苏格木勒-3汤水提物中镇静催眠成分的筛选

目的筛选苏格木勒-3汤水提物中具有镇静催眠的成分。方法 102只大鼠随机分为空白组、SD模型组、苏格木勒-3汤水提物高及低剂量组、阳性组、白豆蔻-香旱芹水提物高及低剂量组、白豆蔻-荜茇水提物高及低剂量组、香旱芹-荜茇水提物高及低剂量组、白豆蔻水提物高及低剂量组、香旱芹水提物高及低剂量组、荜茇水提物高及低剂量组等17组,每组6只。除空白组外,其余各组大鼠腹腔射注300 mg/kg对氯苯丙胺酸混悬液制作大鼠失眠模型。造模成功后,空白组、模型组大鼠每天生理盐水灌胃,阳性组予阿普唑仑0. 12 mg/kg灌胃,苏格木勒-3汤水提物高及低剂量组分别予108、54 mg/kg的水提物灌胃,白豆蔻-香旱芹水提物高及低剂量组分别予84、42 mg/kg的水提物灌胃,白豆蔻-荜茇水提物高及低剂量组分别予82、41 mg/kg的水体物灌胃,香旱芹-荜茇水提物高及低剂量组分别予98、49 mg/kg的水提物灌胃、白豆蔻水提物高及低剂量组分别予33、16. 5 mg/kg的水提物灌胃、香旱芹水提物高及低剂量组分别予74、37 mg/kg的水提物灌胃、荜茇水提物高及低剂量组分别予29、14. 5 mg/kg的水提物灌胃,1次/d,连续灌胃7d。断头处死各组大鼠,取脑组织,ELISA法检测各组大鼠脑组织失眠指标5-羟色胺(5-HT)、神经递质γ-氨基丁酸(GABA)、白细胞介素1-β(IL-1β)及氧化还原指标超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。结果与空白组比较,模型组脑组织5-HT、GABA、SOD含量均降低,IL-1β、MDA含量升高(P均<0. 05)。与模型组比较,其余各组脑组织5-HT均升高(P均<0. 05);除苏格木勒-3汤水提物低剂量组外,其他组脑组织GABA含量均升高(P均<0. 05);苏格木勒-3汤水提物高、苏格木勒-3汤水提物低、白豆蔻-香旱芹水提物高、白豆蔻水提物低、荜茇水提物高组脑组织IL-1β降低(P均<0. 05);白豆蔻-香旱芹水提物高、白豆蔻-荜茇水提物低、香旱芹-荜茇水提物高、白豆蔻水提物低组脑组织MDA含量均下降(P均<0. 05);苏格木勒-3汤水提物高、白豆蔻-香旱芹水提物低、白豆蔻-荜茇水提物高及低、香旱芹水提物低、荜茇水提物低、阳性组脑组织SOD含量增加(P均<0. 05)。结论苏格木勒-3汤水提物中镇静催眠作用的有效物质来源于白豆蔻、香旱芹、荜茇等单味药;白豆蔻、香旱芹、荜茇可通过降低脑组织IL-1β、MDA、升高5-HT、GABA、SOD含量发挥镇静催眠作用。

苏格木勒-3汤中白豆蔻-白苣胜挥发油部位体外GC-MS分析

目的:建立苏格木勒-3汤中白豆蔻-白苣胜挥发油部位体外GC-MS图谱,分析其体外化学成分。方法:水蒸气蒸馏法提取苏格木勒-3汤中白豆蔻-白苣胜挥发油部位,采用气相色谱-质谱联用方法(GC-MS)分析其化学成分及相对含量。结果:从白豆蔻-白苣胜挥发油各色谱峰中共鉴定出59个种化学成分,其中"表观丰度"最大的为10号峰桉油精(73.73%),2、5号α-蒎烯(2.30%、9.96%)、23号α-松油醇(6.46%)、4号峰α-水芹烯(1.00%)、6号峰α-月桂烯(0.82%)、12号峰γ-萜品烯(0.81%)、15号峰β-芳樟醇(0.72%)7个成分为白豆蔻-白苣胜挥发油中主要特征性成分。结论:苏格木勒-3汤中白豆蔻-白苣胜挥发油部位是主要药效组分,且分析得到的成分均为本方有效物质基础;建立的方法可作为本方挥发性成分的质量控制方法。

苏格木勒-3汤水提物治疗失眠的药效学研究

目的:观察苏格木勒-3汤各成分水提物对小鼠的镇静催眠作用。方法 :通过观察小鼠自主活动、催眠剂量戊巴比妥钠睡眠时间,考察苏格木勒-3汤各成分水提物对小鼠的镇静催眠作用。结果 :苏格木勒-3汤水提物各剂量组均可显著降低小鼠活动时间、站立次数。与空白组比较,苏格木勒-3汤水提物高、低剂量组,白豆蔻水提物低剂量组,香旱芹水提物高剂量组,白豆蔻-香旱芹水提物高剂量组,白豆蔻-荜茇水提物高剂量组,香旱芹-荜茇水提物高和低剂量组,阳性对照组小鼠入睡潜伏时间显著缩短,差异具有统计学意义(P<0.05)。与空白组比较,苏格木勒-3汤水提物高剂量组、白豆蔻水提物低剂量组、白豆蔻-香旱芹水提物高剂量组小鼠睡眠持续时间延长,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:苏格木勒-3汤单药、药对以及复方水提物均可显著降低小鼠活动时间、站立次数。苏格木勒-3汤单药、药对以及复方水提物可缩短入睡潜伏时间,而只有复方及白豆蔻、白豆蔻-香旱芹水提物可延长睡眠持续时间。

苏格木勒-3汤水提物对小鼠镇静、催眠及失眠模型大鼠催眠的作用机制研究

目的:研究苏格木勒-3汤水提物对小鼠镇静、催眠及对失眠模型大鼠催眠的作用机制。方法:将小鼠随机分为空白组(生理盐水,2 mL/100 g)、阳性对照组(阿普唑仑,0.15 mg/kg)和苏格木勒-3汤水提物高、低剂量组(90.0、45.0 mg/kg,以生药量计,下同),每组12只,各组小鼠每天灌胃给药1次,连续给药5 d,观察小鼠自主活动(活动时间和站立次数)变化及在戊巴比妥钠催眠剂量下(50 mg/kg)对小鼠入睡潜伏期和睡眠持续时间的影响。采用腹腔注射氯苯丙氨酸建立大鼠失眠模型,将成模大鼠随机分为模型组(生理盐水,2 mL/100 g)、阳性对照组(阿普唑仑,0.09 mg/kg)和苏格木勒-3汤水提物高、低剂量组(108.0、54.0 mg/kg),每组10只,并另取10只正常大鼠作为空白组(生理盐水,2 mL/100 g),各组大鼠每天灌胃给药1次,连续给药7 d后处死;采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠脑组织内5-羟色胺(5-HT)、γ-氨基丁酸(GABA)、白细胞介素1β(IL-1β)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果:在镇静、催眠实验中,与空白组比较,其余各组小鼠活动时间和站立次数均显著减少(P<0.05或P<0.01);苏格木勒-3汤水提物高剂量组和阳性对照组小鼠入睡潜伏期均显著缩短(P<0.05或P<0.01),苏格木勒-3汤水提物高剂量组小鼠睡眠持续时间显著延长(P<0.05)。在催眠作用机制实验中,与空白组比较,模型组大鼠脑组织内5-HT及GABA、SOD含量显著降低(P<0.05),IL-1β、MDA含量显著增加(P<0.05)。与模型组比较,阳性对照组和苏格木勒-3汤水提物高、低剂量组大鼠脑组织内5-HT含量显著增加(P<0.05或P<0.01);苏格木勒-3汤水提物高剂量组、阳性对照组大鼠脑组织内GABA、SOD含量显著增加(P<0.05或P<0.01),苏格木勒-3汤水提物高、低剂量组IL-1β含量显著降低(P<0.05),其余指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:苏格木勒-3汤水提物具有较好的镇静、催眠作用,其催眠作用机制可能与中枢神经递质5-HT、GABA及细胞因子IL-1β水平有关。

蒙药苏格木勒-3汤不同部位中4种成分的含量测定

目的:建立测定蒙药苏格木勒-3汤水提物中芹菜素、胡椒碱及其挥发油中桉油精、枯茗醛含量的方法。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定芹菜素、胡椒碱的含量;采用气相色谱法(GC)测定桉油精、枯茗醛的含量。HPLC法采用色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液,流速为1.0 mL/min,检测波长为225(芹菜素)、342 nm(胡椒碱),柱温为30℃,进样量为10μL。GC法采用色谱柱为Dimensions SH-Rtx-1毛细管柱,载气为高纯氢气,进样口温度为270℃,载气流量为1 mL/min,程序升温,进样量为10μL,进样分流比为1∶10。结果:芹菜素、胡椒碱、桉油精、枯茗醛检测质量浓度的线性范围分别为12.5~200μg/mL(r=0.999 6)、87.3~139.7μg/mL(r=0.999 9)、136~2 187μg/mL(r=0.999 9)、39~635μg/mL(r=0.999 9);定量限分别为0.02、0.06、0.06、0.12μg/mL;检测限分别为0.01、0.02、0.03、0.04μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于4%;加样回收率分别为89.26%~97.26%(RSD=2.69%,n=6)、94.20%~104.01%(RSD=3.64%,n=6)、98.51%~110.11%(RSD=3.87%,n=6)、95.76%~107.82%(RSD=4.12%,n=6);含量分别为0.769~0.828、7.741~7.981、5.284 7~5.846 6、1.038 6~1.1012 mg/g(n=3)。结论:所建方法简单、可行,可用于蒙药苏格木勒-3汤不同部位的质量控制。

UPLC-Q-TOF法测定大鼠血清中苏格木勒-3水提物胡椒碱的浓度及其药动学研究

目的对蒙药苏格木勒-3水提物中胡椒碱进行大鼠血清药动学研究。方法采用乙腈沉淀蛋白进行血清样品预处理,选用盐酸维拉帕米为内标,以UPLC-Q-TOF法测定大鼠血清中胡椒碱含量。色谱柱为ACQUITY UPLC HSS T3 C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸水(B),A:B=70%:30%,流速:0.4 mL·min^(-1),柱温30℃,进样量:2μL。电喷雾电离离子源(ESI),采用多反应离子监测,检测离子为正离子,分别选择m/z胡椒碱286/201,维拉帕米455/165。结果胡椒碱在0.015~20.272μg·mL^(-1)线性关系良好(R^(2)=0.9994)。日内精密度RSD 1.2%~8.1%,日间精密度RSD 1.7%~12.7%。水提物回收率为70%~85%。取SD大鼠,按3.96 g·kg^(-1)剂量口服给药后,主要药动学参数:C max为0.415μg·mL^(-1)、t_(max)为4.00 h、t 1/2为10.00 h、AUC_(0~24)为3.36 h·pg·mL^(-1)、AUC_(0~∞)为4.17 h·pg·mL^(-1)、MRT为14.10 h。结论建立的含量测定方法快速、准确,适用于胡椒碱在大鼠体内的药动学研究。

基于UPLC-Q-TOF-MS对蒙药苏格木勒-3水提物化学成分的研究

目的:对蒙药苏格木勒-3水提物进行化学成分研究,构建较为全面的化学成分谱,为苏格木勒-3水提物有效物质基础研究奠定基础。方法:采用超高液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术,使用ESI离子源,通过mzCloud与mzVoult软件以及质谱裂解规律,并结合对照品及相关文献资料比对进行定性分析。结果:经过分析,从蒙药苏格木勒-3水提物中共鉴定出42个成分,主要包括氨基酸、酚酸类、黄酮类、内酯类、生物碱类及其他类等6类成分,并对各成分的药材来源进行归属。结论:本研究全面、快速、准确地分析了蒙药苏格木勒-3水提物的化学成分,为其药效物质基础和质量控制等研究奠定了基础。

HPLC法同时测定蒙药苏格木勒-3有效部位中7种成分的含量

目的:建立测定蒙药苏格木勒-3有效部位中咖啡酸、牡荆素、阿魏酸、木犀草素、芹菜素、山柰酚、胡椒碱含量的方法。方法:采用Agilent Eclipse XDB-C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱,流速:1.0mL/min,柱温:30℃,波长为343nm,进样量为10μL。结果:蒙药苏格木勒-3有效部位中7种成分咖啡酸、牡荆素、阿魏酸、木犀草素、芹菜素、山柰酚、胡椒碱分别在0.59~2.95(R^(2)≥0.9999)、1.53~7.65(R^(2)≥1.0000)、9.69~48.45(R^(2)≥0.9999)、21.40~107.00(R^(2)≥1.0000)、52.00~520.00(R^(2)≥1.0000)、2.75~13.75(R^(2)≥0.9990)、0.89~4.45μg/mL(R^(2)≥1.0000)范围内线性关系良好。精密度、重现性、稳定性和加样回收率均符合有关规定。结论:所建方法简单、高效、快速、灵敏,可用于蒙药苏格木勒-3有效部位的质量控制。