Distribution in tissue and excretion in urine and feces of swertisin after intravenous administration to rats

Swertisin contents in rat urine,feces and tissues were determined by reversed-phase high-performance liquid chromatography（RP-HPLC） method.Chromatographic separations were performed on a C18 column with acetonitrile-water（23：77,v/v） as the mobile phase.The calibration curves were linear over the ranges of 0.175-35.0μg/mL for rat urine,0.5-60.0μg/mL for rat feces,and 0.014 to 53.0μg/mL for all tissues.The inter-and intra-day precisions and accuracy for all measured samples were satisfactory.The fully validated method was applied for tissue distribution and excretion of swertisin in rat urine and bile after intravenous administration.The maximum level of swertisin was found in kidney,which reached 83.87± 6.36μg/g.In rat heart,swertisin was hardly detected under used experimental conditions.Swetisin level in liver,kidney,stomach,smooth muscle and skeletal muscle continued to decrease from 5 to 60min.Swertisin showed increasing tendency in intestine,spleen and testis tissues at scheduled time points.Detectable swertisin was found in brain and lung tissue.Totally 11.9% swertisin dose was cumulatively excreted from urine in 60h after intravenous administration.There was small amount of swertisin in rat feces and the cumulative excretion level reached 4.59% of intravenous dose in 60h.

青藏高原龙胆科植物药用有效成分的高效液相色谱分析

采用高效液相色谱法,对青藏高原上9种龙胆科植物中的3种有效成分齐墩果酸、芒果甙和当药黄素进行了分离和分析。所用色谱柱为SupelcoINCC18柱(150mm×1 5mmi d ,5μm);在选定的色谱条件下每种成分在各自的浓度范围内均具有较好的线性相关性。样品的加标回收率为102 4%～106 7%,相对标准偏差为0 55%～3 01%。

当药黄素抗抑郁作用研究

研究当药黄素的抗抑郁作用及其可能的作用机制。研究采用动物行为绝望模型评价当药黄素抗抑郁活性;采用药物交互作用模型探讨其主要作用环节及其可能的作用机制。结果显示当药黄素没有中枢神经兴奋性,能缩短小鼠悬尾和强迫游泳的不动时间;增加5-HTP诱导的小鼠甩头次数,可拮抗利血平引起的小鼠体温下降和眼睑下垂,对育亨宾毒性具有增强作用,但对盐酸色胺所致大鼠惊厥无影响。上述结果表明当药黄素具有抗抑郁活性,其抗抑郁活性可能与抑制5-羟色胺重摄取、增强脑内神经递5-HT神经功能和影响去甲肾上腺素有关;而与抑制体内单胺氧化酶活性无关。

射干叶中黄酮碳苷类化合物的药理作用研究进展

本课题组在对海南产射干叶的化学成分进行研究时,得到了5种已知的黄酮碳苷类化合物,分别是:当药素、2-″O-鼠李糖基当药素、异牡荆素和2-″O-鼠李糖基异牡荆素、芒果素。其中前二者含量很高。本论文对这五种化合物的药理作用进行了综述。

射干叶中黄酮碳苷的分离纯化与结构鉴定

运用HP20型大孔吸附树脂、聚酰胺柱色谱、Sephadex-LH20型葡聚糖凝胶柱色谱和YMC制备型高效液相色谱柱(ODS)等色谱方法,从海南产射干叶中分离了4种黄酮碳苷.采用UV,1 H NMR,13 C NMR,MS等波谱学方法,结合熔点测定、盐酸-镁粉反应、三氯化铝显色反应等物理和化学方法,鉴定了它们的结构.4种黄酮碳苷分别为化合物Ⅰ:2″-O-鼠李糖基异牡荆素;化合物Ⅱ:2″-O-鼠李糖基当药素;化合物Ⅲ:异牡荆素;化合物Ⅳ:当药素.4种化合物均为首次从鸢尾科植物中分离.

当药黄素对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用

研究当药黄素在H_2O_2诱导PC12细胞损伤中的作用。建立H_2O_2诱导的PC12细胞损伤模型,采用MTT法测定细胞活力,比色法测定细胞MDA和上清液LDH含量,以及SOD、CAT和GSH-Px酶活力,采用DCFH-DA荧光染色测定细胞ROS含量,JC-1染色测定细胞线粒体膜电位。当药黄素能够提高H_2O_2诱导损伤的PC12细胞的细胞活力,增加细胞内SOD、CAT和GSH-Px活力,降低MDA、LDH含量,抑制细胞内ROS增加,稳定细胞线粒体膜电位。当药黄素对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤有保护作用。

抱茎獐牙菜中当药黄素的HPLC测定研究

[目的]采用反相高效液相色谱法对抱茎獐牙菜中当药黄素的含量进行测定。[方法]色谱柱为Kromasil C18(250mm×4.60mm,5μm),流动相为甲醇-浓度0.02%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1ml/min,检测波长为260nm。[结果]当药黄素在0.92-4.60μg范围内线性关系良好,r=0.9995。平均加样回收率为98.73%,RSD为0.31%。[结论]抱茎獐牙菜中当药黄素在花的部位含量最高。该测定方法适应性广,可用于测定抱茎獐牙菜中的当药黄素。

RP-HPLC法测定湿生扁蕾中当药黄素的含量

[目的]建立反相高效液相色谱法测定湿生扁蕾中有效成分当药黄素含量的方法。[方法]采用Kromasil-C18（250 mm×4.6 mm,5μm.）色谱柱,52%甲醇/水（含0.04%H3PO4）为流动相,流速0.8 ml/min,检测波长270 nm,柱温30℃。[结果]当药黄素在10 min内与其他组分达均到基线分离,当药黄素的线性范围是0.338-2.025μg（r=0.999 5）,加标回收率为103.3%（RSD=3.2%）。[结论]该方法测定快速,结果准确、可靠。

喉毛花化学成分研究

从龙胆科植物喉毛花(Comastoma pulmonarium (Turcz.) Toyohuni)中分离到6个(口山)酮类化合物,经化学及光谱方法分别鉴定为1,8-二羟基-3,5-二甲氧基(口山)酮(Ⅰ),1,8-二羟基-3,7-二甲氧基(口山)酮(Ⅱ),1-羟基-3,7,8-三甲氧基(口山)酮(Ⅲ),8-羟基-1,3,5-三甲氧基(口山)酮(Ⅳ),1,3,8-三羟基-7-甲氧基(口山)酮(Ⅴ),1-O-β-D-吡喃葡萄糖-3,8-二羟基-7-甲氧基(口山)酮(Ⅵ)以及齐墩果酸(Ⅶ)、当药黄素(Swertisin)(Ⅷ)。其中Ⅵ为新化合物,命名为喉毛花甙(Comastomaside)。

RP-HPLC法同时测定湿生扁蕾中木犀草素、当药黄素和当药醇苷的含量

目的：用反相高效液相色谱法同时测定湿生扁蕾中木犀草素、当药黄素和当药醇苷的含量。方法：色谱柱：Agilent SB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：在0~20 min内,甲醇∶水（含0.04%H3PO4）由40∶60~63∶37线性梯度洗脱,在20~50 min内,甲醇∶水（含0.04%H3PO4）=63∶37等度洗脱;流速：0.8 m L/min;检测波长：254 nm,柱温：30℃。结果：木犀草素在30 min内达到基线分离,回归方程：Y=84 800X＋4540（r=0.999 9）,线性范围0.848 0~4.240μg;当药黄素在15 min内达到基线分离,回归方程：Y=52 300X-32 300（r=0.999 9）,线性范围0.896 0~4.480μg;当药醇苷在20 min内达到基线分离,回归方程：Y=102 000X＋83 400（r=0.999 9）,线性范围为0.832 0~4.160μg。结论：该测定方法快速,测定结果准确可靠。

酢浆草的HPLC指纹图谱建立及2种有效成分的含量测定

目的:建立酢浆草的高效液相(HPLC)指纹图谱,并同时测定其中异牡荆素、当药黄素的含量。方法:采用HPLC法。色谱柱为ACE Excel-5-C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1 mL/min,柱温为35℃,检测波长为280 nm,进样量为10μL。以异牡荆素峰为参照,绘制12批酢浆草药材样品的HPLC指纹图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价,确定共有峰。按上述色谱条件同法测定异牡荆素、当药黄素的含量。结果:12批酢浆草药材样品共有19个共有峰,相似度均大于0.89,同时指认异牡荆素、当药黄素2个共有峰。异牡荆素、当药黄素检测质量浓度的线性范围分别为3.91~117.36μg/mL(r=0.9994)、9.88~118.56μg/mL(r=0.9992);定量限分别为0.675、3.587μg/mL;检测限分别为0.205、1.087μg/mL;精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于2%;加样回收率分别为95.46%~99.10%(RSD=1.23%,n=6)、95.34%~101.23%(RSD=2.74%,n=6);平均含量分别为0.227~1.654、0.641~2.052 mg/g。结论:所建指纹图谱可用于酢浆草药材的质量控制;含量测定方法简便、准确,可用于同时测定其中2种成分的含量。

RP-HPLC法同时测定藏药肋柱花中三种成分的含量

建立了同时测定藏中当药黄素、当药醇苷、苦龙苷含量的方法。采用反相高效液相色谱法（RPHPLC）,以Kromasil-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）为色谱柱,以甲醇（A）-0.04%磷酸溶液（B）为流动相,梯度洗脱,40%A（0 min）-63%A（20 min）;流速为0.8 m L/min;柱温为30℃,检测波长为254 nm。结果表明,在20 min内完成对3种成分的分析,各成分之间均达到基线分离。当药黄素、当药醇苷、苦龙苷的线性范围分别为：0.675 0~4.050 0μg（R2=0.999 5）、0.005 5~0.330 0μg（R2=0.999 5）、0.027 5~0.165 0μg（R2=0.999 5）,线性关系良好。平均加样回收率（n=9）分别为99.90%、99.15%、99.88%。建立的HPLC分析方法简单、准确,能快速测定藏药肋柱花中有效成分的含量。

RP-HPLC法测定湿生扁蕾中当药黄素和当药醇苷的含量

[目的]建立反相高效液相色谱法，同时测定湿生扁蕾中有效成分当药黄素、当药醇苷含量。[方法]采用Kromasil-C18（250mm×4．6mm，5um）色谱柱，流动相甲醇和水（含0．04％H3PO4），在0～20min甲醇：水由40：60～63：37线性梯度洗脱，流速0．8ml／min，检测波长254ml，柱温30℃。[结果]当药黄素、当药醇苷2种有效成分都在17min内均达到基线分离，当药黄素、当药醇苷的线性范围分别是0．338～2．025ug（r=0．9995）、0．275～1．650ug（r=0．9995），加标回收率为103．30％（RSD=3．20％）、99．60％（RSD=2．70％）。[结论]该方法快速，结果准确、可靠。

藏药菥蓂子的定性、定量方法研究

目的:建立藏药菥蓂子的定性与定量控制方法。方法:采用薄层色谱、高效液相色谱分别鉴定及测定15批菥蓂子中的黄酮类成分异牡荆素、当药黄素和硫代葡萄糖苷类成分黑芥子苷。两类成分薄层色谱鉴别的固定相分别为聚酰胺薄膜、高效硅胶GF254,展开剂分别为三氯甲烷-甲醇-冰醋酸(11∶1∶1,V/V/V)、乙酸乙酯-甲醇-三乙胺(4∶5∶0.5,V/V/V)。在异牡荆素、当药黄素含量测定的色谱条件中,色谱柱为CAPCELL PAK MGⅡC18,流动相为乙腈-0.4%冰醋酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为336 nm;在黑芥子苷含量测定的色谱条件中,色谱柱为CAPCELL PAK MGII C18,流动相为乙腈-0.02 mol/L四丁基硫酸氢铵水溶液(15∶85,V/V,pH 6),流速为1.0 mL/min,检测波长为227 nm。结果:在薄层色谱鉴别图谱中,供试品分别检测出与异牡荆素、当药黄素及黑芥子苷对照品相应的斑点;异牡荆素、当药黄素、黑芥子苷检测质量浓度线性范围分别为1.26~79.00、1.21~75.38、12.80~640.00μg/mL(r均≥0.999 5),检测限分别为0.09、0.12、0.15μg/mL,定量限分别为0.39、0.43、0.54μg/mL;精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD均≤2.0%(n=6),加样回收率分别为99.1%、97.0%、98.1%,RSD分别为1.9%、1.8%、1.8%(n=6)。15批菥蓂子药材中异牡荆素、当药黄素、黑芥子苷含量范围分别为0.013~0.090、0.020~0.130、18.92~40.75 mg/g。结论:建立的质量控制方法操作简便,重复性及稳定性良好,可用于藏药菥蓂子的质量控制。

湿生扁蕾不同提取物抗氧化活性与主要成分相关性研究

目的探究湿生扁蕾不同提取物抗氧化活性与其中所含当药黄素、当药醇苷、木犀草素的相关性。方法采用高效液相色谱(HPLC)法同时检测湿生扁蕾不同提取物中当药黄素、当药醇苷、木犀草素含量;通过DPPH·清除实验和ABTS+自由基清除实验两种体系,评价各提取物的抗氧化活性;采用Pearson相关性分析和灰色关联分析法,研究湿生扁蕾不同提取物中当药黄素、当药醇苷、木犀草素含量与抗氧化活性之间的相关性。结果湿生扁蕾乙酸乙酯提取物中当药黄素含量最高,为68.19 mg·g^-1;95%乙醇提取物中当药醇苷含量最高,为21.03 mg·g^-1;正丁醇提取物中木犀草素含量最高,为19.38 mg·g^-1。95%乙醇提取物对DPPH·清除能力最强,IC 50值为0.124 mg·mL^-1;正丁醇提取物对ABTS^+自由基清除能力最强,IC 50值为0.036 mg·mL^-1。Pearson相关性分析发现,与木犀草素相比,当药醇苷含量与DPPH·清除能力、ABTS^+清除能力相关性较好,相关系数R 2分别为0.994、0.823;而木犀草素相关系数分别为0.875、0.746。然而,灰色关联分析结果表明木犀草素含量和当药醇苷含量与DPPH·清除能力、ABTS^+清除能力均有较强的关联度。结论湿生扁蕾提取物中的当药醇苷和木犀草素与其体外抗氧化性有较好的相关性,当药醇苷含量可作为评价湿生扁蕾提取物体外抗氧化性的主要指标性成分。

高效液相色谱法测定辐状肋柱花中10种成分的含量

目的 建立高效液相色谱法同时测定辐状肋柱花中马钱苷酸、獐芽菜苦苷、当药苷、芦丁、当药黄素、木犀草素、苦龙胆脂苷、当药醇苷、槲皮素、8-羟基-1,3,5-三甲氧基[口山]酮的含量。方法 采用Waters SunFirODS C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相,进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长 254 nm,柱温 30℃。结果 10种成分马钱苷酸、獐芽菜苦苷、当药苷、芦丁、当药黄素、木犀草素、苦龙胆脂苷、当药醇苷、槲皮素、8-羟基-1,3,5-三甲氧基[口山]酮均得到良好分离,线性关系良好(r≥0.9993),加样回收率均在 96.20%~100.68%,RSD<2.9%。结论 该方法快捷简便、稳定可靠,可应用于辐状肋柱花及其制剂的质量控制,为建立藏药辐状肋柱花质量标准提供依据。

HPLC多指标成分定量结合化学计量学、加权TOPSIS模型评价不同产地肺形草质量

目的评价不同产地肺形草的质量差异。方法采用HPLC法测定肺形草中马钱苷酸、莫诺苷、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、芒果苷、异荭草苷、异牡荆素、去甲基雏菊叶龙胆酮、当药黄素、3,6,8-三羟基-1-甲基呫吨酮、山楂酸和熊果酸,对多指标成分测定结果进行主成分分析、正交偏最小二乘法-判别分析,建立加权优劣解距离模型评估。结果16批肺形草明显聚集为3类;马钱苷酸、莫诺苷、3,6,8-三羟基-1-甲基呫吨酮、熊果酸、当药黄素和芒果苷是影响肺形草质量的主要潜在标志物;浙江和江苏产肺形草整体质量较好。结论建立的方法控制模式简单、评价模型科学合理,可用于肺形草质量评价。

当药黄素治疗2型糖尿病的作用机制及研究进展

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)是一种由多因素导致的系统代谢紊乱疾病,可能由胰岛β细胞的胰岛素分泌缺陷、肌肉组织对葡萄糖的摄取减少、肝糖原输出量增加、脂代谢紊乱、肠促胰岛素效应减弱、肾脏对葡萄糖的处理失调和神经递质紊乱等造成。目前,T2DM的治疗机制主要是通过增加胰岛素的分泌,减少肝糖原的输出,抑制肠道葡萄糖的摄取和吸收,改善C肽的分泌来实现。当药黄素是酸枣仁、菥蓂和淡竹叶等的主要活性成分之一,可诱导干细胞分化成胰岛素产生细胞,调节胰岛素分泌、干预肌肉组织和肝糖原的代谢过程,抑制糖脂和神经递质代谢紊乱,抑制炎症和氧化应激反应的发生,此外还有抗炎、抗氧化、增强记忆力等作用。通过查阅近年来国内外当药黄素治疗T2DM的作用机制,对其分析归纳整理,为T2DM的治疗和研究提供科学的理论依据。

基于UPLC-MS/MS法结合BP神经网络模型在小槐花产地溯源中的应用

目的:建立超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定小槐花中9个成分(烟酸、山柰酚、当药黄素、槲皮素、木犀草素、芦丁、牡荆素、斯皮诺素、水杨酸)的含量并构建BP(back propagation)神经网络模型对不同产地的小槐花进行产地预测。方法:采用安捷伦ZORBAX SB-C_(18)(50 mm×3.0 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1%乙酸(含0.02 mol·L^(-1)乙酸铵)水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,体积流量0.3 mL·min^(-1)。质谱采用ESI正负离子检测模式,多反应监测模式(MRM)的扫描模式。测得各成分含量进行相关性分析,并构建BP神经网络模型用于进行不同产地的小槐花药材的溯源。结果:小槐花中烟酸、山柰酚、当药黄素、槲皮素、木犀草素、芦丁、牡荆素、斯皮诺素、水杨酸9个成分质量浓度分别在0.3888~38.88、10.07~1006.6、34.22~34221.6、3.944~394.4、2.124~212.4、4.344~434.4、46.50~4650.1、1.649~164.9、4.880~488.0 ng·mL^(-1)范围内线性关系良好(r>0.9951),平均加样回收率96.9%~103.9%,RSD均<1.9%。40批小槐花中烟酸、山柰酚、当药黄素、槲皮素、木犀草素、芦丁、牡荆素、斯皮诺素、水杨酸9个成分的含量分别为1.657~7.407、15.801~64.488、1068.348~4270.780、10.608~123.228、3.897~16.802、1.269~97.834、405.285~1955.796、13.614~36.124、4.417~87.509μg·g^(-1)。通过相关性分析可知,当药黄素、芦丁、斯皮诺素、木犀草素4个成分相互呈高度线性正相关,表明小槐花中这4个成分具有一定互相协同的作用。构建BP神经网络模型用于预测不同产地的小槐花样品,检验集的正确率达到92.3%。结论:试验建立的方法简便、灵敏、高效,可用于小槐花成分的快速测定,结合BP神经网络模型对产地进行预测在小槐花产地的溯源中有一定作用。

HPLC同时测定大花肋柱花中的7种成分

目的采用HPLC法同时测定大花肋柱花中马钱苷酸、獐牙菜苦苷、当药苷、芦丁、当药黄素、木犀草素、槲皮素等的含量。方法采用Waters SunFire ODS C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长254 nm,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,进样量10μL。结果马钱苷酸、獐牙菜苦苷、当药苷、芦丁、当药黄素、木犀草素、槲皮素等均得到良好分离,线性关系良好(r≥0.9992);加样回收率为92.71%~98.32%,RSD<3.83%。结论所用方法快捷简便、稳定可靠,可用于藏药大花肋柱花及其制剂的质量控制。