桂籽提取物对LPS诱导的AML12细胞的保护作用及机制研究

目的研究桂籽提取物(OFSN)正丁醇部位对脂多糖(LPS)诱导的小鼠正常肝细胞(AML12)的保护作用及其机制。方法体外培养AML12,CCK-8法测定不同浓度与时间下OFSN对AML12活性的影响,不同浓度的OFSN及Aspirin干预后对LPS诱导AML12活性的影响,筛选出合适的OFSN给药浓度及时间。将细胞分为Control组、LPS组(1μg/mL)、Asipirin组(900μg/mL)、OFSN低、中、高剂量组(100、200、400μg/mL)。利用荧光探针试剂盒检测活性氧(ROS)生成,Western blot法检测各组细胞TLR4/NF-κB p65信号通路蛋白的表达。结果与Control组相比,经LPS诱导后的细胞存活率下降,TLR4/NF-κB p65通路蛋白表达增加,细胞内ROS生成增加。与LPS组相比,经过OFSN及Aspirin干预后细胞活力升高(P<0.01),且在一定的浓度范围内呈现剂量依赖性;Aspirin组与OFSN中、高剂量组细胞中TLR4、NF-κB p65蛋白的表达水平显著性降低(P<0.05,P<0.01),ROS的产生显著减少(P<0.01),OFSN低剂量组无显著变化。结论OFSN对LPS诱导的AML12损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与下调TLR4/NF-κB p65信号通路蛋白表达,减少ROS的生成,同时减少COX-2的表达,从而减少炎症小体NLRP3及炎症因子IL-6的释放相关。

桂花树种子挥发油提取工艺创新性综合教学实验

根据化工工艺实验教学内容的基本要求,融和绿色化工循环经济的理念,选取校园内桂花树种子为原材料,设计了一个化工工艺创新性实验——桂花树种子挥发油提取工艺综合实验。学生自主收集原材料、查阅资料、设计实验方案,选用合理的实验方法对提取溶剂种类、提取时间、液固比及种子粉末粒径等工艺参数对种子中挥发性物质出油率的影响进行探索研究。该工艺实验易于设计,难易适中,操作简单,实践性强。从资料查阅到原材料收集,从方案设计到实验实施,学生可以全程参与,学习积极性均较高。因此开设本工艺创新性实验,通过实验方案设计、工艺选用、实施过程、数据分析以及论文写作等拓展了学生的工程应用视野,夯实了学生的专业理论知识,训练了学生的科学研究素养,提高了学生的实践操作能力。该工艺实验对应用型化学化工类人才培养具有重要作用,可作为应用技术型本科院校化工类专业的综合实验。

桂花种子皮黑色素总酚含量的测定及其脂质抗氧化活性研究

利用氨溶液提取、盐酸水解、多种有机溶剂萃取沉淀等工艺手段分离纯化了桂花种子皮黑色素,随后对黑色素的脂质抗氧化性能进行了研究,并测定了其总酚物质含量。结果表明,该天然黑色素能够显著抑制蛋黄的脂质过氧化,且具有明显的量效关系,其IC50为0.135mg/ml。同时该天然黑色素中含有丰富的酚类物质,1mg天然色色素中总酚的含量相当于12.5mg邻苯二酚。

^(60)Co-γ辐射对桂花种子萌发及幼苗生长的影响

为探讨辐射对桂花种子的诱变作用,以不同剂量的60Co-γ射线对7个桂花品种的种子进行辐射处理,观察其对桂花种子萌发及出苗状况的影响。结果表明,辐射处理对桂花种子萌发状况的影响存在显著的品种间差异。除籽银桂外,其它6个品种种子发芽率均与辐射剂量呈负相关,随着辐射剂量的增加,6个桂花种子的相对发芽率和出苗率明显降低。6个桂花种子的半致死剂量大小顺序依次为潢川金桂>紫梗籽银桂>短柄籽银桂>米花籽银桂>金盏碧珠>宽叶籽银桂,分别为267、151、146、135、98和55Gy。低剂量(50Gy)的辐射能显著提高潢川金桂、短柄籽银桂和金盏碧珠3个品种种子的萌发率及出苗率;高剂量(200Gy)辐射后种子虽能萌发,但出苗率受到明显的抑制,尤其是250Gy时,除了不受辐射剂量影响的籽银桂外,其余6个品种出苗率均为0。本研究结果可为桂花辐射育种提供依据,促进桂花育种进程。

桂花种子皮黑色素提取及影响其稳定性因素分析

采用碱性溶液提取、酸水解、多种有机溶剂萃取沉淀等工艺手段分离纯化了桂花种子皮色素,呈天然黑色,其得率为0.34%(以湿原料为准)。随后,对该色素的理化性质等进行了较系统的研究。结果表明,桂花种子皮黑色素耐光、耐热;对还原剂较稳定;对强氧化荆不够稳定;碱性条件下较稳定;Cu2+、Ca2+、Fe3+、Zn2+等金属离子对该色素有护色、增色作用;Mg2+、Al3+、Na+虽有减色作用,但不明显, 是一种性能优良的天然黑色素。

八月桂花籽的化学成分研究

采用硅胶柱色谱法和重结晶法对八月桂花籽的化学成分进行了研究。从八月桂花籽的95%乙醇提取物中分离出9个单体化合物[熊果酸（1）,苯甲酸（2）,对羟基苯乙醇（3）,β-谷甾醇（4）,β-胡萝卜苷（5）,红景天苷（6）,红景天苷酯（7）,（-）-methylelenolate（8）和4,4＇-二甲基-3,3＇-二甲氧羰基-5,5＇-（1″-甲基-1,3″-丙基）-二吡啶（9）],其结构经1H NMR,13C NMR,DEPT,HMQC和HMBC确证。1~9均为首次从八月桂花籽中分离得到,其中7~9为首次以天然产物形式分离得到。

利用离体培养技术打破桂花种子休眠的试验

桂花种子成熟后胚有后熟作用,胚乳中可能含有抑制胚萌发的物质,使用赤霉素和3个月的层积处理也不能促使其萌发。将桂花种子进行3个月层积处理后,进行离体培养,培养基中加入0.5 mol/L BA,1.0 mol/L BA+0.5NAA可以打破种子的休眠,促进萌发。

美国桂花种子休眠原因的分析

通过对美国桂花种子的形态解剖、种皮结构电镜观察、种子透水性的测定及种子各组成部分抑制物的生物鉴定等试验,分析了美国桂花种子的休眠原因。结果表明:(1)美国桂花种子木质化种壳对种子的吸水透性有一定的阻碍作用,但不是引起种子休眠的主要原因;(2)美国桂花种子的胚没有休眠,离体胚在光照培养7 d开始萌动;(3)胚乳被严密包裹的机械作用使胚无法获得萌发所必需的水分和氧气,这可能是导致种子休眠的最主要的原因。

美国桂花种子低温层积过程中种子结构的变化

美国桂花种子属于深休眠类型,在自然条件下,需要经过2a才能萌发。研究了美国桂花种子低温层积过程中种子结构的变化。结果表明:在低温层积过程中随着层积时间的延长,美国桂花种子种壳中的种孔呈现不断变大、增多的趋势,这说明在自然条件下美国桂花种壳不会阻碍种子的吸水、透气,从而抑制种子的萌发;胚乳中内含物透射观察发现,随着层积时间的延长,细胞膜逐渐解体,到后期淀粉、脂粒大量出现。这表明,在低温层积过程中胚乳中营养物质不断分解,为种子萌发生长提供所需的物质和能量。

短丝木犀种子成熟过程中的超微结构观察

短丝木犀Osmanthus serrulatus种子具有休眠习性,自然生境下有隔年萌发的现象,限制了短丝木犀种群的繁育和扩大。通过透射电子显微镜(TEM)和扫描电子显微镜(SEM)来揭示短丝木犀种子休眠产生的原因,探究其种子成熟过程中种皮结构和胚乳内含物的变化情况。研究结果表明:(1)扫描电镜观察发现,短丝木犀种子种皮表面和内部均含有蜡质,随着种子的发育成熟,蜡质积累形成蜡层,提高了种子对外界不良环境的抵御能力,也对种子吸水造成阻碍;(2)短丝木犀种子发育过程中,薄壁细胞逐渐分化为栅栏细胞,成熟种子的种皮由角质层、栅栏细胞层、薄壁细胞层3层结构组成。角质层和栅栏层影响了种皮透水、透气性,是造成短丝木犀种子休眠的因素之一;(3)透射电镜结果发现,短丝木犀种子发育初期,胚乳细胞内细胞器结构完整。随着种子发育,细胞器逐渐溶解,细胞核失水缩小,脂滴和脂蛋白的不断集合扩大,说明随着短丝木犀的自然成熟,大分子的贮藏物质也随之增加,导致种子物质代谢活动降低,是短丝木犀种子生理休眠的主要原因。

桂花幼苗基础生长环境与其叶片超弱发光特性关系研究

以桂花幼苗为试验样品,采用二次正交旋转组合实验优化设计方案,研究了光照、温度、湿度和水分4个基础环境因素对桂花幼苗叶片超弱发光值的影响,建立了4因素对超弱发光值的综合影响模型.分析发现:不同因素及其交互作用对超弱发光值影响的显著性也不同;其中4个因素的一次项和光照、湿度、水分因素的二次项,以及光照和水分、温度和湿度的交互项,对超弱发光值的影响极显著(p≤0.01);当光照采用10根灯管(即照度值均值为4 229Lx)且温度、湿度和水分分别控制在35℃、85%和90mL/d时桂花幼苗的超弱发光值最大.在此基础上进一步分析并获得了对超弱发光值存在影响作用的各单因素及交互作用的影响规律.

桂花子黄酮的提取工艺优化

为确定桂花子中黄酮类物质的提取工艺,以黄酮得率为考察指标,比较不同溶剂对桂花子黄酮类物质的提取效果,并采用正交试验,研究提取溶剂浓度、提取温度、提取时间和料液比对桂花子黄酮类化合物提取的影响。确定最佳提取工艺条件为最佳提取溶剂为乙醇、乙醇体积分数60%、提取温度90℃、料液比1:50(m/V)、提取时间5h。在此条件下进行提取,黄酮的得率为3.96%。

提高桂花种子发芽率的研究

采取多种措施处理桂花种子,提高桂花种子发芽率。结果表明：4月中下旬收种（树上采摘）较为适宜;带皮桂花种子发芽率低,仅为9.0%;除去外果皮及果肉带壳桂花种子发芽率较高,达到43.7%,去壳后桂花种子发芽率为42.0%,GA3处理在10~100mg/L浓度范围内浓度越高效果越好;经低温层积处理后播种的桂花种子,由于有腐烂现象,其发芽率偏低。

桂花籽油的理化性质、脂肪酸组成及挥发性成分分析

以成熟的桂花种子为原料,采用超声波辅助法提取桂花籽油,测定桂花籽油的理化性质,并用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分别测定桂花籽油的脂肪酸组成和挥发性成分。结果表明:桂花籽油的碘值(I)为124.38 g/100 g,过氧化值为1.16 mmol/kg,皂化值(KOH)为190.28 mg/g,酸值(KOH)为1.24 mg/g,相对密度(20℃)为0.931 3;从桂花籽油中鉴定出12种脂肪酸,占脂肪酸总量的99.39%,主要含有油酸(45.16%)、亚油酸(36.75%)、棕榈酸(11.46%)和硬脂酸(4.68%),不饱和脂肪酸含量为82.38%,不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比值为4.84;从桂花籽油中鉴定出10种挥发性成分,占挥发性成分总量的88.85%,以烷烃和醇类为主,含有α-生育酚(1.04%)和β-谷甾醇(14.30%)两种功能性成分。桂花籽油可以作为功能性植物油开发利用。

^(60)Co-γ辐射对桂花种子发芽出苗及幼苗生长的影响

以金桂、银桂种子为试材,采用不同剂量(0、50、100、150、200、250、300Gy)^(60)Co-γ射线辐射种子,观察辐射对桂花种子出苗率及幼苗生长的影响,以探讨桂花种子辐射效应问题,选育具有较高观赏价值的优良新品种。结果表明:辐射处理导致桂花相对生长率下降、种子发芽势降低、出苗时滞延长、出苗整齐度降低、根系发育受抑制等效应;辐射剂量与金桂和银桂种子的相对出苗率间呈负相关,相关系数分别为-0.86、-0.83;^(60)Co-γ射线辐射可引起桂花幼苗产生较多的表型变异,50Gy处理金桂与银桂种子变异率分别达(13.6±5.23)%、(12.4±4.78)%;采用相对出苗率为指标,金桂与银桂种子辐射半致死剂量分别为92.39、73.63Gy,银桂种子辐射敏感性高于金桂种子。

‘紫梗籽银’桂种子休眠原因的初步探讨

通过对‘紫梗籽银’桂种子种皮结构的电镜扫描、种子发芽率、生活力、种皮吸水量测定以及种子不同部位浸提液对白菜种子萌发影响的试验,初步探讨了‘紫梗籽银’桂种子的休眠原因。结果表明,‘紫梗籽银’桂种子坚硬的外种皮不是引起休眠的原因,种子的休眠可能是由于种皮和种仁内含有发芽抑制物质引起的。

低度养生米酒的混合发酵工艺研究

以糯米、薏米、小米、桂花为原料,通过单因素试验考察薏米添加量、小米添加量、甜酒曲接种量、发酵时间对米酒感官指标的影响,并在此基础上采用正交设计试验对其进一步优化,得到米酒最佳发酵工艺条件是:甜酒曲接种量0.3%,发酵时间60h,糯米70%、薏米25%、小米5%、桂花2%。该工艺条件制备的米酒呈微黄色、桂花香雅致、甜酸适口、营养保健,是对传统米酒的改良与升级。

桂花种子休眠和萌发的初步研究

为了解桂花Osmanthus fragrans种子的休眠原因以及掌握解除休眠的最佳方法,对紫梗籽银桂'Zigeng Ziyin'种子种皮和种实的甲醇浸提液的生物测定和不同质量浓度赤霉素(GA3)处理后种子发芽率进行测定。结果表明:紫梗籽银桂种子的种皮和胚乳中均含有抑制白菜Brassica campestris籽萌发的物质,抑制作用随质量浓度增大而增加。综合前期研究结果,认为桂花种子的休眠不是外源休眠和综合休眠,而是由于由抑制物质引起的内源休眠。赤霉素处理结合低温层积可有效解除种子的休眠,其中以1000mg·L-1赤霉素浸种,低温层积75d的发芽率最高。

桂花籽总黄酮的提取工艺及抗氧化活性研究

采用超声辅助提取桂花籽总黄酮,并通过单因素试验以及正交试验优化桂花籽总黄酮的提取工艺条件,并进一步测试了桂花籽总黄酮对DPPH·和·OH的清除作用。试验表明,最佳提取工艺条件为乙醇浓度70%、提取温度50℃、料液比1∶25(g/mL)、提取时间50 min,在此条件下桂花籽总黄酮提取率为2.37%。在最佳提取工艺条件下桂花籽总黄酮对DPPH·和·OH的清除率作用明显。在相同条件下,桂花籽总黄酮对DPPH·的清除率优于BHT。

桂花种子发育与发芽研究综述

文章指出结实桂花雌蕊的4胚珠中只1个能双受精并发育成种子;形态成熟的桂花种子还需后熟发育才能发芽,赤霉素和层积有利于桂花种子后熟;桂花种子的发芽抑制物、包埋胚的胚乳、低于脱水耐性的临界含水量是桂花种子发芽的障碍;层积催芽使桂花种子发生一系列生理生化变化,朝萌发的方向发展。最后提出桂花种子诱变育种研究和桂花种子生产研究将是桂花种子研究重要的工作。