Screening proteins that interact with mutant superoxide dismutase 1 from familial amyotrophic lateral sclerosis using a yeast two-hybrid system

The present study screened a human fetal brain cDNA library to find the proteins that interact with mutant superoxide dismutase 1 （SOD1） using a yeast two-hybrid system. Using BLAST software, 15 real proteins which interacted with mutant SOD1 were obtained, including 8 known proteins （protein tyrosine-phosphatase non-receptor type 2, TBCl D4, protein kinase family, splicing factor, arginine/serine-rich 2, SRC protein tyrosine kinase Fyn, β-sarcoglycan; glycine receptor a2, microtubule associated protein/microtubule affinity-regulating kinase 1, ferritin H chain）, and 7 unknown proteins. Results demonstrated interaction of mutant SOD1 with microtubule associated protein/microtubule affinity-regulating kinase 1 and β-sarcoglycan.

酵母SOD的研究

确定了酵母 SOD高产菌适宜的培养基和培养条件 ,在此条件下 ,SOD的发酵水平达9.6万 u/ l发酵液。摸索出一条酵母 SOD的制备工艺 ,不仅工艺简单 ,而且酶活性收率高。得到纯度较高的 Cu,Zn- SOD,比活为 36 78u/ mg,活性回收率为 76 % ,分子量为 32 0 0 0 D,等电点为 5.5,功能实验证明酵母 SOD具有显著的抗炎活性 ,做成化妆品对皱纹、粉刺和色素沉着有明显功效。

超声波辅助酶法分离提取葡萄酒泥酵母SOD工艺条件的优化

以葡萄酒泥酵母为试材,超氧化物歧化酶(SOD)比活力为指标,在超声功率、超声时间、蜗牛酶质量浓度、酶解pH值和酶解温度等单因素试验基础上,采用正交试验优化超声波辅助蜗牛酶法提取SOD的工艺条件。结果表明:提取工艺因素对SOD比活力影响大小顺序为超声时间>蜗牛酶质量浓度>超声功率>酶解pH值>酶解温度,1 g湿酵母悬浮于5 mL 0.2 mol/L的磷酸盐缓冲液,其提取SOD最佳工艺条件为超声功率400 W、超声时间12 min、2.0 mg/100 mL蜗牛酶液1 mL、pH 6.6、温度37℃,在此条件下,分离提取得到的SOD比活力达192.27 U/mg。结果表明超声波辅助酶法在葡萄酒泥酵母SOD的提取中具有较高的应用价值。

葡萄酒泥酵母超氧化物歧化酶分离提取工艺条件优化

以葡萄酒泥酵母试材,采用甲苯破壁法分离纯化超氧化物歧化酶(SOD),选择甲苯用量、作用时间、作用温度以及缓冲液pH进行单因素实验,通过L9(34)正交实验优化工艺参数。结果表明:在甲苯用量0.8mL/g,作用时间25min,作用温度50℃,磷酸缓冲液pH8.0的最优条件下,分离纯化的SOD平均比活力为178.73U/mg。此方法操作简单,成本低,适合工厂化生产。

超声波辅助提取葡萄酒泥酵母超氧化物歧化酶工艺优化

以葡萄酒泥酵母为试验材料,采用超声波辅助法分离提取超氧化物歧化酶(SOD).通过单因素试验,研究了料液比、超声波功率、超声波时间和热变性温度对SOD比活力的影响,并采用正交试验确定了超声波法分离提取SOD的最佳工艺参数.结果表明:葡萄酒泥酵母SOD提取的最佳工艺参数为料液比1∶2.5、超声功率400W、超声作用时间16min、热变性温度45℃,在此条件下,分离提取得到的SOD比活力最高为169.32U/mg.此方法操作简单,成本低,所得SOD比活力较高.

酵母菌Y-216SOD的提纯及其性质研究

用筛选的高产ＳＯＤ酵母Ｙ－２１６进行发酵培养，分离提纯出ＳＯＤ，并对其性质进行了初步的研究．确定了发酵培养后的ＳＯＤ提取过程：甲苯破壁法裂解酵母Ｙ－２１６得ＳＯＤ粗提液，并通过ＤＥＡＥ－纤维素－３２柱层析及超滤等方法，得纯化的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ），此酶部分等电点为４５，最大紫外光吸收波长为２６０ｎｍ，耐热性较好，Ｍｎ２＋可能是其金属辅基．

黑泥对小鼠皮肤胶原蛋白和毛发生长的影响

研究黑泥对小鼠皮肤和毛发生长的作用。将黑泥涂抹于小鼠脱毛皮肤部位,观察涂抹部位毛发生长情况,35d后取涂抹部位皮肤,测定SOD活性、胶原蛋白和丙二醛量,扫描电镜观察毛发表面结构。结果表明:黑泥能明显增加小鼠皮肤中胶原蛋白的量,提高皮肤中SOD的活性,有降低皮肤中丙二醛量的趋势,促进毛发生长,增加毛发表面光滑度。黑泥具有延缓皮肤衰老、促进毛发生长和提高毛发质量的作用。

超氧化物歧化酶在食品和化妆品中的应用及其发酵法生产进展

超氧化物歧化酶是生物体内重要的自由基清除剂 ,目前在国内主要作为功效因子或添加剂广泛应用于食品、化妆品中。本文即综述超氧化物歧化酶这两方面的应用现状 ,并介绍相应的基础研究情况。同时介绍利用微生物发酵法生产超氧化物歧化酶的进展 ,主要包括菌种的筛选。

酵母SOD形成的生理学研究

对筛选出的一株ＳＯＤ高产菌株Ｙ－２１６形成ＳＯＤ的生理条件作了初步研究。结果表明：碳源、氮源、碳氮配比和金属离子等营养条件及培养温度、时间和通气量等培养条件，均对该菌株生物量与ＳＯＤ含量有较大的影响。同时通过对几种酵母的测定，发现酵母菌对氧的抗性越大其ＳＯＤ含量也就越高。

酵母菌中超氧化物歧化酶的研究

首次提出了用甲苯破壁提取酵母菌中SOD的方法,此法提取SOD的含量分别为氯仿-乙醇法、酶裂解法和细胞自溶法的1.29、1.08和2.01倍.通过对5种酵母菌的测定,发现酵母菌对氧的抗性与其SOD含量密切相关;同时对一株SOD含量较高的卡尔酵母(Saccharomyces carlsbergensis)BY2菌株进行了营养和培养条件的研究,结果表明它们对该菌株SOD含量和SOD同功酶的影响较大.

西伯利亚蓼PsMnSOD基因的耐盐碱性鉴定及其在盐碱胁迫下的表达模式

植物的超氧化物歧化酶的活性与其在盐胁迫下的防御能力密切相关。本文分析了西伯利亚蓼PsMn-SOD基因在酵母中的表达对酵母耐盐碱性的影响以及西伯利亚蓼中PsMnSOD基因在盐碱胁迫下的表达模式。研究结果表明,PsMnSOD基因在酵母中的表达提高了酵母在盐碱胁迫下的SOD酶活性,并提高了酵母对盐碱胁迫的抗性。RT-PCR结果显示,3%NaHCO3胁迫条件下PsMnSOD基因在西伯利亚蓼的叶、茎和地下茎中均有表达,西伯利亚蓼PsMnSOD基因在茎和地下茎中的表达水平高于在叶中的表达水平,叶中PsMnSOD基因的表达水平随着NaHCO3浓度的增加而上升。本试验表明西伯利亚蓼PsMnSOD基因在抵御盐碱胁迫中起到非常重要的作用。

活性干酵母SOD摇瓶发酵条件的研究

研究了营养与环境条件对耐高温酒精活性干酵母 (TH -AADY)SOD摇瓶发酵的影响。实验结果表明 ,初糖浓度、金属离子、pH值、通气量 (装液量 )和培养时间等均对AADY摇瓶发酵的生物量和SOD含量有较大的影响。在初步优化的发酵条件下 ,细胞生物量为 39.6 g/L ,菌体SOD含量为 1 948U/g ,发酵液产酶能力为7.7万U/L。

利用啤酒酵母生产SOD的提取条件研究

研究了利用异丙醇破壁、丙酮二次纯化提取SOD生产工艺,最佳提取条件为:异丙醇浓度为90%、时间120min、pH7.0,粗酶液的收率为73%,所得SOD的酶比活为3048.7u/mg。与胞内SOD提取老工艺相比,具有工艺简单、设备少、操作简便、成本低等特点。(孙悟)

IL-1β加酵母RNA对照射小鼠外周血肝脾GSH与SOD活性的影响

目的 研究 IL- 1β(人重组白介素 - 1)复合酵母 RNA对小鼠受 γ射线外照射后外周血、肝、脾谷胱甘肽 (GSH)和超氧化物歧化酶 (SOD)活性的影响 ,探讨药物治疗辐射损伤机制 .方法 雌性小鼠 2 5只 ,随机分为 5组 ,115 0 c Gy腹部照射后 1h,2 4h分别给予后肢 im IL - 1β,酵母 RNA,IL - 1β复合酵母 RNA,于照后 6 d,取外周血、肝脏和脾脏测 SOD,GSH活性 .结果 照射后外周血、肝、脾 SOD,GSH活性下降 .使用 IL - 1β,酵母 RNA,IL - 1β复合酵母 RNA后照射组外周血、肝、脾 SOD,GSH活性升高 ,且肝、脾的 SOD,GSH活性与照射对照组之间有显著差异 (P<0 .0 5 ) ,复合组肝脾SOD,GSH活性明显高于照射对照组具有显著差异 (P<0 .0 1) ,高于照射单独给药组 .外周血各照射组之间无显著差异 .结论 IL- 1β复合酵母 RNA升高 γ射线外照射对肝、脾谷胱甘肽 (GSH) ,超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ,复合用药可以对抗射线引起机体产生的损伤作用 .结果表明 :照后复合应用 IL - 1β,酵母 RNA可通过提高清除自由基 。

酵母SOD高产菌的选育及发酵条件

从数株酵母菌中选出了一株细胞生物量(Biomass)和超氧化物歧化酶(SOD)含量都较高的菌株,研究了该菌株产SOD较适宜的培养基组成、pH值和时间等发酵条件。

酵母SOD1基因缺失突变体应答刚果红胁迫的转录组学分析（英文）

SOD1基因编码的铜锌超氧化物歧化酶是酵母细胞中最重要的抗氧化酶.前期研究发现,SOD1基因缺失(sod1Δ)导致酵母细胞对真菌细胞壁抑制剂刚果红(Congo red,CR)的敏感性增加,提示细胞抗氧化能力与细胞壁稳定性相关.本研究采用酵母全基因组表达谱芯片,比较了CR胁迫条件下,野生型酵母细胞和sod1Δ酵母细胞的转录表达谱.结果表明,与野生型酵母细胞相比,sod1Δ酵母细胞中260个基因发生了显著差异表达(140个基因表达上调、120个基因表达下调).随机选取12个差异表达基因采用定量PCR验证,结果与芯片分析结果一致.差异表达基因功能主要涉及细胞壁(几丁质合成)、细胞代谢、细胞防御(抗氧化和热冲击蛋白)、蛋白质合成以及大量功能未知基因.进一步研究发现,CR处理后,细胞壁几丁质含量和细胞内氧化应激指标丙二醛(MDA)含量在sod1Δ酵母细胞中显著升高,而在野生型酵母细胞中无明显变化,与芯片筛选差异表达基因的生物学功能分析结果一致.本研究提供了在全基因组水平上对SOD1基因与细胞壁应激反应之间关联的新认识.

月桂酸修饰超氧化物歧化酶的制备及其性质研究

用月桂酸对超氧化物歧化酶进行化学修饰以改善其稳定性。活化的月桂酸与ＳＯＤ在４０℃碱性条件下反应１ｈ，再用ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００柱进一步纯化．修饰ＳＯＤ活性回收率９３％，比活为６０００Ｕ／ｍｇ．具有较强的稳定性，基本上消除了免疫原性并明显地延长了在血液中的半衰期；该产品适用于化妆品和食品。

富硒啤酒酵母对肉鸡生长性能及抗氧化能力的影响

60羽1周龄的健康AA肉鸡,随机均分为5组,每组12羽:1组为对照组,饲喂含亚硒酸钠0.152mg/kg的基础日粮;2～4组为富硒啤酒酵母组,分别在基础日粮中添加有机硒的水平为0.2、0.5和1.0mg/kg;5组为啤酒酵母组,在基础日粮中添加啤酒酵母。分别在试验的第14、21和28天分测定鸡的体重,并取全血谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性和血浆总抗氧化能力(T-AOC)。结果表明,在试验的第14、21天,各组鸡的体重之间差异不显著(P>0.05),在28天时,2～3组显著高于1组(P<0.05);2～4组鸡全血GSH-PX活性、SOD活性和T-AOC均显著或极显著高于1组和5组(P<0.05或P<0.01)。因此,富硒啤酒酵母能明显提高鸡的抗氧化能力,是一种较好的有机硒源。

酵母菌中SOD复合酶的初步研究

对不同酵母菌中SOD等抗氧化酶的活性进行了初步的分析测定 ,筛选出了一株诸酶活性都较高的菌株 (丹宝利面包活性干酵母 )。研究了该酵母在不同培养时期SOD等酶活力的变化情况 ,发现POD、CAT等酶的活性水平与SOD活性的变化有密切的相关性。通过比较几种提取方法的效果 ,认为利用甲苯破壁法提取SOD复合酶具有一定的可行性。

酵母菌中超氧化物歧化酶的研究

通过对9株酵母菌SOD含量的测定比较，选出1株Y12酵母菌其生物量及酶含量均较高。同时对此菌产SOD酶的营养，培养条件及破壁提取方法进行初步研究，结果表明它们对该菌株SOD酶含量及菌体生物量影响较大，并进一步确定出最佳生理条件，找到了种较优的破壁提取法：冻融──酶解法，使SOD活力得以大大提高。