多梳蛋SUZ12预测吉西他滨治疗肝内胆管癌疗效和预后的研究

目的本研究探讨了肝内胆管癌(ICC)患者多梳蛋白SUZ12的表达及其在预测ICC患者的生存和对治疗反应的作用。方法用免疫组织化学方法检测207个肝组织样本(包括ICC患者,胆道上皮内瘤样病变患者Bil IN-1,-2,-3,和非瘤样病变的胆管样本)SUZ12和p16INK4a蛋白的表达。评估这些蛋白的表达是否和接受化疗的ICC患者的病理学特征和生存结果相关,以及是否和随后的化疗反应相关。结果从非肿瘤性胆管组织依次到BilIN-1,-2,-3,ICC,SUZ12表达水平渐进增加。而p16INK4a蛋白在非瘤样病变性胆管组织中大量表达,但在Bil IN-1,-2,-3,ICC组织中依次逐渐降低。SUZ12表达与未分化的ICC、淋巴结转移和晚期癌症相关。Kaplan-Meier曲线分析显示,高表达SUZ12的ICC患者与低表达SUZ12的ICC患者相比,总生存期和无瘤生存期显著降低。SUZ12表达与接受吉西他滨为基础的辅助化疗(Adjuvant gemcitabine-based chemotherapy,AGC)的患者的总体存活显著相关。结论SUZ12表达能够预测用吉西他滨为基础的化疗的ICC患者的总生存期和无病生存期。

胰腺癌组织中SUZ12蛋白的表达及临床意义

目的分析SUZ12蛋白在胰腺癌组织中的异常表达及其与临床和病理特征的关系。方法对2002至2007年哈尔滨医科大学附属第一医院86例胰腺癌患者石蜡标本通过免疫组化方法检测SUZ12蛋白的表达情况。结果 SUZ12蛋白在63%的胰腺癌组织中表达增高,其增高与肿瘤的分化,淋巴结转移相关(P<0.001);此外,高表达的SUZ12蛋白对吉西他滨有抑制作用(P<0.05)。结论高表达的SUZ12蛋白促进肿瘤恶性生物学行为并能促使肿瘤细胞耐受吉西他滨。

PRC2成分SUZ12在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨PRC2成分SUZ12在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组化技术检测检测2012年6月至2013年6月我院76例结直肠癌患者手术切除的肿瘤组织和配对癌旁正常组织中SUZ12的表达,分析SUZ12与结直肠癌临床病理特征的相关性。结果SUZ12在结直肠癌组织表达水平(9.24±4.47)明显高于配对的正常结直肠组织(3.45±2.78),两者差异有统计学意义(P<0.01),SUZ12表达水平与结直肠癌组织学分化程度(P=0.014)、TNM分期(P=0.016)及淋巴结转移(P=0.036)有关,而与患者的年龄、性别、肿瘤的部位、大小及浸润深度无明显相关(P>0.05)。结论SUZ12表达与结直肠癌侵袭和转移密切相关,可以作为评估结直肠癌恶性程度新的指标。

COL8A1通过竞争性结合miR-876调控SUZ12的表达从而促进胃癌细胞增殖

目的筛选胃癌中具有显著临床意义的潜在靶基因,探究其在胃癌发生发展中的功能和潜在分子机制。方法通过GEPIA数据库检索对胃癌发生发展具有重要意义的目的基因;采用免疫组化染色法及qRT-PCR检测目的基因在胃癌组织及胃癌前病变组织中的表达;通过siRNA介导敲低目的基因,利用细胞增殖实验和克隆形成实验验证其在胃癌发生发展中的作用;通过生物信息学数据库检测与目的基因结合的microRNA,进一步探索潜在作用机制。结果共筛选出46个基因在胃癌中高表达且具有显著临床预后相关性,最终选择COL8A1作为研究目的基因。胃癌及胃高级别上皮内瘤变组织中COL8A1高于正常组织(P=0.000),与病理T分期显著相关(P<0.05),其高表达患者预后不良。敲低COL8A1表达后,胃癌细胞增殖速率和克隆形成速率显著降低(P<0.05)。过表达miR-876可抑制SUZ12表达,降低细胞增殖速率(P<0.05);同时过表达miR-876和COL8A1可显著上调SUZ12表达(P<0.01),恢复细胞增殖速率至正常水平。结论COL8A1在胃癌中高表达,参与胃癌前病变进展为胃癌的过程,可作为胃癌早期诊断的分子标志物;COL8A1促进胃癌细胞增殖,可能通过竞争性结合miR-876,减弱miR-876与SUZ12结合作用,进而释放SUZ12,促进胃癌的发展。

人类SUZ12基因实时荧光定量PCR检测方法的建立

目的：建立SYBR GreenI实时荧光PCR定量检测人类SUZ12基因的方法．方法：将SUZ12RT-PCR扩增片段克隆入载体pGEM—T后，经测序鉴定正确后，进行纯化和定量及系列稀释，应用SYBRGreenI实时荧光定量PCR检测Suz12，建立标准曲线，熔解曲线分析产物的特异性．结果：该法检测的最低拷贝数为14．2，线性范围为1．42× 10^-1．42× 10^8拷贝，相关系数7为-1．00，1．42× 10^7拷贝／L标本的批内变异系数（CV）和日间CV分别为1．8％和2．8％．熔解曲线分析显示单一的峰，熔解温度（meltingtemperature，Tm）为（81．37±0．16）℃．结论：实时荧光定量PCR方法检测SUZ12基因，快速有效、灵敏度高、特异性好．

SUZ12过表达及敲减恶性外周神经鞘瘤稳定细胞株的建立及其意义

目的:构建SUZ12基因过表达和敲减的恶性外周神经鞘瘤(MPNST)稳定细胞株并探讨其意义。方法:PCR合成SUZ12基因全长并设计合成SUZ12基因的3对特异性sgRNA干扰靶点序列(sgRNA-1、sgRNA-2、sgRNA-3),构建重组表达质粒,转染293T细胞,包装慢病毒颗粒并用荧光法测定其滴度。确定慢病毒感染的最适MOI以及嘌呤霉素筛选的最适剂量,转染ST88-14细胞,构建过表达及敲减的MPNST稳定细胞株。荧光显微镜观察稳定株绿色荧光蛋白的表达情况,RT-qPCR在mRNA水平进行验证,MTT法检测SUZ12过表达和敲减组增殖活性的改变。结果:LV-SUZ12和LV-SUZ12-sgRNA转导入ST88-14细胞并稳定表达绿色荧光蛋白,RT-qPCR结果显示过表达稳定株SUZ12表达量明显升高(P<0.05),CRISPR/Cas9敲减稳定株SUZ12表达量明显下降(P<0.05)。MTT结果显示过表达SUZ12基因抑制MPNST细胞的增殖。结论:SUZ12过表达和敲减的稳定细胞株构建成功,初步验证结果表明过表达SUZ12基因抑制MPNST细胞的增殖,为针对SUZ12在MPNST中的生物学功能、作用机制和疾病诊断治疗的进一步研究提供了实验基础。

SUZ12在舌鳞癌中的表达及临床意义

目的研究多梳蛋白家族成员SUZ12在舌鳞状细胞癌(以下简称舌鳞癌)中的表达及其与多种临床病理参数之间的关系,探讨其在舌鳞癌预后判断中的意义。方法采用免疫组织化学染色半定量的方法检测72例术前未接受放、化疗或其他特殊治疗的原发性舌鳞癌患者标本及15例正常舌黏膜中SUZ12的表达情况,结合临床资料,对其与舌鳞癌临床病理特征和预后的相关性进行统计学分析。结果 SUZ12在舌鳞癌组中的表达明显高于正常舌黏膜。舌鳞癌组织中SUZ12的表达与患者年龄、性别、抽烟、饮酒、肿瘤大小、病理分级、临床分期之间在统计学上无显著性差异,与颈部淋巴结转移(P=0.032 5)、总体生存率(P=0.022 5)及无瘤生存率(P=0.017 9)相关。结论 SUZ12在舌鳞癌组织中过表达与颈淋巴结转移及低生存率相关,可能作为舌鳞癌诊断和预后判断的指标。

PRC2成分SUZ12在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的相关性

目的：探讨并研究多梳抑制复合物2（PRC2）成分SUZ12在结直肠癌组织中的表达情况及其与临床病理特征的相关性。方法：选择85例行腹腔镜结直肠癌切除术的患者为研究对象,术中收集所有患者手术切除后的结直肠癌病理标本,患者术前均未行放化疗,同时另取距离癌组织边缘15 cm的癌旁正常组织为对照组。测定结直肠癌组织及正常组织内的SUZ12蛋白含量,根据细胞核阳性染色强度和阳性细胞所占比例,评价SUZ12阳性表达分数及在结直肠癌组织中的表达水平。结果：左半结肠癌组、横结肠癌组、右半结肠及乙状结肠癌组、直肠癌组与其相应的对照组多梳蛋白SUZ12的阳性标记分数均增加（P〈0.05-P〈0.01）。大肠癌TNMⅢ-Ⅳ期的SUZ12的阳性标记分数均高于Ⅰ-Ⅱ期,中分化及高分化癌组织的分数均高于和低分化及未分化（P〈0.01）,有淋巴结转移比无淋巴结转移的分数高（P〈0.01）。SUZ12的阳性标记分数在年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤部位和肿瘤浸润深度各组差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：SUZ12蛋白可作为评价肿瘤恶性程度的指标,对早期诊断结直肠癌、改善治疗方案、提高患者生存时间至关重要。

SUZ12蛋白对口腔鳞状细胞癌的致癌作用

目的分析SUZ12蛋白的表达水平与口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者恶性生物学行为的关系,并研究SUZ12蛋白在口腔鳞状细胞癌细胞系中的生物学功能。方法对2008至2013年哈尔滨医科大学附属第一医院96例口腔鳞状细胞癌患者石蜡标本通过免疫组化方法检测SUZ12蛋白的表达;在体外实验中,通过RNA干扰的手段抑制SUZ12蛋白在口腔鳞状细胞癌细胞系中的表达水平。结果 SUZ12蛋白在OSCC组织中表达增高,其增高与肿瘤的分化,淋巴结转移相关(P<0.001);此外,发现抑制SUZ12蛋白的表达抑制了口腔鳞状细胞癌细胞的增殖,促进了口腔鳞状细胞癌细胞的凋亡。结论SUZ12起到癌基因的作用,高表达的SUZ12蛋白水平在口腔鳞状细胞癌发生发展过程中起到重要作用。

Polycomb蛋白SUZ12在肝细胞癌组织中的表达及与预后的关系

目的探讨SUZ12蛋白在肝癌组织中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片技术联合免疫组织化学法检测SUZ12蛋白在88例肝癌及27例正常肝组织中的表达水平,通过统计学方法分析其潜在的临床意义。结果SUZ12在肝癌组织中的表达水平高于正常肝组织,其表达阳性率分别为89.24%和56.65%。Kaplan-Meier分析表明,SUZ12低表达患者的术后生存时间明显延长;Cox回归分析提示,SUZ12蛋白高表达组在肝癌AJCC分期(P<0.001)、肿瘤>5 cm(P=0.006)、低分化(P=0.048)、血管侵犯(P<0.001)与SUZ12低表达组有显著统计学差异,并且SUZ12蛋白表达水平可能是肝癌术后预后的独立危险因素。结论SUZ12蛋白在肝癌及癌旁中的表达明显高于正常肝组织,其高表达与促进肝癌发生、发展相关,并提示SUZ12是一个潜在促癌基因。

微小RNA-214-5p靶向SUZ12对宫颈肿瘤细胞增殖和侵袭能力的影响

目的探讨微小RNA(miR)-214-5p靶向SUZ12对宫颈癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法选取2020年6月到2022年6月商丘市第一人民医院收治的宫颈癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析miR-214-5p表达水平。人宫颈癌细胞株CaSki随机分为对照组和miR-214-5p组。分别采用对照慢病毒和miR-214-5p慢病毒感染建立稳定细胞株。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和BrdU实验分析两组细胞的增殖活性;采用划痕实验分析细胞的迁移能力;采用Transwell分析两组细胞的侵袭能力。通过数据库和双荧光素酶报告基因分析miR-214-5p的靶基因。采用蛋白质免疫印迹(Western blot)分析靶蛋白的表达水平。组间计量数据比较采用t检验。结果癌旁组织中miR-214-5p表达水平(1.37±0.13)明显高于宫颈癌组织(0.56±0.14),差异有统计学意义(t=32.110,P<0.05)。对照组细胞miR-214-5p表达水平(1.16±0.08)明显低于miR-214-5p组细胞(2.79±0.18),差异有统计学意义(t=19.300,P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值(2.79±0.18)明显高于miR-214-5p组细胞(1.16±0.08),差异有统计学意义(t=19.300,P<0.05)。对照组细胞BrdU阳性率[(55.83±4.00)%]明显高于miR-214-5p组细胞[(28.29±3.90)%],差异有统计学意义(t=12.080,P<0.05)。对照组细胞划痕愈合率[(80.98±5.36)%]明显高于miR-214-5p组细胞[(47.81±3.11)%],差异有统计学意义(t=13.120,P<0.05)。对照组细胞侵袭细胞数量[(124.17±12.22)个]明显高于miR-214-5p组细胞[(72.83±10.78)个],差异有统计学意义(t=7.716,P<0.05)。SUZ12是miR-214-5p的靶基因。对照组细胞SUZ12蛋白表达水平(1.10±0.08)明显高于miR-214-5p组细胞(0.46±0.08),差异有统计学意义(t=13.730,P<0.05)。结论miR-214-5p在宫颈癌组织中呈低表达,通过靶向调控SUZ12蛋白,调控着宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭过程。

下调SUZ12抑制人宫颈癌细胞的增殖及作用机制

目的探讨下调SUZ12表达对人宫颈癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法通过RNAi(RNA干扰技术)下调SUZ12和Cdc25C蛋白的表达,通过慢病毒转染法对Hela细胞构建Cdc25C蛋白过表达及其对照细胞株,并用含嘌呤霉素培养基进行为期14 d的筛选,荧光拍照检测绿色荧光蛋白以及Western Blot法进行验证;MTT法检测下调SUZ12和Cdc25C蛋白对细胞增殖的影响;Western Blot法检测下调SUZ12表达后蛋白表达量的改变。结果 MTT结果显示,siSUZ12组中Hela及SiHa的增殖率远低于对照组,细胞增殖明显受到抑制,Hela的生存率为(60.65±7.64)%(P<0.01),SiHa的生存率为(73.81±9.30)%(P<0.01)。时效研究结果显示,转染siSUZ12后,Hela细胞在转染第2天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为(56.13±7.78)%(P<0.01);SiHa细胞在转染第1天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为(70.50±3.15)%(P<0.01)。细胞周期结果显示,Hela细胞在siSUZ12作用48 h后,G0/G1期的比例明显增加(P<0.05),细胞发生G1/S期阻滞。SiHa细胞在siSUZ12作用60 h后,G2/M期细胞数比例显著升高(P<0.01),细胞发生G2/M期阻滞。Western Blot结果显示,下调SUZ12表达后,细胞内Cdc25C的表达明显被抑制。阻断Cdc25C的表达后能显著拮抗siSUZ12对Hela、SiHa细胞的抑制作用,而过表达Cdc25C能降低siSUZ12对细胞的抑制作用。结论下调SUZ12能通过干扰Cdc25C的表达,产生抑制人宫颈癌细胞增殖的作用。

Zeste基因抑制子基因12在糖尿病肾脏病模型大鼠肾组织中的表达

背景:Zeste基因抑制子基因12(Suppressor of zeste gene 12,Suz12)可参与肾小管上皮细胞的上皮间质转化。目的:探讨Suz12对糖尿病肾脏病进程的影响及其相关作用机制。方法:①细胞实验:将大鼠肾小管上皮细胞分为正常对照组(葡萄糖5.5 mmol/L)、高糖组(葡萄糖30 mmol/L)和高渗组(葡萄糖5.5 mmol/L+甘露醇24.5 mmol/L);将100 nmol/L Suz12小干扰RNA(siRNA)及其阴性对照(NC siRNA)转染至高糖培养的肾小管上皮细胞中后48 h,采用Western blotting、CCK-8和流式细胞仪检测Suz12、Ⅳ型胶原蛋白、α-平滑肌肌动蛋白和E-cadherin的蛋白表达、细胞增殖和凋亡。采用染色质免疫共沉淀检测Suz12和金属蛋白酶组织抑制因子3的结合;金属蛋白酶组织抑制因子3表达抑制与组蛋白H3K27me水平增加有关,以甲基化特异性PCR法检测金属蛋白酶组织抑制因子3组蛋白H3K27me3甲基化水平;采用Wnt/β-catenin通路激活剂TDZD-8(10μmol/L,1 h)处理转染Suz12 siRNA的肾小管上皮细胞,以验证Wnt通路的激活是否影响干扰Suz12对细胞损伤的作用。②动物实验:采用腹腔注射60 mg/kg链脲佐菌素构建糖尿病大鼠模型,并通过尾静脉注射0.1 mL含3×108 PFU空腺病毒载体(NC siRNA)或Suz12 siRNA腺病毒(Suz12 siRNA)的PBS;实验结束后收集血清、尿液和肾脏组织,采用全自动生化分析仪检测血糖、血肌酐、尿氮素、尿总蛋白水平;苏木精-伊红和Masson染色观察肾脏组织形态学变化;Western blotting检测肾脏组织中相关蛋白的表达水平。结果与结论:①与正常对照组相比,高糖组肾小管上皮细胞中Suz12、Ⅳ型胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白蛋白表达水平明显升高,E-cadherin蛋白表达水平明显降低,细胞增殖减少,凋亡率增加;而转染Suz12 siRNA可逆转高糖处理对肾小管上皮细胞的损伤;②与高糖+Suz12 siRNA组相比,TDZD-8处理可逆转Suz12敲低对肾小管上皮细胞中Ⅳ型胶原蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、E-cadherin和Wnt通路相关蛋白表达水平、细胞增殖和凋亡的影响;③Suz12可与金属蛋白酶组织抑制因子3结合,显示金属蛋白酶组织抑制因子3存在H3K27me3修饰,且敲低Suz12可降低高糖诱导的肾小管上皮细胞中金属蛋白酶组织抑制因子3甲基化水平;④与糖尿病组相比,Suz12 siRNA组大鼠血糖、血肌酐、尿氮素、尿总蛋白水平明显降低,肾脏组织病理变化和纤维增生得到缓解,Ⅳ型胶原蛋白、Suz12和Wnt通路相关蛋白表达水平显著降低,E-cadherin表达水平明显升高;⑤结果表明,Suz12在糖尿病大鼠中可能通过促进金属蛋白酶组织抑制因子3甲基化参与糖尿病肾脏病发展。

长链非编码RNA LINC01296对胃癌细胞增殖的影响及其机制

目的观察长链非编码RNA LINC01296对胃癌细胞增殖的影响及其机制。方法收集人胃癌细胞系SGC-7901、BGC-823及人正常胃黏膜上皮细胞GES1,采用实时荧光定量PCR法检测细胞LINC01296表达。将SGC-7901、BGC-823细胞各分为两部分,分别加入小干扰RNA(siRNA)、阴性对照RNA(siNC)进行转染,转染24 h。收集细胞,采用CCK-8法检测波长450 nm处的光密度(OD)值,克隆形成实验计数克隆形成数,胞质胞核分离实验观察LINC01296在胃癌细胞中的分布,RNA结合蛋白免疫共沉淀实验观察LINC01296与EZH2、SUZ12的相互作用。结果SGC-7901、BGC-823及GES1细胞LINC01296相对表达量分别为4.04±1.64、5.33±1.32、1.41±0.01,SGC-7901、BGC-823细胞LINC01296相对表达量均高于GES1细胞(P均<0.05)。转染siRNA、siNC的SGC-7901细胞OD值分别为1.20±0.03、1.38±0.02,克隆形成数分别为(112.56±5.22)、(256.14±6.42)个,二者比较P均<0.05;转染siRNA、siNC的BGC-823细胞OD值分别为1.50±0.04、1.73±0.22,克隆形成个数分别为(98.21±5.56)、(203.76±5.31)个,二者比较P均<0.05。LINC01296在SGC-7901、BGC-823细胞核中的相对表达比例均高于细胞质(P均<0.05)。RNA结合蛋白免疫共沉淀实验结果显示,LINC01296可以与EZH2、SUZ12结合。结论LINC01296可能通过与EZH2、SUZ12结合而促进胃癌细胞增殖。

miR-195抑制舌鳞癌细胞系CAL27增殖、迁移和侵袭

目的研究miR-195对舌鳞癌CAL27细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法用RT-qPCR检测舌鳞癌组织及癌旁正常组织中miR-195 mRNA的表达;CAL27细胞的分组及处理:miR-195组(转染miR-195 mimics)、miR-con组(转染miR-NC)、si-con组(转染si-con)、si-激酶12抑制剂SUZ12组(转染si-SUZ12)、miR-195+Ctrl组(miR-195 mimics和pcDNA 3.1共转染)、miR-195+SUZ12组(miR-195 mimics和pcDNA 3.1-SUZ12共转染);MTT法检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测细胞SUZ12蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测细胞荧光活性。结果舌鳞癌组织中miR-195 mRNA表达与癌旁正常组织及与健康口腔角质细胞NHOK相比显著降低(P<0.05);过表达miR-195及敲减SUZ12均可显著抑制CAL27细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.05);过表达SUZ12可逆转miR-195对CAL27细胞增殖、迁移和侵袭的抑制。结论miR-195可抑制CAL27细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与靶向SUZ12有关。

TET1对肾癌786-O细胞增殖的影响及其相关机制

目的:应用小干扰RNA(small interferingRNA,siRNA)沉默TET1(ten-eleven translocation1)基因表达,探索其对人肾癌786-O细胞增殖的影响及其可能的机制。方法:采用脂质体转染法将靶向TET1基因的TET1-siRNA转染人肾癌786-O细胞,实验设空白对照组、阴性对照组和干扰组(TET1-siRNA组)。分别采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测转染TET1-siRNA后,786-O细胞中TET1、SUZ12(suppressor of zeste12)、EZH2(enhancer of zestehomolog 2)和EED(embryonic ectoderm development)mRNA及其蛋白的表达;MTT法和克隆形成实验检测786-O细胞的增殖活性和克隆形成率;FCM检测786-O细胞周期。结果:与空白对照组比较,转染TET1-siRNA后,786-O细胞中TET1 mRNA及其蛋白的表达水平分别下降了(85.13±0.03)%和(56.41±0.09)%,差异有统计学意义(P<0.05);786-O细胞的增殖受到抑制,克隆形成能力明显下降,G0/G1期细胞百分比明显增加(P<0.05);SUZ12 mRNA及其蛋白表达水平下调(P<0.05),EED和EZH2蛋白表达水平变化不明显(P>0.05)。结论:TET1-siRNA可显著下调肾癌786-O细胞中TET1蛋白的表达水平,明显抑制786-O细胞的增殖,并使细胞阻滞于G1期,其机制可能与TET1调控SUZ12的表达,影响其靶基因对PRC2(polycomb repressive complex 2)的招募有关。

干涉lncRNAs HOTAIR对人子宫内膜癌Ishikawa细胞的影响

目的探讨利用RNA干涉沉默HOTAIR基因对人子宫内膜癌Ishikawa细胞的影响。方法利用脂质体转染Ishikawa细胞;q PCR检测HOTAIR基因的表达;Western Blot检测Ishikawa细胞中EZH2、SUZ12蛋白的表达水平。Transwell法评估Ishikawa细胞的侵袭能力。结果 siRNA可有效抑制Ishikawa细胞中HOTAIR的表达,并降低了Ishikawa细胞中EZH2、SUZ12蛋白的表达水平。Transwell实验显示,通过转染si HOTAIR可抑制癌细胞的侵袭(P<0.05)。结论靶向HOTAIR的序列特异性siRNA可显著抑制HOTAIR基因的表达,降低Ishikawa细胞中PRC2核心成分EZH2蛋白、SUZ12蛋白的表达,降低癌细胞侵袭能力。

多梳基因家族蛋白在常见皮肤T细胞淋巴瘤及淋巴组织增殖性疾病中的表达

目的探讨表观遗传抑制因子PcG家族成员果蝇zeste基因增强子的人类同源物1/2(EZH1/EZH2)、胚胎外胚层发育蛋白(EED)及胚胎干细胞抑制蛋白(SUZ12)在常见皮肤T细胞淋巴瘤及淋巴组织增殖性疾病(CTCL/LPD)中的表达。方法收集2012—2019年于中国医学科学院皮肤病医院确诊的93例CTCL/LPD及8例扁平苔藓皮损石蜡标本,行免疫组化染色,观察EZH2、EED、SUZ12及EZH1蛋白表达。采用SPSS 25.0软件进行卡方检验及Spearman相关分析。结果93例中包括44例蕈样肉芽肿(MF)、17例NK/T细胞淋巴瘤(NK/TCL)及原发性皮肤间变大细胞淋巴瘤(PC-ALCL)、淋巴瘤样丘疹病(LyP)、种痘水疱病样淋巴组织增殖性疾病(HV-like LPD)及皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤(SPTCL)各8例。93例CTCL/LPD中83例(89.2%)EZH2、81例(87.1%)EED、78例(83.9%)SUZ12、37例(39.8%)EZH1阳性;8例扁平苔藓中1例EZH2、8例EZH1阳性,EED、SUZ12全阴性。CTCL/LPD与扁平苔藓4种蛋白的表达分级差异均有统计学意义(χ2分别为41.75、39.74、39.36及32.83,均P<0.001),且MF、NK/TCL、PC-ALCL、LyP、HV-like LPD及SPTCL与扁平苔藓的表达差异亦均有统计学意义(α=0.0083,均P<0.001)。同时,EZH2与EZH1的表达评分在MF、NK/TCL、PC-ALCL、LyP、HV-like LPD及SPTCL中均呈负相关(rs分别为-0.60、-0.68、-0.89、-0.74、-0.93、-0.80,均P<0.05)。结论PcG家族成员EZH2、EED、SUZ12及EZH1在CTCL/LPD中表达异常。