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甘蔗类钙调素ScCML13与SCMV运动蛋白P3N-PIPO的互作研究
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作者 玉泉馨 杨宗桃 +7 位作者 张海 程光远 焦文迪 曾康 罗廷绪 黄国强 王璐 徐景升 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1855-1866,共12页
类钙调素(Calmodulin-like,CML)是植物特有的钙信号感受器蛋白之一,参与植物生长发育和响应外界环境信号转导。甘蔗(Saccharum spp.hybrid)中CML应答甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)侵染尚未见报道。本研究从甘蔗热带种Badil... 类钙调素(Calmodulin-like,CML)是植物特有的钙信号感受器蛋白之一,参与植物生长发育和响应外界环境信号转导。甘蔗(Saccharum spp.hybrid)中CML应答甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)侵染尚未见报道。本研究从甘蔗热带种Badila(S.officinarum)中克隆了一个CML基因,命名为ScCML13。该基因开放读码框(open reading frame,ORF)长度为519 bp,编码172 aa。生物信息学分析表明,ScCML13属于稳定的亲水脂溶蛋白,无跨膜结构域,有4个结合Ca2+的EF-hand结构域;系统进化树分析表明,该蛋白在单子叶和双子叶植物中及单子叶C3和C_(4)植物中具有明显分化;酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)试验表明,ScCML13与SCMV的运动蛋白P3N-PIPO互作。亚细胞定位试验表明ScCML13定位于内质网和细胞核。共定位试验发现ScCML13会干扰SCMV-P3N-PIPO的质膜(plasma membrane)或胞间连丝(plasmodesmata)定位。实时荧光定量PCR(Real Time Quantitative PCR,RT-qPCR)分析发现,ScCML13基因主要在甘蔗叶片中表达,在节间和根中的相对表达量低;ScCML13基因在感染SCMV后2 h显著上调,随后下调至与对照组相比的水平,而在感染后期上调。 展开更多
关键词 类钙调素 甘蔗花叶病毒 P3N-PIPO 蛋白互作
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Virus Infection Situation of 37 Sugarcane Varieties in Guilin City
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作者 Shen Linbo Xiong Guoru +3 位作者 Wang Wenzhi Feng Xiaoyan Feng Cuilian Zhang Shuzhen 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2017年第6期24-27,共4页
To understand virus infection situation of integrated demonstration and regional test sugarcane varieties in national sugarcane system in Guilin City,Guangxi Province,leaf samples with or without symptoms were collect... To understand virus infection situation of integrated demonstration and regional test sugarcane varieties in national sugarcane system in Guilin City,Guangxi Province,leaf samples with or without symptoms were collected from 37 sugarcane varieties,and five kinds of viruses were detected by RT-PCR with specific primers,including Sugarcane yellow leaf virus( SCYLV),Sugarcane streak mosaic virus( SCSMV),Sorghum mosaic virus( SrM V),Sugarcane mosaic virus( SCMV) and Sugarcane bacilliform virus( SCBV). The results showed that SCYLV was detected from four sugarcane varieties,and the detection rate was10. 81%; SCSMV was detected from five sugarcane varieties,and the detection rate was 13. 51%; SrM V was detected from four sugarcane varieties,and the detection rate was 10. 81%; SCMV had not been found; SCBV was detected from 27 sugarcane varieties,and the detection rate was 72. 9%. Additionally,mixed infection of different viruses was widespread,and the total mixed infection rate was 21. 62%. Thus,integrated demonstration and regional test sugarcane varieties in national sugarcane system in Guilin City had been seriously infected by viruses,and mixed infection of different viruses was common. The paper will provide a reference for breeding and popularization of antiviral sugarcane varieties. 展开更多
关键词 sugarcane yellow leaf virus(SCYLV) sugarcane streak mosaic virus(SCSMV) Sorghum mosaic virus(SrMV) sugarcane mosaic virus(scmv) sugarcane BACILLIFORM virus(SCBV)
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高糖新品种云蔗1640花叶病原的检测与脱毒种苗生产 被引量:1
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作者 吴转娣 赵培方 +4 位作者 杨洪昌 昝逢刚 覃伟 杨立凡 郭家文 《中国糖料》 2024年第2期1-8,共8页
【目的】甘蔗花叶病是导致甘蔗品种减产的重要病害,通过应用甘蔗健康种苗可以有效提高甘蔗种苗的抗病能力。‘云蔗1640’是由云南省农业科学院甘蔗所培育的高产高糖甘蔗新品种,适宜在我国热区推广种植。【方法】本研究通过田间采样调查... 【目的】甘蔗花叶病是导致甘蔗品种减产的重要病害,通过应用甘蔗健康种苗可以有效提高甘蔗种苗的抗病能力。‘云蔗1640’是由云南省农业科学院甘蔗所培育的高产高糖甘蔗新品种,适宜在我国热区推广种植。【方法】本研究通过田间采样调查结合RT-PCR检测的方法,完成了‘云蔗1640’甘蔗品种的花叶病毒带病情况调查,开展了‘云蔗1640’健康种苗的脱毒处理与品种的快繁。【结果】确认‘云蔗1640’携带有甘蔗花叶病毒,其主要的病原以甘蔗线条花叶病毒为主,甘蔗花叶病毒次之,不带有高粱花叶病毒。通过温水处理结合茎尖脱毒的方法培养获得了‘云蔗1640’健康种苗。研究表明经RT-PCR的方法检测线条花叶病毒和甘蔗花叶病毒的脱毒效率分别为10.12%和90.62%。经筛选出不带病原的脱毒种苗作为原种开展健康种苗的组培快繁。【结论】糖料蔗健康种苗的繁育是一种有效的良种繁育技术,可加快优异甘蔗新品种的推广与应用,为我国蔗糖产业的发展提供新的优异种质,是我国蔗区老品种提纯复壮的新来源。 展开更多
关键词 甘蔗 ‘云蔗1640’ 花叶病 脱毒种苗 种苗繁育与推广
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SrMV和SCMV侵染玉米的细胞超微病变比较研究 被引量:5
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作者 王卫兵 洪健 周雪平 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期215-220,共6页
运用超薄切片电镜技术比较观察了高粱花叶病毒(SrMV)和甘蔗花叶病毒(SCMV)侵染玉米叶片细胞的超微结构变化,结果显示:线状SrMV和SCMV粒子分散或成束分布在感病细胞的细胞质内,同时在细胞质中产生大量柱状内含体.SrMV引起风轮体和卷筒体... 运用超薄切片电镜技术比较观察了高粱花叶病毒(SrMV)和甘蔗花叶病毒(SCMV)侵染玉米叶片细胞的超微结构变化,结果显示:线状SrMV和SCMV粒子分散或成束分布在感病细胞的细胞质内,同时在细胞质中产生大量柱状内含体.SrMV引起风轮体和卷筒体,属于Edwardson等划分的第 型,一些内含体分布于细胞壁附近,有的直接与细胞壁胞间连丝相接.SCMV引起风轮体、卷筒体和片层聚集体,属于第 型,一些成束的病毒粒子和内含体存在于筛管中.对两种病毒的细胞病理学效应作了比较,并对可能与病毒胞间运动相关的超微结构进行了讨论. 展开更多
关键词 高粱花叶病毒 甘蔗花叶病毒 柱状内含体 细胞病理学 超微结构 玉米 叶片细胞
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甘蔗花叶病毒(SCMV)种群结构分析 被引量:12
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作者 郑艳茹 翟玉山 +4 位作者 邓宇晴 成伟 程光远 杨永庆 徐景升 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第2期135-140,共6页
针对已公布的18个甘蔗花叶病毒(SCMV)全基因组序列,利用MEGA 5.1分析了其11个蛋白(P1、HC-Pro、P3、6K1、CI、6K2、VPg、NIa-Pro、Nib、CP-C和多聚蛋白)编码基因所受的选择压,并结合其编码蛋白的功能,预测了部分基因在SCMV进化过程中的... 针对已公布的18个甘蔗花叶病毒(SCMV)全基因组序列,利用MEGA 5.1分析了其11个蛋白(P1、HC-Pro、P3、6K1、CI、6K2、VPg、NIa-Pro、Nib、CP-C和多聚蛋白)编码基因所受的选择压,并结合其编码蛋白的功能,预测了部分基因在SCMV进化过程中的角色和变异位点.结果显示:P1和CP-N端的变异性程度较大,P1蛋白多样性最高;CP-C端变异性和多样性均较低;PIPO受到的选择压最小,但多样性最低,可能是由于PIPO与P3共用一段编码序列.来源于甘蔗的SCMV多聚蛋白的第2 853、2 897和2 904个氨基酸位点(在CP中部)分别为T、R和E,而来源于玉米的SCMV多聚蛋白对应的氨基酸位点分别为S、K和D,表明这3个位点具有寄主依赖性. 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 种群结构 选择压力
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病毒侵染对转SCMV-CP基因甘蔗光合速率和活性氧代谢的影响 被引量:4
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作者 姚伟 段真珍 +3 位作者 陈义强 何正权 张木清 陈如凯 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期95-99,共5页
对转SCMV-CP基因甘蔗叶绿素含量、光合参数、活性氧代谢有关的酶活性进行了测定分析,结果表明转基因甘蔗由于外源CP基因的导入,病毒在植株体内无法正常复制繁殖,从而保护了植株细胞免受因病毒侵染造成的伤害。未转基因甘蔗接种后病毒迅... 对转SCMV-CP基因甘蔗叶绿素含量、光合参数、活性氧代谢有关的酶活性进行了测定分析,结果表明转基因甘蔗由于外源CP基因的导入,病毒在植株体内无法正常复制繁殖,从而保护了植株细胞免受因病毒侵染造成的伤害。未转基因甘蔗接种后病毒迅速繁殖蔓延,受害叶片对活性氧清除能力的下降,促使有毒物质活性氧的积累,启动膜脂过氧化,造成膜的损伤。 展开更多
关键词 甘蔗 花叶病毒 活性氧代谢
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侵染中国甘蔗和玉米的SCMV CP基因序列多样性分析 被引量:9
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作者 周国辉 许东林 陈晓琴 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期84-91,共8页
【目的】揭示侵染中国甘蔗及玉米的甘蔗花叶病毒(Sugarcanemosaicvirus,SCMV)的遗传多样性,为抗病品种培育及病害综合防治提供依据。【方法】以病株叶组织总RNA抽提物为模板,通过RT-PCR扩增及扩增产物直接测序获得了华南地区SCMV26个甘... 【目的】揭示侵染中国甘蔗及玉米的甘蔗花叶病毒(Sugarcanemosaicvirus,SCMV)的遗传多样性,为抗病品种培育及病害综合防治提供依据。【方法】以病株叶组织总RNA抽提物为模板,通过RT-PCR扩增及扩增产物直接测序获得了华南地区SCMV26个甘蔗及玉米田间分离物的近全长CP基因序列,结合GenBank中已公布的部分相应序列,采用序列比对及分子系统进化树重建方法,对SCMVCP基因序列的变异性进行分析。【结果】中国SCMV可分为3个分子组群,各组群分别对应于各自来源的寄主,即杂种甘蔗(糖用甘蔗,Saccharuminterspecifichybrids)、玉米(Zeamays)和高贵甘蔗(果用甘蔗,Saccharumofficinarum)。CP基因核苷酸同一性,不同组群之间为78%~84%,同一组群内部各分离物之间大于91%。在分子系统进化树中,这3个分子组群各自聚集成簇,前两个组群分别隶属于Alegria等(2003)建立的甘蔗组(sugarcanegroup,SCE组)和玉米组(maizegroup,MZ组),第3个组群为本研究首次发现,命名为高贵甘蔗组(noblesugarcanegroup,NSCE组)。侵染杂种甘蔗的SEC组不存在明显的地域分化,而侵染玉米和高贵甘蔗的MZ组和NSEC组则可对应地理来源分为若干亚组,前者可分为华东华中亚组、西北西南亚组及华南亚组,后者至少包括华南亚组和浙江亚组。在玉米、杂种甘蔗及高贵甘蔗混栽区,不同作物上的SCMV可以通过蚜虫传播而交叉侵染,但各组群间依寄主种类存在相对隔离现象。本研究还发现中国华南地区,SCMV可自然侵染甘蔗近缘属杂草河八王(Narengasp.)和芒(Miscanthussp.)。【结论】在中国,SCMV存在丰富的遗传多样性,其分化与寄主类型密切相关,可分为杂种甘蔗组、玉米组和高贵甘蔗组,其中玉米组和高贵甘蔗组又可根据地理来源分为若干亚组。在抗病品种的选育及病害综合防治中,必须充分考虑到病毒的这种分化现象。 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 CP基因 序列分析 遗传分化
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广州地区SCMV玉米分离物外壳蛋白基因的序列分析及其引致的生理病变 被引量:3
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作者 陈晓琴 伦璇 +2 位作者 周凌云 许东林 周国辉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期151-156,共6页
外壳蛋白(CP)基因序列分析结果表明,广州地区甜玉米上的甘蔗花叶病毒(SCMV)分离物属于玉米变异组,与我国其他地区玉米上的SCMV分离物有较大差异。其CP基因核苷酸同一率与广东甜玉米分离物(AJ310105)为91.6%,而与我国其他地区玉米分离物... 外壳蛋白(CP)基因序列分析结果表明,广州地区甜玉米上的甘蔗花叶病毒(SCMV)分离物属于玉米变异组,与我国其他地区玉米上的SCMV分离物有较大差异。其CP基因核苷酸同一率与广东甜玉米分离物(AJ310105)为91.6%,而与我国其他地区玉米分离物同一率为85.1%-87.1%。通过对该分离物侵染甜玉米所致的细胞病变进行超薄切片电镜观察,结果表明,除多种细胞器病变外,还有4种类型的内含体,即风轮体、卷筒体、束状体和片层集聚体,部分束状体与胞间连丝相连,可能与病毒胞间运转有关。该分离物机械摩擦接种侵染甜玉米后,引致寄主植物叶组织PAL和SOD酶活性较大的变化,其中PAL活性在侵染早期比对照低,随后比对照高,SOD活性比对照稍高,而POD和CAT酶活则与对照无显著差异。 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 外壳蛋白基因 序列分析 细胞病变
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甘蔗类泛素蛋白UBL5应答SCMV侵染及其与SCMV-6K2的互作 被引量:3
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作者 杨宗桃 刘淑娴 +5 位作者 程光远 张海 周营栓 商贺阳 黄国强 徐景升 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期332-341,共10页
泛素化修饰在蛋白功能调控、生长发育和逆境应答中具有重要作用。类泛素蛋白(ubiquitin-likeproteins,UBLs)是泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)的重要组分。本课题组前期利用酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)技术... 泛素化修饰在蛋白功能调控、生长发育和逆境应答中具有重要作用。类泛素蛋白(ubiquitin-likeproteins,UBLs)是泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)的重要组分。本课题组前期利用酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)技术从甘蔗(Saccharumspp.hybrid)中分离鉴定了1个与甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)编码蛋白6K2互作的类泛素蛋白UBL5,命名为Sc UBL5,长度为73aa。本研究利用双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)试验进一步证实了Sc UBL5与SCMV-6K2互作;生物信息学分析表明,Sc UBL5为稳定的亲水性非分泌蛋白,无信号肽和跨膜结构。系统进化树分析表明,Sc UBL5具有明显的种属特异性。亚细胞定位分析表明,Sc UBL5定位于细胞质和细胞核。实时荧光定量PCR分析发现,Sc UBL5基因的表达具有明显的组织特异性,在完成形态建成的正一叶、第7叶、根和第8节间中的相对表达量显著高于未成熟的心叶和第3节间;SCMV侵染对Sc UBL5基因表达影响显著,Sc UBL5基因在侵染早期显著上调,侵染后期下调但显著高于对照。 展开更多
关键词 甘蔗 类泛素蛋白 甘蔗花叶病毒 6K2
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甘蔗PsbR亚基应答SCMV侵染及其与SCMV-6K2的互作 被引量:2
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作者 张海 程光远 +4 位作者 杨宗桃 刘淑娴 商贺阳 黄国强 徐景升 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1522-1530,共9页
光系统II(Photosystem II,PSII)的PsbR亚基对于放氧复合体(oxygen-evolving complex)的组装和稳定具有至关重要的作用。本课题组前期克隆了甘蔗(Saccharum spp.hybrid)的PsbR亚基编码基因,命名为ScPsbR,并利用酵母双杂交技术(yeast two ... 光系统II(Photosystem II,PSII)的PsbR亚基对于放氧复合体(oxygen-evolving complex)的组装和稳定具有至关重要的作用。本课题组前期克隆了甘蔗(Saccharum spp.hybrid)的PsbR亚基编码基因,命名为ScPsbR,并利用酵母双杂交技术(yeast two hybrid,Y2H)验证了ScPsbR与甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)编码蛋白6K2的互作。本研究通过生物信息学分析表明,ScPsbR具有典型的PsbR亚基结构域,无信号肽,具有1个跨膜结构域,为稳定的疏水性蛋白。系统进化树分析表明,该蛋白在C3和C4植物中存在明显的分化。亚细胞定位试验表明,ScPsbR定位于叶绿体且与SCMV-6K2共定位。双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)试验进一步验证了ScPsbR与SCMV-6K2的互作。实时荧光定量PCR检测表明,ScPsbR基因表达具有显著的组织特异性,在根和茎中表达极少,未成熟叶片和初衰叶中次之,成熟叶片中相对表达量最高;SCMV侵染显著影响ScPsbR基因表达,ScPsbR基因在侵染0~12 h显著上调,侵染1~5 d下调至略低于对照的水平,但差异不显著,侵染7~15 d显著下调。 展开更多
关键词 PsbR亚基 甘蔗花叶病毒 6K2 蛋白互作
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甘蔗易化子家族蛋白Sc ZIFL1与6K2互作应答SCMV侵染
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作者 刘淑娴 杨宗桃 +5 位作者 程光远 张海 周营栓 商贺阳 黄国强 徐景升 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期3080-3090,I0001-I0012,共23页
易化子超家族转运蛋白(major facilitator superfamily,MFS)在生物中普遍存在,锌诱导类辅助因子(zinc induced facilitator like,ZIFL)是MFS成员,参与小分子有机物运输。本课题组前期利用酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)技术从甘蔗(Sa... 易化子超家族转运蛋白(major facilitator superfamily,MFS)在生物中普遍存在,锌诱导类辅助因子(zinc induced facilitator like,ZIFL)是MFS成员,参与小分子有机物运输。本课题组前期利用酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)技术从甘蔗(Saccharum spp.hybrid)中分离鉴定了1个与甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)编码蛋白6K2互作的ZIFL,命名为Sc ZIFL1。本研究利用双分子荧光互补技术(bimolecular fluorescence complementation,Bi FC)进一步验证了Sc ZIFL1与SCMV-6K2的互作。生物信息学分析表明,Sc ZIFL1长度为484个氨基酸,无信号肽,具有12个跨膜结构域,为不稳定的疏水性蛋白。序列比对分析表明,Sc ZIFL1具有MFS保守的半胱氨酸模体、特征基序及反向运输基序。系统进化树分析表明,该蛋白在单子叶和双子叶植物之间,以及单子叶C_(3)植物和C_(4)植物之间存在明显分化。亚细胞定位试验表明,Sc ZIFL1定位于液泡膜,部分与SCMV-6K2共定位。实时荧光定量PCR分析发现,Sc ZIFL1基因的表达具有明显的组织特异性,在茎中表达最高,叶中次之,根中最低;在完成形态建成且处于旺盛工作状态的+1叶和第8节间中的相对表达量显著高于未成熟的心叶、第3节间和渐衰叶片+7叶;接种SCMV后,Sc ZIFL1表达量在侵染早期显著上调,随后持续高表达。 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 6K2 ZIFL1 蛋白互作
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甘蔗分子伴侣ShDnaJ基因克隆及在甘蔗线条花叶病毒胁迫下的表达分析
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作者 冯小艳 王文治 +4 位作者 王俊刚 沈林波 赵婷婷 冯翠莲 张树珍 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2310-2319,共10页
【目的】克隆甘蔗分子伴侣基因Sh DnaJ,并分析其在甘蔗线条花叶病毒(SCSMV)胁迫下的表达模式,为探究ShDnaJ基因在甘蔗应答SCSMV侵染过程中的功能和作用机制提供理论参考。【方法】通过同源克隆技术克隆ShDnaJ基因完整开放阅读框(ORF)序... 【目的】克隆甘蔗分子伴侣基因Sh DnaJ,并分析其在甘蔗线条花叶病毒(SCSMV)胁迫下的表达模式,为探究ShDnaJ基因在甘蔗应答SCSMV侵染过程中的功能和作用机制提供理论参考。【方法】通过同源克隆技术克隆ShDnaJ基因完整开放阅读框(ORF)序列,利用生物信息学软件对其进行分析,再利用绿色荧光蛋白(GFP)融合表达法分析ShDnaJ蛋白的亚细胞定位,采用实时荧光定量PCR检测ShDnaJ基因在甘蔗不同组织及在SCSMV胁迫下的表达水平。【结果】ShDnaJ基因ORF全长1260 bp,编码419个氨基酸残基,蛋白分子量为45682.47 Da,理论等电点(pI)为8.78,属于稳定的亲水蛋白,含有DnaJ结构域,属于DnaJ超家族成员,定位于内质网。ShDnaJ蛋白的二级结构由113个α-螺旋、31个β-转角、78个延伸链和197个无规则卷曲组成。ShDnaJ蛋白与高粱SbDnaJ蛋白的氨基酸序列相似性最高,为96.93%,说明两者亲缘关系最近。ShDnaJ基因在甘蔗根、茎和叶中均有表达,且根和茎中的相对表达量显著高于叶中(P<0.05,下同),但未成熟茎Sh DnaJ基因的相对表达量高于成熟茎;成熟叶ShDnaJ基因的相对表达量高于未成熟叶。随着处理时间的推移,SCSMV胁迫组和对照组(磷酸缓冲液处理)中ShDnaJ基因的相对表达量整体呈下降趋势,但SCSMV接种后不同时间点ShDnaJ基因的相对表达量均显著高于对照组。【结论】ShDnaJ基因具有组织表达特异性,且组织的成熟程度会影响其表达水平。SCSMV胁迫下该基因表达上调,推测该基因参与调控甘蔗植株对SCSMV的抗性。 展开更多
关键词 甘蔗 分子伴侣DnaJ 基因克隆 甘蔗线条花叶病毒(SCSMV) 表达分析
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甘蔗花叶病毒四川分离物的鉴定和遗传变异分析 被引量:3
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作者 李明骏 钟源 +2 位作者 廖豪杰 吴根土 青玲 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期45-53,共9页
玉米和甘蔗是西南地区两种重要的禾本科农作物,而病毒病的常年发生严重威胁着玉米和甘蔗的生产.从四川攀枝花田间采集表现花叶、褪绿、斑驳或矮化等病毒病症状的玉米样品54份和甘蔗样品42份,用小RNA深度测序结合反转录聚合酶链式反应进... 玉米和甘蔗是西南地区两种重要的禾本科农作物,而病毒病的常年发生严重威胁着玉米和甘蔗的生产.从四川攀枝花田间采集表现花叶、褪绿、斑驳或矮化等病毒病症状的玉米样品54份和甘蔗样品42份,用小RNA深度测序结合反转录聚合酶链式反应进行病毒检测,以明确引起该地区玉米和甘蔗病毒病的病原.结果显示:从玉米病株上检测到甘蔗花叶病毒(sugarcane mosaic virus,SCMV)、玉米黄花叶病毒(maize yellow mosaic virus,MaYMV)和留尼旺玉米线条病毒(maize streak Reunion virus,MSRV),3种病毒的检出率分别为66.7%,59.3%和3.7%;从甘蔗病样中检测到SCMV(52.4%)、甘蔗瓜德罗普杆状病毒A(sugarcane bacilliform Guadeloupe A virus,SCBGAV)(76.2%)和高粱花叶病毒(sorghum mosaic virus,SrMV)(28.6%).鉴于SCMV在玉米和甘蔗田间样品中的高检出率,利用其外壳蛋白基因对SCMV四川分离物的遗传变异进行综合分析.系统发育分析表明:120个SCMV中国分离物被分为5组,且其进化分组表现出宿主和地理起源的相关性,来源于玉米的SCMV四川分离物主要被聚入C组,而来源于甘蔗的SCMV四川分离物被聚入E组.核苷酸多样性分析表明:来源于玉米和甘蔗的SCMV四川分离物群体间变异度较高.FST测试表明:四川和云南两地SCMV群体间存在频繁基因流,且群体统计分析结果显示SCMV四川和云南分离物群体存在潜在的扩张趋势.该研究是对四川玉米和甘蔗上病毒病原的综合鉴定,也是对SCMV四川分离物遗传变异情况的首次报道,为SCMV病毒病的防控提供了重要参考依据. 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 玉米 甘蔗 病毒检测 遗传变异
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甘蔗VAMP相关蛋白ScPVA12与甘蔗花叶病毒P3N-PIPO的互作研究 被引量:1
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作者 玉泉馨 杨宗桃 +8 位作者 张海 程光远 周营栓 焦文迪 曾康 罗廷绪 黄国强 张木清 徐景升 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2472-2484,共13页
植物囊泡膜蛋白相关蛋白PVA12 (plant vesicle-associated membrane protein (VAMP)-associated proteins homolog12)属于VAP27家族蛋白,在细胞中介导内质网囊泡运输以及膜融合。甘蔗(Saccharumspp.hybrid)PVA12应答甘蔗花叶病毒(Sugarc... 植物囊泡膜蛋白相关蛋白PVA12 (plant vesicle-associated membrane protein (VAMP)-associated proteins homolog12)属于VAP27家族蛋白,在细胞中介导内质网囊泡运输以及膜融合。甘蔗(Saccharumspp.hybrid)PVA12应答甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus, SCMV)侵染尚未见报道。本研究从栽培种新台糖22号(ROC22)中克隆了PVA12基因,命名为ScPVA12。该基因开放读码框(open reading frame, ORF)的长度为735 bp,其编码长度为244 aa的蛋白。生物信息学分析表明,ScPVA12是一种不稳定的亲水性脂溶蛋白,C端具有跨膜结构域;二级结构中无规则卷曲占比最高;进化树分析表明,该蛋白在单子叶和双子叶植物中存在明显分化。酵母双杂交(yeast two-hybrid, Y2H)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation, BiFC)试验表明, ScPVA12与SCMV-P3N-PIPO蛋白互作。亚细胞定位试验表明ScPVA12定位于内质网。共定位试验表明ScPVA12与SCMV-P3N-PIPO共定位于内质网。实时荧光定量PCR分析发现,ScPVA12基因在甘蔗各组织中均有表达,在第8节间中的表达量最低,在正七叶中的表达量最高;SCMV侵染对ScPVA12基因表达影响显著,在SCMV胁迫下ScPVA12基因先下调表达,后期恢复正常水平。 展开更多
关键词 PVA12 甘蔗花叶病毒 P3N-PIPO 蛋白互作
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甘蔗ShPR10基因的克隆及其编码蛋白与甘蔗线条花叶病毒P1蛋白的互作研究 被引量:1
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作者 黄佳艳 冯小艳 +3 位作者 沈林波 王文治 胡海燕 张树珍 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期163-174,共12页
病程相关蛋白10(pathogenesis related protein 10,PR10)在植物抵抗病毒侵染中发挥重要作用。前期以甘蔗线条花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)编码的RNA沉默抑制子P1为诱饵,筛选获得一个甘蔗ShPR10蛋白。为探究ShPR10在... 病程相关蛋白10(pathogenesis related protein 10,PR10)在植物抵抗病毒侵染中发挥重要作用。前期以甘蔗线条花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)编码的RNA沉默抑制子P1为诱饵,筛选获得一个甘蔗ShPR10蛋白。为探究ShPR10在甘蔗应答SCSMV侵染过程中的功能,利用同源克隆技术克隆甘蔗ShPR10基因并对其编码蛋白进行生物信息学分析,利用绿色荧光蛋白融合表达法分析ShPR10蛋白的亚细胞定位,采用酵母双杂交和双分子荧光互补技术验证ShPR10与SCSMV P1的互作关系,采用农杆菌共浸润瞬时表达系统和Western blot技术分析ShPR10对P1沉默抑制子活性的影响。结果显示,甘蔗ShPR10基因开放阅读框全长570 bp,编码一个不稳定亲水蛋白,蛋白分子量为21.17 kD,等电点为4.77,含有一个P-loop基序,不含跨膜结构域和信号肽。ShPR10二级结构包含51.85%的无规则卷曲、35.98%的α-螺旋、7.41%的延伸链和4.76%的β-转角。ShPR10蛋白与玉米ZmPR10蛋白的氨基酸序列相似性高达91.53%,两者在进化树上聚为一个分支。ShPR10定位在细胞质和细胞核,与SCSMV P1在酵母细胞和烟草细胞中存在互作关系。ShPR10本身不具有沉默抑制子活性,其表达削弱了P1的沉默抑制子活性,但对P1蛋白的含量无明显影响。综上,ShPR10可能通过结合P1来削弱P1的沉默抑制子活性,从而提高甘蔗对SCSMV的抗性。 展开更多
关键词 病程相关蛋白 PR10 甘蔗线条花叶病毒 RNA沉默抑制子 P1蛋白 甘蔗 蛋白互作
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甘蔗谷胱甘肽硫转移酶ScGSTF1与P3N-PIPO互作应答甘蔗花叶病毒侵染的研究 被引量:1
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作者 杨宗桃 焦文迪 +6 位作者 张海 张克闽 程光远 罗廷绪 曾康 周营栓 徐景升 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期2665-2676,共12页
谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase, GST, EC2.5.1.18)广泛分布于具有细胞结构的生物中。在植物中,GST参与调控生长发育、异生物质解毒及逆境应答。本课题组以甘蔗花叶病毒(Sugarcanemosaicvirus,SCMV)编码蛋白P3N-PIPO为诱饵... 谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase, GST, EC2.5.1.18)广泛分布于具有细胞结构的生物中。在植物中,GST参与调控生长发育、异生物质解毒及逆境应答。本课题组以甘蔗花叶病毒(Sugarcanemosaicvirus,SCMV)编码蛋白P3N-PIPO为诱饵,从甘蔗(Saccharumspp.hybrid)叶片cDNA酵母文库中筛选到1个GST基因,并从甘蔗原始栽培种Badila中克隆了该基因,其开放读码框(open reading frame, ORF)长度为645 bp,编码214个氨基酸。序列比对及进化树分析表明,该基因编码蛋白属于GST家族的Phi (F)类型(GSTF),因此命名为ScGSTF1。进一步的生物信息学分析表明,ScGSTF1不存在跨膜区域,为稳定的亲水性脂溶蛋白;GST蛋白在单子叶和双子叶植物中及C3和C4植物中存在明显的分化。酵母双杂交(yeast two-hybrid, Y2H)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation, BiFC)试验表明, ScGSTF1与SCMV-P3N-PIPO蛋白互作。亚细胞定位试验表明ScGSTF1定位于内质网。实时荧光定量PCR分析表明, ScGSTF1在甘蔗各个组织中显著差异表达,在第3节间中的表达量最高,在心叶及根中的表达量最低;SCMV侵染显著性影响ScGSTF1基因的表达水平,侵染早期上调表达,随后下调,但仍保持显著高于对照的水平。 展开更多
关键词 甘蔗 甘蔗花叶病毒 谷胱甘肽硫转移酶 P3N-PIPO 蛋白互作
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An Atypical Thioredoxin Imparts Early Resistance to Sugarcane Mosaic Virus in Maize 被引量:16
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作者 Qingqing Liu Huanhuan Liu +9 位作者 Yangqing Gong Yongfu Tao Lu Jiang Weiliang Zuo Qin Yang Jianrong Ye Jinsheng Lai Jianyu Wu Thomas Lubberstedt Mingliang Xu 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期483-497,共15页
Sugarcane mosaic virus (SCMV) causes substantial losses of grain yield and forage biomass in susceptible maize worldwide. A major quantitative trait locus, Scmvl, has been identified to impart strong resistance to S... Sugarcane mosaic virus (SCMV) causes substantial losses of grain yield and forage biomass in susceptible maize worldwide. A major quantitative trait locus, Scmvl, has been identified to impart strong resistance to SCMV at the early infection stage. Here, we demonstrate that ZmTrxh, encoding an atypical h-type thioredoxin, is the causal gene at Scmvl, and that its transcript abundance correlated strongly with maize resistance to SCMV. ZmTrxh alleles, whether they are resistant or susceptible, share the identical coding/proximal promoter regions, but vary in the upstream regulatory regions. ZmTrxh lacks two canon- ical cysteines in the thioredoxin active-site motif and exists uniquely in the maize genome. Because of this, ZmTrxh is unable to reduce disulfide bridges but possesses a strong molecular chaperone-like activity. ZmTrxh is dispersed in maize cytoplasm to suppress SCMV viral RNA accumulation. Moreover, ZmTrxh- mediated maize resistance to SCMV showed no obvious correlation with the salicylic acid- and jasmonic acid-related defense signaling pathways. Taken together, our results indicate that ZmTrxh exhibits a distinct defense profile in maize resistance to SCMV, differing from previously characterized dominant or recessive potyvirus resistance genes. 展开更多
关键词 MAIZE sugarcane mosaic virus quantitative resistance gene h-type thioredoxin
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The complete sequence of a sugarcane mosaic virus isolate causing maize dwarf mosaic disease in China 被引量:4
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作者 程晔 陈炯 陈剑平 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2002年第3期322-330,共9页
The complete sequence of a potyvirus from maize in Zhejiang Province was determined. The RNA was 9596 nucleotides long, excluding the 3'-poly (A) tail, and there was a single long open reading frame (ORF) of 9192 ... The complete sequence of a potyvirus from maize in Zhejiang Province was determined. The RNA was 9596 nucleotides long, excluding the 3'-poly (A) tail, and there was a single long open reading frame (ORF) of 9192 nts encoding a 346.1 ku polyprotein. The polyprotein had substantial amino acid sequence homology with those encoded by the RNAs of a Chinese isolate of sorghum mosaic virus (SrMV-C) and a Bulgarian isolate of maize dwarf mosaic virus, but it was most closely related to sugarcane mosaic virus (SCMV) isolates, for which only partial sequences have been published. According to the published criteria for distinguishing potyviruses, the sequence reported here is clearly a strain of SCMV, but it also showed a surprisingly high amino acid homology with SrMV-C in the HC-Pro, P3 and Cl proteins. 展开更多
关键词 maize DWARF mosaic disease sugarcane mosaic virus genome organization taxonomy.
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Auxin Binding Protein 1 Reinforces Resistance to Sugarcane Mosaic Virus in Maize 被引量:4
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作者 Pengfei Leng Qing Ji +12 位作者 Torben Asp Ursula K. Frei Christina R. Ingvardsen Yongzhong Xing Bruno Studer Margaret Redinbaugh Mark Jones Priyanka Gajjar Sisi Liu Fei Li Guangtang Pan Mingliang Xu Thomas Lǖbberstedt 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2017年第10期1357-1360,共4页
Dear Editor,Sugarcane mosaic virus (SCMV) causes severe viral diseases in maize worldwide (Fuchs and Gruntzig, 1995), resulting in significant losses in grain and forage yield in susceptible cultivars of maize and... Dear Editor,Sugarcane mosaic virus (SCMV) causes severe viral diseases in maize worldwide (Fuchs and Gruntzig, 1995), resulting in significant losses in grain and forage yield in susceptible cultivars of maize and related crops. The most promising solution is to cultivate resistant varieties, which contribute to sustainable crop production. Two epistatically interacting major SCMV resistance loci (Scmvl and Scmv2) are required to confer complete resistance against SCMV in the resistant nearisogenic line F7RPJRR (the letters left of the slash refer to the genotype at Scmv2 on chromosome 3 and those on the right refer to the genotype at Scmvl on chromosome 6, with R indicating a resistance allele and S a susceptibility allele) (Xing et al., 2006). 展开更多
关键词 Auxin Binding Protein 1 Reinforces Resistance sugarcane mosaic virus MAIZE
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甘蔗花叶病和宿根矮化病多重PCR检测方法的建立 被引量:19
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作者 张显勇 蔡文伟 +2 位作者 杨本鹏 张树珍 王业桥 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期4321-4327,共7页
【目的】建立能同时检测甘蔗花叶病(sugarcane mosaic virus,SCMV)和宿根矮化病(ratoon stunting disease,RSD)的多重PCR检测方法。【方法】以病株带鞘叶组织总核酸反转录物为模板,根据中国甘蔗花叶病的主要致病病原高梁花叶病毒SrMV和... 【目的】建立能同时检测甘蔗花叶病(sugarcane mosaic virus,SCMV)和宿根矮化病(ratoon stunting disease,RSD)的多重PCR检测方法。【方法】以病株带鞘叶组织总核酸反转录物为模板,根据中国甘蔗花叶病的主要致病病原高梁花叶病毒SrMV和甘蔗花叶病毒中国大陆优势株系SCMV-A,结合B、D、E和SC株系的外壳蛋白核苷酸序列的保守区设计PCR引物对和已有的检测甘蔗宿根矮化病病原木质部赖氏杆菌木质部亚种(Leifsonia xyli subsp.Xyli,Lxx)的PCR引物对,在SCMV RT-PCR和RSD单一PCR体系的基础上,建立并优化可同时检测SCMV和RSD的多重PCR检测方法。【结果】此检测方法可特异地从感染SCMV和RSD的样品中扩增出SCMV(400 bp)和RSD(265 bp)2个条带,扩增产物测序结果表明,SCMV扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为81%~99%,RSD扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为91%~99%。【结论】应用此检测方法可稳定、特异地检测出蔗株中是否有导致甘蔗花叶病和宿根矮化病的单一或混合的病原。 展开更多
关键词 甘蔗花叶病毒 甘蔗宿根矮化病 RT-PCR 病原检测 多重PCR
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