马钱子中16个生物碱类化合物13CNMR谱的数据分析

从炮制前后的马钱子中，提取分离和鉴定了１６个生物碱，其中异马钱子碱、异马钱子碱氮氧化物、异番木鳖碱、氮氧化物、２－羟基，３－甲氧基番木鳖碱为新生物碱。经光谱（１３ＣＮＭＲ，１ＨＮＭＲ，ＩＲ，ＵＶ和ＭＳ）解析，确定其结构。通过实验发现，用１３ＣＮＭＲ谱测定马钱子中生物碱的结构，具有简便、快速等优点，且各化合物及其衍生物的共振峰呈现一定的规律。

马钱子总生物碱脂质体的含量与包封率测定

目的建立测定马钱子总生物碱脂质体含量和包封率的方法,用于处方与工艺评价。方法采用氨性氯仿法提取马钱子总生物碱并分析其成分,采用硫酸铵梯度法制备马钱子总生物碱脂质体。以士的宁为对照品,采用紫外分光光度法,在254nm测定用破膜剂溶解的马钱子总生物碱脂质体的吸光度确定其含量。采用葡聚糖凝胶柱分离脂质体和游离药物,分别测定含量后计算包封率。结果马钱子总生物碱提取物平均得率为3.49%,在总生物碱提取物中士的宁和马钱子碱分别占46.76%和26.51%。士的宁标准曲线的范围是2.4～20μg/mL,加样回收率在96.66～102.62%范围内。葡聚糖凝胶柱层析的回收率为100.85±0.79%(n=3)。结论所建立的方法简便快捷稳定,可以满足马钱子总生物碱脂质体质量控制的需要。

腰痛宁胶囊的毒理学研究

目的:观察大鼠口服腰痛宁胶囊的急性毒性和长期毒性作用。方法:以SD大鼠为受试对象,采用B liss法测定口服腰痛宁胶囊的LD50;采用4个剂量(300,150,75,37.5 mg/kg)iq SD大鼠,连续180d,观察给药90,180 d时大鼠的生长发育、血液学、血液生化学、组织病理变化及停药30 d时上述指标的变化。结果:雄性和雌性SD大鼠口服腰痛宁胶囊的LD50为6 158.95 mg/kg和803.85 mg/kg。大鼠连续给药90 d时,300 mg/kg剂量组碱性磷酸酶、肌酐比空白对照组升高(P<0.01):白蛋白降低(P<0.01);5只大鼠肝细胞脂肪变性;2只大鼠肾脏近曲小管上皮细胞高度水肿,轻度脂肪变性,管腔变大,肾小管内可见红细胞管型,肾间质少量炎细胞浸润。150 mg/kg剂量组碱性磷酸酶升高(P<0.05),总蛋白和白蛋白降低(P<0.01),3只大鼠肝细胞脂肪变性。给药180 d时,对大鼠体重、摄食量、活动、外周血象、主要脏器的重量系数检查未见明显影响。300 mg/kg剂量组白蛋白降低(P<0.01),总蛋白、肌酐升高(P<0.0 l和P<0.001);150 mg/kg剂量组白蛋白降低(P<0.001),总蛋白、肌酐升高(P<0.05和<0.001);75 mg/kg剂量组白蛋白降低,(P<0.001),肌酐升高(P<0.001),2只大鼠肝细胞轻度脂肪变性;37.5 mg/kg剂量组白蛋白降低(P<0.001),总蛋白和肌酐升高(P<0.0 l和<0.001)。停药30 d后,大鼠体重、摄食量、活动、外周血象、重要器官脏器系数均正常。生化指标检查,各给药组同空白对照组比较肌酐升高(P<0.001)。病理学检查各组各脏器均未发现明显改变。结论:不同性别的SD大鼠对腰痛宁胶囊的急性毒性反应有非常著性差异,雄性大鼠LD50比雌性高7.66倍。长期毒性研究表明,长期大剂量服用腰痛宁胶囊,对肾功能有一定影响并且恢复较慢,建议肾功能不好的患者慎用。通过对腰痛宁胶囊180 d用药过程中各项指标反应的观察,未见性别差异。综合分析认为,腰痛宁胶囊在规定剂量下服用是安全可靠的。

pH区带逆流色谱法分离纯化马钱子中马钱子碱和士的宁

建立了pH区带逆流色谱分离制备马钱子中生物碱类成分马钱子碱和士的宁的方法。溶剂系统为V(甲基叔丁基醚):V(乙腈):V(水)=2:2:3,静置分层后,上相加入三乙胺,使其浓度为10mmol/L,作为固定相;下相加入HCl,使其浓度为10mmol/L,作为流动相。从308mg马钱子总生物碱中分离得到50mg马钱子碱和120mg士的宁,得率分别为72.8%和85.1%;纯度分别为96.8%和98.3%。并采用LC-ESI-MS和13CNMR对目标化合物的结构进行了鉴定。

毛细管区带电泳法测定马钱子药材及其制剂中士的宁和马钱子碱的含量

目的:建立了测定马钱子药材及其制剂中土的宁和马钱子碱含量的毛细管区带电泳法。方法:选择25mmol·L^(-1)醋酸钠含0.01％冰醋酸(pH3.86)溶液为运行缓冲液,无涂层毛细管柱(57cm×75μm,有效长度50cm),采用5kPa,5s压力进样,运行电压30.0 kV,温度20℃,DAD检测波长203nm。实验以盐酸麻黄碱为内标物质。结果:士的宁和马钱子碱的浓度分别在6.93～138.20μg·mL^(-1)和6.51～130.20μg·mL^(-1)范围内时,具有良好的线性关系,相关系数r分别为0.9997和0.9994(n=6);马钱子药材中士的宁和马钱子碱的加样回收率分别为101.3％和99.42％;RSD分别为2.5％和2.2％(n=6)。士的宁和马钱子碱的最低检测限分别为0.05μg·mL^(-1)和0.06μg·mL^(-1)。结论:马钱子药材及其制剂中的其它组分与士的宁和马钱子碱可产生良好分离,本法简便、快速、准确、可靠。

士的宁和马钱子碱氮氧化物的研究

以士的宁和马钱子碱为母体，与过氧化氢反应，生成士的宁和马钱子碱氮氧化物，通过还原性试验证明，士的宁氮氧化物较马钱予碱氮氧化物稳定。

马钱子生品、炮制品中马钱子碱和士的宁的含量测定及毒性实验研究

目的测定马钱子生品、砂烫炮制品和牛奶炮制品中马钱子碱和士的宁含量,及其毒性研究。方法采用HPLC法测定马钱子生品、砂烫炮制品和牛奶炮制品中马钱子碱和士的宁含量,通过小鼠急性毒性实验测定马钱子生品、马钱子砂烫炮制品及马钱子牛奶炮制品的半数致死量(LD50)。结果马钱子生品中马钱子碱和士的宁的含量分别为(0.037±0.014)mg/g和(0.934±0.254)mg/g,LD50为1.9737 mg/kg体质量。马钱子砂烫炮制品中马钱子碱和士的宁的含量分别为(0.016±0.005)mg/g和(0.237±0.098)mg/g。马钱子牛奶炮制品中马钱子碱和士的宁的含量分别为(0.011±0.006)mg/g和(0.191±0.048)mg/g。马钱子砂烫炮制品和牛奶炮制品按最大给药剂量(2.70 mg/kg体质量)给药后,小鼠均无出现死亡。结论砂烫、牛奶炮制能够降低马钱子生品中马钱子碱和士的宁的含量,提高用药的安全性。

磷脂组成对马钱子总生物碱隐形脂质体抗肿瘤作用的影响

目的比较3种不同磷脂组成大豆磷脂、氢化大豆磷脂、复合磷脂氢化(氢化大豆磷脂∶大豆磷脂=1∶3,w/w)的隐形脂质体载药后对马钱子总生物碱抗肿瘤作用的影响。方法采用硫酸铵梯度法制备了马钱子总生物碱隐形脂质体。ICR小鼠接种S180瘤株造成移植性荷瘤小鼠模型,比较马钱子总生物碱溶液和3种不同磷脂组成隐形脂质体给药后荷瘤小鼠的抑瘤效果,比较给药后各组荷瘤小鼠的体质量、免疫器官(脾和胸腺)指数和肝、肾功能指数。结果磷脂组成对马钱子总生物碱隐形脂质体的抗肿瘤效果具有显著影响。1 mg/kg剂量下的马钱子总生物碱溶液、大豆磷脂隐形脂质体、氢化大豆磷脂隐形脂质体和复合磷脂隐形脂质体的抑瘤率分别为17.84%、28.00%、32.84%和47.09%。马钱子总生物碱复合磷脂与氢化大豆磷脂隐形脂质体给药后未发现对免疫器官存在明显的抑制作用;不同磷脂组成的马钱子总生物碱隐形脂质体对肝肾功能的影响以大豆磷脂隐形脂质体最大,其次为复合磷脂隐形脂质体,而氢化大豆磷脂隐形脂质体的影响最低。结论基于药效与安全性考虑,复合磷脂脂质体是抗肿瘤中药有效部位马钱子总生物碱具有开发前景的新型载体。

马钱子生物碱成分的体外抗肿瘤活性筛选

目的从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物。方法应用人鼻咽癌细胞株KB、人白血病细胞株HL-60、人胃癌细胞株BGC和人肝癌细胞株BEL-7402筛选6种马钱子生物碱类成分对其生长的抑制作用。结果士的宁对人鼻咽癌细胞株KB、人白血病细胞株HL-60和人胃癌细胞株BGC等细胞的生长有一定的抑制作用;伪士的宁对人鼻咽癌细胞株KB、人胃癌细胞株BGC和人肝癌细胞株BEL-7402等细胞的生长有一定的抑制作用;依卡金对人鼻咽癌细胞株KB和人胃癌细胞株BGC等细胞的生长有一定的抑制作用。结论士的宁、伪士的宁和依卡金对人鼻咽癌细胞株KB和人胃癌细胞株BGC等细胞的生长皆有抑制作用,呈现浓度-效应关系。

毛细管区带电泳法对马钱子药材中生物碱质量控制的研究

目的建立马钱子药材中生物碱质量控制的方法。方法利用毛细管区带电泳法,以来涂层石英毛细管(75μm×50 cm)为分离通道,80mmol·L^(-1)Tris-H_3BO_3(醋酸调pH至4.0)为运行缓冲溶液,分离电压23 kV,进样3.45×10~3 Pa,10s；柱温25℃；DAD检测波长214 nm。结果士的宁和马钱子碱的浓度均在1.0～120 mg·L^(-1)内呈良好线性关系,r分别为0.9999和0.9997；加样回收率分别为96.57%(RSD=1.73%)和102.04%(RSD=1.62%)；最低检测限分别为0.490 mg·L^(-1)和0.957 mg·L^(-1)。结论实验证明利用毛细管区带电泳法,马钱子药材中士的宁和马钱子碱能够与其他组分得到很好的分离,方法简单、快速,可作为中药材中有效成分质量控制的方法。

马钱子散中马钱子总生物碱的含量测定方法研究

目的：建立马钱子散中马钱子总生物碱的含量测定方法。方法：采用酸性染料比色法，溴百里香酚蓝为酸性染料，分别以马钱子碱和士的宁为对照品，测定马钱子散中马钱子总生物碱含量。结果：士的宁、马钱子碱在0．0200～0．0802mg／mL浓度范围内与吸光度均呈良好的线性关系，士的宁、马钱子碱的回收率分别为：95．30％-101．48％（RSD为2．28％），97．14％～105．30％（（RSD为2．95％）；以马钱子碱计，马钱子散中马钱子总生物碱含量为3．16％。结论：所建立的总生物碱测定方法准确、稳定、重复性好，可用于马钱子散中马钱子总生物碱的含量测定。

马钱子及其不同炮制品水煎出物中士的宁和马钱子碱的含量测定

目的用HPLC法对马钱子的江西法炮制品及其改良法炮制品的水煎出物中士的宁和马钱子碱含量进行测定。方法色谱柱填料为硅胶,流动相为正己烷-二氯甲烷-甲醇-浓氨水(47.5∶47.5∶5∶0.35),检测波长为254 nm。结果江西法炮制品及其改良法炮制品中士的宁和马钱子碱的含量较低。其中以醋浸砂炒品中的含量为最低。结论江西法及其改良法炮制的马钱子比其砂烫法和油炸法更易降低毒性,使其安全范围增大,从而提高其临床用药的安全性。

基于固体发酵的白钱菌质急性毒性及镇痛作用的研究

目的:利用药用真菌白僵菌固体发酵中药马钱子,使马钱子毒性下降,同时保持其镇痛作用。方法:选用对马钱子基质适应性较强的白僵菌,在一定条件下对马钱子进行双向固体发酵,获得白钱菌质;观察马钱子发酵前后小鼠急性毒性(LD50)的变化情况,并比较它们对醋酸腹腔刺激所致小鼠扭体的抑制作用和对小鼠热板致痛的影响。结果:发酵组的LD50为167.3mg/kg,与马钱子生品相比,LD50上升率为33.8%,各发酵组均可明显延长小鼠舔后足的潜伏期(P<0.001),发酵组的高、中剂量组可明显减少小鼠腹腔注射醋酸引起的扭体反应次数(P<0.05或P<0.01),但低剂量组对减少扭体次数未见明显效果。结论:马钱子经白僵菌发酵后毒性明显降低,并保持了其镇痛作用。

毛细管区带电泳法测定马钱子及其制剂中士的宁和马钱子碱的含量

目的 :建立毛细管区带电泳法 (CZE)测定马钱子及其制剂“治伤消淤丸”中士的宁和马钱子碱的含量。方法 :选择含0 .2 m ol/ L醋酸的 2 0 mm ol/ L醋酸铵 (p H 3.6 4)溶液为分离用缓冲液 ,以盐酸多巴胺为内标 ,采用 3.5 k Pa进样 5 s,运行电压2 5 k V,紫外检测波长 2 14nm。结果 :士的宁和马钱子碱的浓度在 5～ 10 0 μg/ ml内时 ,具有良好的线性关系和重现性 ,相关系数 r分别为 0 .9996和 0 .9995 ,RSD<4.5 % ,加样回收率均在 95 %～ 10 5 % ,最低检测限分别为 0 .0 6和 0 .0 4μg/ m l。 结论 :CZE可有效地分离、测定马钱子及其制剂“治伤消淤丸”中的士的宁和马钱子碱的含量 ,方法简便、快速、准确、可靠。

马钱子的量效关系及毒性作用

制马钱子在４０～８０ｍｇ／ｋｇ范围内，对小鼠具有明显的剂量依赖性抗炎镇痛作用，小于４０ｍｇ／ｋｇ时仅有抗炎作用，大于８０ｍｇ／ｋｇ时连续用药毒性增强，还可使小鼠胸腺重量明显增加。小鼠ｐｏ ＬＤ_５０为１４０．１３±１４．７４ｍｇ／ｋｇ。提示该药用量须适宜。

马钱子的毒理学研究

马钱子具有显著的中药临床应用价值 ,但它的毒性限制了其临床应用。从对马钱子毒性的认识、毒性反应机理、影响毒性的因素 ,几方面对马钱子的毒理学研究作一综述。

红栓菌液体发酵条件下马钱子中士的宁和马钱子碱的质量分数变化

在单因素实验条件优化的基础上,采用L16(45)正交试验,以士的宁和马钱子碱的质量分数为主要考察指标,结合菌体生物量,研究不同碳源、氮源、装液量、中药量、菌球数量以及发酵时间对红栓菌发酵马钱子的影响,优化红栓菌液体发酵马钱子的最佳培养基和培养条件。优化工艺为:以麦芽糖为碳源,豆饼粉为氮源,装液量为100mL(250mL的三角瓶),加入0.25g马钱子细粉,接入3个大小均一的红栓菌菌球,28℃摇床培养5d。与发酵空白比较,红栓菌-马钱子发酵液中士的宁和马钱子碱的质量分数总和降低了8.74%,菌体生物量达10.6g/L,增加37.7%,同时马钱子碱氮氧化物和士的宁氮氧化物的质量分数增加。马钱子能促进红栓菌菌体的生长,液体发酵培养可达到降低马钱子中毒性成分质量分数的目的。

马钱子药理作用及减毒增效方法研究进展

综述马钱子药理作用和减毒增效方法研究进展。马钱子主要含有生物碱类化合物,具有抗肿瘤、调节免疫、抗炎镇痛、促进神经功能恢复、促进骨折愈合、修复软骨损伤、改善酒精依赖、调节小肠运动等药理作用。马钱子属于剧毒药,可通过控制剂量、炮制加工、药物配伍、研发新剂型与新工艺等方法达到减毒增效的目的。

马钱子总生物碱隐形脂质体的制备及急性毒性研究

目的:制备马钱子总生物碱隐形脂质体并与普通脂质体比较急性毒性。方法:采用酸性染料法测定马钱子总生物碱的含量。采用氨性氯仿法从制马钱子中提取了马钱子总生物碱并测定了纯度。以士的宁为模型药物,考察马钱子总生物碱隐形脂质体的制备工艺。采用硫酸铵梯度法制备了马钱子总生物碱隐形脂质体及普通脂质体,比较了两者的包封率、粒径等药剂学性质以及急性毒性。结果:采用优化后的处方与工艺,士的宁隐形脂质体的包封率为90.64%,产率为98.82%,并应用于马钱子总生物碱隐形脂质体的制备。马钱子总生物碱隐形脂质体和普通脂质体的包封率分别为80.97%和73.01%,粒径分别为106.5 nm和163.4 nm。马钱子总生物碱溶液、普通脂质体及隐形脂质体的LD50分别为1.85、2.56和3.42 mg/kg。结论:士的宁隐形脂质体的制备工艺可用于马钱子总生物碱隐形脂质体制备。与普通脂质体相比,隐形脂质体作为马钱子总生物碱的载体性质更加理想。

马钱子总生物碱复合磷脂脂质体包封率的测定

目的：建立测定马钱子总生物碱复合磷脂脂质体包封率的方法。方法：采用浸渍法提取马钱子总生物碱并进行了纯化,采用硫酸铵梯度法制备了马钱子总生物碱复合磷脂脂质体。以士的宁为对照品,采用紫外分光光度法在254nm测定用破膜剂溶解的马钱子总生物碱脂质体的吸光度测定其含量。采用葡聚糖凝胶柱分离脂质体和游离药物,分别测定含量后计算包封率。结果：马钱子总生物碱平均得率为3.49%。士的宁标准曲线的范围是2.4-20μg/mL,加样回收率98.04%±1.31%。葡聚糖凝胶柱层析的回收率为102.93%±2.04%。结论：所建立的方法简便快捷稳定,可以满足马钱子总生物碱复合磷脂脂质体质量控制的需要。