TβR1和p-Smad2/3蛋白在哈萨克族食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨TGF-β信号通路关键分子转化生长因子β-1型受体(transforming growth factor-βreceptor 1,TβR1)和磷酸化Smad2/3(phosphorylated Smad2/3,p-Smad2/3)蛋白在哈萨克族(哈族)食管鳞状细胞癌(鳞癌)中的表达及其临床意义。方法采用GEO和TCGA数据库分析食管鳞癌标本与癌旁正常组织中TβR1和p-Smad2/3的表达;运用免疫组织化学技术检测127例哈族食管鳞癌组织和82例癌旁正常组织中TβR1和p-Smad2/3的蛋白表达状况,分析及探讨TβR1、p-Smad2/3蛋白表达水平与哈族食管鳞癌患者临床病理参数及预后的关系。结果TβR1和p-Smad2/3蛋白在哈族食管鳞癌中表达上调(P=4.79×10^(-7);P=2.21×10^(-9)),且两者的表达呈正相关(r=0.322,P=0.002);TβR1、p-Smad2/3蛋白表达水平与食管鳞癌的浸润深度密切相关(P=0.003;P=0.005),且有淋巴结转移的样本中TβR1、p-Smad2/3蛋白表达水平明显高于无淋巴结转移的样本(P=0.028;P<0.001),而TβR1、p-Smad2/3蛋白表达与食管鳞癌患者年龄、性别和肿瘤分化程度无明显相关(均P>0.05);Kaplan-Meier生存分析显示TβR1和p-Smad2/3蛋白高表达食管鳞癌患者生存时间明显短于低表达患者(P=0.0013;P=0.0017)。结论TβR1和p-Smad2/3蛋白表达与哈族食管鳞癌患者的肿瘤浸润深度、淋巴结转移及预后密切相关。

TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ在膀胱癌中表达的临床及病理意义

目的 :探讨转化生长因子 β1(transforminggrowthfactorβ1,TGFβ1)及其相关受体蛋白表达与人膀胱移行细胞癌 (TCCs)生物行为特征的关系。方法 :采用免疫组化方法检测 74例TCCs中TGFβ1及其受体TβRⅠ、TβRⅡ和PCNA蛋白表达。结果 :TGFβ1、TβRⅠ和TβRⅡ在TCCs中表达阳性率分别为 89.2 %、70 .3%和 4 8.6 % ,浸润性生长的膀胱癌TGFβ1过表达率为 83.8% ,明显高于表浅性生长组 (33.3% ) (P <0 .0 5 ) ;TGFβ1过表达与TCCs术后复发有关 (P <0 .0 5 ) ;TGFβ1表达强度与PCNA指数呈显著正相关 (P <0 .0 0 5 ) ;TβRⅡ阳性表达与TCCs浸润程度负相关 (P <0 .0 0 5 ) ,TGFβ1及其受体的共同表达与TCCs浸润程度有密切关系 (P <0 .0 0 5 )。 结论 :TGFβ1在TCCs的发生、发展过程中发挥双向调节作用 ,其负性调节作用的丧失与TβRⅡ失表达有关 ;TGFβ1过度表达与肿瘤细胞增殖、浸润性生长、复发等生物学行为关系密切 。

子宫内膜癌中TβRⅠ和TβRⅡ基因甲基化状态

目的探讨TβRⅠ和TβRⅡ基因甲基化与子宫内膜癌发生发展的关系。方法应用改进的甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)技术检测60例子宫内膜癌组织及60例癌旁正常组织中TβRⅠ、TβRⅡ基因启动子甲基化情况,分析两基因启动子甲基化与各临床指标之间的关系。结果 TβRⅠ在子宫内膜癌组和癌旁正常组的甲基化率分别为75.0%(45/60)和45.0%(27/60),子宫内膜癌组的甲基化率显著高于癌旁正常组(χ2=11.250,P=0.001)。TβRⅡ在子宫内膜癌组和癌旁正常组的甲基化率分别为68.3%(41/60)和36.7%(22/60),子宫内膜癌组的甲基化率显著高于癌旁正常组(χ2=12.063,P=0.000)。两基因启动子甲基化与临床指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 TβRⅠ和TβRⅡ基因启动子甲基化可能与子宫内膜癌的发生有关。

TGF-β受体TβRⅠ、TβRⅡ在实验性鼠牙髓炎中的定量分析

目的:观察研究转化生长因子-β受体TβRⅠ、TβRⅡ在大鼠可复性牙髓炎中在不同时间段动态变化特点,分析TGF-β受体TβRⅠ、TβRⅡ在牙髓炎发生、发展及转归的意义。方法:通过对大鼠上颌第1磨牙进行机械性不喷水均匀磨除釉质,酸蚀剂处理暴露的牙本质,建立实验性大鼠可复性牙髓炎模型;将牙髓炎模型组织块连续切片后采用免疫组化法染色,光镜观察、单因素方差分析(ANOVA)、Tukey检验。结果:在可复性牙髓炎症组织中TGF-β受体TβRⅠ、TβRⅡ的表达明显增强,且随时间呈动态变化趋势,TβRⅠ、TβRⅡ在3d达到最高,之后略有下降。结论:TGF-β受体TβRⅠ、TβRⅡ参与牙髓组织损伤修复并发挥重要作用。

大鼠液压冲击脑损伤TGF-β1及其受体TβR I的表达

目的观察脑损伤后TGF-β1及其受体TβRI蛋白表达及其时序性变化,探讨脑损伤的分子机制及法医学脑损伤时间推断。方法用免疫组织化学方法观察大鼠液压冲击脑损伤后TGF-β1及其受体TβRI蛋白在伤后不同时间(30 min、1 h、3 h、6 h、12 h、1 d、3 d、7 d)的表达情况,以正常大鼠及手术大鼠作为对照。结果 (1)正常及手术对照组大鼠脑组织内有低水平的TGF-β1及TβRI表达;(2)脑损伤后1～3d,大脑皮质和脑干TGF-β1/TβRI蛋白表达逐渐增加,7 d时仍维持在高表达水平;(3)海马冲击后12 h～1 d逐渐增加,3 d时仍处于高表达水平,7 d时已开始下降。结论脑损伤可诱导TGF-β1/TβRI基因在脑内表达,其时序性改变可望用于法医学脑损伤时间推断。

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TβRⅠ/Ⅱ、Smad3、Smad4和Smad7表达的影响

目的:研究壮肝逐瘀煎对肝纤维化(HF)大鼠TβRⅠ/Ⅱ、Smad3、Smad4和Smad7表达的影响.方法:Wistar大鼠44只,随机取8只作为正常对照(A)组;余大鼠用CCl4复合因素法进行HF造模,wk4随机处死4只证实HF形成后随机分为病理模型(B)组、壮肝逐瘀煎治疗(C)组、秋水仙碱对照(D)组、大黄蟅虫丸对照(E)组.B组予生理盐水ig,C、D、E组予相应药液ig.6wk后获取肝组织,HE染色观察HF程度;用免疫组化、图像分析方法对TβRⅠ/Ⅱ、Smad3、Smad4、Smad7的组织分布进行半定量分析.结果:与B组比较,C、D、E组肝小叶结构趋于正常,肝组织TβRⅠ/Ⅱ、Smad3、Smad4表达显著减少(TβRⅠ:2.75±0.10,3.14±0.07,3.44±0.06vs5.47±0.13,P<0.01;TβRⅡ:1.86±0.12,2.09±0.10,2.53±0.12vs3.52±0.15,P<0.01;Smad3:2.28±0.59,3.84±1.11,3.97±0.90vs5.65±1.28,P<0.01;Smad4:1.57±0.53,3.15±0.79,3.37±0.78vs5.25±1.60,P<0.01),Smad7表达显著增加(3.45±0.58,2.09±0.38,1.75±0.29vs0.73±0.34,P<0.01),C组强于D、E组(P<0.01).结论:壮肝逐瘀煎能显著改善HF组织病理变化,其作用机制可能与壮肝逐瘀煎调控TβRⅠ/Ⅱ、Smad3、Smad4、Smad7的表达有关.

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TGF-β1及TβRⅠ/ⅡmRNA表达的影响

目的:研究中药壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TGF-β1及TβRⅠ/ⅡmRNA表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法:采用四氯化碳(CCl4)复合因素大鼠肝纤维化模型,给予壮肝逐瘀煎灌胃,取血清及肝组织做检测,双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清TGF-β1含量,实时荧光定量PCR技术对肝组织TβRⅠ/ⅡmRNA进行定量分析。结果:治疗6周后,与病理模型组大鼠比较,壮肝逐瘀煎治疗组肝小叶结构趋于正常,纤维间隔明显变薄,TGF-1β及TβRⅠ/ⅡmRNA明显降低(P<0.01)。结论:壮肝逐瘀煎能够显著改善肝纤维化大鼠肝组织的病理变化,具有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与壮肝逐瘀煎抑制TGF-β1及TβRⅠ/ⅡmRNA表达有关。

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺组织中TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ的表达

为探究TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ对小鼠乳腺组织纤维化的作用,本研究采用奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌(S.aureus)感染小鼠乳腺后,分别于感染后1 d、3 d、5 d、7 d、14 d、21 d采集小鼠乳腺组织,应用免疫组化染色检测TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ在小鼠乳腺组织细胞中的表达与分布,应用荧光定量PCR和western blot方法检测小鼠乳腺组织中TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβm RNA转录水平和这些蛋白的相对表达水平。结果显示,小鼠感染S.aureus前期(1 d^5 d) TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ主要在其炎性细胞和乳腺上皮细胞中表达,TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβm RNA转录水平和蛋白表达极显著高于对照组(p<0.001),感染S.aureus后期(7 d^21 d),细胞外基质较多,TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ在小鼠乳腺成纤维细胞和乳腺上皮细胞中均有表达,TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ的表达极显著高于对照组(p<0.001)。研究表明,S.aureus感染小鼠后,能够促进乳腺组织中TβRⅠ、FGFR2和PDGFRβ的表达,从而促进小鼠乳腺纤维化。本研究为深入探究生长因子受体在乳腺纤维化的分子作用机制奠定了基础。

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TβRⅠ/Ⅱ、Smad3、Smad4、Smad7表达的影响

目的:研究壮肝逐瘀煎对肝纤维化(HF)大鼠TβRⅠ/Ⅱ、Smad3、Smad4、Smad7表达的影响,探讨其抗HF的作用机制。方法:44只wistar大鼠随机取8只作为正常对照组,正常饲养。剩余大鼠采用CCl4复合因素法进行HF造模,第4w随机处死4只,证实HF形成后,随机分为病理模型组、壮肝逐瘀煎组、秋水仙碱组、大黄虫丸组。病理模型组予生理盐水灌胃,其余3组分别给予相应药物灌胃。12w后获取肝组织,苏木精-伊红染色,观察HF的程度。免疫组织化学染色、图像分析方法对TβRⅠ/Ⅱ、Smad3、Smad4、Smad7的组织分布进行半定量分析。结果:壮肝逐瘀煎组、秋水仙碱组、大黄虫丸组与病理模型组比较,肝小叶结构趋于正常,纤维间隔明显变薄,肝组织TβRⅠ/Ⅱ、Smad3、Smad4表达显著减少(P<0.01),Smad7表达显著增加(P<0.01),壮肝逐瘀煎组优于秋水仙碱组、大黄虫丸组。结论:壮肝逐瘀煎能够显著改善HF大鼠肝组织的病理变化,具有明显的抗HF作用,其作用机制可能与壮肝逐瘀煎调控TβRⅠ/Ⅱ、Smad3、Smad4、Smad7的表达有关。

TGFβ1、TGFβ2和TβRⅡ在口腔鳞癌中的表达和意义

目的 :探讨转化生长因子TGFβ1、TGFβ2及其Ⅱ型受体TβRⅡ与口腔鳞癌发生和发展的关系。方法 :采用SABC免疫组化法检测 40例口腔鳞癌术后标本和 2 0例正常口腔粘膜中TGFβ1、TGFβ2及其受体TβRⅡ的表达。 结果 :口腔鳞癌和正常口腔粘膜中均表达TGFβ1、TGFβ2和TβRⅡ ,但程度不同。与正常口腔粘膜相比 ,TGFβ1、TGFβ2在口腔鳞癌中呈过表达 ,而TβRⅡ则表达下降。口腔鳞癌临床分期、有无颈淋巴结转移及病理分级与TGFβ1、TGFβ2过表达及TβRⅡ表达下降有关。 结论 :TGFβ1、TGFβ2和TβRⅡ可能参与了口腔鳞癌的发生发展及颈淋巴结转移过程 ,是口腔鳞癌发生发展及预后的一个指标。

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TβRⅠ/ⅡmRNA表达的影响

目的:研究中药壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TβRⅠ/ⅡmRNA表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法:采用四氯化碳(CCl4)复合因素制备大鼠肝纤维化模型后,大鼠灌胃壮肝逐瘀煎,取肝组织作病理学检查,并通过实时荧光定量PCR技术对肝组织TβRⅠ/ⅡmRNA进行定量分析。结果:与病理模型组大鼠比较,RT-PCR显示经壮肝逐瘀煎治疗,大鼠肝内TβRⅠ/ⅡmRNA明显降低,肝小叶结构趋于正常,纤维间隔明显变薄。结论:壮肝逐瘀煎能够显著改善肝纤维化大鼠肝组织的病理变化,具有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与其下调TβRⅠ/ⅡmRNA表达的作用有关。

鳖甲煎丸及罗格列酮药物血清对大鼠肝星状细胞TβRⅡ和Smad3mRNA表达的影响

目的:观察鳖甲煎丸和罗格列酮对由TGF-β1刺激的大鼠肝星状细胞(HSC)内TβRⅡ和Smad3mRNA表达的影响,探讨药物抗肝纤维化的作用机制。方法:采用中药血清药理学的方法,在HSC培养体系中添加外源性TGF-β1,运用反转录聚合酶联反应(RT-PCR)法检测不同剂量鳖甲煎丸和罗格列酮药物血清对由TGF-β1刺激的HSC TβRⅡ和Smad3mRNA表达的影响。结果:TGF-β1上调HSC TβRⅡ和Smad3mRNA的表达,鳖甲煎丸和罗格列酮均下调TGF-β1刺激下的HSC TβRⅡ和Smad3mRNA的表达,鳖甲煎丸作用随剂量增加逐渐增强。结论:鳖甲煎丸和罗格列酮可能是通过在不同位点抑制TGF-β1/Smad信号转导达到抗肝纤维化目的;鳖甲煎丸作用呈剂量依赖性。

瘢痕疙瘩TβRⅡ数量和亚细胞分布的研究

目的:通过对瘢痕疙瘩(K)TGFβ1及其Ⅱ型受体(TβRⅡ)数量、亚细胞分布研究,探讨K发生的病理机制。方法:应用组织切片免疫组织化学、流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测20例K、8例正常皮肤组织及其体外培养的成纤维细胞中TβRⅡ的表达状况,比较K与正常皮肤TβRⅡ表达数量和亚细胞分布的差异。结果:免疫组化显示TβRⅡ在正常皮肤组织中主要表达于表皮的基底层、角质层、汗腺、毛囊及小血管内皮细胞、成纤维细胞的细胞膜和细胞浆,在K组织中主要表达于角质层、基底层细胞和成纤维细胞的细胞膜、细胞浆与细胞核。流式细胞仪及激光共聚焦显微镜检测显示体外培养的成纤维细胞TβRⅡ荧光表达强度K明显高于正常皮肤,TβRⅡ在正常皮肤成纤维细胞非连续表达于细胞膜和细胞浆,在K成纤维细胞中连续表达于细胞膜,弥散表达于细胞浆和细胞核。结论:K中TβRⅡ的数量和亚细胞分布与正常皮肤存在差异,可能为K重要的发病机制。

胃癌组织中TGF-β_1和TβR_1基因的表达及意义的研究

目的 :观察转化生长因子β1 (TGF-β1 )及其受体 I(TβR1 )基因在人类胃癌组织中的表达及其与胃癌病理生物学行为的关系。方法 :应用抗 TGF-β1 和 TβR1 多克隆抗体对 10 7例胃癌组织中的 TGF-β1 和 97例胃癌组织中的 TβR1 基因表达蛋白进行了 S- P免疫组织化学方法检测。结果 :TGF-β1 在胃癌组织中的阳性表达 (75 % )明显高于癌旁组织 (2 4.4% )及正常组织 (2 9.2 % ) ,差异非常显著 (P <0 .0 1) ;TRβ1 在胃癌组织中阳性表达 (19.6 % )明显低于癌旁组织 (79.6 % )和正常组织 (75 .6 % ) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :TGF-β1 和 TβR1 基因的异常表达与胃癌的发展及恶性程度有关。

P63及TβR-Ⅱ蛋白在食管鳞状细胞癌及其癌前病变中的表达及意义

目的通过对食管鳞状细胞癌癌前病变及其癌组织标本中P63及转化生长因子受体Ⅱ型(TβR-Ⅱ)蛋白表达的研究,探讨两者表达与食管鳞状细胞癌的关系。方法应用免疫组织化学技术检测P63及TβR-Ⅱ蛋白在正常食管黏膜鳞状上皮和轻、中、重度非典型增生鳞状上皮以及鳞状细胞癌组织共162例中的表达。结果在食管正常鳞状上皮、非典型增生鳞状上皮及其癌组织中P63蛋白表达的阳性率呈递增趋势(P<0.01),TβR-Ⅱ蛋白表达的阳性率则呈递减趋势(P<0.01)。P63和TβR-Ⅱ蛋白的表达与性别无关(均P>0.05),但与癌组织分化程度、浸润深度和淋巴结转移均显著相关(均P<0.05)。Spearman等级相关分析结果显示P63和TβR-Ⅱ蛋白的表达与食管鳞状上皮各级病变呈负相关(rs=-0.498,P<0.05)。结论P63和TβR-Ⅱ蛋白的异常表达可能与食管鳞状细胞癌癌变及其生物学行为密切相关,联合检测二者表达可作为判断食管鳞状细胞癌发生、发展和预测转移潜能的生物学指标。

肾癌组织中TβRⅡ基因甲基化状态的检测及其临床意义

目的探讨转化生长因子β受体Ⅱ(TβRⅡ)在肾透明细胞癌(RCCC)中的甲基化状态及其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测43例肾透明细胞癌组织,43例正常组织中TβRⅡ基因的甲基化状况;应用免疫组织化学P-V法检测40例肾透明细胞癌组织,28例正常组织中TβRⅡ基因的蛋白表达情况。结果 RCCC组织中TβRⅡ基因的甲基化率为58.1%(25/43),显著高于正常组织34.9%(15/43),差异有统计学意义(P<0.05);肾透明细胞癌中TβRⅡ基因的甲基化率与患者年龄、性别、肿瘤的大小和肿瘤分化程度无显著相关性(P>0.05)。TβRⅡ在RCCC组织中的免疫组化结果显示,基因蛋白表达在RCCC组显著低于正常组(P<0.05),且其蛋白表达与肿瘤的大小和肿瘤分化程度相关(P<0.05)。结论 TβRⅡ基因启动子甲基化可能与RCCC的发生有关。

TGF-β1和TβRⅡ在胰腺癌组织中的表达及临床意义

目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)及其Ⅱ型受体(TβRⅡ)在人胰腺癌组织中的表达,探讨其与胰腺癌进展、转移的关系。方法应用SABC免疫组化方法检测TGF-β1、TβRⅡ在10例正常胰腺、13例慢性胰腺炎和36例胰腺癌中的表达。结果TGF-β1、TβRⅡ阳性率在正常胰腺均为10.0%,慢性胰腺炎中分别为7.7%、15.4%,胰腺癌中分别为44.4%、47.2%,胰腺癌中的阳性率明显高于前两组(P<0.05);TGF-β1、TβRⅡ的表达与胰腺癌患者的年龄、性别、肿瘤的大小、位置、组织学分级无关(P>0.05),与临床分期相关(P<0.01);TGF-β1、TβRⅡ在胰腺癌中共同阳性率为36.1%,其共同表达与胰腺癌的组织学分级和临床分期有关(P<0.01)。结论单独检测TGF-β1、TβRⅡ的表达对判断胰腺癌的进展、转移趋势有参考价值;两者共同表达对判断胰腺癌的恶性程度及进展、转移趋势有参考价值。

表达可溶性TβRⅡ胞外区腺病毒载体的构建及功能试验研究

目的:探讨表达可溶性TβRⅡ胞外区片段的腺病毒载体构建,及其在肿瘤生物治疗学方面的作用机制和效果。方法:RT-PCR法克隆鼠源性TβRⅡ胞外区编码序列,采用AD-easyXLAdenovirusVectorSystem试剂盒构建表达上述基因的腺病毒载体。通过ELISA试验验证表达可溶性TβRⅡ胞外区序列的腺病毒载体转染细胞后所具有的阻断TGF-β的作用。应用于小鼠体内试验,观察该病毒载体对免疫效应细胞抗肿瘤活性的影响,从而评价其在肿瘤治疗方面的作用。结果:克隆了鼠源性TβRⅡ胞外区编码序列并成功地构建了表达这些基因的腺病毒载体。功能试验表明由腺病毒表达的TβRⅡ胞外区片段具有阻断TGF-β信号通路的作用。体内试验则表明应用于荷瘤小鼠可抑制肿瘤的发展。结论:表达可溶性TβRⅡ胞外区片段的腺病毒载体可显著地提高免疫细胞的杀伤能力,抑制肿瘤生长,为肿瘤的生物学治疗提供了新的研究方向。

TGFβ1和TβRⅡ在子宫内膜癌与癌前病变中的表达及其临床意义

目的研究转化生长因子(TGF)β1及转化生长因子Ⅱ型受体(TβRⅡ)在子宫内膜癌发生发展中的作用及其与子宫内膜癌生物学行为的关系。方法采用SP免疫组化方法检测30例增殖期内膜、15例单纯增生、17例非典型增生、57例子宫内膜癌中TGFβ1和TβRⅡ的表达。结果在正常、增生及内膜癌中均有TGFβ1与TβRⅡ表达,且两者表达呈一致性(P>0.05)。TGFβ1及TβRⅡ在正常、单纯增生到非典型增生内膜中表达呈递增趋势,差异显著(均P<0.05);从非典型增生至内膜癌临床各期呈下降趋势(均P<0.05);两者表达与内膜癌浸润肌层深度呈负相关(均P<0.01);与淋巴结转移呈负相关(均P<0.01);与分化程度呈正相关(均P<0.01)。结论TGFβ1和TβRⅡ在子宫内膜癌的发生发展中起重要作用,检测TGFβ1及其受体TβRⅡ表达对评价子宫内膜癌的恶性程度、转移及预后有重要价值。