一种咽拭子采集装置的设计及应用

目的探讨一种新型咽拭子采集装置在核酸检测中的应用效果。方法选取核酸采集点进行采样的医务人员120人,随机分为试验组和对照组,各60人。对照组采用常规咽拭子采集方法,试验组采用新型咽拭子采集装置采集。记录两组咽拭子采集时间,评价被采集对象的舒适度和满意度。结果试验组咽拭子采集时间(22.84±2.57)s,短于对照组(27.56±2.44)s,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组舒适度和满意度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论新型咽拭子采集装置能有效提高采样效率。

4例新型冠状病毒感染病例咽拭子与痰标本病毒核酸检测的比较

目的比较分析新型冠状病毒病例咽拭子与痰标本的病毒核酸检测效果。方法对4例新型冠状病毒确诊病例的咽拭子与痰标本分别进行人体细胞GAPDH管家基因、病毒ORF 1ab基因、N基因及S基因Real time RT-PCR核酸检测与比较。结果4例病例的咽拭子和痰标本中,人体细胞管家基因GAPDH均呈现明显典型的扩增信号曲线;病毒ORF 1ab基因、N基因及S基因核酸检测中,痰标本的扩增曲线信号均比咽拭子强,扩增曲线的CT值均低于咽拭子,在病例1和4表现更加明显,而病例4的咽拭子标本检测中,商品化试剂呈现阴性结果,而痰标本则呈现明显的阳性结果。结论在开展新型冠状病毒实验室核酸检测中,痰标本的病毒含量高于咽拭子标本,其检测效果优于咽拭子标本。

咽拭子新型冠状病毒核酸检测的临床价值

目的了解某院新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者的临床资料及咽拭子检查结果,评价咽拭子新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测的临床价值,为临床诊断COVID-19提供参考。方法回顾性收集中南大学湘雅医院2020年1月23日—2月18日经SARS-CoV-2核酸检测确诊COVID-19患者病历资料,分析患者临床资料、病毒核酸检测的取样次数、取样方法、标本类型、检测手段等信息。结果28例确诊患者平均年龄(43.78±14.46)岁,男女比例为2.5∶1,46.42%的患者有武汉/湖北旅居史,14.29%的患者与确诊COVID-19患者有密切接触史。患者临床表现以发热(78.57%)、咳嗽(53.57%)为主,实验室检查可见白细胞计数正常(71.43%),淋巴细胞计数下降(53.57%),肺部CT呈多发磨玻璃影(92.59%)及斑片影(70.37%)。28例确诊病例中,发病至确诊的中位时间为5.5 d。首次采集标本SARS-CoV-2检测阳性者18例(64.29%),首次可疑阳性1例;首次阴性(包括可疑阳性),第二次采集阳性者5例(17.86%);前两次采集阴性,第三次采集阳性者2例(7.14%);经四次检测阳性者1例(3.57%);经五次检测后阳性者2例(7.14%)。鼻/口咽拭子采样26例(92.86%),诱导排痰2例(7.14%),经鼻咽拭子、咽拭子、痰标本RT-PCR确诊27例(96.43%),痰标本NGS测序确诊1例(3.57%)。结论COVID-19临床常表现有发热及干咳,但无特异性,仍需依赖SARS-CoV-2核酸检测才能确诊。咽拭子作为发热门诊首选的SARS-CoV-2核酸采集方式具有简便易行的优势,但检测结果呈阴性并不能排除SARS-CoV-2感染。

31例新型冠状病毒感染病例咽拭子与痰标本病毒核酸检测的比较

目的比较新型冠状病毒病例咽拭子标本与痰标本的病毒核酸检测结果。方法对31例新型冠状病毒确诊病例的咽拭子与痰标本分别进行病毒ORF1ab基因、N基因及人体上皮细胞(ribonucleoprotein,RNP)基因(试剂内标基因)RT-PCR核酸检测与比较。结果 31例病例的咽拭子和痰标本中,人体上皮细胞RNP基因均呈现明显典型的扩增信号曲线;病毒ORF1ab基因、N基因的检测结果:31例患者的咽拭子核酸结果中,28例患者均显示阴性,第9例和第16例患者的咽拭子为单基因阳性,第17例为双基因阳性;同时采集的痰标本结果显示,18例患者均为单基因阳性,13例患者为双基因阳性。痰标本的病毒ORF1ab基因和N基因核酸检测扩增曲线的Ct值小于咽拭子标本的Ct值。结论在开展新型冠状病毒实验室核酸检测中,痰标本的病毒含量高于咽拭子标本,其检测效果优于咽拭子标本,更能准确体现患者病情。

咽拭子、鼻拭子、痰液中SARS-CoV-2核酸检测结果一致性及检出率分析

目的通过对不同类型标本严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)核酸检测结果的一致性及检出率分析,明确检测结果较优的标本类型。方法回顾分析郑州市疾病预防控制中心自开展SARS-CoV-2核酸检测以来所有同时采集自同一被检者的不同种类的标本核酸检测结果,利用McNemarχ~2检验分析不同标本病毒核酸阳性检出率的统计学差异;用kappa检验分析不同标本核酸检测结果的一致性。结果本研究共有61例被检者同时进行2种及以上标本的核酸检测,其中检测咽拭子标本158人次,痰液标本144人次,鼻拭子标本35人次;ORF1a/b基因和N基因同时检出率最高的为痰液标本(71.5%),其次是鼻拭子标本(34.3%),咽拭子标本检出率最低(29.1%)。同时进行痰液标本和咽拭子标本检测的有144人次,2者ORF1a/b基因检出率分别为75.0%、33.3%,N基因检出率分别为89.6%、42.4%,差异均有统计学意义(P均<0.05),ORF1a/b基因检出结果中2者间一致性差(k<0.4),N基因检出结果中2者间不存在一致性(k<0),痰液标本病毒核酸阳性检出率明显高于咽拭子标本;同时进行痰液标本和鼻拭子标本检测的有22人次,2者ORF1a/b基因检出率分别为63.6%、27.3%,N基因检出率分别为81.8%、40.9%,差异均有统计学差异(P均<0.05),ORF1a/b基因检出结果中2者间一致性差(k<0.4),N基因检出结果中2者间不存在一致性(k<0),痰液标本病毒核酸阳性检出率亦高于鼻拭子标本;同时进行鼻拭子标本和咽拭子标本检测的有35人次,鼻拭子标本病毒核酸阳性检出率高于咽拭子标本,2者ORF1a/b基因检出率分别为40.0%、25.7%,N基因检出率分别为51.4%、34.3%,但差异均无统计学意义(P均>0.05),一致性检验结果则表明2者一致性差(k均<0.4),因此2者在病毒核酸阳性检出率方面差异无统计学意义,但在核酸检出与未检出的结果方面存在差异,即检测结果可相互补充以提高检出率。结论痰液标本病毒核酸阳性检出率高于咽拭子标本和鼻拭子标本,在人群筛查中3种标本检测结果可互相补充验证以减少漏诊。

样本分析前质量控制对新型冠状病毒核酸检测结果的影响

目的评估新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测阳性样本的运输保存温度以及保存时间对样本核酸结果稳定性的影响。方法对来自20例2019-nCoV核酸检测阳性患者鼻咽拭子的病毒核酸结果循环阈值(CT值)进行分析。将目标样本等量分装20份,在25℃、4℃、-20℃和-80℃温度下储存,并在1、2、3、7、14 d后测定。结果20份样本在不同温度下和保存不同时间后检测结果均为ORF-1ab基因和N基因双靶标阳性;由于RNA的不稳定性,样本在-20℃和-80℃储存的前7 d内和在4℃保存的48 h内相对稳定;样本在-20℃和-80℃储存7 d后、4℃储存48 h后和室温下储存24 h后核酸检测CT值呈上升趋势。在不同温度下,ORF-1ab基因在保存第7天时出现CV值均>5%;N基因在25℃、4℃和-20℃条件下保存至第7天时出现CV>5%;在忽略保存温度的前提下,样本保存时间为7 d时标本ORF-1ab基因和N基因CT值的CV较大,样本保存时间为14 d时20份标本中6份ORF-1ab基因的CV>5%,7份样本N基因CT值的CV>5%。结论样本的储存温度和储存时间是2019-nCoV核酸检测分析中潜在的分析前误差,由于RNA的不稳定性,当分析延迟时,尤其是处于较高的储存温度和经过较长的储存时间后,遇到弱阳性标本可能影响检测结果和临床诊断。样本采集后应在低温条件下保存运输并尽快检测,以减少因储存温度和时间而导致的分析前误差。

乙酰半胱氨酸诱导排痰减少新型冠状病毒核酸检测假阴性2例

目的减少新型冠状病毒核酸检测的假阴性结果。方法对2例新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者给予口服乙酰半胱氨酸诱导排痰,收集痰标本,采用荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测病毒核酸。结果病例1中5次咽拭子标本病毒核酸检测结果均为阴性,痰标本4次阴性、1次阳性;病例2中11次咽拭子标本病毒核酸检测结果均为阴性,痰标本5次阴性、6次阳性/可疑。结论与咽拭子采集标本比较,以乙酰半胱氨酸口服诱导排痰采集痰标本可明显减少病毒核酸检测结果的“假阴性”,避免出院患者病毒核酸“复阳”现象的发生。

流感样病例咽拭子病毒核酸检测结果分析

目的分析流感样病例咽拭子病毒核酸检测的结果。方法选择2016年12月—2018年3月在齐齐哈尔市疾病预防控制中心传染病所进行就诊的疑似流感患者60例为观察组,选择同期健康体检者60例作为对照组,进行流感样病例咽拭子病毒核酸检测。结果观察组咽拭子病毒阳性检出率为70.0%(42/60),对照组检出率为13.3%(8/60),两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论采取咽拭子病毒核酸检测分析,可以有效提高病毒检出阳性率,也能够清晰监测到病毒是否存在变异,更好的了解流感的流行趋势。

手足口病毒诱导肠上皮细胞差异表达miRNA的筛选及其在患儿粪便标本中的诊断效能分析

目的筛选两种常见手足口病毒肠病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CA16)感染诱导人肠上皮细胞系(HIEC)差异表达的miRNA,并分析其在手足口病患儿粪便标本中的诊断价值。方法将EV71和CA16分别与HIEC共培养,感染复数为10,培养0、24、48、96 h后,行miRNA微阵列芯片分析,筛选差异表达miRNA。将HIEC分为观察组和对照组,观察组感染临床手足口病患儿分离病毒株46株,对照组不感染病毒株。培养72 h,采用实时荧光定量PCR法检测芯片筛选出的差异表达miRNA相对表达量,选择变化最大的前4种miRNA作为粪便miRNA联合检测法的靶标。选择手足口病患儿40例和健康体检儿童52例,比较粪便miRNA联合检测法、血清IgM抗体检测法、咽拭子病毒核酸检测法的诊断效能。结果miRNA微阵列芯片检测结果显示,HIEC感染EV71、CA16后miR-526a、miR-23b、miR-619-5p、miR-204-5p、miR-5585-3p和miR-146a表达明显升高且相对升高倍数均>2。观察组较对照组升高幅度最大的前4个miRNA分别为miR-23b、miR-619-5p、miR-204-5p、miR-5585-3p(P均<0.01)。粪便miRNA联合检测法对手足口病的阳性检出率为87.5%、灵敏度为90.91%、特异度为84.09%、准确性为92.30%,血清IgM抗体检测法对手足口病的阳性检出率为37.5%、灵敏度为63.64%、特异度为85.71%、准确性为70.60%,咽拭子病毒核酸检测法对手足口病的阳性检出率为90.0%、灵敏度为88.64%、特异度为92.86%、准确性为95.65%。结论EV71和CA16诱导HIEC表达明显升高的miRNA分别为miR-23b、miR-619-5p、miR-204-5p、miR-5585-3p,以其作为靶标进行粪便miRNA联合检测对手足口病的诊断价值较高。

严重急性呼吸综合征冠状病毒2咽拭子核酸检测法假阴性调查分析

目的探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)咽拭子核酸检测法的假阴性率,并分析其原因,为稳固我国新型冠状病毒肺炎(COVID-19)防控工作提供参考。方法对2020年2月19日至3月20日湖北省妇幼保健院光谷院区收治的1452例COVID-19患者的咽拭子核酸检测结果进行回顾性分析,将出院前检测结果为阳性之前的阴性结果判定为假阴性,统计假阴性患者例数。随访出院患者,筛选出院后再次核酸检测阳性(复阳)的患者,分析出院前病毒核酸检测连续阴性次数和核酸复阳的关系。结果1452例COVID-19患者中男592例(40.77%)、女860例(59.23%)。212例(14.60%)咽拭子核酸检测结果曾出现假阴性。共随访到28例(1.93%)出院后复阳患者,连续2次核酸检测阴性的918例患者中有24例(2.61%)复阳,高于连续3次及以上核酸检测阴性患者的复阳率(0.75%,4/534),差异有统计学意义(χ^2=6.21,P=0.0127)。结论SARS-CoV-2咽拭子核酸检测法具有一定比例的假阴性,是患者出院后核酸复阳的原因之一。建议出院前由不同检测者进行多次、连续检测,满足连续3次及以上核酸检测阴性的出院标准可以降低复阳率。

不同人群新型冠状病毒核酸检测的临床价值

目的探讨新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测在发热门诊、隔离病房、易感人群以及大规模筛查等不同人群中的应用价值,为SARS-CoV-2实验室检测提供参考依据。方法采集2020年2月1日—3月22日郑州人民医院不同人群的咽拭子,包括发热门诊、隔离病房患者,一线疫情防控医护人员,以及无新型冠状病毒肺炎(COVID-19)症状的住院患者、陪护家属和复工人员。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,使用A、B两种国产检测试剂盒对发热门诊、隔离病房的患者进行SARS-CoV-2核酸检测。结果共检测15497份咽拭子标本,SARS-CoV-2核酸阳性24份,核酸阳性病例均来自发热门诊和隔离病房。24例咽拭子SARS-CoV-2核酸阳性患者同时送检的血标本核酸结果均呈阴性。A、B两种试剂首次咽拭子核酸检测结果一致,2例确诊COVID-19患者治疗后复查咽拭子标本,A组试剂检测为阳性,B组试剂检测为阴性。该院疫情防控一线医护人员、未出现COVID-19症状的住院患者、陪护家属和复工体检人员核酸检测均为阴性。结论复工人员、住院患者、陪护家属和一线疫情防控人员SARS-CoV-2核酸筛查均未发现阳性,咽拭子标本SARS-CoV-2核酸检测阳性率高于血标本,不同核酸检测试剂检测阳性率稍有差异。

贵州省8500例2019新型冠状病毒核酸检测结果分析

目的了解贵州省新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)的感染情况和所用试剂对2019新型冠状病毒核酸的检测情况。方法对五类人员(疑似病例、与确诊病例的密切接触者、每天发热门诊就诊的发热患者、湖北省武汉市等重点疫区返黔的居家隔离和集中隔离人员、每天由湖北省武汉市等重点疫区新的来黔返黔人员)进行了新型冠状病毒核酸检测,所用试剂为A和B两组,涉及样本类型有痰液、鼻拭子、咽拭子、血浆和血清。结果自2020年2月6日至2020年2月19日,完成了8500例新型冠状病毒核酸样本检测,共检测出8例阳性标本(7例为咽拭子、1例为咽拭子及痰液标本),试剂B出现未检测出ORF 1ab基因的情况,且不管是检测N或ORF 1ab基因,试剂A的CV均较小。从扩增曲线来看,试剂A的扩增曲线较试剂B典型。在痰液和咽拭子中,ORF 1ab和N基因均呈现明显的扩增曲线,但痰液中这两个靶基因的CT值均低于咽拭子。结论通过核酸检测能及早发现2019-nCoV的感染者;部分厂家2019-nCoV核酸检测试剂盒的批内重复性有待提高。

新型冠状病毒肺炎疫情防控常态化下核酸检测门诊采集咽拭子标本的体会与思考

本文对新型冠状病毒肺炎疫情防控常态化下核酸检测门诊采集咽拭子流程及方法进行总结。采集前按照操作规范进行环境、物品和人员准备,采集后对样本进行保存转运并按规定脱防护服及用物处置。采集流程、护士管理模式、样本运送流程,各项工作有序开展,样本质量全部达标,患者和医护人员“零”感染。改善咽拭子标本采集点的工作环境,加强对咽拭子操作人员的保护和相关培训,是预防职业暴露的重要环节。

疫情常态化下核酸检测门诊的管理策略

本文主要介绍了核酸检测门诊在疫情常态化下咽拭子标本采集中的管理策略,包括对护士、实习生和保洁员防控知识的培训管理、加强采样场所秩序的管理,通过加强各环节管理质量,保障医务人员工作安全,稳步提升护理服务质量。

新型冠状病毒肺炎患者粪便与咽拭子病毒核酸检测结果分析

目的探讨新型冠状病毒肺炎患者粪便与咽拭子病毒核酸检测的临床价值。方法回顾性分析2020年1月22日至2月27日金华市中心医院收治的17例新型冠状病毒肺炎患者的临床资料(包括人口学、临床表现)及咽拭子标本与粪便标本病毒核酸检测结果。结果17例患者中男10例,女7例,比例为1.4:1;年龄中位数为37岁;重型1例。其中初诊发热者13例(76.4%),无症状者1例(5.8%);初诊咽拭子病毒核酸检测阳性17例(100.0%);初诊胸部CT检查,未见病变2例(11.1%),肺部炎症15例(88.2%),其中磨玻璃片状影8例(47.0%)。17例患者均进行了粪便病毒核酸检测,阳性7例(41.1%)。其中咽拭子病毒核酸检测转阴性时间平均8.4 d,咽拭子病毒核酸检测转阴性后粪便病毒核酸检测持续阳性7例,最长可达到24 d。结论粪便新型冠状病毒核酸检测阳性持续时间长于咽拭子病毒核酸检测阳性持续时间。新型冠状病毒是否可经粪-口传播值得探讨。

新型冠状病毒肺炎患者治疗后咽拭子与诱导痰标本病毒核酸检测的比较

目的:比较分析新型冠状病毒肺炎患者治疗后咽拭子与诱导痰标本病毒核酸检测效果。方法:对新型冠状病毒肺炎确诊病例治愈后出院的25例患者咽拭子与诱导痰标本病毒核酸检测结果进行分析比较。结果:25例患者咽拭子和痰标本中,其中13例患者出院前2次诱导痰及咽拭子病毒核酸检测结果均为阴性;另外12例患者治疗后第一次核酸检测中,有3例患者咽拭子阳性而诱导痰阴性,另9例患者诱导痰阳性,咽拭子阴性,之后进行的病毒核酸检测中,诱导痰及咽拭子2次检测均为阴性。结论:在新型冠状病毒实验室核酸检测中,诱导痰标本检测效果优于咽拭子标本,两种方法联合检测更有利于临床诊断。

气管插管模具在新型冠状病毒核酸鼻咽拭子标本采集教学中的应用

采集鼻咽拭子标本进行新型冠状病毒核酸检测是目前疫情防控的重要手段之一。当前国外疫情日趋严峻,国内疫情防控已进入常态化,对新冠病毒核酸检测的需求也日益增大。然而,如何快速、有效、安全地培训相关人员掌握相关标本的采集方法,也对当前临床实践教学构成新的挑战。结合本校毕业学员新冠疫情防控演练的场景教学实践,就如何利用气管插管模具为教具,帮助学员快速有效掌握鼻咽拭子标本采集及储运方法进行介绍和探讨,以期在疫情防控培训中得到推广应用,进一步提高核酸样本采集的质量和效率。

新型冠状病毒肺炎的临床及CT表现

目的:探讨新型冠状病毒肺炎的临床及CT表现,提高对其认识和诊断的准确性。方法:回顾性分析某院通过咽拭子核酸检测阳性确诊的17例新型冠状病毒肺炎病例资料,对流行病史、实验室检查等临床表现和CT影像特征进行分析研究。结果:轻型3例,普通型14例,重型及危重型0例。所有病例均与湖北省疫区有关,有本地住民、旅游者或与被感染患者有接触史,临床症状较轻,都有发热、咳嗽,血白细胞正常或略减少,淋巴细胞减少等;多层螺旋CT表现为多发斑片状磨玻璃影,不按肺叶、肺段分布,多位于胸膜下,早期以肺间质性改变为主。结论:新型冠状病毒肺炎有特征性,结合流行病史、实验室检查等临床表现和影像学表现可对其进行初步筛查,进行早期诊断、早期隔离、早期治疗及对疫情控制有一定的帮助。

武汉市金银潭医院1例核酸反复阳性新冠肺炎患者的救治

新型冠状病毒肺炎(简称新冠肺炎)疫情不断蔓延,出现较多医护人员感染,福建省医疗队前来武汉金银潭医院支援,接管综合楼第4、5病区。其中第5病区有1例确诊新冠肺炎患者,咽拭子查核酸反复阳性,但临床症状(发热、咳嗽、气喘等)并不明显,胸部CT较前缓慢吸收,达不到出院标准(2次间隔24 h核酸阴性),无法出院,同时也担心该患者是否存在较强的传染性,是否会传染给其他患者,本文就该病例的临床资料、诊治经过等进行报告。

新型冠状病毒肺炎感染病例中鼻咽拭子与咽拭子标本的病毒核酸检验结果分析

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)主要通过飞沫和密切接触传播,传染性强,目前在全球蔓延,给人的身体健康及世界公共卫生安全造成了严重的损害。病毒核酸检验是新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病例确诊的金标准。本研究分别采集武汉江夏方舱医院67例确诊为COVID-19病例的鼻咽拭子与咽拭子标本送检,进行SARS-CoV-2核酸检验。其中28例患者鼻咽拭子病毒核酸呈阳性,13例患者咽拭子病毒核酸呈阳性,26例患者鼻咽拭子与咽拭子病毒核酸均为阴性。本研究结果提示,鼻咽拭子送检标本病毒核酸检验结果优于咽拭子标本(P<0.05)。