不同CaCl_(2)试剂组合对西葫芦种子低温萌发的影响

以‘春翡翠’西葫芦种子为试材,采用CaCl_(2)溶液、CaCl_(2)+脲基二琥珀酸四钠(HIDS)溶液、CaCl_(2)+黄腐酸(FA)溶液、去离子水(CK)浸种,研究不同CaCl_(2)试剂组合浸种对低温下种子萌发的影响,以期为提高西葫芦抗冷性提供参考依据。结果表明:与对照相比,添加CaCl_(2)的3个处理均可提高西葫芦种子在低温下的萌发能力,表现为CaCl_(2)+FA>CaCl_(2)+HIDS>CaCl_(2)>CK。与对照相比,CaCl_(2)+FA浸种效果最好,浸种后西葫芦种子发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数显著提高2.48%、2.48%、1.15%、14.71%;根长、鲜质量、干质量显著增加15.12%、46.47%、13.35%;CaCl_(2)+FA溶液浸种提高了芽苗中渗透调节物质含量及抗氧化酶活性,使芽苗中脯氨酸、可溶性糖、可溶性蛋白质含量、超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性分别增加14.52%、180.00%、31.78%、1.52%、53.53%;超氧阴离子自由基、过氧化氢含量分别降低了131.97%、35.83%。综上所述,不同CaCl_(2)试剂组合均可减轻低温对种子萌发的伤害,其中CaCl_(2)与FA组合浸种缓解低温伤害效果最佳。

西葫芦未受精胚珠离体培养条件的优化及胚囊植株的产生

目的建立西葫芦离体雌核发育高频植株再生体系,以加速自交系选育,有效缩短西葫芦杂种一代育种周期。方法将西葫芦未受精胚珠接种至附加2,4-D、NAA、BA的N6培养基上可形成胚状体,该胚状体转接至无激素的N6培养基上可形成再生植株。结果试验共获得120棵再生植株(R0),其中41株因生活力低下死亡,8株用于摸索移栽方法死亡,71株移栽成活且生长正常,其中42株性状表现符合二倍体特征且育性正常,已有10株获得自交果实及种子,其余29株育性异常。试验结果表明,胚珠发育时期、培养基、供体基因型及供体栽培季节等均显著影响胚状体诱导频率。结论胚状体起源于胚囊成员细胞,再生植株为胚囊植株。试验筛选出3种诱导频率较高的培养基;以开花前1日及当日的胚珠诱导频率较高;秋播材料诱导效果最好。

套袋和摘除花瓣对西葫芦果实发育及品质的影响

以早青一代西葫芦品种为材料,研究了套袋及摘除雌花花瓣对果实发育和品质的影响。结果表明,套袋对西葫芦的瓜形、瓜色无不良影响,套袋瓜新鲜度好,质地脆嫩,感官品质提高,蛋白质含量稍有增加,但套袋对坐瓜率、果实发育、商品瓜产量以及果实中维生素C、可溶性糖和游离氨基酸的含量均有一定程度的不利影响。套袋结合摘除花瓣可以消除或降低套袋对坐瓜、果实发育和商品瓜产量的不利影响。

西葫芦未受精胚珠离体诱导植株再生的关键因素

开花当天的西葫芦未受精胚珠在含5%蔗糖和0.8%琼脂的N6基本培养基中附加0.5 mg/L NAA和1.0mg/L 2,4-D的诱导培养基上培养最有利于诱导植株再生;所得再生植株经气孔保卫细胞叶绿体计数法鉴定,60%为二倍体,其自交后代株系内高度整齐一致,证明所得二倍体再生植株是纯合的双单倍体,来源于单倍的胚囊细胞。

西葫芦未受精子房离体培养的影响因素

【目的】探究西葫芦未受精子房离体培养的主要影响因素,以提高其胚状体诱导率和生根品质,增加再生植株数量,丰富西葫芦育种材料。【方法】以西葫芦"春玉一号"未受精子房为材料,分析MS、B5、N6和White 4种基本培养基的诱胚效果;在MS培养基中添加不同质量浓度的6-BA(0,0.5,1.0,2.0mg/L)和NAA(0,0.2,0.5,1.0mg/L),筛选2种激素的最佳组合;之后添加不同质量浓度的2,4-D(0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mg/L),筛选2,4-D的适宜质量浓度;在MS培养基中添加不同质量浓度的NAA(0,0.05,0.1,0.2,0.5,1.0mg/L),分析其对胚状体芽生根效果的影响。【结果】西葫芦未受精子房以MS为基本培养基时胚状体诱导率最高,为16.67%;在MS培养基中添加1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA时的诱导效果最好,诱导率为19.76%;在MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基中添加1.0mg/L 2,4-D可以加快胚珠膨大的速度,增加胚珠转绿的数量,但对出胚的提高效果不显著。MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA有利于提高胚状体芽的生根品质,且根系生长健壮。【结论】MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+1.0mg/L 2,4-D是西葫芦未受精子房离体培养中胚状体诱导的最佳培养基,MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA是诱导其胚状体芽生根的较适宜培养基。

西葫芦离体雌核发育胚状体成苗影响因子分析

以西葫芦杂交组合20-3-9×17为供体,进行未受精胚珠的离体培养,诱导离体雌核发育。分析表明,培养基的碳源、外源激素配比对胚状体的形态建成及成苗有显著影响,以30 g.L-1蔗糖或20 g.L-1葡萄糖做为胚状体诱导培养基的碳源、添加4.00 mg.L-12,4-D+0.25 mg.L-1NAA+1.00 mg.L-16-BA或4.00 mg.L-12,4-D+0.5 mg.L-1NAA+1.00 mg.L-16-BA,并以20 g.L-1蔗糖或葡萄糖作为成苗培养基的碳源,可使健全胚状体成苗率达95.0%以上。未受精胚珠取样部位与胚状体转接时期也是影响胚状体成苗的重要因子,取自子房中部的胚珠诱导出的健全胚状体比例与成苗率均较高;胚状体形成后1周内转接有利于成苗。

西葫芦胚囊植株及其自交后代主要农艺性状的初步观察

以西葫芦离体雌核发育胚囊植株当代(R0)及其自交一代(R1)、自交二代(R2)的部分植株为试材,对其主要农艺性状进行初步观察。结果显示,各世代胚囊植株的第一雌花节位、雌花节率以及果实性状等有良好的整齐度,并与供体及杂交组合亲本的相关性状存在不同程度的差异,胚囊植株的育性有一定程度的分离。

生长调节剂诱导西葫芦、黄瓜雌花分化和发育的研究

应用25、50、100和200mg／kg的吲哚乙酸（LAA）、萘乙（NAA）、赤霉素（GA）喷施2～3叶期西葫芦和黄瓜幼苗及用50、100和200mg／kg的TiBA（三碘苯甲酸）喷施20-30cm高的西葫芦和黄瓜植株，发现50mg／kgIAA和200mg／kgTiBA明显促进西葫芦雌花分化和坐果，NAA的促进效果较差，GA无效；50mg／kgIAA和100mg／kgTiBA促进黄瓜雌花分化和坐果，NAA的捉拼效果较差。低浓座的GA具有一定的促进作用。

西葫芦穴盘育苗潮汐灌溉技术研究

以西葫芦(Cucurbita pepo L.)为试材,采用潮汐灌溉和顶部洒水(CK)2种灌溉方式,其中潮汐灌溉有2个灌溉时长水平:15 min/次、30 min/次,3个灌溉频率水平:1次/d、1次/2 d、1次/3 d,共7个处理;探讨了潮汐灌溉和顶部洒水2种灌溉方式对西葫芦穴盘苗生长及生理变化、基质电导率、含水量和灌水量的影响。结果表明,与顶部洒水灌溉方式相比,潮汐灌溉的15 min/次、1次/d处理和30 min/次、1次/d处理的穴盘苗素质最佳,且分别节水10%、6%;最优潮汐灌溉制度是灌溉高度为穴盘高度的2/3(3 cm)、灌溉时长为15 min/次、灌溉频率为1次/d。

西葫芦单倍体诱导及分子检测鉴定

以3种基因型西葫芦为试材,探讨不同基因型与花粉辐照剂量(25～400 Gy)对西葫芦单倍体植株诱导的影响。结果表明,基因型与辐照剂量对植株坐果率和单倍体诱导率均有显著影响。辐照剂量率2 Gy/min,剂量125～250 Gy比较适宜西葫芦单倍体的诱导,获得的再生植株较多,有利于单倍体植株的产生。单倍体植株主要由点状胚与箭形胚发育而来。基因型330的单倍体诱导率为5.08%,基因型331的为7.40%,而基因型332未能获得单倍体植株。利用特异的EST-SSR标记快速对再生植株中的单倍体或自然加倍单倍体植株进行鉴定,并通过保卫细胞叶绿体计数法及流式细胞仪验证SSR标记分析结果的可靠性,确定植株染色体倍性水平。西葫芦单倍体植株生长势弱,叶片较小,花粉败育。

西葫芦DH群体主要农艺性状分离的初步分析

对一个包括31个株系的西葫芦胚囊植株DH群体进行考察,初步分析其几个主要农艺性状的分离变异情况,并与同来源的F2群体进行比较,以了解其在西葫芦性状遗传分析及优异自交系选育上的应用价值。结果显示,所考察的西葫芦DH群体在第一雌花节位、雌花节率、始花期、始收期、果形指数、果肉厚、果柄长及单果质量等数量性状上的分离变异情况与F2基本一致;在果实颜色、叶片形状、分枝习性等质量性状上的分离经卡方检验,只有叶片形状基本符合1∶1的分离比,其余两个性状的分离均出现了超亲类型;该DH群体中5个株系两个自交世代R1、R2的相关性状表现出较好的遗传稳定性。

痕量灌溉技术在日光温室西葫芦栽培上的应用研究

以西葫芦（Cucurbita pepo L.）为材料,微喷灌溉为对照,研究痕量灌溉管不同埋深对日光温室春季西葫芦生长、产量和水分生产效率的影响,结果表明,痕量灌溉管不同埋深处理后对西葫芦的生长影响无差异性;与对照相比,埋深6、12 cm 2个处理的西葫芦叶片蒸腾速率分别降低了1.26、1.72 mmol（H2O）/（m^2·s）,叶片净光合速率分别提高了1.40、1.09μmol（CO2）/（m^2·s）,果实有机酸含量分别降低了17.2%、6.9%;微喷灌溉的果实VC含量分别比2个处理降低了32.7%、30.5%。在0-6 cm深基质里含水量高低表现为微喷灌溉〉痕量灌溉管埋深6 cm〉痕量灌溉管埋深12 cm,在6-12 cm深基质里含水量高低表现为微喷灌溉〉痕量灌溉管埋深12 cm〉痕量灌溉管埋深6 cm;痕量灌溉管埋深6、12 cm的处理其667 m^2的耗水量分别比微喷灌溉下降了65.7%、61.7%,水分生产效率分别增加了102.4%、88.1%。综合产量、耗水量等经济因素,西葫芦基质栽培的痕量管埋深以6 cm为宜。

低温胁迫下不同西葫芦品种抗寒性生理指标的比较

测定了4个受低温胁迫的西葫芦(CucurbitapepoL)品种叶片的电导率、可溶性糖含量、过氧化氢酶活性、植物组织中自由水/束缚水比值等生理指标。结果表明:在4个西葫芦品种中,早青一代的过氧化氢酶活性与可溶性糖含量最高,自由水/束缚水比值最低,电导率最小;而纯丰美玉的过氧化氢酶活性与可溶性糖含量最低,自由水/束缚水比值最高,电导率最大;艺农特早、银青一代的各指标居中。综合比较可得抗寒性顺序为:早青一代>艺农特早或银青一代>纯丰美玉。

西葫芦离体雌核发育初期POD及其同工酶活性变化研究

以一代杂种碧珠为供体诱导西葫芦离体雌核发育,研究了离体雌核发育初期胚珠中过氧化物酶(POD)及其同工酶活性的变化规律。结果显示,西葫芦离体雌核发育初期即未受精胚珠接种后13 d内,胚珠中POD及其同工酶活性变化明显,其中总的过氧化物酶(POD)、NADH过氧化物酶(NADHPOD)、生长素过氧化物酶(IAAO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性呈上升趋势;细胞色素过氧化物酶(COX)、抗坏血酸过氧化物酶(ASP)的活性呈先下降后略升高的趋势。

西葫芦胚囊植株生殖特性

考察了经未受精胚珠离体诱导获得的西葫芦再生胚囊植株及其3个自交世代的生殖特性。单倍体胚囊植株高度不育,无法获得自交后代。绝大多数双单倍体(DH)胚囊植株及其3个自交世代的花器特征、开花进程等与二倍体供体一致。DH植株当代的花粉萌发率为15.52%～42.67%,花粉量偏少,自交单果结籽数明显少于二倍体供体。DH植株3个自交世代的花粉萌发率为17.62%～42.70%,均低于二倍体供体,各自交株系的花粉生活力在3个自交世代间保持稳定,但花粉量仍偏少。交叉授粉验证结果显示,DH植株当代及其3个自交世代的雌性生殖能力接近二倍体供体,雄性生殖能力明显低于二倍体供体,但未呈现持续下降趋势。DH植株3个自交世代的种子发芽率均在92%以上,自交种子具可稔性。

天气状况和是否束花对西葫芦花粉生活力的影响

试验研究了不同的天气和是否束花处理对西葫芦花粉生活力的影响。结果表明,无论在晴天还是阴天及是否束花,西葫芦花粉生活力从6:00开始均表现出先上升后下降的趋势,晴天最佳授粉时间(花粉生活力最高)为7:00~9:00,适宜授粉时间为6:00~10:00;阴天最佳授粉时间为9:00~10:00,适宜授粉时间为8:00~12:00。将束花和不束花的西葫芦花粉生活力进行比较,结果表明,无论哪种天气,束花的西葫芦花粉生活力均高于未束花的,且花粉失活慢。

外源添加物对西葫芦胚状体诱导效果研究

以6个基因型的西葫芦未授粉子房为试材,于MS培养基中分别添加不同质量浓度6-BA(1.0,1.5,2.0mg/L)和TDZ(0.04,0.05,0.06mg/L),筛选最适培养基与出胚材料;获得最适培养基后再分别添加不同质量浓度的NAA,AgNO3或相同质量浓度(20mg/L)秋水仙碱不同时间培养,分析其对西葫芦未授粉子房胚状体诱导的效果。结果表明:1西葫芦未授粉子房在培养基(P5)MS+30g/L Suc.+8g/L Agar+0.05mg/L TDZ上胚状体诱导效果最好,XH13-7为出胚率最高材料;2在P5培养基中添加0.25 mg/L NAA有利于出胚并可适当降低玻璃化率,胚状体诱导率高达10.53%;3添加20mg/L AgNO3显著减少胚状体玻璃化,对出胚影响不明显,玻璃化率仅为11.63%;4添加20mg/L秋水仙碱抑制胚状体发生。

叶面喷施四种诱导剂预防西葫芦白粉病效果

以3个西葫芦品种和6份西葫芦种质为试材,通过叶面喷施5g·L^(-1) NaHCO_3、5.706g·L^(-1)K_2HPO_4、2.62g·L^(-1)K_2SiO_3和RM(0.188g·L^(-1)核黄素+0.746g·L^(-1)蛋氨酸),研究了4种药剂对西葫芦白粉病的预防效果及对单株产量和叶片中可溶性糖及可溶性蛋白质含量的影响,以期探寻预防西葫芦白粉病的化学农药替代技术。结果表明:对西葫芦白粉病的预防效果表现为5.706g·L^(-1) K_2HPO_4>5g·L^(-1) NaHCO_3>2.62g·L^(-1) K_2SiO_3>RM;4种诱导剂处理均能在一定程度上有效延缓西葫芦白粉病的发展进程,且有促进植株生长的作用;各处理对西葫芦单株产量的影响没有明显的规律,但产量均较对照有所提高,以5.706g·L^(-1) K_2HPO_4和RM处理的增产效果较好。植株诱导抗性增强与产量增加呈正相关,相关系数为0.693;各处理均提高了西葫芦植株叶片中的可溶性糖和可溶性蛋白质含量,植株诱导抗性增强与可溶性糖含量增加呈正相关,相关系数为0.754。表明西葫芦可能通过调节植株内源营养物质的种类及含量来调节自身应激反应,诱导形成对白粉病的抗病机制。

西葫芦PRSV-W病毒病抗病种质鉴定及抗性遗传分析

番木瓜环斑病毒西瓜株系(PRSV-W)是危害西葫芦生产的主要病害之一,为减少产量损失,加快西葫芦抗病品种的选育,本研究拟通过人工苗期子叶摩擦接种,结合酶联免疫吸附测定法(ELISA)及反转录PCR(RT-PCR)检测分析,建立西葫芦PRSV-W抗性鉴定技术,并对148份西葫芦品种及高代自交系育种材料进行抗性评价,同时利用抗、感自交系构建六世代群体,探究西葫芦PRSV-W抗性遗传规律。结果表明,播种2周后最适宜对子叶进行病毒摩擦接种。接种病毒15~25 d后西葫芦抗、感特性表现充分,易于鉴别,从高抗到高感可分为0~4级。148份西葫芦种质材料中,22份种质材料表现为高度抗病,11份种质材料表现为抗病,总抗病种质材料占比22.3%;12份种质材料表现为感病,103份种质材料表现为高度感病,总感病种质材料占比77.7%。此外,在叶片组织的病毒检测中,RT-PCR技术比ELISA更为灵敏准确;在西葫芦高抗自交系BV21中,PRSV-W抗性受1对显性抗病基因控制。本研究结果为西葫芦PRSV-W抗病育种提供了种质材料及技术支持。

蚯蚓粪在西葫芦穴盘育苗中的应用

以蚯蚓粪为主要原料配合不同体积比的珍珠岩作为育苗基质,研究了复合基质对西葫芦(Cucurbita pepo L.)种子萌发及幼苗生长发育的影响。结果表明,与草炭相比,蚯蚓粪具有有机质含量高,营养丰富,氮、磷、钾含量高等特性;蚯蚓粪和珍珠岩以3∶1(V/V)混合基质育苗效果最佳,既提高了西葫芦种子的出苗率,又促进了幼苗的生长发育,地上部干重、地下部干重、根系活力和壮苗指数分别是对照的1.95、2.20、1.34和2.20倍。