马铃薯CRISPR/Cas9编辑多酚氧化酶StuPPO9基因的初探

马铃薯多酚氧化酶基因家族成员StuPPO9是晚疫病原菌诱导表达型基因。为研究StuPPO9基因在马铃薯抗晚疫病中的作用,本研究以马铃薯StuPPO9基因为靶基因,构建了StuPPO9基因的CRISPR/Cas9基因编辑载体。利用农杆菌介导法,建立马铃薯CRISPR/Cas9基因编辑遗传转化体系,最终获得6株转基因阳性植株。进一步对靶位点序列进行测序分析,发现在转基因马铃薯的靶位点处检测到4种基因编辑方式。利用qPCR技术测定发生基因编辑的阳性植株中StuPPO9的表达情况,发现转基因植株StuPPO9(CRISPR)-2-4中,StuPPO9基因的表达受到明显抑制。以上结果表明,本研究已成功将CRISPR/Cas9基因编辑体系运用到马铃薯中,为马铃薯StuPPO9基因功能研究提供技术支持。