苦参碱调节RhoA-ROCK信号通路对冠心病模型大鼠Th17/Treg细胞平衡的影响

目的探讨苦参碱(Matrine)对冠心病(coronary heart disease,CHD)大鼠辅助T细胞17(helper T cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)细胞平衡及Ras同源基因家族成员A(RhoA)-Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路的影响。方法建立冠心病模型,将实验大鼠分为对照组、模型组、苦参碱低剂量(50 mg·kg^(-1))组、苦参碱高剂量(200 mg·kg^(-1))组及苦参碱高剂量(200 mg·kg^(-1))+LPA组(10 mg·kg^(-1))。超声心动图进行大鼠心功能检测;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法进行白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平检测;流式细胞术检测Th17、Treg数量及Th17/Treg比值;免疫组化进行内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、内皮素1(ET-1)蛋白表达水平检测;Masson染色进行大鼠心肌组织的病理形态变化观察;TTC染色检测各组大鼠心肌梗死情况;TUNEL染色进行心肌组织中细胞凋亡情况检测;试剂盒检测RhoA活性;Western Blot法进行半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达水平检测。结果与对照组比较,模型组心肌组织有大量蓝色胶原纤维沉积,左室舒张末期容积(left ventricular end-diastolic volume,LVEDV)、左室收缩末期容积(left ventricular end-systolic volume,LVESV)、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平明显升高,左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室缩短分数(left ventricular shortening fraction,LVFS)、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,Matrine-L组、苦参碱高剂量组心肌组织蓝色胶原纤维逐渐减少,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平依次明显降低,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平依次明显升高(P<0.05)。与苦参碱高剂量组比较,苦参碱高剂量+LPA组心肌组织蓝色胶原纤维增多,LVEDV、LVESV、IL-17、Th17、Th17/Treg、ET-1、心肌梗死面积、细胞凋亡率、TUNEL阳性率、Bax、Caspase-3、RhoA活性、RhoA、ROCK1、ROCK2表达水平明显升高,LVEF、LVFS、TGF-β、Treg、eNOS、Bcl-2表达水平明显降低(P<0.05)。结论苦参碱通过抑制RhoAROCK信号通路调节Th17/Treg细胞平衡,改善冠心病大鼠心肌损伤。

Th17和调节性T细胞在人类免疫缺陷病毒疾病进展中的作用及其调控机制

目的本研究通过观察人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者外周血Th17、Treg细胞及其相关转录因子、细胞因子的表达,进一步揭示Th17、Treg细胞的调控机制及其在HIV感染者疾病进展中的作用。方法选取2019年1月—2019年10月河南省上蔡县HIV感染者80例作为研究组,选取同地区健康人群20例作为对照组。采用流式细胞术检测外周血CD4^(+)T、CD8^(+)T及外周血单个核细胞Th17、Treg,酶联免疫吸附试验检测血浆中细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、IL-23水平,实时聚合酶链反应检测转录因子ROR-γt及Foxp3 mRNA表达,Pearson法分析Th17、Treg与CD4^(+)T的相关性。结果研究组CD4^(+)T、CD4^(+)T/CD3+T、CD4^(+)T/CD8^(+)T低于对照组(P<0.05),CD8^(+)T和CD8^(+)T/CD3+T高于对照组(P<0.05)。研究组Th17/CD4^(+)T、Th17/Treg低于对照组(P<0.05),Treg/CD4^(+)T高于对照组(P<0.05)。研究组ROR-γtmRNA高于对照组(P<0.05),Foxp3mRNA低于对照组(P<0.05)。研究组IL-17、IL-23水平低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果表示,Th17细胞百分比与CD4^(+)T细胞计数呈正相关(r=0.293,P<0.05),Treg细胞百分比与CD4^(+)T细胞计数呈负相关(r=-0.198,P<0.05)。结论HIV感染能降低Th17细胞、升高Treg细胞,破坏机体免疫平衡,其机制与调控转录因子ROR-γt、Foxp3及细胞因子IL-17、IL-23表达有关,Th17细胞、Treg细胞与HIV感染者疾病进展密切相关。

结直肠癌组织高表达IL-35对Th1和Th17可塑性的作用

目的 探讨结直肠癌组织中高表达的抑制性细胞因子白细胞介素(IL)-35对辅助性T细胞1(Th1)和辅助性T细胞17(Th17)可塑性的作用。方法 选取2019年3月—2020年2月上海交通大学医学院附属新华医院结直肠癌患者90例(结直肠癌组)和健康体检者28名(正常对照组)。采用流式细胞术检测结直肠癌组和正常对照组外周血Th1百分比(Th1%)和Th17百分比(Th17%)。基于Kaplan-Meier Plotter数据库分析γ-干扰素(IFN-γ)和IL-17A高表达对结直肠癌患者总生存期和预后不良的影响。采用免疫组化法检测结直肠癌患者癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘≥2 cm)中IL-35的表达。采用酶联免疫吸附试验检测结直肠癌患者和正常对照者血清IL-35水平。采用体外诱导Th1分化实验观察IL-35对Th1分泌IL-17A和IFN-γ的影响。结果与正常对照组比较,结直肠癌组Th1%显著降低(P=0.019),Th17%显著升高(P<0.001)。结直肠癌组Th1%与Th17%的r2值(0.393 4)与正常对照组(0.041 0)比较差异有统计学意义(P=0.007)。基于KaplanMeierPlotter数据库的分析结果显示,IFN-γmRNA低表达是结直肠癌患者总生存期缩短的危险因素[风险比(HR)=0.74,95%可信区间(CI)为0.58~0.94,P=0.013],IL-17A mRNA高表达是结直肠癌患者总生存期缩短的危险因素(HR=1.26,95%CI为1.02~1.59,P=0.020)。结直肠癌患者癌组织IL-35表达显著高于癌旁组织(P<0.001)。Ⅰ~Ⅱ期(早期)和Ⅲ~Ⅳ期(晚期)结直肠癌患者血清IL-35水平均显著高于正常对照者(P<0.05)。体外诱导Th1分化实验结果显示,IL-35可降低Th1中IFN-γ表达,提高IL-17A表达。结论 结直肠癌患者外周血Th1和Th17呈异常变化,且IL-35表达增加。高表达的IL-35可降低Th1中IFN-γ表达,提高IL-17A表达。

缺血性脑卒中后抑郁患者外周血CDC42、Th17细胞表达及与抑郁程度的相关性分析

目的观察缺血性脑卒中患者外周血细胞分裂周期蛋白42(CDC42)、辅助性T细胞17(Th17)表达并探究其表达与患者抑郁程度的相关性。方法选取2022年1月—2023年1月河北北方学院附属第一医院收治的200例缺血性脑卒中患者为观察组,另选取同期该院200例体检健康者为对照组。患者入院后均接受常规抗血小板聚集、降脂等对症支持治疗,并采用多感官刺激方案对患者进行干预。采用蒙哥马利抑郁评定量表评估患者的抑郁状态,并将患者分为无抑郁组116例、轻度抑郁组38例、中度抑郁组31例、重度抑郁组15例。比较各组医院焦虑抑郁量表(HADS)和简易精神状态评价量表(MMSE)评分,比较观察组干预前后日常生活活动能力(ADL)评分;检测各组外周血CDC42 mRNA、Th17细胞、调节性T细胞(Treg)、Th17/Treg表达。以Pearson相关系数分析HADS评分与患者外周血CDC42 mRNA、Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg表达水平的相关性。结果观察组HADS-A评分、HADS-D评分均高于对照组(P<0.05),MMSE评分低于对照组(P<0.05)。重度抑郁组HADS-A评分、HADS-D评分高于其他组(P<0.05),MMSE评分低于其他组(P<0.05);中度抑郁组HADS-A评分、HADS-D评分高于轻度抑郁组和无抑郁组(P<0.05),MMSE评分低于轻度抑郁组和无抑郁组(P<0.05);轻度抑郁组HADS-A评分、HADS-D评分高于无抑郁组(P<0.05),MMSE评分低于无抑郁组(P<0.05)。观察组外周血CDC42 mRNA、Treg细胞的表达水平低于对照组(P<0.05),外周血Th17细胞、Th17/Treg的表达水平高于对照组(P<0.05)。重度抑郁组Th17细胞、Th17/Treg表达水平高于其他组(P<0.05),Treg细胞表达水平低于另外组(P<0.05),中度抑郁组Th17细胞、Th17/Treg表达水平高于轻度抑郁组、无抑郁组(P<0.05),Treg细胞表达水平低于轻度抑郁组、无抑郁组(P<0.05),轻度抑郁组Th17细胞、Th17/Treg表达水平高于无抑郁组(P<0.05),Treg细胞表达水平低于无抑郁组(P<0.05)。观察组干预后HADS-A评分、HADS-D评分低于干预前(P<0.05),MMSE评分、ADL评分高于干预前(P<0.05)。观察组干预前后外周血CDC42 mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组干预后外周血Th17细胞、Th17/Treg表达水平低于干预前(P<0.05),外周血Treg细胞表达水平高于干预前(P<0.05)。观察组患者外周血Th17细胞、Th17/Treg表达与HADS评分呈正相关(r=0.673、0.603,均P<0.05),外周血Treg细胞表达与HADS评分呈负相关(r=-0.586,P<0.05),外周血CDC42 mRNA与HADS评分无相关性(r=-0.375,P>0.05)。结论缺血性脑卒中患者外周血CDC42mRNA表达明显降低、Th17细胞表达明显升高,随着患者抑郁程度加重,Th17细胞表达逐渐升高,而CDC42mRNA表达与患者的抑郁程度无相关性,可通过合理的干预措施减轻抑郁情绪,防止病情加重。

口腔扁平苔藓患者血清miR-155-5p、SOCS1 mRNA水平与病损程度及Th17/Treg失衡的关系

目的探讨口腔扁平苔藓(OLP)患者血清微小核糖核酸-155-5p(miR-155-5p)、细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS1)mRNA水平与病损程度及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡的关系。方法选择OLP患者76例(观察组),其中非糜烂型28例、糜烂型48例(轻中度糜烂29例、重度糜烂19例),同期随机另选体检健康的志愿者50例(对照组),采集所有研究对象外周静脉血,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-155-5p、SOCS1 mRNA,采用流式细胞术检测Th17、Treg比例并计算Th17/Treg。采用Pearson/Spearman相关分析法分析OLP患者血清miR-155-5p水平与SOCS1 mRNA水平的关系以及二者与外周血Th17、Treg比例和Th17/Treg的关系。结果与对照组比较,观察组血清miR-155-5p水平以及外周血Th17比例和Th17/Treg升高,血清SOCS1 mRNA水平和外周血Treg比例降低(P均<0.05)。非糜烂型OLP及糜烂型OLP轻中度糜烂、重度糜烂患者血清miR-155-5p水平以及外周血Th17比例和Th17/Treg逐渐升高,血清SOCS1 mRNA水平和外周血Treg比例逐渐降低(P均<0.05)。相关性分析显示,OLP患者血清miR-155-5p水平与血清SOCS1 mRNA水平呈负相关关系(r=-0.809,P<0.01);血清miR-155-5p水平与外周血Th17比例、Th17/Treg均呈正相关关系(r/rs分别为0.819、0.820,P均<0.05),与Treg比例呈负相关关系(r=-0.735,P<0.05);血清SOCS1 mRNA水平与外周血Th17比例、Th17/Treg均呈负相关关系(r/rs分别为-0.770、-0.790,P均<0.05),与Treg比例呈正相关关系(r=0.733,P<0.05)。结论OLP患者血清miR-155-5p水平升高、血清SOCS1 mRNA水平降低,二者水平变化与病损程度加重和Th17/Treg失衡密切相关。

艾拉莫德联合双醋瑞因对难治性类风湿关节炎患者的疗效及对TH17/Treg细胞因子的影响

目的:研究难治性类风湿关节炎(RRA)治疗中双醋瑞因与艾拉莫德联合疗效及对患者辅助性T细胞17(TH17)/调节性T淋巴细胞(Treg)的影响。方法:回顾性分析2021年1月至2023年12月入院的80例RRA患者,根据不同治法分为单一组(单用艾拉莫德,40例)与联合组(联用艾拉莫德、双醋瑞因,40例);比较两组治疗前后血清学指标[白细胞介素-17(IL-17)、TH17、Treg、TH17/Treg]、血清炎症因子[C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-1(IL-1)]、免疫学指标[免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)]、实验室指标[人内皮抑素(ES)、类风湿因子(RF)、红细胞沉积率(ESR)]、临床症状改善状况(关节肿胀数量、晨僵时间、关节疼痛(VAS)评分)与治疗后总有效率、不良反应(白细胞减少、恶心呕吐、瘙痒、皮疹)发生率。结果:与单一组比较,联合组治疗后IL-17、TH17、TH17/Treg、CRP、TNF-α、IL-1β、IL-1、IgM、IgA、IgG、RF、ESR与关节肿胀数量、VAS评分更低,Treg、ES更高,晨僵时间更短,差异有统计学意义(P<0.05)。联合组治疗后总有效率(97.50%)高于单一组(80.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。两组白细胞减少、恶心呕吐、瘙痒、皮疹发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:RRA治疗中双醋瑞因与艾拉莫德联合疗效显著,有益于进一步改善患者炎症因子、免疫学指标及实验室指标与减轻症状,还可纠正TH17/Treg失衡,且不良反应少。

COPD患者Treg/Th17免疫失衡及血清PCT水平与急性加重发作风险的关系

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)免疫失衡及血清降钙素原(PCT)水平与急性加重发作风险的关系。方法回顾性分析2020年6月至2023年6月在西安医学院第二附属医院进行诊治的80例COPD患者临床资料,依据病情划分为COPD稳定期(SCOPD组,48例)和COPD急性加重期(AECOPD组,32例)。观察两组患者基础资料差异,采用多因素logistic回归分析AECOPD的危险因素,绘制受试者操作特征曲线(ROC)分析各项血清指标评估AECOPD的效能,采用Spearman相关性分析外周血Treg、Th17、Treg/Th17及PCT水平与AECOPD的关系。采用χ^(2)检验、t检验。结果AECOPD组中男20例,女12例,年龄(59.66±9.17)岁,病程(9.16±2.52)年;SCOPD组中男28例,女20例,年龄(60.13±9.05)岁,病程(8.98±2.14)年。AECOPD组Treg、Treg/Th17均低于SCOPD组[(2.52±0.48)%比(3.61±0.73)%、(0.54±0.16)比(1.10±0.33)],差异均有统计学意义(t=7.435、8.913,均P<0.001);AECOPD组Th17、PCT水平均高于SCOPD组[(4.64±0.95)%比(3.28±0.69)%、(1.33±0.46)μg/L比(0.75±0.32)μg/L],差异均有统计学意义(t=7.417、6.656,均P<0.001)。经多因素logistic回归分析证实,Treg、Th17、Treg/Th17、PCT均是AECOPD的影响因素(均P<0.05)。ROC分析结果显示,外周血Treg、Th17、Treg/Th17及PCT水平均可用于AECOPD的评估,曲线下面积分别为0.895、0.910、0.932、0.803(均P<0.001)。相关性分析显示,外周血Treg、Treg/Th17均与AECOPD呈负相关,Th17、PCT水平均与AECOPD呈正相关(均P<0.05)。结论Treg、Th17、Treg/Th17、PCT均是AECOPD的影响因素,且与AECOPD密切相关,可将以上指标作为评估AECOPD的标志物,为临床防治AECOPD提供参考。

获得性免疫缺陷综合征合并肺结核患者肺CT征象与Th17/Treg失衡的关系

目的探讨获得性免疫缺陷综合征(AIDS)合并肺结核患者肺CT征象与辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡的关系。方法选取2015年6月至2019年6月就诊的AIDS合并肺结核患者58例作为观察组,另选同期单纯肺结核患者30例作为对照组。观察2组肺CT征象;采用流式细胞术检测外周血Th17、Treg比例并计算Th17/Treg比值变化;采用酶联免疫吸附试验测定血清白细胞介素-17、白细胞介素-10水平;并分析观察组外周血Th17/Treg比值与非典型肺结核肺CT征象的关系。结果与对照组比较,观察组弥漫性粟粒影、多发空洞、多肺段渗出、胸腔积液、肺门及纵隔淋巴结增大、2个以上肺段病变比例显著增高,肺部钙化影发生率明显降低(P<0.05,P<0.01)。与对照组比较,观察组外周血Th17比例、Th17/Treg比值、血清白细胞介素-17水平明显降低,Treg比例、血清白细胞介素-10水平升高(P<0.05)。Th17/Treg比值越低,非典型肺结核肺CT征象发生率越高(P<0.01)。结论AIDS合并肺结核患者肺CT征象不典型比例较高,Th17/Treg失衡,肺CT征象联合Th17/Treg比值对AIDS合并肺结核患者具有较好的临床诊断价值。

IL-33介导巨噬细胞极化影响非小细胞肺癌患者Tre g/Th17失衡

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中白细胞介素(IL)-33介导巨噬细胞极化对调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法 选择2020年9月至2021年8月新疆医科大学第四附属医院收治的42例NSCLC住院患者(NSCLC组)及40例健康体检者(对照组)作为研究对象。采用流式细胞术检测两组研究对象外周血中Th17、Treg及巨噬细胞/单核细胞的数量;使用磁珠法分选NSCLC组外周血单个核细胞和对照组外周血CD4^(+)T细胞,并使用IL-33诱导巨噬细胞极化,将NSCLC组IL-33极化后的巨噬细胞与对照组CD4^(+)T细胞共培养;RT-qPCR法检测IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA水平及共培养后维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头蛋白P3(FOXP3)mRNA水平;CBA多因子试剂盒检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β、IL-10、TGF-β的含量。结果 外周血中,NSCLC组CD14^(+)CD68^(+)CD86^(+)CD206-样M1、CD14^(+)CD68^(+)CD86-CD206^(+)样M2巨噬细胞比例及CD14^(+)CD68^(+)CD86-CD206^(+)样M2/CD14^(+)CD68^(+)CD86^(+)CD206-样M1均高于对照组(P均<0.05),NSCLC组Treg细胞水平及Treg/Th17比例均高于对照组(P均<0.05);IL-33诱导的巨噬细胞培养上清液中IL-10 mRNA、TGF-β mRNA相对表达水平均增加(P均<0.05);IL-33诱导的巨噬细胞与CD4^(+)T细胞共培养后,FOXP3 mRNA水平高于与M0、M1共培养组(P<0.05)。结论 IL-33能够促进NSCLC中巨噬细胞M2极化,M2巨噬细胞促进Treg/Th17比例增加,上调Treg特异性转录因子FOXP3,可能与其促进IL-10、TGF-β分泌增多有关。

基于Th17/Treg平衡对类风湿关节炎作用机制的研究概况

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是全身性、持续性、自身免疫性疾病,其病理机制涉及多种免疫细胞,尤其是T淋巴细胞。辅助性T细胞17(relper T cell 17,Th17)和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是构成免疫系统的关键元素,在维持免疫稳态方面起着重要的作用。对单味中药及其有效成分、中药复方、中成药基于Th17/Treg平衡治疗RA的研究进展进行概括,为RA的临床治疗提供理论指导,为了解RA的发病机制提供新的思路。

血清MCP-1水平及外周血Th17/Treg平衡与老年COPD并发全身炎症反应综合征的关系

目的探讨血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平及外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡与老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)并发全身炎症反应综合征(SIRS)的关系。方法选取82例老年COPD合并SIRS患者(SIRS组),以1∶1比例对照选取单纯老年COPD患者(非SIRS组)。采用酶联免疫吸附法与流式细胞术检测血清MCP-1与外周血Th17、Treg比例。通过多因素Logistic回归分析老年COPD并发SIRS的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清MCP-1水平和外周血Th17/Treg对老年COPD并发SIRS的预测价值。结果与非SIRS组比较,SIRS组血清MCP-1和外周血Th17、Th17/Treg高,外周血Treg比例低(P<0.05)。Th17高(OR=3.640,95%CI:1.929~6.867)、MCP-1高(OR=1.035,95%CI:1.016~1.054)、Th17/Treg高(OR=3.612,95%CI:1.835~7.107)为老年COPD并发SIRS的独立危险因素,Treg高(OR=0.651,95%CI:0.467~0.907)为独立保护因素(P<0.05)。血清MCP-1水平联合外周血Th17/Treg预测老年COPD并发SIRS的曲线下面积为0.890(95%CI:0.832~0.934),大于血清MCP-1水平、外周血Th17/Treg单独预测(P均<0.05)。结论血清MCP-1水平升高和Th17/Treg失衡与老年COPD并发SIRS独立相关,血清MCP-1水平联合外周血Th17/Treg检测对老年COPD并发SIRS有较高的预测价值。

补肾助孕方对黄体功能不全性不孕症大鼠Treg、Th17及其相关因子的影响

目的探讨补肾助孕方对黄体功能不全(Luteal phase defect,LPD)性不孕症大鼠模型调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)及相关因子的影响。方法采用大鼠灌服米非司酮混合液(10 mL·kg^(-1))构建LPD性不孕症模型,分别给予阳性药地屈孕酮混合液(0.02 g·kg^(-1))和补肾助孕低(4.5 g·kg^(-1))、中(9 g·kg^(-1))、高(18 g·kg^(-1))剂量组干预。通过苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色观察子宫组织病理形态,流式细胞法和ELISA法检测大鼠外周血Treg、Th17细胞百分比和相关因子含量,Western blot和qPCR法检测大鼠Treg、Th17细胞转录因子蛋白水平及mRNA的表达。结果与空白组相比,模型组子宫内膜厚度明显变薄(P<0.01),Treg细胞百分比及抗炎因子白介素-10(IL-10)含量显著下降(P<0.01),Th17细胞百分比及炎症因子白介素-17A(IL-17A)明显升高(P<0.01),FOXP3蛋白及mRNA表达被抑制(P<0.05,P<0.001),RORγT蛋白及mRNA水平呈现高表达(P<0.01,P<0.001);与模型组相比,地屈孕酮及补肾助孕中、高剂量组能增加子宫内膜增厚(P<0.05,P<0.01),促进子宫内膜腺体的增生和发育;Treg细胞百分比及IL-10含量显著增加(P<0.01,P<0.001),Th17细胞百分比明显下降(P<0.01,P<0.001),FOXP3蛋白表达上调(P<0.01,P<0.001);补肾助孕中、高剂量组IL-17A含量及RORγT蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);地屈孕酮组和补肾助孕高剂量组FOXP3 mRNA水平显著升高(P<0.01,P<0.001),RORγT mRNA表达下调(P<0.001)。结论补肾助孕方可调节LPD性不孕症大鼠的免疫平衡,提高子宫内膜容受性,这可能是治疗不孕症的新的思路。

梓醇干预PKM2/LDHA表达调控Th17细胞分化的机制研究

目的研究梓醇通过干预丙酮酸激酶M2(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)表达进而影响辅助性T细胞17(Th17)分化的机制。方法从C57BL/6小鼠脾脏中分选出naive CD4^(+)T细胞,通过加入定向分化刺激剂诱导72 h使naive CD4^(+)T细胞向Th17细胞分化。在诱导分化的同时,分别用0(定向对照)、20、40、80μg/mL梓醇对细胞进行处理。采用流式细胞术检测细胞中Th17细胞分化比例,采用比色法检测细胞培养上清液中丙酮酸、乳酸水平,采用实时荧光定量-逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测细胞中视黄酸相关孤儿受体γt(RORγt)、PKM2、LDHA mRNA表达情况,采用Western blot法检测细胞中PKM2、LDHA、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达情况。结果与定向对照组比较,经20、40、80μg/mL梓醇作用72 h后,细胞中Th17细胞分化比例分别降低了6.74%、8.41%、9.24%;细胞培养上清液中丙酮酸、乳酸水平,细胞中PKM2、LDHA、RORγt mRNA表达水平以及细胞中PKM2、LDHA蛋白表达水平和STAT3磷酸化水平均显著降低(P<0.05)。结论梓醇可通过下调PKM2、LDHA表达来降低糖酵解水平,进而抑制Th17细胞分化。

中药通过调节Th17/Treg平衡干预胃癌的研究进展

胃癌(GC)是一种较为常见的消化道恶性肿瘤。辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)是CD4+T细胞的分化亚群,Th17/Treg的失衡已被证实与GC的发病进程密切相关。中药不仅可改善GC患者的生存预后,而且在GC的术后化疗中起到了增效减毒的效果。本文系统整理了中药通过调节Th17/Treg平衡干预GC的作用规律。结果发现,中药复方可通过发挥健脾益气、健脾温阳、化瘀解毒等功效以调节GC的Th17/Treg平衡;中药及其有效成分通过调节Th17/Treg平衡来干预GC的作用机制主要表现为抑制Th17、Treg的过度分化及其转录因子、细胞因子的过度表达,逆转GC Th17/Treg平衡向Th17或Treg的过度漂移,从而恢复GC Th17/Treg的免疫平衡。

花青素调节JAK2/STAT3信号通路对自身免疫性心肌炎大鼠Th17/Treg平衡的影响

目的:探讨花青素对自身免疫性心肌炎(AE)大鼠T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)平衡及Janus激酶2/信号转导和转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路的影响。方法:将60只SD大鼠分为对照(NC)组、模型(Model)组、花青素组(50 mg/kg花青素)、STAT3激活剂Colivelin组(1 mg/kg Colivelin)、花青素+Colivelin组(50 mg/kg花青素+1 mg/kg Colivelin),每组12只。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清炎性因子水平;苏木素-伊红(HE)染色检测心肌病理变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色检测心肌细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测脾脏维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、叉头蛋白p3(Foxp3)mRNA表达情况;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测心肌JAK2/STAT3通路相关蛋白表达。结果:Model组心肌明显坏死和水肿,大量炎性细胞浸润;花青素组心肌无明显的坏死和细胞肿胀;Colivelin组心肌损伤加重;与花青素组相比,花青素+Colivelin组大鼠炎性细胞浸润现象增加。与NC组相比,Model组白细胞介素(IL)-17、IL-23水平、RORγt mRNA水平、Th17细胞水平、Th17/Treg比例、心肌细胞凋亡率及磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3、磷酸化JAK2(p-JAK2)/JAK2比例明显升高(P<0.05),IL-10、IL-4水平、Treg细胞水平、Foxp3 mRNA水平明显下降(P<0.05);与Model组比较,花青素组IL-17、IL-23水平、RORγt mRNA水平、Th17细胞水平、Th17/Treg比例、心肌细胞凋亡率以及p-STAT3/STAT3、p-JAK2/JAK2比例明显下降(P<0.05),IL-10、IL-4水平、Treg细胞水平、Foxp3 mRNA水平明显升高(P<0.05);Colivelin组对应指标呈相反趋势(P<0.05);与花青素组相比,花青素+Colivelin组IL-17、IL-23水平、RORγt mRNA水平、Th17细胞水平、Th17/Treg比例、心肌细胞凋亡率及p-STAT3/STAT3、p-JAK2/JAK2比例明显升高(P<0.05),IL-10、IL-4水平、Treg细胞水平、脾脏Foxp3 mRNA水平明显下降(P<0.05)。结论:花青素可能通过抑制JAK2/STAT3通路,恢复Th17/Treg平衡,实现对AE大鼠心肌的保护作用。

自拟清热调血汤对湿热蕴结型宫颈炎合并HPV感染的疗效以及外周血Th17、Treg细胞的调节作用

目的探讨自拟清热调血汤治疗湿热内蕴型宫颈炎合并人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染的疗效以及对外周血T辅助细胞17(T helper cell 17,Th17)、调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)水平的影响。方法回顾性分析2018年1月—2022年1月该院收治的64例湿热内蕴型宫颈炎合并HPV感染患者,按不同的治疗方法分为两组,各32例。对照组给予重组人干扰素α-2b凝胶干预;治疗组在对照组干预基础上给予自拟清热调血汤内服。两组连续治疗3个月。比较两组HPV-DNA转阴率、湿热内蕴证症状评分、临床疗效、外周血Th17与Treg细胞水平、不良反应。结果治疗3个月后,治疗组患者的HPV-DNA转阴率(90.63%,29/32)较对照组(65.63%,21/32)显著上调(P<0.05);治疗3个月后,两组湿热内蕴证症状评分显著降低,且治疗组降低更显著(P<0.01);治疗3个月后,治疗组患者的总有效率(93.75%,30/32)较对照组(68.75%,22/32)上调更加明显(P<0.05);治疗3个月后,两组外周血Th17和Treg细胞水平明显降低,且治疗组降低更显著(P<0.01);治疗组患者的不良反应发生率(3.13%,1/32)较对照组(15.63%,5/32)下降,但组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在西医常规干预措施的基础上,本组自拟清热调血汤治疗湿热内蕴型宫颈炎合并HPV感染的疗效更优,能提高HPV转阴率,促进中医证候改善,降低不良反应,以及下调外周血中Th17和Treg细胞水平。

盐酸左西替利嗪口服溶液联合孟鲁司特钠治疗过敏性鼻炎-哮喘综合征的临床效果及对Th17/Treg的影响

目的探讨盐酸左西替利嗪口服溶液联合孟鲁司特钠治疗过敏性鼻炎-哮喘综合征的临床效果及对辅助性T17细胞(Th17)/调节性T细胞(Treg)的影响。方法选取2021年2月至2022年3月收治的120例过敏性鼻炎-哮喘综合征患者为研究对象,以随机数字表法将其分为对照组与观察组,各60例。对照组给予孟鲁司特钠治疗,观察组在对照组基础上加盐酸左西替利嗪口服溶液。比较两组的治疗效果。结果治疗后,观察组的过敏性鼻炎症状评分低于对照组,哮喘控制测试评分高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组的免疫球蛋白E(IgE)、降钙素原(PCT)水平均低于对照组,干扰素-γ(IFN-γ)水平高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组的Th17、Th17/Treg低于对照组,Treg高于对照组(P<0.05)。结论盐酸左西替利嗪口服溶液联合孟鲁司特钠治疗过敏性鼻炎-哮喘综合征可有效改善患者临床症状,减少炎性因子释放,改善Th17/Treg水平,值得推广与应用。

祛风扶阳汤对支气管哮喘大鼠TGF-β_(1)/Smad信号通路与Th17/Treg失衡的影响

目的观察祛风扶阳汤对支气管哮喘大鼠气道炎症、气道重塑、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/Smad信号通路及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡的影响,探究其作用及机制。方法将45只SD大鼠随机分为空白组、哮喘组、地塞米松组、祛风扶阳汤中剂量组、祛风扶阳汤高剂量组,每组9只。除空白组外,其余组大鼠均采用卵蛋白腹腔注射和雾化吸入方法建立支气管哮喘模型。建模成功后,地塞米松组给予地塞米松0.001 g/kg灌胃,祛风扶阳汤中、高剂量组分别给予祛风扶阳汤9.95 g/kg和19.9 g/kg灌胃,空白组和哮喘组灌胃等量生理盐水,均1次/d,连续灌胃4周。记录各组大鼠末次灌胃后咳嗽次数,HE染色观察肺组织病理形态,ELISA法检测肺泡灌洗液中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-17A(IL-17A)、TGF-β_(1)水平,Western blot法检测肺组织中TGF-β_(1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Smad2/3、p-Smad2/3蛋白表达情况,流式细胞仪检测肺组织中IL-17A^(+)CD4^(+)、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg比例。结果与空白组比较,哮喘组大鼠咳嗽次数明显增加(P<0.05),肺泡灌洗液中IL-6、IL-17A、TGF-β_(1)水平和肺组织中TGF-β_(1)、α-SMA、p-Smad2/3蛋白相对表达量及IL-17A^(+)CD4^(+)比例均明显升高(P均<0.05),肺泡灌洗液中IL-10水平和肺组织中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg比例均明显降低(P均<0.05);肺组织胶原纤维沉积、炎性细胞浸润明显。与哮喘组比较,各药物组大鼠的咳嗽次数均明显减少(P均<0.05),地塞米松组和祛风扶阳汤高剂量组肺泡灌洗液中IL-6、IL-17A、TGF-β_(1)水平和肺组织中TGF-β_(1)、α-SMA、p-Smad2/3蛋白相对表达量及IL-17A^(+)CD4^(+)比例均明显降低(P均<0.05),地塞米松组和祛风扶阳汤高剂量组肺泡灌洗液中IL-10水平和祛风扶阳汤高剂量组肺组织中CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg比例均明显升高(P均<0.05);各药物组肺组织损伤、胶原纤维沉积、炎性细胞浸润均减轻。结论祛风扶阳汤可以通过调节TGF-β_(1)/Smad信号通路以及Th17/Treg细胞平衡,从而减轻支气管哮喘大鼠气道炎症反应与气道重塑。

肺炎支原体感染患儿血清TBIL、SP-D、Th17/Treg水平变化的意义及预测价值

目的:探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清总胆红素(TBIL)、肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)、辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)水平变化及预测价值。方法:选取2022年4月-2023年12月本院收治的103例MPP患儿为研究组,其中急性期56例、恢复期47例;同时选取同期本院体检的健康儿童63例作为对照组。根据病情转归分为预后良好、预后不良。比较两组实验室指标[白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-35(IL-35)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)]、入院时血清TBIL、SP-D、Th17/Treg水平,分析治疗3 d各血清指标对病情转归的预测价值,Logistic回归方程分析影响MPP患儿病情转归的危险因素。结果:与对照组比较,研究组TBIL、SP-D、Th17/Treg、IL-17、CRP、PCT水平升高,IL-35水平降低,FEV1、FVC、PEF降低(P<0.05);与预后良好患儿比较,预后不良患儿血清TBIL、SP-D、Th17/Treg水平升高(P<0.05);TBIL、Th17/Treg与IL-17、CRP呈正相关,SP-D与PCT呈正相关,且与IL-35呈负相关(P<0.05);TBIL、SP-D、Th17/Treg是影响MPP患儿预后不良的危险因素(P<0.05);三项联合检测时AUC均高于单项检测(P<0.05)。结论:MPP患儿血清TBIL、SP-D、Th17/Treg水平升高,对MPP患儿病情转归具有一定预测价值。

过敏性鼻炎与支气管哮喘患儿外周血HMGB1与Th17/Treg的变化及相关性

目的探讨儿童过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)和支气管哮喘(bronchial asthma,BA)患儿外周血高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)水平与辅助性T细胞17(T helper 17 cell,Th17)和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的比例(Th17/Treg)的相关性。方法采用前瞻性研究方法,选取2023年3月至12月在解放军总医院第七医学中心门急诊就诊患儿及健康体检者共113例作为研究对象,按照临床症状分成健康对照组(n=25)、过敏性鼻炎组(AR组,n=28)、支气管哮喘组(BA组,n=31)和两者并有组(AR+BA组,n=29),比较4组肺功能、免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)、白细胞介素(interleukin,IL)-17、HMGB1水平和Th17/Treg比例。统计学方法采用t检验、方差分析和Pearson相关性分析。结果各组的第1秒用力呼气容积(forced expiratory volume in the first second,FEV1)的结果显示,健康对照组高于AR组、BA组和AR+BA组[(96.4±2.5)%、(90.7±4.9)%、(88.6±4.1)%、(82.1±5.5)%,F=47.193,P值均<0.001],显示AR和BA患儿肺功能可能变差。AR组、BA组和AR+BA组HMGB1水平高于健康对照组[(30.4±12.4)mg/L、(47.2±17.8)mg/L、(51.4±21.8)mg/L、(4.3±2.1)mg/L,F=48.896,P值均<0.001]。AR组、BA组和AR+BA组Th17/Treg比例高于健康对照组(0.68±0.14、0.71±0.14、1.36±0.40、0.30±0.07,F=105.547,P值均<0.001)。Pearson相关性分析结果显示,HMGB1与Th17(r=0.521,P<0.001)、Th17/Treg(r=0.419,P<0.05)、IgE(r=0.502,P<0.05)、IL-17(r=0.472,P<0.05)呈正相关,与FEV1(r=-0.645,P<0.001)呈负相关。结论在儿童AR合并BA的发病过程中,HMGB1水平及Th17细胞百分比增加,而Treg细胞百分比降低,Th17/Treg比例存在失衡的情形,HMGB1水平与Th17细胞百分比、Th17/Treg比例、IgE、IL-17及FEV1存在一定的相关性,HMGB1和Th17/Treg的动态平衡可能通过影响细胞因子的表达而起到一定的调节作用。