HBV相关肝病患者外周血T细胞及细胞因子水平研究

背景乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)相关慢性肝病患者外周血T细胞及细胞因子水平与患者免疫功能状态密切相关,不同疾病程度的HBV相关肝病患者的T细胞、细胞因子水平及与肝病阶段的相关性值得进一步探究.目的探究不同阶段HBV相关慢性肝病患者外周血T细胞亚群计数、细胞因子变化特点及关联性.方法本研究为一项观察性研究,共纳入慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者65例,肝硬化失代偿期(decompensated cirrhosis,DCC)患者122例,肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者109例,收集患者一般信息、病史、治疗情况及实验室检查结果、Child-Paugh分级及HCC患者肿瘤巴塞罗那分期,分析各项指标,尤其是T细胞亚群计数及细胞因子的组间差异及特征.结果HBV相关肝硬化、HCC患者外周血CD8^(+)T细胞水平与Child分级A到C呈负相关.HCC患者CD8^(+)T细胞绝对计数显著低于DCC[240(150-379)cells/μLvs 277(154-435)cells/μL,P<0.05]及CHB[240(150-379)cells/μL vs 452(269-706)cells/μL,P<0.001]患者.白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α在HCC组均最高.DCC、HCC患者Child-Paugh分级越差,CD3^(+)、CD8^(+)T细胞水平越低,IL-6水平越高.HCC患者CD3^(+)、CD8^(+)T细胞水平随着肿瘤巴塞罗那分期由A到D呈下降趋势,IL-6呈上升趋势.且肝硬化、HCC患者CD3^(+)(r=-0.340,P<0.001)、CD8^(+)(r=-0.353,P<0.001)T细胞水平与IL-6升高水平呈显著负相关.结论HBV相关肝硬化、HCC患者外周血CD8^(+)T细胞计数与Child分级(由A到C)呈负相关,且IL-6水平与CD8^(+)T细胞计数存在负相关关系.

入院白蛋白、T淋巴细胞亚群、白细胞计数预测中晚期宫颈癌化疗患者医院感染的价值

目的分析入院白蛋白、T淋巴细胞亚群、白细胞计数(WBC)预测中晚期宫颈癌化疗患者医院感染的价值。方法选取2020年1月至2022年1月在华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤科住院接受化疗治疗的187例中晚期宫颈癌患者作为研究对象,对其入院时血常规指标、血液生化指标、外周血T淋巴细胞亚群指标及医院感染情况进行回顾性分析。结果有66例患者发生医院感染,感染率为35.29%,感染部位以泌尿系统为主,占53.03%,其次为呼吸系统,占22.73%。感染组患者入院WBC、白蛋白、CD4^(+)T淋巴细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值分别为(4.19±1.75)×10^(9)/L、(35.80±3.70)g/L、(31.49±2.78)%、1.01±0.16,均低于未感染组[(6.00±2.01)×10^(9)/L、(41.72±5.02)g/L、(35.13±2.83)%、1.44±0.29],差异均有统计学意义(P<0.05)。WBC、白蛋白、CD4^(+)T淋巴细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值预测中晚期宫颈癌化疗患者医院感染的受试者工作特征曲线下面积(AUC)分别为0.742、0.815、0.806、0.896,在截断值下,CD4^(+)T淋巴细胞比例的敏感度最高,WBC的特异度最高。结论中晚期宫颈癌的医院感染部位以泌尿系统为主,患者入院WBC、白蛋白、CD4^(+)T淋巴细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值的下降可提示其医院感染风险,临床医师应对患者开展综合性的治疗前评价并采取有效的干预措施,以降低其医院感染发生率。

淋巴细胞分离液对T细胞阳性花环和非T细胞阳性花环计数结果影响的研究

目的探讨单克隆抗体SPA红细胞花环法(McAb-A-E法)检验T淋巴细胞亚群时,淋巴细胞分离液对阳性花环细胞计数结果以及非T淋巴细胞阳性花环计数结果的影响。方法选择淋巴细胞分离液法分离的单个核细胞(PBMC)和不加任何物质的抗凝血用自然沉降法分离的混合细胞,用10倍量稀释液洗涤1次。两种细胞用McAb-A-E直接法进行样本对照,并作统计学处理。结果对20例临床标本用两种不同方法制取单个核细胞悬液的实验对照研究,2组CD3+(t=-4.197,P=0.000)、CD4+(t=-5.177,P=0.000)、CD8+(t=-4.240,P=0.000)、CD4+/CD8+(t=-1.958,P=0.095)进行比较,CD3+、CD4+、CD8+3组结果差异有统计学意义,均为P<0.001。CD4+/CD8+结果比较,差异无统计学意义(P>0.05);2组非T淋巴细胞阳性花环比较(t=-5.638,P=0.000),差异有统计学意义(P<0.001)。结论淋巴细胞分离液分离的PBMC细胞,用10倍量的稀释液洗涤1次,细胞表面黏附的黏稠淋巴细胞分离液是无法全部除去的,其对实用McAb-A-E直接法实验的影响是使阳性花环淋巴细胞计数结果偏高,相对的阴性淋巴细胞计数结果偏低。

单平台与双平台流式细胞术T细胞亚群绝对计数的比较

目的寻找基于CYTOMICS FC500流式细胞仪(简称CYTOMICS FC500)的相对稳定、经济的外周血T细胞亚群绝对计数方法。方法分别用基于CYTOMICS FC500的双平台和单平台流式细胞术(FCM)同时检测280例患者外周血T细胞亚群的绝对值,比较2种方法结果的相关性和一致性;评价高值和低值样本用2种方法检测的批内和批间精密度。结果双平台与单平台FCM T细胞亚群绝对计数结果的相关性好(r≥0.984),但存在明显差异(P<0.01),双平台FCM检测的CD4+CD8-(CD4+)T细胞绝对值比单平台FCM平均低36.5(-71.8,114.7)个/μL,差异百分比为8.7%(-13.8%,31.2%);双平台FCM检测的CD4-CD8+(CD8+)T细胞绝对值比单平台FCM平均低41.4(-84.4,167.2)个/μL,差异百分比为8.7%(-13.9%,31.3%);双平台FCM检测的CD4-CD8-T细胞(DNT)和CD4+CD8+T细胞(DPT)绝对值也均低于单平台FCM。双平台FCM检测CD4+T细胞、CD8+T细胞、DNT、DPT绝对值高值和低值的批内变异系数(CV)分别为3.5%和4.2%、3.8%和3.4%、6.1%和7.6%、9.5%和18.7%,批间CV分别为5.1%和5.9%、5.5%和5.1%、7.7%和9.6%、12.2%和24.6%,低于单平台FCM检测各T细胞亚群绝对值高值和低值的批内CV(4.0%和4.8%、4.2%和4.0%、6.7%和8.6%、11.1%和21.4%)和批间CV(6.3%和7.5%、7.0%和6.8%、8.5%和10.3%、13.6%和26.4%)。结论基于CYTOMICS FC500的双平台和单平台FCM外周血T细胞亚群绝对计数结果差异较大,不宜在同一时间段内交替使用,其中双平台FCM精密度更高,且能节约成本,可优先选择。

肺结核及肺外结核患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义

目的探讨肺外结核患者外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+T淋巴细胞亚群及CD4^+/CD8^+比值的变化及其临床意义。方法搜集2017年11月至2019年1月在成都市公共卫生临床医疗中心结核病区住院的147例患者(包括63例单纯肺结核、60例肺结核并发肺外结核和24例单纯肺外结核患者,分别为肺结核组、肺结核并发肺外结核组和肺外结核组)作为研究对象。采用流式细胞仪及四色淋巴细胞亚群检测试剂盒检测纳入的各组患者外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+T淋巴细胞的绝对计数及CD4^+/CD8^+比值,分析上述各组患者外周血T淋巴细胞亚群的差异。结果肺结核并发肺外结核患者外周血CD3^+和CD4^+T淋巴细胞计数分别为596.000(377.500,823.250)个μl和347.500(214.000,479.250)个/μl,均低于单纯肺结核患者的698.000(572.000,904.000)个/μl和409.000(311.000,545.000)个/μl,差异均有统计学意义(Z=-2.507,P=0.012;Z=-2.431,P=0.015)。肺结核并发肺外结核患者的CD8^+T淋巴细胞计数与CD4^+/CD8^+比值分别为195.500(137.250,278.750)个/μl和1.670(1.258,2.273),较肺结核患者的244.000(154.000,317.000)个/μl和1.770(1.290,2.350)降低,但差异均无统计学意义(Z=-1.892,P=0.058;Z=-0.546,P=0.585)。单纯肺外结核患者外周血CD3^+和CD4^+T淋巴细胞计数分别为551.500(283.750,949.000)个/μl和295.500(134.250,461.750)个/μl,低于单纯肺结核患者的698.000(572.000,904.000)个/μl和409.000(311.000,545.000)个/μl,差异均有统计学意义(Z=-2.089,P=0.037;Z=-2.460,P=0.014);单纯肺外结核患者外周血的CD8^+T淋巴细胞计数[185.000(92.000,366.250)个/μl]及CD4^+/CD8^+比值[1.455(1.018,2.128)]与单纯肺结核患者[分别为244.000(154.000,317.000)个/μl和1.770(1.290,2.350)]相比,差异均无统计学意义(Z=—1.315,P=0.188;Z=-1.429,P=0.153)。结论随着肺结核患者外周血CD3^+、CD4^+T淋巴细胞计数的逐步降低,结核分枝杆菌可能更易播散至肺外;外周血CD8^+T淋巴细胞计数及CD4^+/CD8^+比值在肺外结核发生机制中的作用尚需进一步探讨。

小儿热速清糖浆联合阿奇霉素治疗急性化脓性扁桃体炎患儿的效果

目的:观察小儿热速清糖浆联合阿奇霉素治疗小儿急性化脓性扁桃体炎患儿的效果。方法:选取2019年8月至2020年8月该院收治的200例急性化脓性扁桃体炎患儿进行前瞻性研究,按照随机数字表法分为研究组和对照组各100例。对照组应用阿奇霉素干混悬剂治疗,研究组在对照组基础上联合小儿热速清糖浆治疗。连续治疗5 d后,比较两组临床疗效、临床症状消失时间,治疗前后白细胞计数、C反应蛋白和T细胞亚群指标[CD4^(+)、CD3^(+)、CD8^(+)]水平,以及不良反应发生率。结果:治疗后,研究组治疗总有效率为96.00%,高于对照组的88.00%,差异有统计学意义(P<0.05);研究组咽痛消失时间和体温恢复正常时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组白细胞计数和C反应蛋白水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组CD4^(+)、CD3^(+)水平均高于治疗前,且研究组高于对照组,两组CD8^(+)水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:小儿热速清糖浆联合阿奇霉素治疗急性化脓性扁桃体炎患儿可提高治疗总有效率,缩短临床症状消失时间,降低白细胞计数和C反应蛋白水平,以及改善T细胞亚群指标水平,效果优于单纯阿奇霉素治疗。

动态监测食管癌术后吻合口瘘感染患者血PCT、WBC、T细胞亚群的临床价值

目的探究动态监测血降钙素原(PCT)、白细胞计数(WBC)、T淋巴细胞亚群水平在食管癌术后吻合口瘘感染患者治疗及预后中价值。方法回顾性分析菏泽市立医院2015年6月-2019年6月收治的58例吻合口瘘感染患者及58例同期吻合口瘘未发生感染患者的临床资料,比较两组患者术后1、3、5 d时血清PCT、WBC、T淋巴细胞亚群的变化情况,利用受试者工作特征曲线(ROC)分析PCT、WBC、T淋巴细胞亚群诊断食管癌术后吻合口瘘感染的价值;根据患者预后情况分为痊愈组和死亡组,比较不同预后患者确诊吻合口瘘感染时PCT、WBC、T淋巴细胞亚群水平,并利用ROC分析PCT、WBC、T淋巴细胞亚群水平预测预后的价值。结果吻合口瘘组患者术后1、3、5 d时PCT、WBC高于对照组,CD3^(+)、CD3^(+)CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC结果显示,术后3 d血PCT、WBC、CD4^(+)/CD8^(+)水平诊断吻合口瘘感染的AUC分别为0.879、0.779、0.751,95%CI分别为0.817~0.924、0.693~0.865、0.661~0.842;58例吻合口瘘感染患者中有13例死亡,病死率为22.41%,死亡组患者的PCT、WBC高于痊愈组,CD4^(+)/CD8^(+)低于痊愈组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC结果显示,血PCT、WBC、CD4^(+)/CD8^(+)水平预测吻合口瘘感染患者不良预后的AUC分别为0.762、0.752、0.843,95%CI分别为0.618~0.907、0.607~0.897、0.722~0.963。结论动态监测血PCT、WBC、T淋巴细胞亚群水平有利于提高食管癌术后吻合口瘘感染诊断,同时还具有一定的预测预后的价值。

128例健康成年人T淋巴细胞及其亚群比值和绝对计数研究

目的建立蚌埠市健康成年人T淋巴细胞亚群及其绝对计数的正常参考值,为相关临床和流行病学分析提供参考依据。方法流式细胞术,使用美国BD公司生产的FACSCcount系统,EDTA-2K抗凝管静脉采血,在绝对计数管(TruCount tube)内进行T淋巴细胞亚群的检测及绝对计数分析。结果蚌埠市健康成年人总T淋巴细胞(CD3+细胞群)绝对计数为(1260.98±354.66)个/μl,CD4+细胞亚群绝对计数为(648.88±198.50)个/μl,CD8+细胞亚群绝对计数为(504.36±176.35)个/μl,CD4/CD8比值为1.43±0.68。结论利用流式细胞仪进行静脉血T淋巴细胞及其亚群检测及绝对计数分析,快速、客观、准确。蚌埠市健康成年人T淋巴细胞亚群及其绝对计数较国内别的报告有所差异。

肾移植受者T细胞亚群绝对计数动态监测对感染的预警作用

目的探讨长期监测T细胞亚群绝对计数水平对肾移植受者术后感染的预警作用。方法回顾性分析2017年1月至2021年5月在上海交通大学医学院附属瑞金医院26例行肾移植术后新发感染受者临床资料(感染组,感染发生在移植后1~240个月)。选择129例同期肾移植术后无感染、健康受者作为对照组。感染组连续或定期测量外周血T细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)绝对计数,并与对照组检测数据进行比较。根据移植后采样时间将感染组和对照组各分为6个亚组,分析感染亚组与其相应对照亚组之间T细胞亚群绝对计数的差异。正态分布计量资料采用两独立样本t检验和单因素方差分析比较,非正态分布计量资料采用Mann-Whitney U检验比较,计数资料采用χ^(2)检验比较。使用受试者工作特征(ROC)曲线分析T细胞亚群绝对计数在肾移植术后预警感染性疾病的最优值。P<0.05为差异有统计学意义。结果感染组和对照组受者CD4^(+)/CD8^(+)比值分别为(1.2±0.5)、(1.3±0.6),差异无统计学意义(t=0.610,P>0.05)。感染组受者CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)T细胞绝对计数[(367±212)、(189±117)和(161±92)个/μL]均低于对照组[(1374±663)、(695±334)和(626±377)个/μL],差异均有统计学意义(t=14.036、13.541和12.311,P均<0.05)。CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)T细胞绝对计数在6个感染亚组受者中差异均无统计学意义(P均>0.05)。对照亚组1受者CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)T细胞绝对计数均低于对照亚组5,差异均有统计学意义(P均<0.05)。CD4^(+)、CD8^(+)和CD3^(+)绝对计数预测肾移植术后感染性疾病最优截断值分别为712、362和255个/μL,敏感度分别为94.6%、92.2%和96.1%,特异度分别为92.3%、96.2%和88.5%。结论肾移植受者低T细胞亚群绝对计数水平具有预示及预警感染风险的作用。

C反应蛋白、白细胞计数和T淋巴亚群与胃癌患者术后感染性并发症的关系及其诊断价值分析

目的:研究C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)和T淋巴亚群与胃癌患者术后感染性并发症的关系,并分析其诊断价值。方法:以2016年3月~2018年6月于本院行根治术治疗的胃癌患者120例为研究对象,将其按照术后是否发生感染性并发症分为并发症组56例与无并发症组64例。分别比较两组患者术前、术后24 h以及术后48 h的血清CRP、WBC和T淋巴亚群相关指标水平变化情况。采用多因素Logistic回归分析胃癌感染性并发症的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各项指标诊断胃癌根治术后感染性并发症的效能。结果:术后24 h、术后48 h两组患者血清CRP、WBC水平高于术前(P<0.05),且并发症组高于无并发症组(P<0.05)。术后48 h,并发症组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于无并发症组(P<0.05),而手术前后CD8+无明显变化。多因素Logistic回归分析显示,年龄≥55岁、CRP≥10 mg/L、WBC≥10×109/L和CD4+/CD8+<1是患者术后发生胃癌感染性并发症的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析发现:CRP、WBC、CD3+、CD4+联合检测诊断胃癌根治术后感染性并发症的敏感度、特异度均高于单独检测。结论:CRP、WBC和T淋巴亚群与胃癌患者术后感染性并发症的发生密切相关,临床工作中对CRP、WBC、CD3+、CD4+进行联合检测有助于胃癌术后感染性并发症的早期诊断。

ANC及免疫功能变化与妇科术后淋巴囊肿并发感染的关系研究

目的探讨中性粒细胞绝对数(ANC)及免疫功能变化与妇科术后淋巴囊肿并发感染的关系,为妇科术后淋巴囊肿并发感染的防治提供参考。方法选取2018年1-12月于郑州人民医院行盆腔淋巴结清扫术后发生淋巴囊肿的患者100例为研究对象,对淋巴囊液进行病原菌检测,同时检测患者血ANC及血清免疫球蛋白A(IgA)、IgG、IgM、T细胞亚群(CD3^+、CD4^+、CD8^+)绝对计数及CD4^+/CD8^+。结果27例患者发生囊肿并发感染,感染率为27.00%,其中21例患者囊液检测出病原菌21株,其中葡萄球菌属10株、链球菌属6株、肠球菌属3株、其他2株;感染患者ANC、IgA、IgG、IgM、CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+水平分别为(0.65±0.23)×10^9/L、(3.28±2.11)g/L、(9.70±1.72)g/L、(1.26±0.68)g/L、(41.21±4.38)%、(32.11±4.15)%、(1.07±0.43)均低于无感染患者,CD8^+(30.33±2.89)%高于无感染患者(P均<0.001);ANC、CD4^+/CD8^+水平低下是妇科术后淋巴管囊肿患者并发感染的影响因素(P<0.05)。结论妇科术后囊肿患者ANC及免疫功能低下时易发生囊肿并发感染,应针对引起术后淋巴囊肿并发感染的因素进行防控,若患者存在ANC及免疫功能低下应积极纠正,以避免并发感染。

“鸡尾酒”疗法治疗儿童原发免疫性血小板减少症临床疗效观察

目的观察"鸡尾酒"疗法治疗持续、慢性儿童原发免疫性血小板减少症临床疗效。方法选取ITP患儿48例,随机分为2组各24例。治疗组采用"鸡尾酒"治疗(自拟仙芍丹归汤、小剂量甲泼尼龙片、脾氨肽、复方芦丁片、多维片),对照组予归脾汤治疗,疗程均为6个月。比较治疗前后患儿血小板计数,血小板参数,包括平均血小板体积(MPV)、平均血小板分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT),T淋巴细胞亚群细胞,包括NK细胞表面标志物(CD3^+)、辅助性T细胞表面标志物(CD4^+)、抑制性T细胞表面标志物(CD8^+),以及CD4^+/CD8^+水平的变化。结果治疗总有效率66.67%,高于对照组33.33%,差异有统计学意义(P<0.05);在治疗1,3,6个月后治疗组血小板计数均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗1,3个月治疗组PCT高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 "鸡尾酒"疗法治疗持续、慢性ITP儿童患者有较好的临床疗效。