Sumf2条件性基因剔除小鼠模型的建立及初步表型分析

目的建立Sumf2条件性基因剔除小鼠模型，为整体水平研究Sumf2基因的生物学功能创造条件。方法运用生物信息学，采用ET克隆、同源重组、显微注射等技术成功建立Sumf2条件性基因剔除小鼠模型，并通过该模型与Ella-cre转基因小鼠交配，获得Sumf2基因剔除小鼠模型，通过PCR、RT-PCR、WesternBlot等方法在不同水平验证Sumf2基因的表达；对该小鼠模型进行初步的表型分析。结果经胚胎干细胞打靶，获得19个正确同源重组的克隆，重组效率为20％：阳性克隆经囊胚注射，获得2只嵌合体雄鼠；嵌合雄鼠与C57BL／6J小鼠交配，获得28只灰鼠，经PCR鉴定16只为杂合子小鼠，阳性率为57％；与Ella—ere转基因小鼠交配，获得了Sumf2基因剔除小鼠模型，DNA、RNA及蛋白水平证明该基因已成功剔除；初步的表型观察未发现Sumf2基因剔除小鼠生长发育、血常规及血生化指标等出现异常改变。结论成功建立Sumf2条件性基因剔除小鼠模型，该基因纯合缺失未发现明显的生长发育异常，为进一步的基因功能研究奠定了基础。