氧化苦参碱调控CTLA-4和PD-1缓解小鼠类风湿关节炎的作用

目的 观察氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)通过免疫负调控机制对小鼠胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)的缓解作用。方法 将DBA/1J小鼠随机分为正常组、模型组、OMT组和地塞米松组,每组9只。采用胶原和佐剂等体积混合背部皮下多点注射诱导DBA/1J小鼠,构建CIA小鼠模型。OMT组和地塞米松组分别用氧化苦参碱和地塞米松进行腹腔注射,正常组注射同等剂量的生理盐水。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测脾淋巴细胞叉头样转录因子P3(forkhead box protein3,Foxp3)、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白-4(cytotoxic T-lymphocyte-associated protein-4,CTLA-4)和程序性死亡受体-1(programmed cell death protein-1,PD-1)的mRNA表达水平。采用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察关节滑膜组织的异位生发中心。采用免疫组织化学法和Western blot检测Foxp3及CTLA-4和PD-1的表达。结果 OMT可缓解CIA小鼠关节肿胀度并降低其关节评分,增加脾淋巴细胞和关节组织Foxp3及CTLA-4的表达,降低PD-1的表达(P均<0.05),并减少炎性细胞大面积浸润。结论 OMT可能经增加调节性(Foxp3+)T细胞CTLA-4的表达但降低PD-1的表达而缓解RA。

基于微小RNA-142-3p与细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4的相互作用探讨细胞因子在原因不明反复性流产的作用

目的探讨原因不明反复性流产(URSA)过程中微小RNA-142-3p(miR-142-3p)与细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)的相互作用对细胞因子影响的可能机制。方法选取2016年9月至2017年12月中国科学院大学深圳医院(光明)收治的45例URSA患者纳入流产组,选取同期于中国科学院大学深圳医院(光明)进行检查的40例健康早孕者作为对照组进行回顾性研究。采用流式细胞仪检测两组研究对象外周血中CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞百分比,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测Th1型细胞因子与Th2型细胞因子的表达水平。结果流产组研究对象CD4^(+)CD25^(+)Treg细胞百分比低于对照组(P<0.05);流产组研究对象外周血中白细胞介素-10(IL-10)和白细胞介素-4(IL-4)的表达水平低于对照组(P<0.05),而白细胞介素-2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的表达水平均高于对照组(P<0.05);流产组研究对象的IL-2/IL-10、IFN-γ/IL-4比值均高于对照组(均P<0.05);荧光素酶报告基因检测显示,miR-142-3p与CTLA-4具有较强的结合能力。结论miR-142-3p对CTLA-4的表达具有潜在的抑制作用,这可能是促使URSA的机制之一。

p73 4G14C-4A14T基因多态性与结直肠癌发病风险相关性的系统评价

目的系统评价细胞周期调控基因p73 4G14C-4A14T基因多态性与结直肠癌易感性的关系。方法检索2000—2010年Cochran图书馆、中国期刊网、中国生物医学文献数据库、维普科技期刊全文数据库、PubMed、Web of science、BIOSIS Preview、Journal Citation Reports、FMJS、EMMC等数据库,语种不限,获取有关p73 4G14C-4A14T基因多态性与结直肠癌发病风险相关性的研究结果,分别以病例组和对照组的p73 4G14C-4A14T基因型分布以及比值比(OR)为效应指标,确定纳入标准,对文献进行评价筛选,异质性检验,然后利用RevMan5.0软件对各研究原始结果进行统计处理,并计算合并的OR值及其95%可信区间。结果按照纳入标准,最终入选5篇文献,累计病例919例,对照1 234例。Me-ta分析p73 4G14C-4A14T基因型GC/GC vs.GC/AT+AT/AT合并OR值为0.84(95%CI:0.71～1.00),Z值为1.95,GC/GC vs.AT/AT合并OR值为0.50(95%CI:0.35～0.70),Z值为4.00,AT/ATvs.GC/GC+GC/AT合并OR值为1.94(95%CI:1.39～2.70),Z值为3.91。结论我们发现AT/AT基因纯合子可以明显提高结直肠癌的发病风险,差异有统计学意义,Meta分析结果说明p73 4G14C-4A14T基因多态性与结直肠癌发病风险之间有明显相关性。结果表明携带p73 4G14C-4A14T多态性是结直肠癌重要的发病因素。

河南贲门癌高发区贲门癌组织浸润淋巴细胞CD4、CD8、γδT和肿瘤细胞P53的表达及意义

目的:探讨河南贲门癌高发区贲门癌组织浸润淋巴细胞CD4、CD8、γδT和肿瘤细胞P53的表达变化特征、相关性及贲门癌组织浸润淋巴细胞CD4、CD8和γδT的表达与贲门癌临床病理的相关性。方法:采用组织病理学方法分析40例贲门癌的组织病理学诊断并采用免疫组化卵白素-生物素-过氧化物酶复合物法分析其浸润淋巴细胞CD4、CD8、γδT的表达状况和肿瘤细胞P53的表达状况。结果:40例贲门癌组织,P53染色阳性率是75.0%,30例P53阳性贲门癌组织中,P53阳性肿瘤细胞数为99±22。CD8和γδT阳性淋巴细胞数在P53阳性组明显高于P53阴性组(P<0.05);而CD4阳性淋巴细胞数在P53阳性组低于P53阴性组(P>0.05);P53阳性肿瘤细胞与CD8阳性淋巴细胞呈正相关(P<0.05)。CD4、CD8、γδT阳性淋巴细胞在不同性别、不同年龄、不同分化、不同分期及有无淋巴结转移的贲门癌浸润淋巴细胞中的表达差异均无显著性(P>0.05)。结论:贲门癌患者中P53蛋白可能作为肿瘤抗原引起以CD8+T淋巴细胞为主的特异性免疫反应,为P53作为贲门癌患者免疫治疗的一个靶点提供了理论依据。贲门癌组织浸润T淋巴细胞亚群类型与贲门癌临床特征(中低分化、肿瘤中晚期、有无淋巴结转移)均无相关性。

T(4-AP)P的合成及与镉反应的分光光度法研究

合成了非水溶性显色剂ｍｅｓｏ－四（４－氨基苯基）卟啉（简称Ｔ（４－ＡＰ）Ｐ），研究了Ｃｄ（Ⅱ）－Ｔ（４－ＡＰ）Ｐ－Ｔｗｅｅｎ－８０－８－羟基喹啉体系的最佳形成条件，在ｐＨ１２．５～１２．８的强碱性介质中，沸水浴加热２０ｍｉｎ反应进行完全．Ｃｄ（Ⅱ）与Ｔ（４－ＡＰ）Ｐ的摩尔比为１２，在配合物最大吸收波长４４６ｎｍ处的表观摩尔吸光系数是３．０８×１０５Ｌｍｏｌ－１ｃｍ－１，镉量在０～６．０μｇ／２５ｍＬ范围内遵守比尔定律．方法应用于废水和黑米试样中痕量Ｃｄ（Ⅱ）的直接测定，结果满意．

流式细胞术检测CD4^+ T细胞内p24抗原辅助诊断HIV-1的感染

目的探讨流式细胞术(FCM)检测CD4+T淋巴细胞内p24抗原对人免疫缺陷病毒1(HIV-1)感染的辅助诊断价值。方法通过FCM检测HIV-1感染者和正常人(阴性对照)CD4+T淋巴细胞内HIV-1 p24抗原,建立方法。收集HIV-1早期感染者样本,用FCM检测CD4+T淋巴细胞内p24抗原,ELISA检测血浆p24抗原以及nest-PCR检测核酸,比较3种方法的检测结果。结果感染者p24+CD4+T淋巴细胞比例明显高于相应阴性对照(P<0.01);感染者组p24+CD4+T淋巴细胞比例95%百分位数为1.92%,确立阴阳界值为2.00%。CD4+T淋巴细胞计数≤350个/μL的感染者p24+CD4+T淋巴细胞比例明显高于相应CD4+T淋巴细胞计数>350个/μL的感染者(P<0.05)。FCM检测HIV-1早期感染者CD4+T淋巴细胞内p24抗原结果显示,该方法的检验效能优于ELISA检测血浆p24抗原,和核酸检测相当。结论 FCM检测CD4+T淋巴细胞内p24抗原能及时发现HIV-1早期感染,在HIV-1感染的辅助诊断方面有一定的应用价值。

T(4-TAP)P分光光度法测定瓷餐具铜溶出量

提出用四 - ( 4 -三甲铵苯基 )卟啉 [T( 4 - TAP) P]分光光度法测定陶瓷餐具中铜的溶出量。该方法灵敏度高 ,选择性好 ,操作简便快速 ,结果令人满意。

rhG-CSF动员对异基因造血干细胞移植供者外周血CD4^+ T细胞S1P_1表达的影响

CD4+ T细胞主要通过其表面的S1P1受体与外界的第一信使1磷酸鞘氨醇(S1P)相互作用调节免疫功能。本研究旨在探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)动员对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)供者外周血CD4+ T细胞S1P1表达的影响。17例allo-HSCT供者于rhG-CSF动员前及动员后第4天采集外周血,使用磁珠分选法纯化CD4+ T细胞,提取微量RNA,用实时定量PCR法检测S1P1的表达。结果显示,rhG-CSF动员前后CD4+ T细胞均表达S1P1,且动员后S1P1在CD4+ T细胞中的表达明显低于动员前。结论:rhG-CSF动员使allo-HSCT供者外周血CD4+ T细胞S1P1的表达明显下调。

脓毒症小鼠脾脏CD4+T细胞miR-142-3p的表达与其意义

目的观察脓毒症小鼠脾脏CD4+T细胞的miR-142-3p的表达水平。方法通过盲肠结扎穿孔法建立脓毒症小鼠模型,28只C57BL/6小鼠随机(随机数字法)分为两组:假手术组,脓毒症模型组,每组各14只。所有小鼠均于手术后48 h处死并取材。采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-2,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测小鼠脾脏CD4+T细胞miR-142-3p的水平。结果脓毒症小鼠脾脏CD4+T细胞的miR-142-3p表达水平较假手术组显著升高(P<0.05),IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-2水平均较假手术组显著升高(P<0.05)。结论脓毒症小鼠脾脏CD4+T细胞中miR-142-3p表达上调与炎症相关。

基于P·S·T分析的柳州旅游4C·D营销策略研究

基于柳州旅游的现状 ,研究了其市场定位 (Positioning)、市场细分 (Segm enting)、目标市场的确定 (Target-ing)问题 ,在此分析的基础上确定了不同于传统 4P'S理论的柳州旅游的 4C· D区域营销策略 ,即注重旅游者的需求和欲望 (Consumers'wants and needs)、成本 (Cost)、方便 (Convenience)旅游者的购买、与旅游者有效沟通 (Com munication)、以及实施数据库营销 (Database Marketing)

Smad4及TβRⅡ和P21^(waf1)在食管鳞癌的表达及意义

目的 :探讨食管鳞癌中Smad4、TβRⅡ及P2 1waf1的表达特点及其意义。方法 :80例食管鳞癌样本常规石蜡切片行Smad4、TβRⅡ、P2 1waf1免疫组织化学染色。结果 :Smad4、TβRⅡ、P2 1waf1的表达在食管癌组织学分级Ⅰ级、癌细胞未浸至深肌层和淋巴结无转移的组织样本中阳性率明显高于组织学分级Ⅲ级、癌细胞浸至深肌层或浆膜层和淋巴结有转移的组织样本 ,差异均有显著或极显著意义 (P <0 .0 5 )。结论 :Smad4、TβRⅡ、P2 1waf1与食管鳞癌的发生发展及生物学行为有关 ,随病理分期、细胞分级增高阳性表达率降低。

T(4-TAP)P吸光光度法测定人发中痕量铜

微量元素铜是人类生命攸关的元素,它参与造血过程;是生物系统中一种独特的催化剂;可以提高白细胞消灭细菌的能力,与内分泌腺体的功能也有密切关系,因此,测定人体中微量元素铜有着重要的临床意义。文献[2]以α、β、γ、δ-四-（4-三甲铵苯基）卟啉[简称T（4-TAP）P]作显色剂测定了金属材料中的铜。本文应用该试剂测定人发中铜,体系稳定,无干扰,灵敏度高,摩尔吸光系数为2.5×105L·mol-1·cm-1,变异系数不大于3.4%,回收率为96.6%～100.2%,设备简单,操作方便。对发样的测定结果良好。

长链非编码RNA MIR22HG通过微小RNA-9-3p调节CTLA4抑制前列腺癌

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)MIR22HG通过微小RNA-9-3p(miR-9-3p)调节细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)抑制前列腺癌的机制。方法收集26例前列腺癌组织样本和26例前列腺增生组织样本,培养VCAP、PC3、LNCap和DU145细胞。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测前列腺癌组织、前列腺增生组织及4种前列腺癌细胞的MIR22HG和miR-9-3p mRNA水平。筛选MIR22HG和miR-9-3p mRNA表达较高的细胞。将筛选出的细胞按不同干预方法分为OE-CTLA4(CTLA4过表达组)、OE-MIR22HG(MIR22HG过表达组)、miR-9-3p mimic(miR-9-3p过表达组)、OE-MIR22HG+miR-9-3p mimic(MIR22HG及miR-9-3p联合过表达组)、OE-NC+NC mimic(转染对照组)、NC mimic(miR-9-3p过表达对照组)。采用TargetScan数据库及荧光素酶报告基因实验验证MIR22HG与miR-9-3p及miR-9-3p与CTLA4是否存在靶向抑制关系。采用qRT-PCR及Western blot检测各组细胞MIR22HG和miR-9-3p mRNA及CTLA4蛋白表达。取裸鼠96只,按干预方法不同分为OE-NC+NC mimic组(转染对照)、OE-MIR22HG组(MIR22HG过表达)及OE-MIR22HG+miR-9-3p mimic组(MIR22HG及miR-9-3p联合过表达),每组32只。接种后4周期间,每周检测小鼠原位移植瘤并统计瘤体的质量和体积变化。结果前列腺癌细胞VCAP、PC3、LNCap和DU145细胞中,PC3细胞MIR22HG mRNA相对较低,miR-9-3p mRNA相对较高,因此选择PC3细胞进行研究。在PC3细胞中成功过表达MIR22HG,荧光素酶报告基因实验验证了MIR22HG和miR-9-3p的靶向抑制关系,过表达MIR22HG,miR-9-3p表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。TargetScan数据库预测免疫基因CTLA4和miR-9-3p的靶向关系,荧光素酶报告基因实验验证miR-9-3p和CTLA4的靶向抑制关系,过表达miR-9-3p,CTLA4表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达MIR22HG的裸鼠皮下肿瘤的质量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。OE-MIR22HG+miR-9-3p mimic组裸鼠皮下肿瘤的质量、体积与OE-NC+NC mimic组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论MIR22HG与miR-9-3p存在靶向负调节关系,miR-9-3p与CTLA-4存在靶向调节关系,MIR22HG/miR-9-3p可能通过抑制CTLA4达到免疫治疗前列腺癌的目的。

meso-四-(4-甲氧苯基)卟啉-镉(Ⅱ.)-[(OP-Tween-80)或(Tween-80)]显色体系及其双波长和导数光谱行为研究

本文研究了meso-四-(4-甲氧苯基)卟啉与Cd(Ⅱ)在表面活性剂〔(OP+Tween-80)或(Tween-80)〕存在下的显色反应,并对它们的双波长及导数光谱行为进行了探讨。结果表明,在碱性介质中该试剂与Cd(Ⅱ)均形成1:1配合物,λmax为438.5nm,ε＇_(438 .5)(OP+Tween-80)=4.85×10~5,ε＇ _(438.5)(Tween-80)=4.05×10~5,ε_(438.5/422)~双波长(OP+Tween-80)=8.75×10~5,ε_(438.5)~四阶导数(Tween-80)=8.57×10~6。混合增溶体系灵敏度高,选择性好,而Tween-80体系简单。两者的合成样品测定回收率在94.50～109.00％之间。

组织T细胞因子4、P糖蛋白和抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-xl在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨组织T细胞因子4（TCF－4）、P糖蛋白（P—gP）和抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤－x1（Bcl—x1）在结直肠癌中的表达及其临床病理特征的关系。方法选取广州医科大学附属广州市第一人民医院2013年1～12月100例手术切除结直肠癌组织及距病灶10em以上的正常组织。应用免疫组化的方法，分别检测TCF－4、P—gP和Bcl—x1蛋白在结直肠癌组织及正常组织的表达，并分析其与临床病理的关系。结果TCF－4、P—gP和Bcl—x1在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为85％、67％和84％。明显高于正常黏膜组织（9％、2％、7％），差异有统计学意义（P〈0．05）；结直肠癌组织中TCF-4、P—gP，Bcl-x1三者间表达呈正相关（r=0．301、0．581、0．390，P〈0．01）。结直肠癌组织中TCF－4和Bcl—x1阳性表达与肿瘤组织的分化程度呈正相关（r=0．390，P〈0．01），结直肠癌组织中TCF－4、P—gP，Bcl—x1阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、组织学类型之间无明显相关（P〉o．05），与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期有关（P〈0．05）。结论结直肠癌组织中TCF-4、P—gP和Bcl—x1的表达与浸润、转移、TNM分期及复发密切相关，可作为判断结直肠癌患者预后的指标，P—gP和Bcl—xl在结直肠癌中的多药耐药机制可能与Wnt／β-Catenin—TCF信号通路TCF－4有关。

miR-21-5p靶向JAK/STAT信号通路抑制Th1细胞极化

目的探讨miR-21-5p对1型辅助性T细胞(Th1细胞)极化相关信号通路的调控作用。方法提取小鼠脾单个核细胞,用免疫磁珠阴性分选试剂盒分离初始(naive)CD4^(+)T细胞,用抗小鼠CD3ε,CD28和白细胞介素4(IL-4)单克隆抗体及小鼠IL-12和IL-2混合因子诱导体系诱导初始CD4^(+)T细胞向Th1细胞极化,同时转染miR-21-5p模拟物或模拟物对照,分别命名为Th1诱导组、诱导+模拟物对照组和诱导^(+)miR-21-5p模拟物组,72 h后用流式细胞术检测CD4和干扰素γ(IFN-γ)双阳性(CD4^(+)IFN-γ^(+))细胞百分比;用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Th1细胞极化相关关键转录因子和细胞因子mRNA表达水平;Western印迹法检测Th1细胞极化相关通路关键蛋白及其磷酸化水平。结合双荧光素酶报告系统验证miR-21-5p作用靶标关键细胞因子IFN-γ、信号通路受体IL-12受体β_(1)(IL-12Rβ_(1))和信号转录与转录激活因子1(STAT1)的表达。结果经免疫磁珠分选获得高表达CD62L的初始CD4^(+)T细胞。与Th1诱导组和诱导+模拟物对照组相比,诱导+miR-21-5p模拟物组CD4^(+)IFN-γ^(+)细胞百分比显著降低(P<0.01);Th1细胞极化相关Janus激酶(JAK)/STAT信号通路关键转录因子STAT1(P<0.01)、STAT4(P<0.05)和T盒21转录因子(T-bet)(P<0.01)mRNA表达显著下调,IFN-γ(P<0.01)和IL-12Rβ_(1)(P<0.05)mRNA表达水平亦显著下调,同时STAT1和STAT4蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.01)。结合双荧光素酶报告系统结果表明,miR-21-5p模拟物可分别特异性靶向结合IFN-γ(P<0.01),IL-12Rβ_(1)(P<0.01)和STAT1(P<0.05)基因的3′-非翻译区,而对应靶向位点突变后miR-21-5p模拟物不影响其表达。结论miR-21-5p可靶向下调IFN-γ,IL-12Rβ_(1)和STAT1表达,抑制IL-12和IFN-γ介导的JAK/STAT信号通路活化,从而抑制Th1细胞极化。

HBV慢性感染者肝脏组织中CD4^+T、CD8^+T和FoxP3^+Tregs细胞的表达水平

目的:计数慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者肝脏组织中CD4^+T、CD8^+T和Fox P3^+Tregs细胞,观察不同免疫状态下的肝脏组织中CD4^+T和CD8^+T细胞表达水平之间的差异,探索其临床意义。方法:选取慢性HBV感染者68例,健康对照组(非HBV感染组)30例,运用免疫组织化学的方法进行检测。结果:慢性HBV感染组的CD4^+T、CD8^+T和Fox P3^+Tregs细胞表达水平明显升高,与非HBV感染组相比,P均<0.001;在HBV感染组中,CD4^+T和CD8^+T细胞在免疫耐受期患者肝脏组织中的表达水平最低,CD4^+T、CD8^+T细胞在免疫清除期、再活动期中的表达水平与二者在免疫耐受期相比,均有增高趋势,然而CD4^+T、CD8^+T细胞的表达水平在免疫耐受期、免疫清除期、低复制期及再活动期任意两期之间比较,P均>0.05。结论:CD4^+T和CD8^+T细胞在免疫耐受期、免疫清除期、低复制期及再活动期患者肝脏组织中表达水平的变化趋势在一定程度上反应了各期肝脏的免疫状态;Fox P3^+Tregs细胞可能与HBV感染慢性化有关。

冷变形对T4P态Al-Mg-Si板材在烤漆过程中的时效析出及软化行为的影响

针对T4P态汽车车身用Al-1.3Mg-1.2Si-0.5Cu-0.7Mn合金板材,采用室温拉伸变形结合DSC测定分析,研究了冷变形程度对其再经烤漆处理后的屈服强度及时效析出特点的影响规律。结果表明当变形量较大时,T4P态Al-1.3Mg-1.2Si-0.5Cu-0.7Mn合金板材表现出显著的应变强化效应;当应变量超过15%时,由于应变强化导致铝板屈服强度增量接近190 MPa;承受不同程度拉伸变形的T4P态合金板经烤漆处理后,均表现出比较明显的烤漆硬化现象。铝板经烤漆处理前后屈服强度增加量随拉伸变形量的增加先逐渐减小后基本趋于稳定;固溶水淬后30 min内将铝板进行170℃×7 min的预时效处理工艺,能有效改善铝板的烤漆硬化性。

miR-338-3p/TCF4对脉络膜微血管内皮细胞增生及凋亡的影响

目的探讨微小RNA-338-3p(miR-338-3p)对脉络膜微血管内皮细胞增生和凋亡的影响及其调控机制。方法体外培养人脉络膜微血管内皮细胞,将培养的细胞分为血管内皮生长因子(VEGF)组和正常对照组,正常对照组细胞常规培养,VEGF组细胞应用VEGF处理24 h;将VEGF组培养的细胞分为4个亚组,分别将阴性对照(miR-NC)、miR-338-3p拟似物、miR-338-3p拟似物+pcDNA、miR-338-3p拟似物+pcDNA-TCF4转染至脉络膜微血管内皮细胞后用VEGF处理24 h。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测细胞中miR-338-3p和TCF4相对表达量;采用MTT法检测细胞增生率以评估细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;行双荧光素酶报告实验验证miR-338-3p与TCF4的靶向关系;采用Western blot法检测细胞中增生标记蛋白细胞增生核抗原-67(Ki-67)、增生细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(bax)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)蛋白相对表达量。结果与正常对照组比较,VEGF组细胞中miR-338-3p mRNA表达水平显著降低,TCF4 mRNA表达水平显著升高,细胞增生率显著升高,细胞凋亡率显著降低,细胞中Ki-67、PCNA、bcl-2蛋白表达水平显著升高,bax蛋白水平显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);与VEGF+miR-NC组比较,VEGF+miR-338-3p组细胞增生率显著降低,细胞凋亡率显著升高,细胞中Ki-67、PCNA、bcl-2蛋白表达水平显著降低,bax蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-338-3p可靶向结合TCF4;与VEGF+miR-338-3p+pcDNA组比较,VEGF+miR-338-3p+pcDNA-TCF4组细胞增生率显著升高[(56.48±13.20)%vs.(96.24±16.24)%],细胞凋亡率显著降低[(30.59±3.57)%vs.(12.36±1.29)%],细胞中Ki-67、PCNA、bcl-2蛋白表达水平显著升高(0.41±0.11 vs.0.96±0.19;0.44±0.10 vs.0.97±0.20;0.55±0.12 vs.0.98±0.15),bax蛋白表达水平显著降低(0.87±0.13 vs.0.42±0.11),差异均有统计学意义(t=5.700、14.408、7.516、7.111、6.715、7.927,均P<0.01)。结论miR-338-3p过表达可负向调控TCF4在细胞中的表达量,从而抑制脉络膜微血管内皮细胞的增生及诱导细胞凋亡。

非对称型卟啉([T(4DTP)(NDT)P]P)分光光度法测定铜

以非对称性卟啉5,10,15-三（对二甲氨基苯基）-20-（3′-硝基-4′-二甲氨基）苯基卟啉（[T（4DTP）（NDT）P]P）作显色剂,研究测定铜离子的高灵敏分光光度法。结果表明,在pH=3.7时,卟啉配合物的最大吸收波长位于431 nm处,铜质量浓度在0~0.120 mg.L-1范围内符合比耳定律,摩尔吸光系数为3.49×105L.mol-1.cm-1。用所拟方法对污水、粮食等样品中的铜进行测定,相对标准偏差低于3.0%,回收率在95.3%~108%范围内。