乙酰基转移酶KAT2A和Survivin蛋白乙酰化在食管癌中的相关性研究

目的 探讨食管癌组织中乙酰基转移酶2A(KAT2A)表达与Survivin蛋白乙酰化水平,分析二者在食管癌发生过程中的相关性。方法 选取70例食管鳞癌组织及其癌旁正常食管黏膜组织。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Survivin和KAT2A mRNA的表达,免疫组化及Western blotting检测Survivin和KAT2A的蛋白表达,免疫荧光验证Survivin和KAT2A在癌组织中的定位及表达;免疫共沉淀检测Survivin乙酰化。分析Survivin蛋白乙酰化与KAT2A的相关性及其二者与食管癌临床病理特征的关系。构建KAT2A RNA干扰序列,脂质体介导法转染至食管癌EC109细胞。应用qRT-PCR和Western blotting检测转染siRNA-KAT2A的食管癌EC109细胞中KAT2A mRNA和蛋白表达水平,免疫共沉淀检测EC109细胞中Survivin蛋白乙酰化水平。结果 食管癌组织中Survivin和KAT2A mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05);食管癌组织中Survivin和KAT2A蛋白呈高表达,而癌旁组织则呈低表达。免疫荧光证实Survivin和KAT2A蛋白在癌组织中同时呈现高表达状态,二者主要表达于细胞质中,部分表达于细胞核中。食管癌组织中Survivin蛋白发生了乙酰化,且食管癌组织中的乙酰化率显著高于癌旁组织(P<0.05);在食管癌组织中Survivin乙酰化和KAT2A表达呈正相关(r=0.517,P<0.05);Survivin乙酰化和KAT2A表达与食管癌的TNM分期、分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05)。体外实验显示,RNA干扰下调KAT2A对食管癌细胞Survivin mRNA和蛋白表达量均无影响(P>0.05),但Survivin蛋白的乙酰化水平显著降低(P<0.05)。结论 在食管病变过程中KAT2A参与了Survivin乙酰化修饰,其高表达可能是Survivin乙酰化修饰重要的前期分子事件,在食管癌的诊治中具有潜在应用价值。

砷对雄性大鼠睾丸组织AQP-8及survivin蛋白表达的影响

[目的]研究亚慢性砷中毒对大鼠睾丸组织AQP-8及survivin蛋白表达的影响。[方法]将40只健康成年清洁级SD雄性大鼠随机分为对照组以及低、中、高剂量砷染毒组,每组10只;采用自由饮水方式染毒,低、中、高剂量染毒组饮水中亚砷酸钠浓度分别为2.4、12.0、60.0 mg/L,连续染毒15周,对照组饮用蒸馏水;染毒试验结束后,对各组大鼠进行精子计数,计算精子存活率;制备睾丸组织切片进行病理学观察;利用免疫组化及Western blotting法测定大鼠睾丸组织中AQP-8及survivin蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比,中、高剂量染毒组大鼠精子计数与精子存活率均降低,且差异显著(P<0.05)。低剂量染毒组大鼠生精小管无明显变化;中剂量染毒组大鼠生精上皮层数减少,小管间隙增宽;高剂量染毒组大鼠部分生精小管出现基膜溶解,生精上皮细胞层次紊乱,细胞间隙增大,间质出现水肿、渗出。免疫组化分析结果显示,AQP-8蛋白主要表达于各级生精细胞的细胞膜和精子细胞,与对照组相比,各剂量染毒组大鼠睾丸组织中AQP-8阳性细胞平均光密度值显著(P<0.05)升高;survivin蛋白主要表达于次级精母细胞和精子细胞的胞浆,与对照组相比,各剂量染毒组大鼠睾丸组织中survivin阳性细胞平均光密度值显著(P<0.05)降低。Western blotting分析结果显示,对照组和各剂量染毒组大鼠睾丸组织中均存在AQP-8及survivin蛋白的表达;与对照组相比,低、中、高剂量染毒组AQP-8蛋白表达量显著(P=0)增加,survivin蛋白表达量显著(P=0)降低。[结论]砷暴露使睾丸组织AQP-8蛋白表达量增加,survivin蛋白表达量下降,这可能是导致其雄性生殖毒性效应的机制之一。

泽漆汤对小鼠Lewis肺癌抑制作用及survivin蛋白表达的影响

目的:观察泽漆汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠瘤体的抑制作用及其对survivin蛋白表达的影响,探讨其作用机理。方法:C57BL/6小鼠在右前腋皮下接种Lewis肺癌细胞造模,观察低、中、剂量泽漆汤对荷瘤小鼠抑瘤率、胸腺指数和肿瘤细胞增殖周期的影响,并通过免疫组化染色观察泽漆汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织sur-vivin蛋白的表达。结果:低、中、高剂量泽漆汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠的瘤重抑制率分别为24.55%、28.74%和35.93%;与模型组比较,泽漆汤能抑制肿瘤细胞的增殖周期,下调Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤组织凋亡抑制蛋白survivin的表达水平(P<0.01)。结论:泽漆汤在体内具有明显的抗肿瘤作用,这一作用可能与其能下调肿瘤细胞的凋亡抑制蛋白survivin的表达相关。

川芎嗪对宫颈癌Hela细胞磷酸化Bad蛋白和Survivin蛋白表达的影响

目的研究川芎嗪(TMP)对Hela细胞磷酸化Bad(p-Bad)蛋白和Survivin蛋白表达的影响。方法四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测TMP对Hela细胞增殖的抑制作用;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western印迹法检测p-Bad和Survivin蛋白的表达。结果与对照组相比TMP可抑制Hela细胞的增殖(P<0.01);增加Hela细胞的凋亡率(P<0.05,P<0.01);降低p-Bad蛋白和Survivin蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论TMP可抑制Hela细胞增殖,诱导Hela细胞凋亡,降低p-Bad蛋白和Survivin蛋白的表达,这可能是TMP诱导Hela细胞凋亡的机制之一。

肝癌组织中survivin蛋白表达的意义

目的:研究survivin蛋白在人肝癌组织中的表达与临床病理特征及预后的关系。方法:应用免疫组织化学染色对48例肝癌中survivin蛋白与增生细胞核抗原(PCNA)的表达情况进行检测,采用TUNEL方法检测细胞凋亡,结合临床病理特征及预后进行分析。结果:48例肝癌中survivin蛋白表达阳性率为64.6％。Edmondson分级Ⅰ-Ⅱ级患者survivin蛋白表达明显低于Ⅲ一Ⅳ级患者(39.1％vs88.0％,P=0.013)。survivin蛋白表达阳性者肝癌细胞增生凋亡比显著高于表达阴性者(1.8vs1.1,P=0.045)。survivin蛋白表达阴性患者与表达阳性患者比较,1a生存率差异无显著意义,但3a生存率前者显著高于后者(70.6％vs35.5％,P=0.011)。结论:survivin蛋白对破坏肝癌细胞增生凋亡平衡、促进肝癌细胞快速增生具有重要作用,survivin蛋白的表达可以作为预后不良的重要指标。

EGCG诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡及对Survivin蛋白表达的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocat-echin-3-gallate,EGCG)对人前列腺癌细胞PC-3凋亡及对其Survivin蛋白表达的影响。方法使用不同浓度的EGCG(0、20、40、80μg/mL)处理前列腺癌细胞株PC-3,通过细胞增殖曲线实验检测EGCG对PC-3细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度EGCG处理PC-3细胞48h后对细胞周期及凋亡的影响;用RT-PCR法检测各浓度EGCG作用48h后PC-3细胞中Survivin基因的表达差异,使用Western blot进行确认。结果 EGCG可以抑制PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用随EGCG浓度的增加而增强(P<0.05);Sur-vivin在PC-3细胞中高表达,EGCG促使PC-3细胞的Survivin表达下调,其表达水平随EGCG浓度的增加而减少(P<0.01)。结论 EGCG能下调PC-3细胞中Survivin蛋白的表达,这可能是EGCG抑制PC-3细胞增殖、诱导其凋亡的关键机制。

Survivin蛋白在卵巢癌中的表达和意义

目的探讨Survivin蛋白表达与卵巢癌临床病理特征间的关系。方法采用链菌素亲生物素蛋白-过氧化酶连接法检测10例正常卵巢、21例卵巢交界性肿瘤和38例卵巢浆液性囊腺癌石蜡组织中Survivin蛋白的表达。结果正常卵巢组织中无Survivin蛋白的表达;Survivin蛋白表达定位在肿瘤细胞的胞浆和胞核中;卵巢交界性肿瘤中Survivin蛋白表达阳性率为42.9%,与病理类型及血肿瘤相关抗原(CA125)的测定值无明显相关关系(P>0.05);浆液性囊腺癌中Survivin蛋白表达阳性率为76.3%,明显高于交界性肿瘤和正常卵巢组织(P<0.05),且与临床分期、组织学分级及淋巴结转移有关(P<0.05),与血CA125测定值、腹水量以及腹水/腹腔冲洗液细胞学间无明显相关关系(P>0.05)。结论Survivin蛋白表达水平增高可能与卵巢上皮癌的分化转移有关。

P-糖蛋白、Survivin蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及其与卵巢癌耐药的关系

目的检测抑凋亡蛋白Survivin及多药耐药基因mdr1的表达蛋白P-糖蛋白(P-gp)在卵巢上皮性癌中的表达,分析其在卵巢癌化学治疗耐药中的作用及与临床病理学特征间的关系。方法应用免疫组织化学技术SP法检测8例正常卵巢组织、16例良性上皮性卵巢肿瘤、46例上皮性卵巢癌(浆液性癌28例、粘液性癌12例、内膜样癌6例)组织中的Survivin、P-gp蛋白的表达情况。结果Survivin、P-gp蛋白在卵巢癌组织中阳性表达率分别为60.9%和34.8%,显著高于良性上皮性卵巢肿瘤组织31.3%、0%和正常卵巢组织(阴性)(P<0.05)。Survivin蛋白在Ⅲ-Ⅳ期恶性上皮性卵巢肿瘤组中的阳性表达高于Ⅰ-Ⅱ期肿瘤组(P<0.05);在低分化恶性上皮性卵巢肿瘤组织中的阳性表达高于中、高分化肿瘤组,有显著性差异(P<0.05),但与肿瘤组织类型无关。Survivin与P-gp在恶性上皮性卵巢肿瘤组中存在共同表达,卡方检验P<0.05,呈正性相关。结论卵巢癌存在原发性耐药,而由Survivin高表达引起的凋亡抑制在卵巢癌多药耐药的发生中起一定作用。

人肝癌多药耐药细胞株survivin蛋白的表达及意义

目的 探讨人肝癌多药耐药细胞株survivin蛋白表达与肝癌细胞多药耐药的关系。方法 用阿霉素(DOX)浓度梯度递增诱导法,建立人肝癌多药耐药细胞株(Bel- 74 0 2 / DOX)。用流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡率,同时用蛋白印迹(Western blot)检测其survivin蛋白表达。结果 随着培养液中DOX浓度的增加,Bel- 74 0 2 /DOX的凋亡率逐渐增加,survivin蛋白的表达逐渐增强。结论 Survivin蛋白的表达变化可能与人肝癌细胞获得性耐药有关。

大肠黏膜癌变过程中Survivin蛋白的表达

目的:探讨Survivin蛋白在人类大肠黏膜癌变过程中的作用及与大肠癌组织分化程度的关系.方法:应用SP免疫组织化学法检测Survivin蛋白在173例石蜡切片中的表达情况,包括26例正常大肠黏膜,35例腺瘤伴轻度非典型增生,25例腺瘤伴重度非典型增生和87例大肠腺癌.结果:Survivin蛋白主要定位于大肠腺瘤伴非典型增生和腺癌细胞的细胞质中,在正常大肠上皮细胞中不表达.在大肠正常黏膜→轻度非典型增生→重度非典型增生→腺癌的过程中Survivin表达阳性率逐渐增高,分别是0.0%、34.2%、56.0%和63.2%.但重度非典型增生和腺癌组的差异无统计学意义.Survivin在不同分化程度的腺癌中表达阳性率无明显差异,而且,Survivin表达强度与大肠腺癌分化程度无关系.结论:Survivin的表达发生在大肠腺癌恶性转化的早期,并在癌变过程中起重要作用,但与腺癌分化程度无关.这可能为大肠癌的诊断和治疗提供了新的靶点.

大肠癌发生过程中Survivin蛋白的表达及其与凋亡、增殖的关系

目的 探讨凋亡抑制蛋白Survivin在大肠癌发生过程中的作用及其与凋亡、增殖的关系。方法 应用免疫组化技术检测了 15例息肉、12例管状腺瘤、16例绒毛状或混合型腺瘤和 5 2例大肠癌组织中Survivin蛋白的表达以及凋亡指数、增殖指数的变化。结果 Survivin蛋白表达与大肠癌临床病理参数无明显的相关关系 ,Survivin蛋白、增殖指数在大肠腺瘤—癌演变中表达均逐渐增高 ,凋亡指数从管状腺瘤至腺癌表达逐渐降低 ,统计学处理差异均有意义。Survivin蛋白表达与增殖指数呈正相关 (P <0 0 0 1) ,与凋亡指数呈负相关 (P <0 0 0 1)。结论 Survivin在大肠癌发生早期过程中表达上调 ,在大肠癌变过程中起重要作用 ,有望成为大肠癌新的早期诊断标志物。

Survivin蛋白在子宫内膜癌中的表达及其与Ki-67抗原表达的关系

目的 探讨抗凋亡蛋白Survivin在正常子宫内膜、不典型增生性子宫内膜及子宫内膜癌中的表达及其与Ki 67抗原表达的关系, 探讨Survivin蛋白在子宫内膜癌发生、发展中的作用及其作为判断预后因子的可行性。方法 应用免疫组织化学SP法, 检测10例正常子宫内膜、10例不典型增生性子宫内膜及 33 例子宫内膜腺癌中 Survivin蛋白及Ki 67抗原的表达, 并结合临床病理特点进行分析。结果 Survivin蛋白在不典型增生的子宫内膜和子宫内膜癌阳性表达率很高, 分别为87 9%和70 .0%, 二者差异无显著性意义 (P>0 .05), 但均高于在正常子宫内膜中的表达率10 .0% (P<0. 05); 在子宫内膜癌中, Survivin的表达与手术 病理分期和组织学分级密切相关 (P<0 .05), 但与肌层浸润无明显关系。另外, Survivin的表达还与 Ki- 67 的表达呈正相关 (P<0 .05)。结论 Survivin可能通过抑制凋亡和促进增殖两方面的作用参与了子宫内膜癌的发生、发展, 其过度表达提示预后不良, 可能成为子宫内膜癌的预后判断因子。

十全大补汤对Survivin蛋白表达的影响

目的:探讨十全大补汤对小鼠肺癌组织中Survivin蛋白表达的影响。方法:40只C57BL/6小鼠接种Lewis肺癌瘤株后,随机分为4组,并给予不同浓度的十全大补汤进行干预,15天后,处死小鼠,采用SABC免疫组化法对各组Survivin蛋白表达进行检测。结果:与模型组比较,十全大补汤中剂量组Survivin蛋白的阳性表达率较低,有统计学意义。结论:十全大补汤在抑制肿瘤的过程中,可能具有双向调节作用。

全腔镜食管癌根治术联合TP化疗方案对食管癌患者血清肿瘤相关因子及survivin蛋白表达的影响

目的探讨全腔镜食管癌根治术联合TP化疗方案对食管癌患者血清肿瘤相关因子及survivin蛋白表达的影响。方法选择2010年8月~2013年8月川北医学院附属医院接受食管癌治疗的100例患者,依据随机数字表法分为对照组和观察组,对照组50例患者仅接受全腔镜食管癌根治术,观察组50例患者在对照组基础上行术前TP化疗。观察两组手术时间、术中出血量、下床活动时间、并发症发生率和预后情况,同时比较两组治疗前后血清肿瘤标志物[可溶型MHC-Ⅰ类链相关蛋白A(sMICA)、转录因子YY1(YY1)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(Cy-fra21-1)]、血清肿瘤恶性生物学标志物[基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、CD44v、血管内皮生长因子(VEGF)]及survivin蛋白水平。结果治疗后,两组sMICA、Cyfra21-1、MMP-9、CD44v、VEGF、survivin蛋白水平均较治疗前降低(P<0.05),其中观察组sMICA、YY1、Cyfra21-1、MMP-9、CD44v、VEGF、survivin蛋白明显低于对照组(P<0.05)。观察组术中出血量显著少于对照组,下床活动时间显著短于对照组(P<0.05),两组手术时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组术后并发症发生率显著高于观察组(P<0.05)。对照组患者3年生存率显著低于观察组(P<0.05)。结论全腔镜食管癌根治术联合TP化疗能够有效下调血清肿瘤相关因子、survivin蛋白表达,疗效显著、并发症发生率低,值得临床推广。

survivin蛋白在前列腺癌中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系

目的 :探讨新的凋亡基因survivin蛋白在前列腺癌 (PCa)的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系。 方法 :采用免疫组化SP法和DNA原位未端标记TUNEL法分别测定 4 2例PCa组织及 10正常前列腺 (NP)组织中survivin蛋白的表达和细胞凋亡。 结果 :survivin蛋白在PCa中的阳性表达为 80 .5 9% ,与病理分级、临床分期和淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 ) ,而NP中无阳性表达 ;PCa组织及NP组织中细胞凋亡指数 (AI)分别为 3.0 3± 1.33、1.0 7± 0 .77,其差异有显著意义 (P <0 .0 5 ) ;survivin蛋白的表达与细胞AI呈负相关 (r=- 0 .6 79,P <0 .0 0 1)。 结论 :survivin蛋白的异常表达而引起的细胞凋亡抑制 ,在PCa的发生、发展中起一定的作用 ;联合检测survivin蛋白和AI,有助于对肿瘤细胞的分化程度作出正确评价 。

Survivin蛋白在前列腺癌组织中的表达和相关性研究

目的探讨Survivin蛋白在前列腺癌组织中表达及其与肿瘤增殖、微血管密度计数和肿瘤细胞凋亡的关系和临床意义。方法采用免疫组化SP法和DNA原位未端标记TUNEL法分别测定42例前列腺癌(PCa)组织和10例正常前列腺(NP)组织中Survivin、Ki-67、VEGF、CD34的表达和细胞凋亡情况。结果Survivin蛋白在PCa中的阳性表达为80.59%,与病理分级、临床分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05),而正常前列腺组织中无阳性表达。Ki-67标记指数(LI)在PCa及NP中分别为(14.42±8.10)%和(8.10±2.50)%,其差异有统计学意义(P<0.01)。PCa中VEGF的阳性表达为69.05%,与病理分级、临床分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。PCa中MVD计数(32.54±10.17)显著高于正常前列腺组织(19.68±5.14)(P<0.01)。PCa癌组织及NP组织中细胞凋亡指数(AI)分别为3.03±1.33和1.07±0.77,其差异有统计学意义(P<0.05)。Survivin蛋白的表达与Ki-67LI、VEGF、MVD计数呈正相关(r分别为0.828、0.427和0.386,P<0.05);Survivin蛋白的表达与细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.679,P<0.001)。结论Survivin蛋白的异常表达而引起的细胞凋亡抑制或逃避、肿瘤细胞增殖和微血管增生的增加,在前列腺癌的发生、发展中起一定的作用;Survivin蛋白的检测有助于对肿瘤细胞的分化程度、病理分期作出正确评价,以指导临床治疗及估计预后。

survivin蛋白在人肝癌组织中的表达及其与细胞增殖及预后的关系

目的 研究肝癌组织中survivin蛋白的表达及其与肝癌细胞增殖及预后的关系。方法 应用免疫组织化学染色对 48例原发性肝癌组织中survivin蛋白与增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达情况进行检测 ,并结合临床预后进行分析。结果 48例肝癌组织中survivin蛋白表达阳性率为 64 .6 % ;survivin蛋白表达阳性者肝癌细胞增殖指数显著高于表达阴性者 (P =0 .0 0 7) ;survivin蛋白表达阴性患者与表达阳性患者比较 ,1年生存率差异无显著性意义 ,但 3年生存率前者显著高于后者 (P =0 .0 1 1 )。结论 survivin蛋白对促进肝癌细胞快速增殖具有重要作用 ,survivin蛋白的表达可以作为预后不良的重要指标 。

Survivin蛋白和VEGF在上皮性卵巢癌中的表达及相关性

目的:探讨Survivin蛋白和VEGF在上皮性卵巢癌组织中的表达及其在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用及两者的相关性。方法:采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶(SP)免疫组织化学方法检测45例上皮性卵巢癌、19例卵巢良性上皮性肿瘤及16例正常卵巢组织中Survivin和VEGF的表达,并分析其与各临床病理特征的关系及两者的相关性。结果:①上皮性卵巢癌中Survivin蛋白和VEGF表达水平均显著高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织,差异有显著性(P<0.05)。②Sur-vivin蛋白和VEGF的阳性表达率与上皮性卵巢癌病理类型无关(P>0.05),与临床分期、组织学分级及淋巴结转移有关(P<0.05)。③上皮性卵巢癌中Survivin蛋白与VEGF的表达呈正相关。结论:Survivin蛋白和VEGF均可作为反映上皮性卵巢癌生物学行为的客观参考指标,与卵巢癌的发生、发展和转移密切相关,Survivin和VEGF的联合检测有助于判断卵巢癌的恶性程度和预后,同时为卵巢癌的靶向治疗提供新的途径。

细胞周期与细胞凋亡共同的调控分子——Survivin蛋白(综述)

细胞周期与细胞凋亡是有着紧密联系的生命活动。尽管凋亡调控蛋白常常牵涉到细胞周期的调控,但是细胞周期与细胞凋亡共同的的调控分子却很少见。一个新的抗凋亡蛋白———Sur vivin蛋白,最近被发现同时具有调控细胞凋亡和细胞周期的双重功能,这为细胞周期与细胞凋亡之间存在紧密联系提供了有力的证据。另一方面,它的表达和分布特点对细胞增殖非常有利,提示Survivin蛋白可能是快速增殖细胞(如癌细胞)重要的调控分子。

索拉菲尼与沙利度胺联合对原发性肝癌患者survivin蛋白及CA125的影响

目的探讨索拉菲尼与沙利度胺联合对原发性肝癌(PHC)患者血清survivin蛋白、CA125的影响。方法将2014年4月~2015年6月我院收治的78例不可切除PHC患者分为对照组与研究组,每组39例。两组均给予相同TACE术治疗,对照组予索拉菲尼400 mg/次,2次/d口服;研究组加服沙利度胺100~200 mg·d^(-1),晚睡前口服。均连续治疗12周,并常规实施保肝治疗。检测两组患者血清survivin蛋白、AFP、CEA、CA125、CA199浓度变化,比较近期疗效和安全性,并随访2年,详细记录患者生存状况。结果与治疗前比较,两组患者血清survivin mRNA、survivin蛋白、AFP、CEA、CA125、CA199水平显著下降(P<0.01);研究组血清survivin mRNA、survivin蛋白、AFP、CEA、CA125、CA199水平显著低于对照组(P<0.01),总缓解率、恶心呕吐发生率及2年生存率明显高于对照组(P<0.05)。结论在TACE基础上联合索拉菲尼、沙利度胺治疗PHC效果显著,可提高患者远期生存状况,可能与下调survivin蛋白、CA125表达有关,但也存在恶心呕吐发生率较高等不足之处。