靶向控制药物浓度梯度等。关于马钱子减毒增效的途径研究较多,但对其减毒增效的机制和原理研究较少且不甚深入,建议后续研究从毒性物质基础、体内暴露和体内过程、分子机制、量-时-毒-效关联性及转化规律等方面对马钱子减毒增效的机制进行深入研究。

不同批次马钱子种仁生品及醋制品中生物碱含量测定

目的比较不同批次马钱子种仁生品及醋制品中生物碱含量,为马钱子醋制工艺的科学性提供一定参考依据。方法收集12批次的马钱子种仁,使用高效液相色谱法测定12批次马钱子种仁生品及其醋制品中士的宁及马钱子碱含量,比较炮制前后两种生物碱成分含量变化。结果12个批次马钱子种仁生品中士的宁含量为1.68%~2.11%,马钱子碱含量为0.99%~1.43%;经醋制后,12个批次马钱子种仁醋制品中士的宁含量为1.21%~1.48%,马钱子碱含量为0.65%~0.94%;两者比例分别降低21.47%~38.89%和27.35%~50.35%。结论马钱子种仁经醋制后士的宁和马钱子碱含量均显著降低,可能是马钱子炮制减毒的原理。

含马钱子中成药的组方规律及应用探析

[目的]通过收集并分析含马钱子的内服中成药处方的用药特点,为马钱子的合理用药提供参考。[方法]收集2020年版《中国药典》和《中华人民共和国卫生部药品标准·中药成方制剂》中含有马钱子的内服中成药处方,借助Excel、SPSS Modeler 18.0、SPSS Statistics 26.0软件对处方进行频次统计、关联分析和聚类分析。[结果]最终共收集内服处方99首,涉及中药264味,其中包括高频中药52味,药味以苦、辛、甘为主,药性以温、平、寒为主,主要归肝、脾经。主治疾病以痹证、创伤类疾病为主,治疗痹证处方的关联规则分析得到54种药物组合,聚类分析可将药物分为8类;治疗创伤类疾病处方关联规则分析得到27种药物组合,聚类分析分为5类。[结论]含马钱子的内服处方中,常以马钱子配伍活血化瘀药、祛风湿药和补虚药,在以血瘀为基本病机的痹证和创伤类疾病的治疗中应用甚广。

基于网络药理学研究马钱子治疗类风湿性关节炎的作用机制

目的采用网络药理学方法研究马钱子治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法通过检索中药系统药理数据分析平台,获得主要活性成分和相关作用靶点。通过UniProt数据库提取作用靶点的基因名称,利用STRING网络在线分析平台获得抗类风湿性关节炎作用靶点,采用Cytoscape 3.9.0构建有效成分-靶点-疾病网络图,STRING网络平台构建PPI网络图,进一步用Bioconductor进行GO、KEGG通路富集分析。结果筛选出马钱子具有靶点的活性成分共12个,马钱子治疗类风湿性关节炎交集靶点17个,预测出马钱子有效成分(S)-Stylopine和(2R)-5,7-dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)chroman-4-one通过神经活性配体受体相互作用通路和血清素能突触通路作用于NR3C1、SLC6A4、PTGS2靶点,并介导多种生物学功能。结论马钱子中的活性成分可能通过多靶点、多通路起到治疗类风湿性关节炎的作用。

马钱子研究进展

马钱子,有剧毒,临床多用其炮制品。本文对国内外马钱子相关文献进行整理查阅,从马钱子的化学成分、药理作用及减毒增效等方面进行简要的综述,以期为马钱子进一步的开发与临床治疗提供科学依据。

马钱子若干组分治疗实验性关节炎的比较研究

将马钱子提取物分离成 4部分 ,即马钱子粉 (A)、非生物碱 (B)、非士的宁生物碱 (C)、士的宁 (D) ,观察各部分对大鼠棉球肉芽增生及角叉菜胶引起足跖肿胀的影响。实验表明 :A和 C均明显抑制棉球肉芽的增生 ,给药后第 5 h明显抑制足跖肿胀 (P<0 .0 5 ) ,B和 D则几乎无作用。提示 A具有抗实验性关节炎作用 ,且有效部位为 C。

马钱子对三种软骨细胞凋亡模型的影响

目的:观察中药马钱子对三种软骨细胞凋亡模型的影响。方法:在兔软骨细胞培养体系中分别加入2mmol/L硝普钠(SNP)、2mmol/LSNP+马钱子、10-4mol/L全反式维甲酸(ATRA)、10-4mol/LATRA+马钱子;在人胚胎软骨细胞培养体系中加入30ng/L肿瘤坏死因子α(TNFα)、TNFα+马钱子,各组培养24h后,采用AnnexinV/PI双参数法对软骨细胞凋亡进行定量检测。结果:软骨细胞在加入SNP、ATRA、TNFα发生凋亡时,加入马钱子能降低SNP、ATRA诱导的软骨细胞凋亡率(P<0.01,P<0.05),但对TNFα诱导的软骨细胞凋亡,无明显抑制作用(P>0.05)。结论:中药马钱子对部分软骨细胞凋亡有一定抑制作用。

6种真菌发酵对马钱子降毒保效作用的初步研究

观察6种不同真菌发酵对马钱子毒性和镇痛、抗炎作用的影响。选择对马钱子药材适应性较强、菌丝生长旺盛的6种真菌菌种——裂褶菌、竹黄、单色云芝、鸡油菌、白僵菌和蝉花,在适生条件下对马钱子进行固态发酵,形成6种相应的马钱子发酵品——褶马菌质(SCSS)、竹马菌质(SBSS)、单马菌质(CUSS)、油马菌质(CCSS)、白马菌质(BBSS)和花马菌质(CGSS);以半数致死量(LD50)为指标,测定马钱子生品(RMSS)和炮制品(PSS)及6种不同发酵品经灌胃给药对小鼠的急性毒性;以双氯芬酸钠(DSE)和RMSS为阳性对照,观察6种不同发酵品对腹腔注射醋酸所致小鼠扭体反应的抑制(镇痛)作用以及对外涂巴豆油所致鼠耳壳肿胀的减轻(抗炎)作用。结果表明,马钱子通过6种真菌发酵后毒性降低,与炮制品基本一致;且它保持了马钱子原有的镇痛和抗炎作用,提示发酵可以为马钱子的降毒保效提供一条新途径。

响应面法优化超声辅助提取马钱子中生物碱的工艺研究

采用响应面法对超声波辅助提取马钱子中生物碱的工艺进行了优化,在单因素试验的基础上,选择提取溶剂中乙醇体积分数、超声功率、提取时间为随机因素,进行三因素三水平的Box-Behnken中心组合设计,采用响应面法(RSM)分析了3个因素对响应值的影响。结果表明,超声波法提取马钱子中生物碱的最佳工艺条件为:马钱子颗粒度为20～40目,溶剂中乙醇体积分数为32.3%,溶剂pH值为5,超声功率300W,提取时间为37min,液料比为10:1。在此条件下,士的宁、马钱子碱的提取量分别达到18.75、9.24mg/g,与理论预测值基本吻合,说明该优化方法可行。

HPLC法测定马钱子及其炮制品中士的宁和马钱子碱的含量

目的:用HPLC法对马钱子的江西炮制方法及其改良法炮制品中士的宁和马钱子碱含量进行测定。方法:色谱柱填料为硅胶,流动相为正己烷-二氯甲烷-甲醇-浓氨溶液(47.5:47.5:5:0.35),检测波长为254 nm。结果:江西法炮制品中士的宁和马钱子碱的含量较低。结论:该法精确、简便、重现性好。

花仙子胶囊有关的急性毒性试验研究

为了探讨花仙子胶囊的毒性,进行了小鼠急性毒性实验、对药物主要组分急性毒性相互作用的观察,及小鼠的耐受性试验。结果表明,小鼠灌胃花仙子胶囊的LD50为1.51g/kg;且有一定的耐受性;洋金花与马钱子配伍,减低了马钱子的毒性。提示该配方对毒性有拮抗作用,为该药配方的合理性提供了实验依据。

不同粒径马钱子粉中马钱子碱、士的宁的含量分析与比较

为考察粒径对马钱子粉中活性(毒性)成分含量的影响,制备了20～200目下的马钱子粉样品;采用扫描电子显微镜(SEM)观察各样品的微观形貌,利用薄层色谱法(TLC)对各样品进行定性鉴别并用高效液相色谱法(HPLC)测定各样品中马钱子碱、士的宁含量。结果表明:不同粒径下马钱子粉样品微观形态组成比例存在差异,而且马钱子碱、士的宁含量不同,马钱子碱(或士的宁)在部分样品中的含量存在显著性差异。因此在马钱子药粉入药时,应严格控制其粒径,结果显示宜将马钱子粉的粒径控制在100～200目之间。

马钱子药材HPLC指纹图谱的研究

目的建立马钱子药材的HPLC指纹图谱分析方法,为马钱子的质量控制提供新方法。方法以甲醇-水-浓盐酸(50∶50∶1)为提取溶剂,超声波震荡30min,制备马钱子药材样品溶液;采用RP-HPLC(DAD)法,选用Kro-masilKR100-5C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),体积流量1.0mL/min,检测波长254nm,流动相为乙腈(B)-0.2%三乙胺-0.2%乙酸水溶液(A),线性梯度洗脱:0min时8%∶92%,30min时17%∶83%,60min时60%∶40%。结果对10批马钱子药材进行测定,以士的宁为参照物,确定了马钱子药材指纹图谱中的12个共有峰;通过方法学考察,精密度、稳定性、重现性试验RSD均小于3%;采用相似度作为指纹图谱的评判参数,计算了不同批次与对照指纹图谱之间的相似度,均大于0.9,表明10批药材质量均一、稳定。结论该方法适用于马钱子药材的质量控制。

马钱子配伍赤芍前后毒性及镇痛抗炎作用的实验研究

目的:探讨马钱子配伍赤芍前后毒性及镇痛抗炎作用的变化。方法:将小鼠随机分为空白对照组、马钱子单煎剂组、马钱子赤芍(1:1)配伍组、马钱子赤芍(1:3)配伍组、马钱子赤芍(1:5)配伍组,利用急性毒性实验,分别测得马钱子单煎剂和马钱子赤芍各配伍组的 LD_(50);利用热板法和醋酸所致小鼠扭体法以及小鼠毛细血管通透性实验法观察了马钱子配伍赤芍前后镇痛及抗炎作用的变化;利用薄层扫描法测定了马钱子配伍赤芍前后士的宁和马钱子碱的含量。结果:马钱子赤芍配伍组与马钱子单煎组比较,LD_(50)明显增大,镇痛作用未见明显改变,抗炎作用配伍组显著优于单味药组(P<0.01),且配伍组的马钱子碱和士的宁含量均明显降低。结论:马钱子赤芍配伍后毒性明显低于单味马钱子,抗炎作用优于单味马钱子,而镇痛作用与单味马钱子基本相当。

马钱子减毒总生物碱的制备及毒性

目的制备去除大部分士的宁的马钱子减毒总生物碱,并考察马钱子总生物碱减毒前后成分及毒性的变化。方法用不同体积分数的乙醇溶解马钱子总生物碱,经磁力搅拌、离心后制备得到马钱子减毒总生物碱,HPLC法测定马钱子减毒总生物碱中马钱子碱和士的宁的量。用Q-TOF-MS技术比较鉴定了马钱子总生物碱减毒前后的主要生物碱类成分。通过小鼠口服急性毒性试验考察了马钱子总生物碱减毒前后的毒性变化情况。结果以20%乙醇为溶剂制备的马钱子减毒总生物碱去士的宁效果最好,同时不影响其他19种生物碱类含有量。小鼠口服急性毒性LD50实验表明马钱子减毒总生物碱与马钱子总生物碱的LD50分别为31.08 mg/kg、10.92 mg/kg。结论马钱子总生物碱中士的宁占38.49%,减毒后仅占14%,减毒工艺提高了马钱子总生物碱临床使用的安全性。

马钱子生物碱提取工艺的研究

为考察马钱子的最佳提取工艺,采用L9(34)正交试验法,以马钱子中士的宁、马钱子碱的含量为考察指标,采用酸性乙醇提取法对药材中的生物碱进行提取工艺研究。结果表明:马钱子生物碱提取的最佳工艺加12倍量80%pH=5的乙醇溶液,提取3次,每次1 h。该工艺合理、稳定、重现性好,为马钱子生物碱的生产提供试验依据。

微波辅助提取马钱子中总生物碱工艺

采用微波辅助方法提取马钱子中总生物碱,并对其工艺条件进行优化。考察微波辐射功率、微波辐射时间、乙醇体积分数、液料比和微波前预浸泡时间等因素对提取效率的影响,并利用响应面法对其工艺条件进行优化。利用中心组合设计原理及响应面法分析建立二次回归模型,以微波辐射功率、微波辐射时间、乙醇体积分数为自变量,以士的宁、马钱子碱产率的综合指标为响应值,研究各因素及其交互作用对生物碱产率的影响。利用模型的响应曲面图及其等高线图,确定微波辅助提取马钱子中生物碱的最佳工艺参数:微波功率240W、微波辐射时间6.7min、液料比6:1(mL/g)、乙醇体积分数58.8%。在此条件下,士的宁、马钱子碱的提取量分别达到18.97、9.46mg/g,与理论预测值基本吻合。该结果可为马钱子中总生物碱的工业提取提供参考和依据。

马钱子总生物碱的测定及其提取条件的正交设计优选

目的建立马钱子总生物碱的RP-HPLC测定方法,探讨其提取分离的优化条件。方法以士的宁、马钱子碱为定量指标成分,通过对马钱子氨性氯仿提取、水提取、酸水提取和酸性乙醇提取等提取方法的比较与筛选,确定乙醇浓度、pH值、提取时间、溶剂用量为影响因素,并以L9(34)正交设计表安排试验。结果马钱子药材细粉加6倍量pH=5的50%乙醇提取3次,每次1h为马钱子总生物碱的最佳提取工艺。结论优选的提取条件效率高,可增加马钱子药材的利用率。