健康足月分娩母亲与新生儿T细胞亚群和NK细胞水平

目的:探讨健康足月分娩母亲、新生儿T细胞亚群、NK细胞的水平,为围产期母亲及新生儿系统保健提供基础免疫数据。方法:无菌采集健康足月分娩母亲静脉血、肝素抗凝、出生5min新生儿脐静脉及3天新生儿股静脉血、肝素抗凝。由美国RD有限公司提供试剂,采用间接免疫荧光技术和S.P法测定T细胞亚群及NK细胞的水平。结果:①健康足月分娩出生5min及3天新生儿与母亲的T细胞亚群、NK细胞水平差异均无显著性(P>0.05)。②出生3天新生儿CD4与正常参考值比较差异有显著性(P<0.02);出生5min新生儿CD3、CD4/CD8及母亲的CD3、CD4、CD4/CD8与正常参考值比较差异均有非常显著性(P<0.01)。③出生5min新生儿NKCD16、NKCD57,出生3天新生儿及母亲的NKCD16与正常参考值比较差异均有非常显著性(P<0.01)。结论:明确了深圳健康足月分娩母亲、新生儿T细胞亚群、NK细胞表达水平;为围产期的母亲、新生儿系统保健提供基础免疫数据。

阿胶对气道炎症小鼠Th17/Treg亚群失衡的逆转作用

目的探讨阿胶对烟尘所致气道炎症小鼠肺脏Th17/Treg亚群失衡的逆转作用。方法 24只C57BL/6小鼠,随机分为对照组、模型组和阿胶组。模型组、阿胶组利用香烟烟雾暴露法建立气道炎症模型,模型组小鼠每日0.2 mL PBS灌胃,阿胶组每日给予0.2 mL阿胶溶液(0.2 g/mL)灌胃,正常组常规饲养。24周后,观察各组小鼠肺组织病理情况,采用流式细胞术检测肺组织Th17细胞亚群及Treg细胞亚群比例,采用逆转录PCR法检测肺组织中IL-6、IL-17A、Foxp3 mRNA表达,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-6、IL-17A、Foxp3水平。结果与正常组相比,模型组小鼠肺间质有大量炎性细胞浸润,肺泡破裂融合,肺组织Th17细胞、Treg细胞比例高,血清IL-17A、IL-6、Foxp3水平和肺组织IL-17A、Foxp3、IL-6 mRNA表达高(P均<0.05)。与模型组相比,阿胶组小鼠肺组织炎症情况明显改善,肺组织Th17细胞、Treg细胞比例低,血清IL-17A、IL-6、Foxp3水平和肺组织IL-17A、Foxp3、IL-6 mRNA表达低(P均<0.05)。结论烟尘能导致气道炎症小鼠肺组织Th17、Treg亚群比例升高,IL-6、IL-17A、Foxp3细胞因子表达上调,阿胶通过降低Th17、Treg亚群比例及IL-6、IL-17A、Foxp3细胞因子表达减轻气道炎症小鼠肺脏炎症。

细粒棘球蚴感染中阻断TGF-β1受体对淋巴细胞的影响

目的:观察TGF-β1对细粒棘球蚴体外与BALB/c小鼠T淋巴细胞培养的影响。方法:阻断剂组:BALB/c小鼠脾细胞+细粒棘球蚴+SB525334共培养;对照组:BALB/c小鼠脾细胞+细粒棘球蚴+PBS共培养;空白对照:BALB/c小鼠脾细胞+RPMI-1640培养基+SB525334共培养。方法:48 h收集淋巴细胞,流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群、CD4+CD25+T细胞的数量、NK细胞的数量及其活性受体NKG2D的表达;乳酸脱氢酶法检测NK细胞的杀伤活性。结果:体外阻断TGF-β1受体后,引起细粒棘球蚴介导的CD4+T细胞数量升高、CD8+T细胞数量降低、CD4+/CD8+T细胞比值升高、CD4+CD25+T细胞数量减少、NK细胞活性受体NKG2D的表达增加、NK细胞对靶细胞Yac-1的裂解率增加和NK细胞活性及其活性受体NKG2D成正相关。结论:体外阻断TGF-β1受体可提高T淋巴细胞免疫,从而抵制细粒棘球蚴的感染。

食管癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞的测定及临床意义

目的探讨检测食管癌患者手术前后外周血T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞(NK)水平变化,从免疫生物学角度探讨食管癌患者手术前后免疫功能的变化。方法以26例健康体检者为对照组,96例食管癌患者为观察组,采用流式细胞仪检测对照组和食管癌患者手术前1天、术后第3天、术后第10天的外周血T淋巴细胞亚群CD3^+T淋巴细胞(CD3^+)、CD4^+T淋巴细胞(CD4^+)、CD8^+T淋巴细胞(CD8^+)、NK细胞(NK)的水平。结果观察组术前、术后第3天及术后第10天外周血CD3^+、CD4^+、NK、CD4^+/CD8^+比值明显低于对照组(P<0.05),CD8^+明显高于对照组(P<0.05)。食管癌组术后第3天与术前各指标差异无统计学意义(P>0.05)。食管癌组术后第10天CD3^+、NK较术前及术后第3天明显升高(P<0.05),CD4^+、CD4^+/CD8^+比值较术前明显升高(P<0.05),术后第10天CD8^+水平较术前、术后第3天明显降低(P<0.05)。食管癌组CD3^+、CD8^+与年龄、分化程度及浸润深度有关(P<0.05),而与性别、KPS评分、肿瘤部位、病理形态、病变长度、有无淋巴结转移、病理类型均无相关性,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论食管癌患者免疫功能受到抑制,手术解除肿瘤负荷后患者免疫状态改善;T淋巴细胞亚群水平可能与食管肿瘤进展程度有关;T淋巴细胞亚群、NK在食管癌患者免疫监测中具有一定价值。

原发性非小细胞肺癌患者手术前后外周血T细胞亚群和NK细胞检测的临床意义

目的探讨原发性非小细胞肺癌(NSCLC)患者手术前后外周血中T细胞亚群的定量变化及其临床意义。方法将原发性非小细胞肺癌Ⅱ～Ⅲ_b进行手术治疗的患者40例作为研究组(A组),肺部良性肿瘤进行手术的患者15例作为对照组(B组),40例正常健康成人作为基础对照组(C组),于术前取全组外周静脉血检测T细胞亚群和NK细胞活性;术后第10天取A组和B组外周血再检测T细胞亚群和NK细胞活性。结果术前A组T细胞亚群和NK细胞与B组和C组的比较,除CD8^+外均明显降低(P<0.05)。术后完全性切除和不完全性切除的患者CD8^+低于剖胸探查者(P<0.05),其余各项指标均高于剖胸探查组(P<0.05),而完全性切除与不完全性切除之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论检测T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于肺癌患者的免疫监测,其中CD4^+/CD8^+的比值在一定程度上可以反映原发性非小细胞肺癌患者癌负荷的情况。完全性切除和不完全性切除都能显著性提高肺癌患者的免疫功能,为放疗或化疗取得更好的疗效创造较好的条件。

地佐辛和吗啡术后镇痛对结直肠癌手术病人T淋巴细胞亚群和NK细胞水平的影响

目的比较地佐辛和吗啡术后镇痛对结直肠癌病人T淋巴细胞亚群及NK细胞水平的影响。方法选择择期全麻下行结直肠癌根治术的病人40例,随机分为吗啡组(M组,n=20)和地佐辛组(D组,n=20)。术毕前10min,D组静脉注射地佐辛0.1mg/kg,M组静脉注射吗啡0.1mg/kg,麻醉清醒后连接病人自控静脉镇痛泵分别行吗啡和地佐辛术后镇痛。术后随访观察、记录两组病人VAS评分及不良反应,并分别于麻醉前(T0)、术后12h(T1)、术后24h(T2)、术后48h(T3)采集静脉血,应用流式细胞仪检测外周T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)及NK细胞水平。结果两组病人各时间点VAS评分无显著性差异(P>0.05)。M组不良反应发生率高于D组(χ2=5.584,P<0.05)。与T0相比,M组病人T1～T3时点CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK细胞水平明显降低(F=4.968～23.477,P<0.05),D组病人CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、NK细胞水平在T1、T2时点明显降低(F=5.948～9.010,P<0.05),在T3点已经恢复至T0水平;D组病人T1～T3时点CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及NK细胞水平均高于M组(t=2.154～2.512,P<0.05);两组各时点CD8+水平差异均无显著性(P>0.05)。结论地佐辛术后镇痛对结直肠癌病人T淋巴细胞亚群及NK细胞的抑制作用比吗啡小。

T细胞亚群的检测与白癜风患者进展期相关研究分析

目的探讨T细胞亚群的检测与白癜风患者进展期的相关性及应用。方法随机抽取汕头市皮肤性病防治院收治的48例进展期白癜风患者为试验组,另选取同期体检的50例健康志愿者作为对照组,检测对比两组T细胞亚群变化。结果试验组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+细胞数均较对照组下降明显(P<0.05);且试验组进展期CD3+、CD4+、CD8+细胞数均较稳定期下降明显(P<0.05),而不同病程的T淋巴细胞亚群差异无统计学意义(P>0.05)。结论 T细胞亚群数量的变化与白癜风患者类型及发展期关系密切,值得临床防治注意。

急性冠状动脉综合征患者调节性T细胞亚群Th3细胞的改变及临床意义

目的探讨调节性T细胞亚群Th3细胞在急性冠脉综合征(ACS)发病中的作用。方法 32例急性心肌梗死(AMI)、37例不稳定型心绞痛(UAP)和31例稳定型心绞痛(SAP)患者为研究对象,采用流式细胞学检测外周血单个核细胞,并计算Th3细胞比例(CD4+TGF-β1+/CD4+T细胞),ELISA检测血浆中Th3相关细胞因子TGF-β1的表达水平。结果 SAP组Th3细胞比例和TGF-β1表达水平显著高于AMI组和UAP组,相比较差异有统计学意义(P<0.05);而AMI组和UAP组Th3细胞比例和TGF-β1表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。Th3细胞的比例与TGF-β1的表达水平呈正相关(r=0.547,P<0.01)。结论Th3细胞下调可能与ACS的发生和发展有关,Th3细胞可能成为预防和治疗ACS新靶点。

艾易舒注射液在乳腺癌术后辅助治疗中的应用及效果评价

目的：评价艾易舒注射液对乳腺癌术后患者化疗后细胞免疫功能及毒副反应影响。方法：将70例Ⅰ-ⅢA期乳腺癌患者随机分为艾易舒加化疗组（36例）和单纯化疗组（34例）,检测治疗前后T淋巴细胞亚群及NK细胞活性,比较两组的毒副反应及生活质量改变。结果：艾易舒加化疗组患者CD3、CD4、CD8水平和CD4/CD8比值及NK细胞活性高于单纯化疗组（P〈0.05）;艾易舒加化疗组患者白细胞减少程度明显小于单纯化疗组（χ^2=7.44,P=0.006）,其他毒副反应差异无显著性（P〉0.05）;艾易舒加化疗组36.11%（13/36）患者KPS提高幅度高于单纯化疗组（11.76%,4/34）（χ^2=5.64,P=0.018）;艾易舒加化疗组44.44%患者体重增加,高于单纯化疗组（17.65%）（χ^2=6.66,P=0.036）。结论：艾易舒注射液可作为乳腺癌患者术后化疗的辅助用药,提高免疫能力,减轻化疗的毒副反应,提高患者的生活质量。

哮喘患儿外周血Th17细胞CD4^+CD25^+调节性细胞变化及其与病情相关分析

目的探讨支气管哮喘患儿外周血中辅助T细胞(Th)17细胞和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的变化与儿童哮喘病情的相关性。方法收集2009年月5月至2010年4月于郑州大学第一附属医院就诊的患儿,均为首次确诊哮喘或规范吸入激素停用>3个月后复发及近1个月内无明显感染者。采用流式细胞仪测定患儿外周血中Th17细胞及CD4+CD25+Treg比例的变化。结果 Th17细胞在哮喘急性期组(2.24%±1.02%)较哮喘缓解期组(1.65%±0.38%)及健康儿童组(1.02%±0.28%)均显著增高(P<0.05),哮喘缓解期组(1.65%±0.38%)和健康儿童组(1.02%±0.28%)无明显差别,CD4+CD25+Treg细胞比例在3组儿童间差异均有统计学意义(F=45.604,P<0.05),与健康儿童组(7.11%±0.89%)相比,哮喘缓解期组(6.05%±0.87%)和哮喘急性期组(5.37%±0.80%)的比例明显下降,而哮喘急性期组较健康儿童组下降。哮喘急性期组轻、中、重度3组之间差异同样有统计学意义。Th17细胞与哮喘患儿病情呈正相关(r=0.649,P<0.05),而CD4+CD25+Treg细胞与病情呈负相关(r=-0.599,P<0.05)。结论急性期哮喘患儿Th17免疫应答增强,急性期患儿、缓解期CD4+CD25+Treg细胞免疫功能下降,哮喘的严重程度与外周血中的Th17/Treg细胞免疫失衡密切相关。

原发性肝癌患者肿瘤转移与T细胞亚群及其细胞因子的相关性分析

目的探讨原发性肝癌患者肿瘤转移与T细胞亚群及其细胞因子的相关性。方法 2014年1月至2016年1月前瞻性收集原发性肝癌患者97例,根据患者是否发生转移,将患者分为转移组和非转移组,其中转移组38例,非转移组59例。所有患者均取得手术标本,使用流式细胞仪测定肝癌组织、癌旁组织和外周血CD4+、CD8+T细胞比例,同时使用酶联免疫吸附试验测定外周血中白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)水平。结果与非转移组相比,转移组患者肝癌组织中CD4+T细胞比例显著升高(P=0.002);CD8+T细胞显著降低(P=0.015)。两组患者癌旁组织中CD4+T细胞比例差异无统计学意义P=0.328)。转移组患者癌旁组织中CD8+T细胞比例显著高于非转移组(P=0.021)。两组患者外周血中CD8+T细胞比例差异无统计学意义(P=0.362)。转移组患者外周血CD4+T细胞比例显著低于非转移组(P=0.032)。与非转移组比较,转移组患者外周血IL-6水平显著降低(P=0.012);IL-10水平显著升高(P=0.006);TNF-α水平显著降低(P=0.000);IFN-γ水平显著降低(P=0.035)。结论原发性肝癌患者肿瘤转移存在明显的T细胞亚群和细胞因子平衡失调。

Ⅱ型树突状细胞在慢性乙型肝炎患者中的功能检测及其临床意义

目的研究慢性乙型肝炎患者外周血中Ⅱ型树突状细胞（pDC2）的数量及其功能的变化与疾病的发生发展的关系。方法采用流式细胞分析技术对27例慢性乙型肝炎患者和15例健康人外周血中pDC2数量的变化以及其产生α干扰素的能力进行了检测，同时与T淋巴细胞亚群CD4^＋，CD8^＋的比值进行了比较分析。结果肝炎患者外周血pDC2的百分数（O．096±0．086）较正常人（0．304±0．093）明显降低，两者差异有统计学意义（P〈0．001），特别是慢性肝炎患者pDC2产生IL-12及IFNα的能力明显低于正常人群（P〈0．001）；而CD4^＋／CD8^＋的比值则明显高于正常人（P〈0．01）。同时发现在HBVDNA（＋）的患者中其pDC2的百分数和CD4^＋／CD8^＋的比值分别为0．087±0．054和1．95±0．562，均明显高于HBVDNA（-）患者（分别为0．043±0．031和1．44±0．476），差异有统计学意义（P〈0．01）。结论与正常人相比，慢性乙型肝炎患者外周血中pDC2的数量和其产生细胞因子的能力降低，后者可能与慢性乙型肝炎患者病程的进展以及血清中HBVDNA阳性有关。

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体Fc融合蛋白在幼年特发性关节炎治疗中临床及免疫学效应分析

目的研究重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子(TNF)受体-抗体Fc融合蛋白治疗幼年特发性关节炎(JIA)的临床疗效及免疫学效应。方法 2011年4月至2013年8月武汉市儿童医院住院的52例非全身型JIA患儿分为治疗组32例和对照组20例。治疗组皮下注射重组人Ⅱ型TNF受体-抗体Fc融合蛋白,同时合并使用甲氨蝶呤(MTX)及非甾体类抗炎药(NSAID);对照组口服MTX,同时合并使用NSAID。治疗后1、3、6个月采用ACR Pedi评分进行疗效评估,比较放射学改变及免疫学指标改变情况。同时记录副反应。结果治疗组治疗后1个月ACR Pedi 30,治疗后3个月、6个月ACR Pedi 30、50、70达标率均显著高于对照组(P<0.05)。治疗组治疗后1个月、3个月、6个月的CRP、ESR均较治疗前明显降低(P<0.05);治疗后6个月的CD4、CD4/CD8、TNF-α、基质溶解素3(MMP-3)、Ig G、Ig M、Ig A较治疗前及对照组均降低(P<0.05);CD8、CD16CD56、CD4CD25、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)则较治疗前升高(P<0.05);治疗后6个月的Poznanski值较治疗前明显改善(P<0.05)。治疗后1个月、3个月治疗组CRP、ESR较对照组明显降低(P<0.05),治疗后6个月治疗组CRP较对照组明显降低(P<0.05),放射学改变较对照组轻(P<0.05)。治疗后6个月治疗组,CD4CD25、IL-10、TGF-β较对照组升高(P<0.05)。结论重组人Ⅱ型TNF受体-抗体Fc融合蛋白联合传统药物治疗非全身型JIA具有良好的安全性和有效性,临床疗效优于单纯传统治疗,能更快、更有效降低炎性指标,并能减轻放射学改变,明显改善JIA细胞及体液免疫紊乱。

CIK细胞治疗对宫颈癌术后患者免疫指标的影响

目的观察宫颈癌术后患者输注CIK细胞治疗前后外周血免疫指标的变化,为评价临床应用CIK细胞治疗宫颈癌的效果提供依据。方法对宫颈癌术后放疗或化疗后的患者应用CIK细胞生物治疗两个周期,随后分别检测治疗前、治疗后1个月及3个月患者外周血T细胞亚群、调节性T细胞以及NK细胞的比例。结果治疗结束后患者外周血CD3^+、CD4^+T细胞比例上升,CD8^+T细胞、CD4^+CD25^+Treg、NK细胞比例下降,CD4^+/CD8^+比值上调,差异有显著性(P<0.05)。结论 CIK细胞治疗可以提高宫颈癌术后患者的免疫功能,提高抗肿瘤能力。