猴副流感病毒SV5 PCR检测方法的建立与初步应用

目的建立检测SV5的PCR方法并加以初步应用。方法根据GenBank中报道的SV5序列,针对其中的SH基因设计引物进行PCR反应,扩增产物进行测序并用BLAST软件进行同源性比对,同时利用限制性内切酶的酶切反应以证实此PCR反应的特异性。在此基础上设计巢式PCR提高此方法的灵敏度。利用此方法对20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本进行检测。结果利用设计的引物扩增出的序列测序结果证实与报道的SV5SH基因相对位置的序列一致。AccⅢ限制性内切酶可对PCR产物进行特异性酶切。巢式PCR比一次PCR的敏感度有所提高。用此方法检测的20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本结果为阴性。结论初步建立了检测SV5病毒的PCR方法,排除实验室用20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本SV5的污染。

猴副流感病毒SV5的PCR检测方法建立及初步应用

[目的]建立检测SV5的PCR方法并加以初步应用。[方法]根据Genbank中报道的SV5序列,针对其中的SH基因设计引物进行PCR反应,扩增产物进行测序并用BLAST软件进行同源性比对,同时利用限制性内切酶的酶切反应以证实此PCR反应的特异性。在此基础上设计巢式PCR提高此方法的灵敏度。利用此方法对20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本进行检测。[结果]利用设计的引物扩增出的序列测序结果证实与报道的SV5SH基因相对位置的序列一致。AccIII限制性内切酶可对PCR产物进行特异性酶切。巢式PCR比一次PCR的敏感度有所提高。用此方法检测的20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本结果为阴性。[结论]本文首次初步建立了检测SV5病毒的PCR方法,排除实验室用20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本SV5的污染。

慢性肺心病与SV5关系讨论

为了明确肺心病与SV5变化关系，我们对无心脏病者及肺心病患者心电图中出现的SV5幅值加以分析，并对其发生机理进行探讨，提出：慢性肺心病时SV5幅值增大，当SV5大于或等于0．5毫伏时，对肺心病诊断敏感性达到42．8％，特异性达到100％。其项诊断符合率高于1977年修订的慢性肺心病诊断标准中心电图诊断标准七项主要条件中的任何一项。

高Rv5和深Sv5在鉴别左室扩张与左室肥厚中的意义探讨

有关左室扩张的心电图标准很少有人报道,关于左室肥厚的心电图标准也都是梯度而不是"全或无"的诊断,即标准符合越多,某项指标超逾正常范围的程度越大,诊断确定性越大.笔者通过与B超对比研究分析进一步探讨心电图Rv5和深Sv5在鉴别左室扩张和左室肥厚中的临床价值.

Sv5异常在诊断左前分支阻滞中的价值

在前分支阻滞(LAH)的心电图诊断,主要根据额面心电轴左偏和标准肢导的形态,有关Sv5异常在LAH中诊断价值,军内尚未见报导。本文报告1984年4月至1987年9月100例LAH者在AV5上的测量结果,并与非LAH图片对照研究。

左前分支传导阻滞时SV5的变化探讨

本文用配对研究的方法观察左前分支传导阻滞（LAFB）时SV5的变化.结果 表明,LAFB组的SV5增深加宽的发生率显著高于对照组（P〈0.05）,提出SV5振幅≥13.0 mm,同时宽度≥0.03 s时,可作为诊断LAFB的参考条件.

S_(V_5)值增大、S_(V_6)>S_(V_5)对左心室肥大的诊断价值

目的探讨SV5值增大、SV6>SV5对左心室肥大(LVH)的诊断价值。方法经超声心动图(UCG)检查分为LVH组(A组)120例和正常组(B组)90例,对其心电图相关指标进行对比分析,并计算各参数电压标准诊断LVH的敏感性、特异性和准确性。结果各参数电压标准对诊断LVH的特异性尚可,但敏感性较低。结论SV5值增大、SV6>SV5与其它诊断条件综合应用,可提高心电图对LVH诊断的敏感性、特异性、准确性。

婴幼儿房间隔缺损心电图中VATV_1、RV_1、SV_5的特点

为比较VATV1、RV1、SV5在单纯继发孔型房间隔缺损与健康婴幼儿中的差异,现总结115例不伴有房室肥大及肺动脉高压的单纯婴幼儿继发孔型房间隔缺损与同例数的健康婴幼儿心电图作对照,结果分析如下。1临床资料病例组选取唐山市妇幼保健院2007年3月至2012年12月继发孔型房间隔缺损的住院患儿共115例,其中男79例,女36.

左前分支阻滞与S_(v_5)的关系

一般认为左前分支阻滞时,胸壁导联不受影响,为了观察左前分支阻滞时V5导联S波是否有改变,我们分析了168例左前分支阻滞,现报告如下.

猴副流感病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用

为对易感动物以及相关生物材料和生物制品进行猴副流感病毒(SV5)的快速病原检测,根据SV5病毒SH基因序列,设计了1对引物,建立了检测SV5的RT-PCR方法,通过优化确定了RT-PCR体系的最佳工作条件。核酸序列分析显示,所扩增片段与GenBank数据库中报道的SV5病毒株WR-21005序列同源性达到97%,证明该方法特异。敏感性分析显示,该方法可检测的最小RNA浓度为2.1 ng/μL,能检出的最小病毒滴度为3.98CCID50/0.1 mL。初步将该方法运用于猴、地鼠、常用传代细胞和猴源生物制品的检测,在所检测的样品中均未检出猴副流感病毒核酸序列。结果表明,所建立的RT-PCR方法可用于猴副流感病毒(SV5)的诊断和分子流行病学调查。

污泥浓度与SV_5、SV_(30)的相关性探讨

通过对活性污泥进行培养,在污泥浓度由50mg/L上升到17000mg/L的整个过程中,发现污泥浓度与SV5、SV30之间存在一定的数学关系。通过计算机MATLAB语言和人工作图的方法,对试验数据进行了归纳和总结,得出污泥浓度的计算公式及简化公式,并确定了其修正系数。

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活SV40病毒早期启动子的研究

目的 :探讨丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白NS5A的反式激活作用。方法 :扩增HCVNS5A基因 ,构建HCVNS5A基因真核表达载体 pcDNA3 1( ) NS5A ;并转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞 ,免疫印迹方法检测转染细胞中HCVNS5A蛋白的瞬时表达 ;与报告质粒 pCAT3- promoter共转染HepG2细胞 ,用酶联免疫吸附方法检测细胞中氯霉素乙酰转移酶 (CAT)的表达活性。结果 :质粒pcDNA3 1( ) NS5A在HepG2细胞瞬时表达HCVNS5A蛋白 ,共转染实验中 pcDNA3 1( ) NS5A组的CAT表达活性是空质粒对照组的 3 8倍。结论 :构建的表达载体能在哺乳动物细胞中表达出相应蛋白 ,并能够反式激活SV4 0病毒早期启动子。本研究为进一步克隆HCVNS5A蛋白反式激活的靶基因 。

S_(v_5)在左前分支阻滞诊断中的意义

为探讨S_V_5在左前分支阻滞中的诊断意义,观察50例左前分支阻滞患者的S_V_5和R_V_5振幅,并与50例正常对照组进行对比分析。结果显示:左前分支阻滞的S_V_5显著大于对照组(P<0.01),而R_V_5则明显小于对照组(P<0.05);如以S_V_5≥3.5mm作为判断左前分支阻滞的指标,则其敏感度明显高于电轴左偏(≤-45°)(P<0.05)。提示S_V_5≥3.5mm可作为左前分支阻滞的一项重要辅助诊断指标。

左前分支心电图与正常心电图Sv_5比较30例

近几年以来有人研究后提出利用Sv_5≥3.5mm作为诊断左前分支传导阻滞的一个重要辅助指标,且有研究证明单一Sv_5≥3.5mm诊断左前分支阻滞特异性达98％、敏感度达56％、准确度达71％。我们将院内近2年来所有左前分支阻滞心电图中筛选出30例典型心电图与正常心电图作Sv_5比较。

心电图SV_5值对左前分支阻滞诊断的探讨

将心电图量图证实的单纯左前分支阻滞病例32例与32例对照组相比较,见病例组心电图SV5段振幅明显大于对照组,SV5≥4.0mm作为其阻滞的诊断指标,提示SV5振幅的增加可能为一项重要的心电图辅助诊断的条件。

左前分支阻滞时S_(V5)的临床诊断价值

利用常规12导联心电图诊断左前分支阻滞（LAFB）时主要根据额面心电轴左偏和肢体导联上QRS波群的形态，对LAFB在胸导联上的表现往往被忽视。本文对100例LAFB的心电图Sv5与非LAFB的心电图进行配对研究，以评价Sv5改变对LAFB的临床诊断价值。

SV300iS5-4变频调速器在注塑机节能改造中的应用

本文以SV300iS5-4注塑机专用变频器为例介绍了注塑机变频改造可行性和改造中常出现的问题及处理方法,举例说明了注塑机变频改造节电效果及收回情况。

NKG5SV裸基因抑制裸鼠体内人肝癌细胞生长及转移

目的 研究NKG5SV裸基因直接注射抗肝细胞肝癌生长及转移复发的作用。方法 以常规方法将NKG划SV装入逆转录病毒载体,扩增捉取NKG5裸基因,以LacZ为对照基因。将不同裸基因和生理盐水与LCI-D20裸鼠人肝癌同时皮下接种或待LCI-D20肿瘤成瘤后瘤内注射,观察对肿瘤成瘤和生长的影响。LCI-D20肿瘤裸鼠皮下接种后10d,分别瘤内注射不同裸基因,观察对肿瘤生长转移的影响。LC1-D20肿瘤肝内接种,接种后22d行肝癌切除术,术中经切缘或脾内注射不同裸基因,观察其对术后转移复发的影响。结累 不同裸基因与LCI-D20肝癌同时皮下接种对照组、LacZ组、NKG5SV组,肿瘤直径(cm)分别为1.76±0.11、1.51±0.34、0.33±0.04。裸基因肿瘤内注射对照组、LacZ细胞组、NKG5SV组,肿瘤直径(cm)分别为0.87±0.08、0.83±0.05、0.26±0.04。瘤重(g)分别为0.43±0.06、0.38±0.04、0.08±0.06。肝癌切除术中应用裸基因转移灶累及部位数、切缘复发瘤直径、肝内转移灶数目、转移灶累及肝叶数在对照组、LacZ组、NKG5SV组分别为,切缘注射肝外转移灶数目(个):4.25±1.48、4.25±1.04、0.63±0.51,切缘肿瘤直径(cm):1.51±0.27、1.35±0.17、0.81±0.17,肝内转移灶数目(个)2.50±1.41、2.38±1.06、1.25±0.71,转移灶累及肝叶数(个):2.13±0.99、2.

NKG_5SV基因导入对自然杀伤细胞杀伤肝癌细胞能力的影响及其机制研究

目的 研究导入NKG5SV基因对NK细胞肝癌杀伤作用的影响及其机理。方法 将NKG5SV和对照基因LacZ基因分别导入肝癌病人的NK细胞 ,K5 6 2细胞杀伤实验检测NK活性 ,MTT法检测不同NK细胞对肝癌细胞株和正常肝细胞株的杀伤 ,并进行形态学观察。DAPI荧光染色法和小片段DNA定量法检测和定量细胞凋亡。结果 肝癌病人NK细胞、NK LacZ细胞、NK NKG5SV细胞 ,健康人NK细胞的NK活性 (% )分别为 5 96± 0 38、6 0 3± 0 42 (P >0 0 5 )、2 7 6 7± 0 18(P <0 0 5 )、30 33± 0 83(P <0 0 5 ) 作用 72h后肝癌病人NK细胞、NK LacZ细胞、NK NKG5SV细胞对SMMC 772 1肝癌细胞株的杀伤活性 (% )分别为 45± 5 ,46± 9(P >0 0 5 )、6 9± 4(P <0 0 1)。SMMC 772 1细胞的凋亡细胞数 (个 /高倍视野 )和凋亡DNA量 (μg/板 )分别为 1 5± 0 3、1 4± 0 5 (P >0 0 5 )、1 9± 0 6 (P >0 0 5 ) ,70± 10、72± 9(P >0 0 5 )、76± 10 (P >0 0 5 )。结论 NKG5SV基因导入肝癌病人的NK细胞通过增加其细胞溶解作用而提高其肿瘤杀伤能力。