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Interaction of nonsense suppressor tRNAs and codon nonsense mutations or termination codons
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作者 Zixian Lu 《Advances in Biological Chemistry》 2012年第3期301-314,共14页
Codon nonsense mutations include amber, ochre, or opal mutations according to termination codon consisting of three types (TAG, TAA and TGA). Codon nonsense mutations are also divided into natural and artificial mutat... Codon nonsense mutations include amber, ochre, or opal mutations according to termination codon consisting of three types (TAG, TAA and TGA). Codon nonsense mutations are also divided into natural and artificial mutations. We discussed the interaction of codon nonsense mutations and suppressor tRNAs in vitro and in vivo. Nonsense suppressions do not only happen in prokaryotes but also in eukaryotes. Meanwhile, the misreading of termination codon and in-corporation of nonnatural amino acids into proteins are also introduced. 展开更多
关键词 NONSENSE Suppression CODON NONSENSE MUTATION suppressor trnaS
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Suppressor tRNA in gene therapy
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作者 Jingjing Ruan Xiaoxiao Yu +7 位作者 Huixia Xu Wenrui Cui Kaiye Zhang Chenyang Liu Wenlong Sun Xiaodan Huang Lei An Yue Zhang 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2024年第10期2120-2131,共12页
Suppressor tRNAs are engineered or naturally occurring transfer RNA molecules that have shown promise in gene therapy for diseases caused by nonsense mutations,which result in premature termination codons(PTCs)in codi... Suppressor tRNAs are engineered or naturally occurring transfer RNA molecules that have shown promise in gene therapy for diseases caused by nonsense mutations,which result in premature termination codons(PTCs)in coding sequence,leading to truncated,often nonfunctional proteins.Suppressor t RNAs can recognize and pair with these PTCs,allowing the ribosome to continue translation and produce a full-length protein.This review introduces the mechanism and development of suppressor t RNAs,compares suppressor tRNAs with other readthrough therapies,discusses their potential for clinical therapy,limitations,and obstacles.We also summarize the applications of suppressor tRNAs in both in vitro and in vivo,offering new insights into the research and treatment of nonsense mutation diseases. 展开更多
关键词 suppressor trna PTC nonsense mutation READTHROUGH gene therapy
原文传递
可诱导高拷贝的正交琥珀抑制性tRNA筛选质粒的构建 被引量:1
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作者 姚东宁 徐晓威 +4 位作者 于涣冰 李尤 李星 高向东 田浤 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期174-178,共5页
为筛选获得对大肠杆菌氨酰合成酶具有高度正交性的琥珀抑制tRNA,建立了一种基于可诱导高拷贝质粒的筛选系统。利用乳糖操纵子对oriL复制子进行调控,有IPTG存在时使其携带的琥珀抑制性tRNA大量转录。正交性不高的琥珀抑制性tRNA大量转录... 为筛选获得对大肠杆菌氨酰合成酶具有高度正交性的琥珀抑制tRNA,建立了一种基于可诱导高拷贝质粒的筛选系统。利用乳糖操纵子对oriL复制子进行调控,有IPTG存在时使其携带的琥珀抑制性tRNA大量转录。正交性不高的琥珀抑制性tRNA大量转录时导致宿主菌死亡,只有携带高正交性的琥珀抑制性tRNA的克隆可以存活,从而达到筛选目的。利用这一筛选质粒,构建了琥珀抑制性tRNA突变文库,并进行了筛选,获得了与大肠杆菌氨酰tRNA合成酶具有高度正交性的突变体,并利用含琥珀抑制突变的半乳糖苷酶突变体进行了验证,证实利用可诱导高拷贝的筛选质粒可筛选出高正交性的琥珀抑制性tRNA突变体。 展开更多
关键词 可诱导高拷贝质粒 琥珀抑制性trna 遗传密码扩充技术
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tRNA介导蛋白质工程 被引量:2
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作者 陈莉 金由辛 王德宝 《生物工程进展》 CSCD 2001年第1期11-14,共4页
在遗传信息从DNA到蛋白质流动的过程中 ,tRNA携带特异的氨基酸参与蛋白质合成 ,对于维持蛋白质翻译的忠实性起着非常重要的作用。生物体内共有 2 0种氨酰tRNA合成酶 ,每一种均对应于一种氨基酸和一个tRNA类型。但是这种翻译过程仅仅限于... 在遗传信息从DNA到蛋白质流动的过程中 ,tRNA携带特异的氨基酸参与蛋白质合成 ,对于维持蛋白质翻译的忠实性起着非常重要的作用。生物体内共有 2 0种氨酰tRNA合成酶 ,每一种均对应于一种氨基酸和一个tRNA类型。但是这种翻译过程仅仅限于 2 0种天然氨基酸 ,因此在进行传统的蛋白质工程研究时常常受到限制。事实上 ,在蛋白质工程中借助于校正tRNA定点掺入非天然氨基酸可以提供蛋白质的结构信息 ,改进蛋白质检测与分离的方法 ,甚至赋予蛋白质某些新的特性。随着生物技术的发展和完善 ,tRNA介导蛋白质工程将不仅在蛋白质工程中发挥潜能 ,而且在研制新型生物材料和疾病诊断及药物治疗方面起到推动作用。 展开更多
关键词 trna介导蛋白质工程 校正trna 定点非天然氨基酸替代 蛋白质检测和分离
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tRNA抑制子对转录因子NKX2.5提前终止密码子的通读 被引量:1
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作者 欧阳平 刘远航 +6 位作者 黄志刚 齐小娟 倪倩 刘亚萍 宋仁生 李涛 吴柱国 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期367-373,共7页
人类NKX2.5基因(NK2 homeobox 5,NKX2.5)提前终止密码子(Premature termination codon,PTC)突变会引起房间隔缺损、房室传导阻滞等先天性心脏病。目前,已报道的NKX2.5 PTC突变有8个(E109X、Q149X、Q170X、Q187X、Q198X、Y256X、... 人类NKX2.5基因(NK2 homeobox 5,NKX2.5)提前终止密码子(Premature termination codon,PTC)突变会引起房间隔缺损、房室传导阻滞等先天性心脏病。目前,已报道的NKX2.5 PTC突变有8个(E109X、Q149X、Q170X、Q187X、Q198X、Y256X、Y259X和C264X)。为了检测tRNA抑制子是否对PTC突变诱导通读产生有功能的全长蛋白,文章将8个NKX2.5 PTC突变克隆到pcDNA3.1(-)载体,将NKX2.5全长和E109X、Q149X及C264X克隆到pEGFP-N1载体,形成NKX2.5-EGFP融合质粒。将NKX2.5-EGFP与对应的tRNA抑制子质粒分别或共转染后观察绿色荧光数量定性判断tRNA抑制子是否诱导通读。Western blotting检测通读后全长蛋白和截短蛋白表达并计算通读效率。Real-time PCR检测NKX2.5下游重要调控基因Cx43 mRNA的表达判断通读后蛋白功能。结果表明,文章成功构建了8个基于pcDNA3.1(-)的NKX2.5表达质粒、4个基于pEGFP-N1的质粒;tRNA抑制子tRNA am能有效通读Q149X、Q170X、Q187X和Q198X,且对后三者的通读效率均在50%以上;tRNA op能有效通读C264X,通读效率约50%左右;tRNA oc不能通读NKX2.5 PTC突变;各通读后样本Cx43 mRNA相对表达量增加7%~41.7%;tRNA am和tRNA op能有效通读NKX2.5 PTC突变,产生具有功能的全长蛋白,但tRNA抑制子对细胞的其他影响还不明确,有待于进一步观察。 展开更多
关键词 trna抑制子 NKX2.5 提前终止密码子 通读 先天性心脏病
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酵母校正tRNA的提取及其对番茄花叶病毒增殖的抑制作用
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作者 王小凤 李丰知 田波 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期105-111,共7页
从酵母(Saccharamyces cerevisiae SUP-6-1温度突变株,含 SUPtRNA^(Tyr),SUPtRNA^(?),SUPtRNA^(His))和菠菜提取了总 tRNA,经过 BD-纤维素柱层析,得到部份纯化的 amber 终止密码校正 tRNA,它们在兔网织细胞裂解液翻译体系中能促进番茄... 从酵母(Saccharamyces cerevisiae SUP-6-1温度突变株,含 SUPtRNA^(Tyr),SUPtRNA^(?),SUPtRNA^(His))和菠菜提取了总 tRNA,经过 BD-纤维素柱层析,得到部份纯化的 amber 终止密码校正 tRNA,它们在兔网织细胞裂解液翻译体系中能促进番茄花叶病毒(ToMV)RNA183k 抄读蛋白的合成。研究了酵母 SUP6-1校正 tRNA 对 ToMV 在烟草中增殖的影响。在用酵母 SUP6-1校正 tRNA 处理的植株顶部新生叶中病毒滴度接种3、5、11、15和20天后,分别是对照的3%、12%、38%、42%和67%。用校正 tRNA 处理的烟草植株中层叶片,在接种后11—20天明显低于对照。下层接种叶中的病毒滴度无显著差异。讨论了校正 tRNA 对 ToMV 增殖抑制的机理。 展开更多
关键词 酵母 校正trna 番茄花叶病毒
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