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MACC1的表达对宫颈癌Hela细胞凋亡特异核酸酶及细胞周期的影响
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作者 杜珍 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2024年第7期0178-0181,共4页
探讨MACC1的表达对宫颈癌Hela细胞凋亡特异核酸酶及细胞周期的影响。方法 将宫颈癌Hela细胞进行培养;扩增MACC1基因;检测MACC1、cyclinD1、MMP2、MMP9、caspase-3基因表达水平、凋亡特异核酸酶水平、Hela细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭... 探讨MACC1的表达对宫颈癌Hela细胞凋亡特异核酸酶及细胞周期的影响。方法 将宫颈癌Hela细胞进行培养;扩增MACC1基因;检测MACC1、cyclinD1、MMP2、MMP9、caspase-3基因表达水平、凋亡特异核酸酶水平、Hela细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭水平以及Hela细胞的周期(G1期、S期、G2期)。结果 siRNA;MACC1组的MACC1、cyclinD1、MMP2、MMP9基因表达水平低于siRNA;NC组;caspase-3基因表达水平高于siRNA;NC组(P<0.05)。siRNA;MACC1组的Hela细胞中凋亡特异核酸酶水平为(1.85±0.18);显著高于siRNA;NC组(1.01±0.09)(P<0.05)。siRNA;于细胞侵袭及细胞迁移数量和Hela细胞A值、等方面,相比siRNA,MACC1组更低;NC组;细胞凋亡率高于siRNA;NC组(P<0.05)。siRNA;MACC1组的Hela细胞中G1期细胞比例高于siRNA;NC组;S期细胞、G2期细胞的比例低于siRNA;NC组(P<0.05)。结论 MACC1的表达能够改善宫颈癌Hela细胞的凋亡特异核酸酶水平,调控细胞周期,将Hela细胞阻滞在G1期,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 MACC1 宫颈癌 HELA细胞 凋亡特异核酸酶 细胞周期
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核酸酶基因LoENDONUCLEASE1在东方百合花朵衰老过程中的功能分析 被引量:1
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作者 李蕊蕊 刘玉杰 +4 位作者 许鑫彤 刘熠 何颖姣 王彩云 罗靖 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期157-165,共9页
为明确百合(Lilium spp.)花朵衰老发生的分子机制,在东方百合‘西伯利亚’(Lilium oriental hybrid‘Siberia’)花被片中克隆了一个衰老相关基因LoENDONUCLEASE 1(SAG10),利用qRT-PCR进行基因表达分析,并通过农杆菌介导的拟南芥稳定表... 为明确百合(Lilium spp.)花朵衰老发生的分子机制,在东方百合‘西伯利亚’(Lilium oriental hybrid‘Siberia’)花被片中克隆了一个衰老相关基因LoENDONUCLEASE 1(SAG10),利用qRT-PCR进行基因表达分析,并通过农杆菌介导的拟南芥稳定表达系统和百合花被片瞬时表达体系验证LoENDONUCLEASE 1基因功能。结果显示,LoENDONUCLEASE 1基因开放阅读框(ORF)为921 bp,编码306个氨基酸;LoENDONU⁃CLEASE 1在百合花朵和叶片的衰老过程中特异表达,且受到脱落酸和水杨酸的诱导;拟南芥过表达LoENDO⁃NUCLEASE 1株系中叶片叶绿素含量显著低于对照株系,百合花被片中瞬时过表达LoENDONUCLEASE 1基因加速了百合花被片的衰老,且过表达花被片中丙二醛和离子渗透率含量显著高于对照。结果表明,LoEN⁃DONUCLEASE 1具有促进花朵和叶片衰老的功能。 展开更多
关键词 百合 鲜切花 花朵衰老 衰老相关基因 核酸酶 过表达
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核酸酶NucB高效表达工程菌株的构建及功能测定
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作者 李江勇 陈熙明 +4 位作者 刘光琇 张威 陈拓 袁亚玲 李善家 《兰州大学学报(医学版)》 2024年第2期12-17,共6页
目的构建可以高效稳定表达核酸酶NucB的工程菌株。方法以大肠杆菌DH5α(DE3)为材料,采用基因编辑的方法将其中的必需基因lexA敲除,重新设计一个带有lexA基因的质粒进行基因回补,从而得到工程菌株DH5α(DE3)ΔlexA,再将带有目的基因nucB... 目的构建可以高效稳定表达核酸酶NucB的工程菌株。方法以大肠杆菌DH5α(DE3)为材料,采用基因编辑的方法将其中的必需基因lexA敲除,重新设计一个带有lexA基因的质粒进行基因回补,从而得到工程菌株DH5α(DE3)ΔlexA,再将带有目的基因nucB的质粒转入基因改造后的菌株中发酵培养生产核酸酶NucB并测定功能。结果经过基因改造后的大肠杆菌DH5α(DE3)ΔlexA与未经基因改造的大肠杆菌对比显示:改造后的菌株质粒非常稳定,蛋白表达量高且发酵过程中可以不用添加抗生素来生产核酸酶NucB。结论以基因编辑的方法成功构建一株无抗生素、高效稳定表达核酸酶NucB的工程菌株DH5α(DE3)ΔlexA。 展开更多
关键词 基因敲除 无抗生素 高效稳定 核酸酶NucB
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微生物发酵法制备核酸酶P1及其性质和应用
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作者 胡洋 万吉林 +2 位作者 侯莎 吴昌正 童星 《中国调味品》 CAS 北大核心 2024年第10期216-220,共5页
核酸酶P1又名5′-磷酸二酯酶,是酶法制备5′-核苷酸的关键酶类。文章对核酸酶P1的结构、性质、发酵工艺及其在食品领域的应用进行了总结,并对其未来的发展方向进行了展望。
关键词 核酸酶P1 性质 发酵 固定化 应用
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阴离子交换树脂固定化核酸酶P1的研究
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作者 王天赐 徐康 +1 位作者 侯亚利 杨忠华 《生物加工过程》 CAS 2024年第1期33-41,共9页
5′-核苷酸及其衍生物因具有较高的营养保健价值和药用价值,市场需求不断增大。核酸酶P1是目前5′-核苷酸工业生产的关键酶,但游离酶存在难以重复利用、消耗量过大等缺点。为了解决上述问题,提高核酸酶的利用效率,笔者利用不同类型树脂... 5′-核苷酸及其衍生物因具有较高的营养保健价值和药用价值,市场需求不断增大。核酸酶P1是目前5′-核苷酸工业生产的关键酶,但游离酶存在难以重复利用、消耗量过大等缺点。为了解决上述问题,提高核酸酶的利用效率,笔者利用不同类型树脂对核酸酶P1进行固定化。以核酸酶P1的吸附量和固定化酶的酶活为评价标准,研究发现阴离子交换树脂1(AER1)固定化时效果最佳,优化后的最佳固定化条件为酶量3 644.7 U/mL(2.2 mL)、戊二醛质量分数0.25%、交联时间1.5 h、固定化时间10.0 h、pH 5.1。该条件下制备的核酸酶P1的比酶活为47 980.95 U/g。在此最佳条件下,固定化酶的热稳定性有一定程度的提高;固定化酶的酸碱稳定性大幅度提高;固定化酶在4℃下保存6周后,酶活保留51.8%,是游离酶的1.6倍。 展开更多
关键词 核酸酶P1 树脂 固定化酶 交联
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固定化核酸酶的制备及其降解沼液中抗生素抗性基因sul 1的研究
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作者 蓝丽华 陈雨心 +2 位作者 张问鼎 王婷 张进 《环境污染与防治》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1414-1420,1428,共8页
为了削减畜禽沼液中抗生素抗性基因,以壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂,采用共价交联法将核酸酶固定到壳聚糖微球上,优化了固定化核酸酶的制备条件,并探究了固定化核酸酶对模拟废水和猪场沼液中磺胺类抗生素抗性基因sul 1的去除效应,... 为了削减畜禽沼液中抗生素抗性基因,以壳聚糖微球为载体,戊二醛为交联剂,采用共价交联法将核酸酶固定到壳聚糖微球上,优化了固定化核酸酶的制备条件,并探究了固定化核酸酶对模拟废水和猪场沼液中磺胺类抗生素抗性基因sul 1的去除效应,为畜禽沼液中抗生素抗性基因进行生物酶法降解提供了新思路。结果表明:1)核酸酶成功固定化在壳聚糖微球表面。最佳制备条件为壳聚糖质量分数4%、戊二醛体积分数2%、交联时间8 h、固定化时间10 h。2)固定化核酸酶在模拟废水中的处理效果极佳,适用pH为5.5~8.5,适用温度为4~37℃,对模拟废水中sul 1的去除率可达100%。重复使用5次后,去除率仍保持在80%以上。3)对猪场原沼液中sul 1的去除效果不及模拟废水。稀释沼液可以有效缓解对核酸酶的抑制,稀释5倍后,在处理温度37℃、处理时间80 min条件下,对沼液中sul 1的去除率最高可达72.2%,重复使用5次后保持44.5%的酶活力。 展开更多
关键词 核酸酶 固定化酶 壳聚糖 抗生素抗性基因 沼液
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新一代基因编辑工具 无须蛋白核酸酶参与 被引量:1
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《张江科技评论》 2024年第1期126-126,共1页
创新点,基因承载着遗传信息,塑造了生命的多样性和复杂性。基因编辑作为一项关键技术,在生物学研究和生物医药产业的发展中具有至关重要的地位,是我们深入了解和改变生命的关键工具。历代基因编辑工具,ZFNs、TALENs、CRISPR-Cas均高度... 创新点,基因承载着遗传信息,塑造了生命的多样性和复杂性。基因编辑作为一项关键技术,在生物学研究和生物医药产业的发展中具有至关重要的地位,是我们深入了解和改变生命的关键工具。历代基因编辑工具,ZFNs、TALENs、CRISPR-Cas均高度依赖蛋白质。 展开更多
关键词 基因编辑 生物医药产业 遗传信息 核酸酶 深入了解 生命 多样性 蛋白质
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葡萄球菌核酸酶样结构蛋白1/SLC7A11抑制铁死亡对骨肉瘤发生发展的影响
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作者 王胜涛 徐淑娟 +3 位作者 贵鹏 李欣咛 隋玉涵 李朝旭 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期11-18,共8页
目的探讨葡萄球菌核酸酶样结构蛋白1(SND1)对骨肉瘤细胞生物学功能的影响,及其通过SLC7A11调控骨肉瘤细胞铁死亡的作用机制。方法检测人成骨细胞hFOB1.19以及骨肉瘤细胞系Saos-2、U2OS、HOS和143B中SND1的表达水平。采用小干扰RNA敲减... 目的探讨葡萄球菌核酸酶样结构蛋白1(SND1)对骨肉瘤细胞生物学功能的影响,及其通过SLC7A11调控骨肉瘤细胞铁死亡的作用机制。方法检测人成骨细胞hFOB1.19以及骨肉瘤细胞系Saos-2、U2OS、HOS和143B中SND1的表达水平。采用小干扰RNA敲减骨肉瘤细胞HOS和143B中SND1的表达(si-SND1),采用CCK8法、细胞克隆形成实验、细胞迁移和侵袭实验探究SND1的表达对骨肉瘤细胞生物学功能的影响;调控骨肉瘤细胞中SND1以及SLC7A11基因的表达,探究SND1通过SLC7A1基因对骨肉瘤铁死亡介导的肿瘤细胞凋亡的影响。结果骨肉瘤细胞Saos-2、U2OS、HOS和143B中SND1 mRNA和蛋白的表达水平显著高于人成骨细胞hFOB1.19(P均<0.01)。与对照组比较,si-SND1转染显著降低HOS和143B细胞中SND1的表达水平(P均<0.01),且细胞活性显著降低,克隆形成数量显著减少,细胞迁移和侵袭能力显著降低(P均<0.001)。铁死亡诱导剂Erastin促进骨肉瘤HOS和143B细胞凋亡,而抑制剂Ferrostatin-1刺激上调细胞活性(P均<0.001)。敲减SND-1后使用Erastin可进一步降低骨肉瘤HOS和143B细胞活性,而使用Ferrostatin-1刺激后可显著恢复细胞活性(P均<0.001);Erastin处理后,si-SND1组细胞中铁离子和丙二醛表达增高,谷胱甘肽表达降低(P均<0.001)。体内实验结果显示,敲减SND1可以明显抑制143B裸鼠移植瘤的瘤体质量(P<0.001)。敲减SND1后骨肉瘤HOS和143B细胞中SLC7A11的表达水平显著减少(P均<0.001),且铁死亡水平升高(P<0.001,P=0.020)。结论骨肉瘤细胞中SND1表达显著增高,其可能通过上调SLC7A11的表达抑制铁死亡,进而促进骨肉瘤细胞活性。 展开更多
关键词 骨肉瘤 葡萄球菌核酸酶样结构蛋白1 铁死亡
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基于核酸酶辅助信号放大的2’-O-甲基修饰分子信标用于高灵敏和特异性外泌体肿瘤microRNA分析
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作者 吕天鹏 柯声锋 +1 位作者 王书皓 崔亮 《分析化学进展》 CAS 2024年第2期95-105,共11页
外泌体是新兴的重要癌症生物标志物。有效检测外泌体和外泌体内容物,特别是microRNA (miRNA),对于癌症的诊断和治疗是迫切且具有挑战性的。基于双链特异性核酸酶(Duplex specific nuclease, DSN)的特异性识别和消化能力,我们设计了一个2... 外泌体是新兴的重要癌症生物标志物。有效检测外泌体和外泌体内容物,特别是microRNA (miRNA),对于癌症的诊断和治疗是迫切且具有挑战性的。基于双链特异性核酸酶(Duplex specific nuclease, DSN)的特异性识别和消化能力,我们设计了一个2’-O-甲基修饰的分子信标(2’-O-methyl-modified molecular beacon, omMB),并开发了一个高灵敏度和特异性分析外泌体miRNA的信号放大检测平台。该方法以A375细胞分泌的外泌体为模型,以microRNA-21 (miR-21)为模型miRNA分子,可以检测到低至37.9 pM的miRNA和2 μg/mL的裂解外泌体。同时,与许多已开发的DSN辅助信号放大方法相比,新方法具有较高的特异性,可以区分错配miRNA。总之,这项工作为医学分析、临床应用和疾病诊断中的外泌体检测提供了一种有效的分析策略。 展开更多
关键词 双链特异性核酸酶 外泌体 微小RNA 分子信标 信号放大
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家蚕RNAi效率相关核酸酶基因对RNAi效率的影响 被引量:1
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作者 陈咏琪 尹延萍 +4 位作者 冯嘉伟 白新宇 李庆荣 钟仰进 杨婉莹 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期303-311,共9页
【目的】鳞翅目(Lepidoptera)昆虫消化系统存在的核酸酶是导致RNAi低效的主要原因之一,本研究旨在探索家蚕Bombyx mori RNAi效率相关核酸酶(RNAi efficiency-related nuclease, REase)BmREase对家蚕RNAi低效的影响。【方法】利用RT-PCR... 【目的】鳞翅目(Lepidoptera)昆虫消化系统存在的核酸酶是导致RNAi低效的主要原因之一,本研究旨在探索家蚕Bombyx mori RNAi效率相关核酸酶(RNAi efficiency-related nuclease, REase)BmREase对家蚕RNAi低效的影响。【方法】利用RT-PCR对家蚕BmREase cDNA全长序列进行同源克隆和生物信息学分析,并采用最大似然法进行系统发育分析;利用qRT-PCR检测BmREase在游走期家蚕不同组织(头、表皮、脂肪体、中肠、气管、马氏管和丝腺)中的特异性表达。通过向游走期家蚕注射BmREase,家蚕蜕皮激素受体(ecdysone receptor, EcR)基因BmEcR,超气门蛋白(ultraspiracle, USP)基因BmUSP和细胞因子sp?tzle1(BmSpz1)基因BmSpz1的dsRNA进行RNAi,分析干扰BmREase表达后是否可以提高靶基因dsRNAs的干扰效率。【结果】RT-PCR扩增得到家蚕BmREase(GenBank登录号:XM_021350017.2)全长cDNA序列,其ORF长2 241 bp,编码746个氨基酸残基;生物信息学分析发现,BmREase与人核酸外切酶I 3qe9.1具有极其相似的结构,其Thr7, His33, Ala37, Arg93, Lys97, Tyr159, Asp160, Ser161和Asn174组成的活性结构域能够与核苷酸序列结合,暗示BmREase具有核酸酶活性。qRT-PCR结果显示,BmREase在家蚕游走期的中肠和马氏管中高表达,说明BmREase主要在家蚕消化系统中表达。在家蚕游走期注射dsRNA,BmREase的表达量比空白对照组的高,RNAi干扰BmREase提高了dsBmEcR, dsBmUSP和dsBmSpz1的干扰效率。【结论】家蚕体内存在与人类核酸外切酶相似功能的酶BmREase,其存在可能影响dsRNA在家蚕体内的干扰效果。本研究为利用RNAi进行家蚕基因功能的研究以及进一步开发RNAi防治害虫具有指导性意义。 展开更多
关键词 家蚕 RNA干扰 DSRNA RNAi效率相关核酸酶 BmREase dsRNA外切酶
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核酸酶在酱油酿造上的应用研究 被引量:2
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作者 赵悦 丁婷婷 +2 位作者 张梦丽 冯怡华 王春玲 《中国调味品》 CAS 北大核心 2023年第8期6-11,共6页
该研究采用低盐固态酱油发酵工艺,采用单一菌株(米曲霉3.042)进行制曲,在制曲过程中添加核酸酶来实现酶法辅助发酵。采用单因素实验确定核酸酶的最佳添加量和添加时间。通过测定酱醅的总酸、氨基酸态氮等理化指标以及成品酱油中的风味成... 该研究采用低盐固态酱油发酵工艺,采用单一菌株(米曲霉3.042)进行制曲,在制曲过程中添加核酸酶来实现酶法辅助发酵。采用单因素实验确定核酸酶的最佳添加量和添加时间。通过测定酱醅的总酸、氨基酸态氮等理化指标以及成品酱油中的风味成分,最后进行成品酱油的感官评定,探讨外源核酸酶在酱油酿造中的作用。结果表明,核酸酶的最佳添加量为大曲质量的0.3%。同时核酸酶的添加提高了大曲的酶活,保证了原料中大分子物质的分解和有效利用,从而具有提高酱油原料利用率和改善酱油风味的效果。 展开更多
关键词 低盐固态酱油 核酸酶 酶活 理化特性 风味 感官评定
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腺相关病毒介导锌指核酸酶体外切除HIV-1基因组研究
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作者 梁智铭 杨辛毅 +8 位作者 王亚楠 王菁 沈晓婷 潘浛雨 杨金龙 陆盼盼 赵琳 梁玥 朱焕章 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期753-764,共12页
人类免疫缺陷病毒1型(Human Immunodeficiency Virus type 1,HIV-1)能够整合到宿主细胞基因组并通过基因沉默的方式逃避高效抗逆转录病毒疗法(Highly Active Antietroviral Therapy,HAART),而高效特异性的基因编辑工具的出现,有望成功切... 人类免疫缺陷病毒1型(Human Immunodeficiency Virus type 1,HIV-1)能够整合到宿主细胞基因组并通过基因沉默的方式逃避高效抗逆转录病毒疗法(Highly Active Antietroviral Therapy,HAART),而高效特异性的基因编辑工具的出现,有望成功切除HIV-1前病毒基因组。重组腺相关病毒(AAV)是基因治疗的重要载体系统,为了获得能够高效感染T细胞的基因编辑工具递送系统,本研究通过比较过表达增强绿色荧光蛋白的血清型2、血清型6、血清型DJ的重组腺相关病毒,筛选出T细胞系的偏好血清型为6型。通过比较CMV启动子、SFFV启动子,筛选出T细胞系的偏好启动子为SFFV启动子。最后,我们通过制备过表达靶向HIV-1长末端重复序列(Long Terminal Region,LTR)的锌指核酸酶(Zinc Finger Nuclease,ZFN)的AAV6递送载体系统,感染模拟HIV-1阳性表达的细胞系Ya,T7E1检测证实HIV-1前病毒基因组被特异性切除,流式细胞仪检测证实切除效率约为17.1%,测序分析进一步证实靶向HIV-1 LTR的ZFN能介导从细胞基因组中切除HIV-1前病毒基因组。实验证明,6型重组腺相关病毒递送靶向HIV-1 LTR的ZFN能有效切除HIV-1前病毒基因组,为该系统未来的体内应用奠定了基础。 展开更多
关键词 基因编辑工具 人类免疫缺陷病毒1型 获得性免疫缺陷综合征 锌指核酸酶 腺相关病毒
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基于双链特异性核酸酶水解信号放大检测miRNA的方法学进展
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作者 秦荟钧 王树急(综述) 段晓雷(审校) 《国际检验医学杂志》 CAS 2023年第2期231-235,共5页
微小RNA(miRNA)作为肿瘤等多种疾病相关的一类核酸标志物,在疾病早期或预后阶段水平极低,需要提高miRNA检测灵敏度。双链特异性核酸酶(DSN)是近年来新发现的一种特异性水解DNA-RNA杂交链中DNA、而对单链RNA不产生作用的核酸酶;利用其酶... 微小RNA(miRNA)作为肿瘤等多种疾病相关的一类核酸标志物,在疾病早期或预后阶段水平极低,需要提高miRNA检测灵敏度。双链特异性核酸酶(DSN)是近年来新发现的一种特异性水解DNA-RNA杂交链中DNA、而对单链RNA不产生作用的核酸酶;利用其酶切特性可导致miRNA循环再利用,从而实现miRNA检测信号放大。目前基于DSN酶切放大效应检测miRNA为一项热点研究,其与等温扩增及纳米材料相结合,主要在DSN介导的比色传感器、荧光传感器、电化学及电化学发光传感器等方面发展出许多miRNA检测新方法,为医学检验工作者提供了极具前景的miRNA技术工具。巧妙设计DNA探针、克服DSN部分局限性、增加新型纳米材料等则是基于DSN酶切放大效应检测miRNA新方法的未来研究发展方向。 展开更多
关键词 微小RNA 双链特异性核酸酶 生物传感器 信号放大
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Research on internal gravity waves in the Martian atmosphere based on Tianwen-1 and Mars Global Surveyor occultation data
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作者 Luo Xiao CunYing Xiao +2 位作者 Xiong Hu ZeWei Wang XiaoQi Wu 《Earth and Planetary Physics》 EI CAS CSCD 2024年第6期890-898,共9页
Internal gravity waves(IGWs)are critical in driving Martian atmospheric motion and phenomena.This study investigates Martian IGWs by using high-resolution data from China’s Tianwen-1 mission and the National Aeronaut... Internal gravity waves(IGWs)are critical in driving Martian atmospheric motion and phenomena.This study investigates Martian IGWs by using high-resolution data from China’s Tianwen-1 mission and the National Aeronautics and Space Administration’s Mars Global Surveyor(MGS)by the radio occultation(RO)technique.Key IGW parameters,such as vertical and horizontal wavelengths,intrinsic frequency,and energy density,are extracted based on vertical temperature profiles from the Martian surface to~50 km altitude.Data reveal that the Martian IGWs are predominantly small-scale waves,with vertical wavelengths between 6 and 13 km and horizontal wavelengths extending to thousands of kilometers.These waves propagate almost vertically and exhibit low intrinsic frequencies close to the inertial frequency,with the characteristic of low-frequency inertial IGWs.Tianwen-1 data indicate stronger IGW activity,higher energy density,and less dissipation than MGS data in the northern hemisphere.Moreover,MGS data in the southern hemisphere show higher buoyancy frequencies and lower vertical wavelengths,suggesting more stable atmospheric conditions conducive to IGW propagation.These extracted IGW characteristics can enhance our understanding of the atmospheric dynamics on Mars and contribute valuable information for parameterization in global circulation models. 展开更多
关键词 internal gravity waves MARS Tianwen-1 Mars Global surveyor radio occultation
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粘质沙雷氏菌全能核酸酶的研究进展
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作者 赵萍 韩冬梅 《北方牧业》 2023年第13期19-20,共2页
全能核酸酶又称非特异性核酸酶(Nonspecific nuclease,NU),可降解几乎所有形式的DNA和RNA (包括单链、双链、线状、环状、天然以及变性的核酸),生成3~5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸。全能核酸酶来源广泛,在动物、植物、细菌、真菌和... 全能核酸酶又称非特异性核酸酶(Nonspecific nuclease,NU),可降解几乎所有形式的DNA和RNA (包括单链、双链、线状、环状、天然以及变性的核酸),生成3~5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸。全能核酸酶来源广泛,在动物、植物、细菌、真菌和病毒均有发现,到目前为止,已鉴定出30多种不同来源的全能核酸酶,其中来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的全能核酸酶活力最强(下文无特殊说明,全能核酸酶均指来源于粘质沙雷氏菌全能核酸酶),能够在非常广泛的条件下保持很高的稳定性和消化活力。全能核酸酶在兽医方面的应用主要是去除兽用疫苗、蛋白、多糖类生物制药生产过程中的核酸残留,降解动物性饲料中的病原体的核酸残留,维护养殖场的生物安全。 展开更多
关键词 粘质沙雷氏菌 动物性饲料 兽用疫苗 核酸酶 非特异性 多糖类 兽医 养殖场
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核酸酶BN及SN基因的克隆和序列分析 被引量:7
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作者 刘玉乐 叶寅 +3 位作者 魏征宇 李胜国 康良仪 田波 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期200-203,共4页
分别从解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aurcus)中提取染色体DNA,经HindⅢ酶解后PCR扩增获得Barnase(核酸酶BN)基因和Staphylococcal Nuclease(核酸酶SN)基因,并克隆到质粒pGEMTZ-f(+)上。... 分别从解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aurcus)中提取染色体DNA,经HindⅢ酶解后PCR扩增获得Barnase(核酸酶BN)基因和Staphylococcal Nuclease(核酸酶SN)基因,并克隆到质粒pGEMTZ-f(+)上。序列分析表明,核酸酶BN的核苷酸序列与已发表的序列有99.3%的同源性,而与据此推测的氨基酸序列完全一致。核酸酶SN基因的核苷酸序列与已发表的序列有99.1%的同源性,与据此推测的氨基酸序列有99.3%的同源性。该工作为利用核酸酶的特异表达或激活获得雄性不育植物及探索新的抗病毒策略打下了基础。 展开更多
关键词 核酸酶BN 核酸酶SN 克隆 序列分析
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磺酸咔咯及其镓(Ⅲ)配合物与DNA的相互作用和光核酸酶活性 被引量:16
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作者 黄俊腾 张阳 +2 位作者 王湘利 计亮年 刘海洋 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1649-1656,共8页
本文用紫外-可见光谱、荧光光谱、圆二色光谱和粘度法研究了2,17-二(磺酸钠基)-5,10,15-三(五氟苯基)咔咯(1)及其镓配合物(1-Ga)与小牛胸腺DNA(ct-DNA)的相互作用。结果表明1和1-Ga通过外部结合的方式与ct-DNA相互作用,且结合能力1-Ga比... 本文用紫外-可见光谱、荧光光谱、圆二色光谱和粘度法研究了2,17-二(磺酸钠基)-5,10,15-三(五氟苯基)咔咯(1)及其镓配合物(1-Ga)与小牛胸腺DNA(ct-DNA)的相互作用。结果表明1和1-Ga通过外部结合的方式与ct-DNA相互作用,且结合能力1-Ga比1大。琼脂糖凝胶电泳实验显示1和1-Ga均具较好的光核酸酶活性,1-Ga光断裂DNA效果比1好,其光断裂机理与羟基自由基的产生有关。 展开更多
关键词 磺酸咔咯 DNA 核酸酶
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螺旋藻胞外和胞内核酸酶活性研究 被引量:6
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作者 王高歌 杨官品 +2 位作者 茅云翔 张宝红 张学成 《青岛海洋大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第6期883-888,共6页
通过分析比较 2个螺旋藻物种 7个品系胞外和胞内核酸酶活性 ,确定了抑制胞外和胞内核酸酶活性的方法。用液体培养基清洗两次可消除胞外核酸酶活性 ,添加 EDTA(2 m mol L-1)可显著地抑制胞内核酸酶活性。高温 (6 5℃ )
关键词 螺旋藻 胞外核酸酶活性 胞内核酸酶活性 EDTA
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重金属对蚕豆(vicia faba)根尖的核酸含量及核酸酶活性影响的研究 被引量:80
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作者 段昌群 王焕校 曲仲湘 《环境科学》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 1992年第5期31-35,共5页
Pb^(2+)、Cd^(2+)、Zn^(2+)在低浓度作用下,随处理浓度的升高,刺激蚕豆(Vicia faba)DNA含量(处理浓度分别低于10.0、0.50、50.0ppm)和RNA含量(处理浓度分别低于10.0、50.0、50.0ppm),DNase活性(处理浓度均低于10.0ppm)和RNase活性(处理... Pb^(2+)、Cd^(2+)、Zn^(2+)在低浓度作用下,随处理浓度的升高,刺激蚕豆(Vicia faba)DNA含量(处理浓度分别低于10.0、0.50、50.0ppm)和RNA含量(处理浓度分别低于10.0、50.0、50.0ppm),DNase活性(处理浓度均低于10.0ppm)和RNase活性(处理浓度分别低于20.0、10.0、50.0ppm)相应地升高;当处理浓度超过相应浓度时,DNA和RNA含量以及DNase与RNase活性随浓度升高而降低。Hg^(2+)在小于0.05ppm时使RNase活性升高,高于该浓度使其降低,其它各指标无上述规律性变化。重金属对核酸代谢的影响结果取决于植物组织的适应性反应与金属离子的毒性反应的强度。文章还讨论了金属离子特征和可能存在的不同代谢活动的抗性诱导体系对植物毒性的影响,以及蛋白质的代谢活动对植物适应性水平的影响。 展开更多
关键词 蚕豆 重金属 核酸 核酸酶 活性
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人工锌指核酸酶介导的基因组定点修饰技术 被引量:37
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作者 肖安 胡莹莹 +6 位作者 王唯晔 杨志芃 王展翔 黄鹏 佟向军 张博 林硕 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期665-683,共19页
锌指核酸酶(ZFN)由锌指蛋白(ZFP)结构域和Fok I核酸内切酶的切割结构域人工融合而成,是近年来发展起来的一种可用于基因组定点改造的分子工具。ZFN可识别并结合特定的DNA序列,并通过切割这一序列的特定位点造成DNA的双链断裂(DSB)。在... 锌指核酸酶(ZFN)由锌指蛋白(ZFP)结构域和Fok I核酸内切酶的切割结构域人工融合而成,是近年来发展起来的一种可用于基因组定点改造的分子工具。ZFN可识别并结合特定的DNA序列,并通过切割这一序列的特定位点造成DNA的双链断裂(DSB)。在此基础上,人们可以对基因组的特定位点进行各种遗传操作,包括基因打靶、基因定点插入、基因修复等,从而能够方便快捷地对基因组实现靶向遗传修饰。这种新的基因组定点修饰方法的突出优势是适用性好,对物种没有选择性,并且可以在细胞和个体水平进行遗传操作。文章综述了ZFN技术的研究进展及应用前景,重点介绍ZFN的结构与作用机制、现有的靶点评估及锌指蛋白库的构建与筛选方法、基因组定点修饰的策略,以及目前利用这一技术已成功实现突变的物种及内源基因,为开展这一领域的研究工作提供参考。 展开更多
关键词 锌指核酸酶 锌指蛋白 基因组定点修饰 基因打靶 分子工具
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