水稻抗白叶枯病近等基因系CBB30的培育及Xa30(t)的初步定位

【目的】将普通野生稻资源Y238所携有的抗白叶枯病新基因Xa30(t)导入栽培稻JG30,培育近等基因系,进行分子标记定位,以便应用于育种实践。【方法】以感病籼稻品种JG30为轮回亲本,Y238为供体进行杂交、回交、自交培育近等基因系;以JG30/Y238的一个BC6F2代群体为定位群体,利用分离集团分析法(BSA),借助SSR、EST、STS等分子标记对Xa30(t)进行分子标记定位。【结果】成功培育了携有Xa30(t)基因的水稻抗白叶枯病近等基因系CBB30。从343个分子标记中筛选出4个能揭示抗感多态性的标记RM1341、V88、C189及03STS,用该4个标记对BC6F2代群体303个单株进行分子检测和连锁分析,结果表明上述4个标记均位于水稻第11染色体长臂,与Xa30(t)的遗传距离分别为11.4cM、11.4cM、4.4cM及2.0cM,且它们位于Xa30(t)基因的同一侧。【结论】通过构建近等基因系及分子标记检测找到4个与Xa30(t)基因连锁的标记RM1341、V88、C189及03STS,将Xa30(t)基因定位于水稻第11染色体长臂上。

小麦T型细胞质雄性不育系与可育系叶片蛋白质双向电泳分析

利用育性恢复基因 (Rf3)的近等基因系 1 0 31— 1、S— 1 65和 1 0 31— 1与S— 1 65之间的正交与反交 ,创建了四个实验品系 ( 1 0 31— 1、S— 1 65、不育品系、反交品系 ) ;采用改进的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶双向电泳技术 ,从发育遗传学的角度 ,对小麦T型细胞质雄性不育和可育株旗叶表达的相关蛋白产物进行差异分析。通过对旗叶蛋白的双向电泳分析 ,发现 4个品系有相近的蛋白质双向电泳图谱。没有相应穗中差异蛋白质的出现。

与太谷核不育小麦Tal基因连锁的RAPD标记的筛选

本试验采用 5 99个引物对太谷核不育小麦的一对近等基因系进行RAPD分析 ,筛选到一个稳定的特异引物OPO0 1,用该引物对太谷核不育小麦的杂交后代育性分离群体进行RAPD分析 ,从而确定了OPO0 190 0 与Tal基因的遗传距离为 14 7± 0 87cM。

与小麦抗白粉病基因Pm6紧密连锁的分子标记筛选

以Prins×PI170914／7*PrinsF3分离群体对在Prins与其Pm6近等基因系P1170914／7*Prins之间呈现多态性的RFLP标记进行遗传作图，发现8个多态性标记中有3个（Xbcd135EcORV9kb、Xbcd307EcOR18．8kb、Xbcd266EcORV18kb）与转移到普通小麦2B染色体长臂上的来源于T．timopheevi的Pm6基因位点紧密连锁。用这8个多态性标记对国际公认含Pm6基因的小麦品种和品系进行检测时表明，这些标记中Xbcd135-2BL可有效地跟踪已导入不同小麦遗传背景中的Pm6基因。

小麦抗白粉病基因Pm6的RAPD标记(英文)

从提莫菲维小麦转移到普通小麦中的小麦白粉病抗性基因Pm6是小麦白粉病（Erysiphe graminis f sp. tritici）的有效抗性基因。用700个随机引物对Pm6近等基因系进行RAPD分析，发现引物OPV20可在抗病近等基因系中产生大小为2kb的稳定的多态片段。用该引物检测10个其他携Pm6的渐渗系材料，均可稳定扩增出该2kb的多态片段。进一步用OPV20对Pm6 F2（IGV1-463×Prins）分离群体进行分析，计算出标记OPV202000与Pm6基因间的遗传距离为3.0±2.2cM，该标记亦可有效检测其他遗传背景中的Pm6基因。

同种带瓣主动脉移植供体组织钙含量的定量分析

目的研究同种带瓣主动脉(AVH)移植后影响供体组织钙含量的因素。方法将90只Wistar大鼠作为受体随机分成异基因组(冷冻组、治疗组)和同基因组。异基因组分别为接受低温保存的AVH移植(冷冻组)和接受1:5稀释树突状细胞(DC)单抗预处理低温保存,AVH移植后给予DC单抗治疗(治疗组),同基因组为对照组。采用改良大鼠AVH腹主动脉异位移植模型(均接受带瓣下心肌的AVH移植)。异基因组SD大鼠为供体,Wistar大鼠为受体;同基因组受体和供体均为Wistar大鼠。各组再随机分为5个小组,每组6只大鼠。DC单抗治疗时间为4周。手术后2、4、81、2、16周用流式细胞仪检测大鼠血液中T细胞抗原抗体α、β(TCR-α、β)和CD28的表达。取出移植物,用光镜和电子显微镜观察移植物组织结构形态学变化,用免疫组织化学染色方法检测动脉壁CD54的表达,用原子火焰吸收法测定AVH组织钙的含量。结果①异基因组移植后TCR-α、β和CD28的表达水平均较同基因组明显增强(P<0.01),治疗组与冷冻组比较,其表达水平明显降低(P<0.01);②异基因组供体组织钙含量自移植后4周开始升高,同基因组各时点的钙含量无明显差别(P>0.05)。冷冻组于术后4、8周其供体组织钙含量为(2856±79)μg/g(、3587±168)μg/g;DC单抗治疗组为(2176±210)μg/g(、3089±176)μg/g;同基因组为(860±60)μg/g、(870±50)μg/g。结论免疫抑制治疗可减轻免疫反应,延缓钙化进程,疗效明显。

大麦抗白粉病近等基因系农艺性状相似性的评价

为考察近等基因系间遗传背景相似的程度,鉴定了十对具不同抗性基因的大麦抗白粉病近等基因系对人工接种白粉病菌的抗性反应,并在田间条件下考察了抽穗期、开花期、株高、穗长、有效分蘗、结实小穗数和百粒重等七个数量性状。结果表明,感病系均表现为高感,抗病系表现从免疫到中抗等不同程度的抗性。在不同对的近等基因系之间,抽穗期、开花期、株高、穗长和结实小穗数等五个性状有极显著的差异。各近等基因系对内抗病系和感病系间在这七个性状上没有明显的差异。说明除抗白粉病性之外,这十对近等基因系内的抗病系和感病系的遗传背景高度相似。

同基因骨髓间充质干细胞输注减轻大鼠心脏移植排斥反应

目的探讨输注受者同基因骨髓间充质干细胞对大鼠心脏移植后排斥反应的影响。方法以Wistar大鼠为供鼠，F344大鼠为受鼠建立异位心脏移植模型，以数字表法随机分为4组，每组各20对：急性排斥反应组（A组）受鼠仅行心脏移植；小剂量环孢素A组（B组）心脏移植受鼠输注小剂量环孢素A；骨髓间充质干细胞组（C组）心脏移植受鼠输注受鼠来源骨髓间充质干细胞；骨髓间充质干细胞联合小剂量环孢素A组（D组）受鼠输注受鼠来源骨髓间充质干细胞且输注小剂量环孢素A。观察各组受鼠移植心存活时间，检测血清细胞因子水平和脾脏组织叉状头转录因子3（Foxp3）基因表达量的变化，观察移植心组织的病理变化。结果A组、B组、C组和D组移植心中位存活时间分别为7d、18d、16d和28d，D组移植心存活时间长于其他组（P〈0．05）；与其他各组相比较，D组术后白细胞介素2和7干扰素水平明显降低（P〈0．05），白细胞介素6和白细胞介素10明显升高（P〈0．05）。病理检查提示，D组移植心组织呈轻度排斥反应表现，B、C组呈中度排斥反应表现，A组呈急性重度排斥反应表现。A组Foxp3信使RNA表达量明显低于B、C、D组（P〈0．05），D组表达量也明显高于B、C组（P％0．05），B、C组之间的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论同基因骨髓间充质干细胞输注联合小剂量环孢素A应用可减轻大鼠同种异体心脏移植排斥反应，并延长移植心脏的存活时间，其免疫调节作用的机制可能与Foxp3基因表达和细胞因子分泌有关。