非瘟后湘西州生猪产业发展情况及高质量发展建议

文章以席卷全国的非洲猪瘟疫情为节点,将湘西州生猪产业发展分为非洲猪瘟疫情前后两个时期,从2017年~2023年9月生猪存出栏、能繁母猪、养殖主体、生猪价格及产业配套环节,分析了疫情过后湘西州的生猪产业发展情况和存在的主要问题,提出了高质量发展建议,为湘西州生猪产业高质量发展提供借鉴和参考。

猪高热病副猪嗜血杆菌的分离鉴定与药敏试验

从2006-2007年河南省发生猪高热病的65家猪场196份病料中分离到6株革兰氏阴性细小杆菌,通过培养特性试验和生化试验初步怀疑为副猪嗜血杆菌,将其进行PCR鉴定,结果表明,分离菌为副猪嗜血杆菌。对6株分离株进行小鼠毒力试验和药物敏感试验,结果表明,6株分离菌能致死小鼠,对头孢他啶、头孢噻呋、头孢唑啉、头孢哌酮、多西环素、痢特灵敏感。

安徽省北部地区猪高热病流行病学调查

2008年7月,安徽省北部地区生猪出现疫病,表现为不食、高热等特征,为查明病因,进行流行病学调查,同时采集发病猪群样品进行病原学和血清学检测。结果137份血清样品中,HPRRSV、PRRSV、PPV带毒率分别为25.5%、23.4%、37.9%;PRRSV、SIV(H1N1、H3N2)抗体阳性率分别为86.5%、9.49%和3.65%,仔猪CSFV抗体免疫合格率为50%;6份组织样品中HPRRSV、PRRSV、CSFV、PRV、PPV带毒率分别为50%、100%、66.7%、33.3%、33.3%。表明引起本次猪病为PRRSV、CSFV、PPV等多种病原体混合感染。

4株高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的分离与鉴定

2007年7月从江苏某些猪场采集的具有明显高热症状的病料组织中分离出4株病毒，经对病毒的TCID50测定、血清学试验、病毒基因鉴定，确认这4株为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒。病毒基因序列分析发现：4株病毒的NSP2基因均存在2处共30个氨基酸缺失，缺失氨基酸分别位于481位、532～560位。氨基酸序列同源性分析可见：分离株与VR2332株、MLV株的同源性很低，在60．3％至68．6％之间；与国内疫苗株CH-1a的同源性为83．1％～83．7％；与国内分离的变异株JXAI株、HUN4株、HB-1（sh）／2002株同源性很高，为91．2％～98．5％；同时4株分离株之间的同源性很高，为99．3％～100．0％。系统发育树表明：分离的4个毒株与JXAI毒株和HUN4株有较近的亲缘关系，与其他株的亲缘关系较远。动物回归试验表明，4株病毒均可以引起仔猪明显的临床高热症状。

一起猪无名高热综合征病例的病原分离鉴定

某猪场发生以体温升高为特征的病例。笔者对其送检的内脏样本进行了病原学检测和病原的分离与鉴定,结果从其内脏样本中检测和分离到多种病原。从其内脏组织中分离到2株细菌,通过细菌学方法鉴定,一株为副猪嗜血杆菌,另一株为猪链球菌;将送检样本接种到Marc-145细胞,能观察到细胞病变,收获的病毒液经PCR检测,为蓝耳病病毒阳性;将送检的样本接种SPF鸡胚,收获的鸡胚尿囊液有血凝性,血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)鉴定为猪副黏病毒。

江苏省猪高热病病例主要继发感染病毒的多重PCR检测

应用建立的2个多重PCR方法，对2005～2006年收集于江苏省的211份猪高热病疑似病料进行了检测。结果，PRRSV阳性率为51．2％，PCV2阳性率为44．1％，CSFV阳性率为10．4％，PPV阳性率为3．9％，PRV阳性率为2．4％。2005年病料中PCV2阳性率为21．2％，2006年为73．2％；2005年PRRSV阳性率为38．1％，2006年为67．7％。2006年猪高热病疫情比2005年严重，PCV2和PRRSV可能在其中发挥了协同致病作用。对10个PRRSV分离株ORF5基因和Nsp2基因进行的测序表明，2006年分离株Nsp2基因中有连续87个碱基的缺失。

我国南方猪高热病的研究(Ⅱ)——猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的分离、鉴定和致病性测定

从我国南方某猪场高热病死猪的组织中分离出能引起Mare145细胞病变的病毒，经过血清中和试验、RT-PCR测定，确定分离物中存在美洲型猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）。将细胞病毒液感染13头55—105日龄健康猪，另有3头健康猪用于同居感染。随意挑取13头中7头再用大肠杆菌培养物加强感染，感染后每天测温，观察临床症状，记录死亡情况和病理变化。结果表明：PRRSV单独感染猪6／6发病，5／6死亡；大肠杆菌与PRRSV混合感染猪7／7发病，5／7死亡；同居感染的3头全部发病，1头死亡。所有感染猪于感染后2—4d内均出现体温升高。两周后体温下降至正常，直到死亡前体温不再升高。死亡多集中在感染后的34—50d的2周时间内。将圈舍温度升至29℃对感染猪发病无加强作用。死亡猪的病理变化主要表现为严重的出血性、间质性肺炎，肢体远端皮表出血。结果表明，虽然PRRSV感染能够引起猪产生高热和高的发病死亡率，但从发病到死亡时间及某些病理变化上看，和南方猪场的发病死亡猪还存在一定的差异，这可能与猪场的一些激发因子或其他病原混合感染有关，从组织和细胞分离物的电子显微镜照片也证明了这一点。

我国南方猪高热病的研究(Ⅰ)——大肠杆菌的分离、鉴定和致病性测定

从湖南3个高热病发病猪场11头病死猪的病料组织中均分离出了大肠杆菌，经血清学鉴定，鞭毛抗原（K88、K99、987P和F41）全为阴性反应。经过157种菌体抗原血清学检测，血清型为5、6、15、22、32和83型。药物敏感试验结果表明，分离的大肠杆菌对大多数常用药物耐药，对氟喹诺酮和头孢类药物敏感。将其中4头猪原代分离的大肠菌培养物以原倍（2×10^7个／mL）、10^4和10^8稀释的菌液分别感染18—22g小白鼠，原倍菌液感染的小白鼠12／30在感染后24h内出现死亡，而10^4和10^8稀释菌液感染的小白鼠均健活；将未经除菌的病死猪组织悬液、过滤除菌的组织悬液、大肠杆菌、过滤除菌的组织悬液及大肠杆菌分别感染30日龄左右的健康小猪，除未经除菌的组织悬液感染猪3／3发病，2／3死亡外，其余所有感染猪只出现体温升高，升幅达1～2℃，减食，精神萎靡，但没有死亡；将死亡猪再次分离到的大肠杆菌感染小白鼠和猪，小白鼠12／15出现死亡，感染猪只出现体温升高（超过1℃），没有出现死亡。结果证明：大肠杆菌在高热病的发病过程中只起协同诱发作用，引起猪发病死亡的真正原因可能是病毒感染。

乳猪“高热症”猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与致病性分析

本研究针对疑似高热症疫情的猪场,从分离病原的致病特性及基因特征,对高热症的病因进行了探索。以RT-PCR/PCR从临床病料中检测出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)核酸,利用Marc-145细胞从病料中分离到PRRSV(XS070425毒株)。测序结果显示,XS070425毒株Nsp2基因无高致病性PRRSV Nsp2基因533～561位连续29个氨基酸"RPVTPLSEPIPVPAPRRKFQQVKRLSSAA"的缺失;但遗传进化分析显示,XS070425毒株Nsp2、ORF5基因与近期我国报道的高致病性PRRSV-HuN4和JXA1有较高的同源性,达95%～96%。致病性试验显示,PRRSV-XS070425原始病料悬液和Marc-145细胞分离物接种健康猪后,病毒血症可持续26d,并出现典型的PRRS临床症状和体温升高,但不致死感染猪。这些结果说明,无NSP2蛋白29个氨基酸残基缺失的PRRSV也是猪高热症的重要病原。

猪高热病综合症流行病学调查与病原分离鉴定

对2006～2007年湖北省部分地区的猪高热病综合症的流行情况进行了实地调查和实验室诊断。共调查7个地市147个养猪场和养猪户,发病猪有67 040头,发病死亡27 477头,发病死亡率41%。273份病料PCR检测呈阳性结果,其中猪瘟的阳性率为41%(86/210)、蓝耳病为83.2%(213/256)、伪狂犬病为33.8%(48/142)、猪圆环病毒为70.5%(189/268)。从采集的病料中分别分离到3株蓝耳病病毒、2株猪圆环病II型病毒和2株猪流感病毒;分离到25株猪链球菌、36株大肠杆菌、13株副猪嗜血杆菌和29株巴氏杆菌等病原菌。

河南豫北地区猪“高热病”流行特征及病原学研究

为进一步探明猪"高热病"的病原特点及发病规律,收集河南豫北地区2007年9月至2010年10月15个县(市)189个不同规模猪场及农村散养户1 381份猪"高热病"病料样本,采用PCR或RT-PCR方法并结合细菌培养技术进行病原检测。结果显示,除7份样本检测结果呈阴性外,共检出猪蓝耳病病毒(PRRSV)阳性1 202份,猪圆环病毒(PCV-2)阳性1 199份,猪流感病毒(SIV)阳性995份,猪瘟病毒(CSFV)阳性20份,附红细胞体(E.suis)阳性316份,副猪嗜血杆菌(Hps)阳性758份,大肠杆菌(E.coil)阳性1 248份,巴氏杆菌(PM)阳性18份,沙门氏菌(SE)阳性38份,检出率分别为87.04%、86.82%、72.05%、1.45%、22.88%、54.89%、17.96%、1.30%和2.75%;流行病学调查结果显示,2009年豫北地区猪"高热病"发病率比2008年上升了115.71%,而2010年前3季度较2009年同比下降42.88%,河南豫北地区猪"高热病"由多种病原混合感染引起,不同年份的流行特征也不同;此疫情秋季发病率最高,对哺乳仔猪的影响较大,特别是对规模化猪场的危害较为严重。

重庆地区流行的PRRSV的ORF5基因变异分析

为了分析重庆地区流行的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5基因变异情况,我们通过RT-PCR扩增采自重庆地区不同猪场高热病病猪肺组织样本中PRRSV的ORF5全序列,并对其进行生物信息学分析。结果8个病例样本中有5个成功扩增出ORF5全序列。系统进化分析表明它们与国内2006年～2007年间的分离株亲缘关系较近,而与更早的分离株和疫苗MLV株亲缘关系较远。此外,推导氨基酸序列分析表明重庆地区流行的PRRSV与以JXA1株等为代表的同期其它地区分离株比较在ORF5的2个线性抗原表位中均存在独特的变异。本研究结果不仅揭示了重庆地区流行的PRRSV ORF5基因的变异特征,而且提示在PRRSV的防控措施中ORF5基因的变异应受到高度的重视。

2010年黑龙江猪高热病流行病学调查

2010年黑龙江省多个地区暴发猪"高热病",为明确其病因及流行特征,对来自大庆市、齐齐哈尔市、佳木斯市、绥化市等地区送检的43例病例(70头病死猪),应用病原学、血清学和PCR方法进行诊断,对确诊的病例进行流行病学回顾性研究。结果表明,小养殖户或小型猪场发病率较高,发病高峰期集中在9～12月份,发病日龄集中在1～3月龄仔猪(54.16%);病死猪以败血症为主,43例病例中猪链球菌病23例(53.49%),猪瘟8例(18.60%),副猪嗜血杆菌病8例(18.60%),猪繁殖与呼吸综合征6例(13.95%),圆环病毒病4例(9.30%),混合感染发病率高达58.13%。以上结果表明,猪"高热病"病因复杂多样,防制工作任重而道远。

高致病性PRRSV(HuN株)NSP2基因的扩增与分析

从2006年高热病病料中分离到一株猪繁殖与呼吸综合征病毒(HuN株),利用RT-PCR扩增其NSP2基因,通过与标准毒株VR-2332进行比较,发现共有30个氨基酸缺失,其中29个为连续缺失,缺少氨基酸分别位于481、532～560位。将分离株与同时期分离自不同地区高热病毒株的基因序列(EF112445、EF112446、EF112447)相比较,发现全部都具有相同的缺失,这说明引起猪高热病的病原变异不大;与较早期分离的AY150312、AY262352毒株进行比较,发现缺失部位不同。该研究补充和丰富了PRRSV毒株的基因组信息数据,为深入研究该毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础。

药食真菌发酵中药及“高效高热瘟病灵口服液”防治猪高热病的研究

为了制备并评价"高效高热瘟病灵口服液"对防治猪高热病的效果,试验采用生物发酵方法对中药"清瘟败毒散"加减方剂的28味中草药进行定向发酵适合性筛选,将筛选出的适合发酵的中药与松乳菇混合发酵,测定药用菌质活性及相关成分的含量、抗菌活性、体外抗PRRSV活性;将发酵的中草药与组方中未发酵(不适合发酵)的中草药混合,经水提取浓缩(含生药1.0 g/mL)配制成防治猪高热病的药物——高效高热瘟病灵口服液,并进行人工感染高热病猪治疗试验及临床治疗试验。结果表明:筛选出16味适合松乳菇发酵的中药,发酵后药用菌质的活性成分及多糖多肽含量增加,抗菌与体外抗PRRSV病毒活性提高。高、中剂量(按体重2 mL/kg、1.0 mL/kg)"高效高热瘟病灵口服液"对人工感染高热病猪的治疗完全有效,对自然发病高热病猪的临床治愈率达92%。说明定向发酵具有一定的优势,"高效高热瘟病灵口服液"具有防治猪高热病的作用。

猪流行性高热症临床表现类型与治疗方法的研究

通过流行病学调查、临床症状、实验室诊断及抗体诊断试剂盒检测等方法,对出现高热症病的4 589头病猪临床表现类型进行系统分类。结果表明,皮肤型占98.3%(4 509/4 589),呼吸障碍型占40.9%(1 879/4 589),消化障碍型占54.7%(2 509/4 589),神经型占2.7%(124/4 589),泌尿障碍型占0.8%(37/4 589),运动障碍型占4.5%(208/4 589)。引起猪流行性高热症的主要原因是多种病毒与细菌混合感染所致,约占91.0%(4 176/4 589);由于接种疫苗而发病的占9.0%(413/4 589)。发病猪可采用同源组织灭活苗以及相应的对症方法进行治疗;对接种疫苗发病的猪,应采取清热解毒的方法进行治疗,治愈率可达85%以上。

猪“高热病”源嗜麦芽窄食单胞菌16S rDNA基因的克隆和系统发育分析

根据NCBI中已报道的嗜麦芽窄食单胞菌16S rDNA基因序列设计引物,对两株来源于猪"高热病"病料中的疑似嗜麦芽窄食单胞菌PSM-5、PSM-6进行PCR扩增。将扩增产物克隆至pMD18-T载体上,并转化到DH5α中。抽取质粒模板,进行PCR和双酶切鉴定并测序,从分子水平上予以鉴定。两株菌的16S rDNA基因扩增片段的核苷酸序列(GenBank登录号为GQ267816和GQ267817)与已经报道的嗜麦芽窄食单胞菌分离株的16S rDNA序列的相似性均在96.78%以上,最高达99.93%。本试验对通过16S rDNA鉴定嗜麦芽窄食单胞菌提供一定参考,同时对猪"高热病"的诊断治疗奠定细菌学方面的基础,对其发病机制的探讨提供依据。

河北省“猪高热病”主要病原分析

对2006～2009年河北省"猪高热病"的主要病原进行了调查分析。结果表明,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、副猪嗜血杆菌(HPS)、胸膜肺炎放线菌(APP)、链球菌(S.S)、大肠杆菌(E.coli)、沙门氏菌(Sal.)和巴氏杆菌(Pm)的总检出率分别为64.52%、30.27%、11.26%、6.13%、3.10%、2.58%、1.46%、1.11%、1.08%和0.10%。其中高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)和经典猪繁殖与呼吸综合征病毒(C-PRRSV)总检出率分别为60.92%和3.60%。HP-PRRSV同其他病原体混合感染比较普遍,感染以二重感染、三重感染为主。总之,河北省"猪高热病"的主要致病病原是HP-PRRSV,并多与PCV-2、PRV、CSFV、HPS、APP、E.coli、S.S和Sal.、Pm等病原体中的一种或几种病原混合感染或继发感染一种"综合症候群"型疫病。

从猪“高热病”谈我国养殖业亟待解决的问题

就猪“高热病”发生、流行与研究现状进行了简要论述,并结合作者的临床实践与研究提出了几点思考。指出猪“高热病”疫情反映了疫病风险已成为我国养猪业发展之瓶颈,严重制约了畜牧业的发展,必须采取切实可行的政策措施,加大对新发疫病的研究与监控力度,强化防疫意识,改善养殖环境,控制污染,走可持续发展的道路。

芜湖地区猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病抗体水平监测与分析

目的:为评估芜湖地区猪瘟、猪口蹄疫、高致病性猪蓝耳病免疫效果,对2013～2016年这3种疫病血清抗体水平进行监测,为芜湖地区综合防控相关疫病提供基础依据。方法:对芜湖地区部分规模猪场和散养户进行血清学调查,共采集血清样品1 038份,使用间接ELISA(酶联免疫吸附试验)进行监测。结果:(1)猪瘟血清抗体平均阳性率为91.9%,芜湖四区四县中血清抗体阳性率最高的为弋江区,最低为南陵县,规模养殖户的血清抗体阳性率略低于散养户。(2)猪口蹄疫血清抗体平均阳性率为83.9%,芜湖四区四县中血清抗体阳性率最高的为三山区,最低为繁昌县,规模养殖户血清抗体平均阳性率高于散养户。(3)高致病性猪蓝耳病血清抗体平均阳性率为65.1%,低于国家免疫要求,需加强针对性免疫措施。结论:监测结果表明,猪瘟、猪口蹄疫血清抗体水平符合国家要求,高致病性猪蓝耳病血清抗体水平低于国家要求。